甘肅省靖遠一中2026屆生物高三第一學期期末統(tǒng)考模擬試題考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列有關細胞代謝敘述，正確的是（）A．與白天相比，夜間小麥葉綠體中NADPH/NADP+的比值明顯降低B．與安靜狀態(tài)相比，運動時人體肌細胞中ATP/ADP的比值明顯升高C．與氣孔開放時相比，氣孔關閉時小麥葉綠體中C5/C3的比值明顯降低D．與有氧狀態(tài)相比，缺氧時人體肌細胞中NADH/NAD+的比值明顯升高2．下列各項中的比較項目，最相近的一組是（）A．線粒體內(nèi)膜的表面大小和線粒體外膜的表面積大小B．植物細胞膜的功能和植物細胞壁的功能C．核糖體的物質(zhì)組成和染色體的物質(zhì)組成D．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的成分和高爾基體膜的成分3．真核細胞需氧呼吸部分過程如下圖所示，下列敘述正確的是（）A．過程①、②均產(chǎn)生少量ATP，過程③產(chǎn)生大量ATPB．過程②發(fā)生在線粒體基質(zhì)，過程③發(fā)生在線粒體內(nèi)膜C．過程①、②、③均能在無氧條件下進行D．過程①、②、③均能產(chǎn)生[H]4．有一瓶混有酵母菌的葡萄糖培養(yǎng)液，當通入不同濃度的O2時，其產(chǎn)生的酒精和CO2的量如圖所示。據(jù)圖中信息推斷錯誤的是A．氧濃度為a時酵母菌沒有有氧呼吸，只進行無氧呼吸B．當氧濃度為b和d時，酵母菌細胞呼吸的過程會不同C．當氧濃度為c時，2/5的葡萄糖用于酵母菌酒精發(fā)酵D．a(chǎn)、b、c、d不同氧濃度下，細胞都產(chǎn)生[H]和ATP5．取同一植物組織制成若干臨時裝片（設各組織細胞液濃度相同），滴加不同濃度的蔗糖溶液，顯微鏡下觀察結果如下圖所示。由圖可知細胞所處的蔗糖溶液濃度最髙的是A． B． C． D．6．下列關于“核酸是遺傳物質(zhì)的證據(jù)”相關歷史探究實驗的敘述，正確的是（）A．肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗是證實DNA作為遺傳物質(zhì)的最早證據(jù)來源B．噬菌體侵染實驗中的噬菌體需分別在含35S、32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間C．煙草花葉病毒的RNA用RNA酶處理后，能使煙草出現(xiàn)感染病毒的癥狀D．各個實驗的思路都是用提純分離的方法單獨觀察某一物質(zhì)的作用二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油具有抑菌、抑制腫瘤等作用，是一種具有廣闊開發(fā)前景的芳香油資源。青蒿素是目前公認的最有效治療瘧疾的藥物，易溶于有機溶劑，60℃以上易分解。回答下列問題：(1)柚皮精油可采用水蒸氣蒸餾法提取，它是利用________將________較強的柚皮精油攜帶出來，形成油水混合物。在油水混合物中，加入________可使油水出現(xiàn)明顯分層；分離得到的油層應加入________進行除水。(2)水蒸氣蒸餾易使柚皮精油有效成分部分水解，為避免此缺點，可采用________法提取柚皮精油。為提高出油率，需先對柚皮進行的處理是________________________，以分解果膠。(3)青蒿素宜采用萃取法提取，現(xiàn)有四氯化碳(沸點76.5℃)和乙醚(沸點34.5℃)兩種溶劑，應選用__________________作為萃取劑，不選用另外一種的理由是________________________________________________________________________。8．（10分）閱讀以下資料，回答相關問題。資料1：小鼠制備的抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕試劑盒”，檢測早孕的準確率在90%以上。資料2：葡萄糖異構酶在工業(yè)上應用廣泛，為提高其熱穩(wěn)定性，朱國萍等人在確定第138位甘氨酸為目標氨基酸后，用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸，結果其最適反應溫度提高了10—12℃，使蛋白質(zhì)空間結構更具剛性。資料3：巴西是全球最大的甘蔗生產(chǎn)國，但是甘蔗易受螟蟲的侵害。2017年6月8日，巴西向世界宣布，全球首款能抵抗螟蟲的轉(zhuǎn)基因甘蔗已培育成功，并且批準該品種進入市場。資料4：大腸埃希菌，俗稱大腸桿菌。是人和動物腸道中的正常棲居菌。自來水一旦被它污染，就有可能引發(fā)腸道傳染病，甚至流行病。因此，必須對自來水進行嚴格的檢測，以確保飲水安全。我國規(guī)定1000ml自來水中的大腸桿菌數(shù)不得超過3個。（1）資料1中，在該“單抗”的生產(chǎn)過程中，將______________作為抗原對小鼠進行接種后，從脾臟中提取B淋巴細胞，并設法將其與鼠的骨髓瘤細胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，選出融合的雜種細胞，對該細胞還需進行____________________，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的符合需要的____________。單克隆抗體最主要的優(yōu)點有_________________。（2）資料2中提到的生物技術屬于____工程的范疇。在該實例中，直接需要操作的____________（選填“肽鏈結構”、“蛋白質(zhì)空間結構”、“基因結構”）。（3）資料3中獲得轉(zhuǎn)基因甘蔗的過程中，核心步驟是________________________，為了避免目的基因和運載體的自身連接成環(huán)和反向連接，應該采取的措施是用____________________對目的基因和載體分別進行切割。（4）實驗前應進行無菌處理。將漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和鑷子等進行

_________________滅菌。培養(yǎng)基進行_______________滅菌。為了鑒定大腸桿菌，在培養(yǎng)基中應加入_______________________。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)_________________色。9．（10分）植物激素是植物細胞接受特定環(huán)境信號誘導產(chǎn)生的、低濃度時可調(diào)節(jié)植物生理反應的活性物質(zhì)。請回答下列問題：（1）生長素是植物激素的一種，是由________經(jīng)過一系列反應轉(zhuǎn)變而來的；在成熟組織中，生長素可以通過韌皮部進行_______________運輸。（2）與“瓜熟”以后“蒂落”有關的植物激素主要是_____________，其生理作用是_______________。（3）植物的矮化特性通常是由體內(nèi)赤霉素的生物合成途徑受阻導致的。為了確定某植物的矮化特性是否與赤霉素有關，某研究小組將生長狀況相同的該種矮化植株幼苗隨機均分成兩組，實驗組處理為_______________，對照組處理為_________________，一段時間后測量兩組植株的平均株高。若________，則矮化特性與赤霉素含量有關；若__________________。10．（10分）癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結合后，可抑制T細胞活性并啟動其凋亡，導致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學活性鑒定，為制備抗體打基礎。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術擴增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構建表達載體。該表達載體的組成，除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。（4）將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學活性和功能，則可裂解293T細胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，其目的是_________________________。11．（15分）鳳眼蓮因繁殖能力超強，吸收N、P能力非常強大，因此既可作為動物飼料，還可捕撈曬干后施于土壤，作為植物“綠肥”，20世紀30年代被引入中國，但現(xiàn)在卻被稱為“水上綠魔”。請回答下列有關鳳眼蓮的問題：（1）鳳眼蓮作為動物飼料、“綠肥”體現(xiàn)了生物多樣性的______________價值。（2）作為外來物種，其種群數(shù)量呈現(xiàn)幾乎指數(shù)增加的原因是______________。（至少答出兩點）（3）夏季來臨，主要是藍藻等迅速繁殖，在一些富含營養(yǎng)的水體中，會發(fā)生水華現(xiàn)象。藍藻與鳳眼蓮都屬于生態(tài)系統(tǒng)中的組成成分中的_____________，但兩者細胞結構主要區(qū)別是______________。（4）我國科技人員創(chuàng)造了浮床生態(tài)工藝法來凈化污水水華，化“廢”為“寶”，如圖。在漂浮水面的浮床上種植以鳳眼蓮為主等水生植物，與水面藍藻等形成____________的種間關系，爭奪____________等。利用生物種間關系，你認為控制水華還可以采取什么措施，提出你的合理建議：_____________________。浮床上的鳳眼蓮能富集鎘、汞等，但不適合做家畜飼料原因是_____________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、A【解析】

1、光合作用過程：光合作用包括光反應和暗反應兩個階段。光反應發(fā)生場所在葉綠體的類囊體薄膜上，色素吸收光照，吸收光能、傳遞光能，并將一部分光能用于水的光解生成[H]和氧氣，另一部分光能用于合成ATP。暗反應發(fā)生場所是葉綠體基質(zhì)中，首先發(fā)生二氧化碳的固定，即二氧化碳和五碳化合物結合形成兩分子的三碳化合物，三碳化合物利用光反應產(chǎn)生的[H]和ATP被還原。2、光合作用的過程的影響因素。（1）光反應與暗反應的聯(lián)系就是光反應為暗反應提供還原氫和ATP，暗反應為光反應提供ADP和Pi；（2）光合作用過程中，光照是光反應的主要影響因素，CO2供應則是暗反應的主要影響因素?！驹斀狻緼、與白天相比，夜間小麥光反應減弱，水光解減少，導致小麥葉綠體中NADPH和NADP+的比值下降，A正確；B、ATP與ADP的含量處于相對穩(wěn)定狀態(tài)，劇烈運動時，肌細胞中ATP與ADP的相互轉(zhuǎn)化速度加快，ATP的含量不會明顯增加，B錯誤；C、葉片氣孔關閉，外界二氧化碳無法進入葉綠體，如果光照繼續(xù)，還原仍在進行，C3含量降低，C5增加，C5/C3的比值增大，C錯誤；D、無氧呼吸時人體肌細胞中NADH用于還原丙酮酸成乳酸，不會造成NADH的大量積累，D錯誤。故選A。2、D【解析】

各種細胞器的結構、功能：細胞器分布形態(tài)結構功能線粒體動植物細胞雙層膜結構有氧呼吸的主要場所，細胞的“動力車間”葉綠體植物葉肉細胞雙層膜結構植物細胞進行光合作用的場所；植物細胞的“養(yǎng)料制造車間”和“能量轉(zhuǎn)換站”。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)動植物細胞單層膜形成的網(wǎng)狀結構細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成和加工，以及脂質(zhì)合成的“車間”高爾基體動植物細胞單層膜構成的囊狀結構對來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)進行加工、分類和包裝的“車間”及“發(fā)送站”（動物細胞高爾基體與分泌有關；植物則參與細胞壁形成）核糖體動植物細胞無膜結構，有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，有的游離在細胞質(zhì)中合成蛋白質(zhì)的場所，“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機器”溶酶體動植物細胞單層膜形成的泡狀結構“消化車間”，內(nèi)含多種水解酶，能分解衰老、損傷的細胞器，吞噬并且殺死侵入細胞的病毒和細菌。液泡成熟植物細胞單層膜形成的泡狀結構；內(nèi)含細胞液（有機酸、糖類、無機鹽、色素和蛋白質(zhì)等）調(diào)節(jié)植物細胞內(nèi)的環(huán)境，充盈的液泡使植物細胞保持堅挺中心體動物或某些低等植物細胞無膜結構；由兩個互相垂直的中心粒及其周圍物質(zhì)組成與細胞的有絲分裂有關【詳解】A、線粒體內(nèi)膜折疊形成了嵴，故其表面積比線粒體外膜的表面積更大，A錯誤；B、植物細胞膜有控制物質(zhì)進出、進行信息交流等功能，植物細胞壁只有支持和保護功能，故植物細胞膜的功能比細胞壁功能更復雜，B錯誤；C、核糖體由RNA和蛋白質(zhì)組成，染色體主要由DNA和蛋白質(zhì)組成，C錯誤；D、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和高爾基體膜都屬于生物膜，其組成成分和結構相似，D正確。故選D。3、D【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：過程①為糖酵解過程，即需呼吸的第一階段，發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)；過程②③為檸檬酸循環(huán)，即需氧呼吸第二階段，發(fā)生在線粒體基質(zhì)?！驹斀狻緼、過程①為糖酵解過程，產(chǎn)生少量的ATP；過程②③為檸檬酸循環(huán)，也產(chǎn)生少量的ATP，A錯誤；B、過程②③為檸檬酸循環(huán)，發(fā)生在線粒體基質(zhì)中，B錯誤；C、過程①糖酵解可以在無氧條件下發(fā)生，而程②③為檸檬酸循環(huán)，即需氧呼吸第二階段，必須在有氧條件下才能發(fā)生，C錯誤；D、過程①、②、③均能產(chǎn)生[H]，D正確。故選D?！军c睛】本題考查細胞呼吸的相關知識，要求考生識記細胞呼吸的過程、場所、條件及產(chǎn)物等基礎知識，能正確分析題圖判斷各個數(shù)字代表的過程的名稱以及發(fā)生的場所等，再結合所學的知識準確判斷各選項。4、C【解析】

酵母菌有氧呼吸反應式：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量，無氧呼吸的反應式為：C6H12O62C2H5OH+2CO2+少量能量；消耗等量的葡萄糖時，無氧呼吸與有氧呼吸產(chǎn)生的CO2摩爾數(shù)之比為1∶3，據(jù)此分析。【詳解】A、根據(jù)曲線圖分析可知，氧氣濃度為a時，產(chǎn)生的酒精量等于釋放的CO2量，這說明酵母菌只進行無氧呼吸，不進行有氧呼吸，A正確；B、氧氣濃度為b時，產(chǎn)生CO2的量多于產(chǎn)生的酒精量，此時酵母菌既進行有氧呼吸，也進行無氧呼吸；氧氣濃度為d時，不產(chǎn)生酒精只產(chǎn)生CO2，說明該點只進行有氧呼吸，不進行無氧呼吸，B正確；C、當氧濃度為c時，產(chǎn)生酒精的量為6mol，則無氧呼吸消耗葡萄糖為6/2=3mol，同時產(chǎn)生6molCO2，則有氧呼吸產(chǎn)生CO2為15-6=9mol，有氧呼吸消耗葡萄糖為9/6=1.5mol，用于酒精發(fā)酵的葡萄糖所占比例為3/(3+1.5)=2/3，C錯誤；D、有氧呼吸和無氧呼吸過程中均可以產(chǎn)生[H]和ATP，D正確。5、A【解析】

當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進入到外界溶液中，由于原生質(zhì)層比細胞壁的伸縮性大，當細胞不斷失水時，液泡逐漸縮小，原生質(zhì)層就會與細胞壁逐漸分離開來，即發(fā)生了質(zhì)壁分離；當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，外界溶液中的水分就透過原生質(zhì)層進入到細胞液中，液泡逐漸變大，整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài)，即發(fā)生了質(zhì)壁分離復原。【詳解】外界溶液濃度＞細胞液濃度，細胞失水，發(fā)生質(zhì)壁分離，液泡體積變小，分析選項可知，A選項的液泡體積最小，失水最多，說明外界蔗糖溶液濃度最髙，故A正確，BCD錯誤。6、A【解析】

格里菲思通過肺炎雙球菌體內(nèi)轉(zhuǎn)化實驗推測加熱殺死的S型菌存在轉(zhuǎn)化因子；艾弗里及其同事通過肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實驗證明DNA是遺傳物質(zhì)，而其他物質(zhì)不是；噬菌體侵染細菌實驗證明DNA是遺傳物質(zhì)?！驹斀狻緼、肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗是證實DNA作為遺傳物質(zhì)的最早證據(jù)來源，A正確；B、噬菌體是病毒，沒有細胞結構，不能獨立生存，必須寄生于活細胞才能繁殖，因此噬菌體不能用含35S、32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)，B錯誤；C、煙草花葉病毒是RNA病毒，其遺傳物質(zhì)是RNA，若用RNA酶處理其RNA，則RNA被水解了，不能使煙草出現(xiàn)感染病毒的癥狀，C錯誤；D、格里菲思的實驗沒有用提純分離的方法單獨觀察某一物質(zhì)的作用，D錯誤。故選A。二、綜合題：本大題共4小題7、水蒸氣揮發(fā)性NaCl無水Na2SO4壓榨石灰水浸泡乙醚青蒿素在60℃以上易分解，應選擇低沸點的萃取劑【解析】

（1）水蒸氣蒸餾法是利用水蒸氣將揮發(fā)性強的植物芳香油攜帶出來；加入NaCl利于油水分離，無水Na2SO4常用于除水。（2）壓榨法能解決了水蒸氣蒸餾法使有效材料水解和原料焦糊的問題；用石灰水浸泡能提高出油率。（3）乙醚沸點低，而青蒿素在60℃以上易分解，應選擇低沸點的萃取劑。8、人絨毛膜促性腺激素克隆化培養(yǎng)和抗體檢測雜交瘤細胞特異性強、靈敏度高，并可大量制備蛋白質(zhì)基因結構基因表達載體的構建使用兩種能產(chǎn)生不同黏性末端的（不同）限制酶干熱高壓蒸汽伊紅—美藍黑【解析】

1、單克隆抗體的制備過程的細節(jié)：（1）二次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。（2）細胞來源：B淋巴細胞：能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無限繁殖；骨髓瘤細胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無限繁殖。（3）雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。（4）提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。2、單克隆抗體優(yōu)點：特異性強，靈敏度高，能大量制備。3、基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲??；第二步：基因表達載體的構建；第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞；第四步：目的基因的檢測和表達?！驹斀狻浚?）資料1中，在該“單抗”的生產(chǎn)過程中，將人絨毛膜促性腺激素作為抗原對小鼠進行接種后，從脾臟中提取B淋巴細胞，并設法將其與鼠的骨髓瘤細胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，選出融合的雜種細胞，對該細胞還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的符合需要的雜交瘤細胞。單克隆抗體最主要的優(yōu)點有特異性強、靈敏度高，并可大量制備。（2）資料2是改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，使之符合人類需求，屬于蛋白質(zhì)工程，其原理是通過改造基因來獲得相應功能的蛋白質(zhì)。（3）基因工程的關鍵環(huán)節(jié)是構建基因表達載體，為了避免目的基因和運載體的自身連接成環(huán)和反向連接，應該采取的措施是使用兩種能產(chǎn)生不同黏性末端的（不同）限制酶對目的基因和運載體分別進行切割。（4）微生物培養(yǎng)過程中要注意防止雜菌污染，培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和鑷子等進行干熱或高壓蒸汽滅菌，為了鑒定大腸桿菌，在培養(yǎng)基中應加入伊紅——美藍。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色?！军c睛】本題考查單克隆抗體的制備過程和基因工程等相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結構的能力；能運用所學知識，準確判斷問題的能力，屬于考綱識記和理解層次的考查。9、色氨酸非極性脫落酸抑制細胞分裂，促進葉和果實的衰老和脫落噴施適量的一定濃度的赤霉素溶液噴施等量的燕餾水或清水實驗組植株的平均株高明顯高于對照組兩組植株的平均株高大致相同，則矮化特性與赤霉素含量無關【解析】

赤霉素的作用是促進生長，解除休眠；生長素的作用是促進細胞生長，促進枝條生根，促進果實發(fā)育等；脫落酸的作用是抑制細胞分裂，促進葉和果實的衰老和脫落；細胞分裂素的作用是促進細胞分裂和組織分化?！驹斀狻浚?）生長素是由色氨酸經(jīng)過一系列反應轉(zhuǎn)變而來的，在成熟組織中，生長素可以通過韌皮部進行非極性運輸。（2）與“瓜熟”以后“蒂落”有關的植物激素主要是脫落酸。脫落酸的生理作用是抑制細胞分裂，促進葉和果實的衰老和脫落。（3）為了確定某植物的矮化特性是否與赤霉素有關，自變量為赤霉素的有無，因變量為矮化植株的株高；若矮化特性與赤霉素含量有關，則實驗組植株的平均株高明顯高于對照組；若兩者平均株高大致相同，則矮化特性與赤霉素含量無關?！军c睛】本題考查植物激素調(diào)節(jié)的相關知識，旨在考查考生的理解能力、實驗與探究能力和綜合運用能力。10、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術利用的是DNA分子復制的原理，所以用該cDNA進行PCR技術擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構建基因表達載體?；虮磉_載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復制原點等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達載體上的標記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，可以檢測細胞膜表面是否具有PD-1基因表達的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術，即從裂解293T細胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實驗的可信度，還需要設置對照實驗，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，因為不含PD-1基因，所以“PD-1與PDL-1信號通路”不會阻斷?！军c睛】題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結合所學的知