第1頁（共1頁）2026年高考生物模擬試卷重點知識題型問題與答案匯編——發(fā)酵工程一．選擇題（共10小題）1．有學生探究檢測大腸桿菌對抗生素的敏感性，實驗操作規(guī)范。如圖示37℃恒溫箱中培養(yǎng)兩天后所見結(jié)果。下列敘述中錯誤的是（）A．①②透明圈的大小差異可能與抗生素種類不同有關(guān) B．②③透明圈的大小差異可能與同種抗生素的濃度不同有關(guān) C．①②③透明圈的大小差異可能與培養(yǎng)基中N源含量不同有關(guān) D．浸有無菌水的圓紙片在本實驗中作為空白對照2．下列在微生物的實驗室培養(yǎng)過程中，關(guān)于平板劃線操作的敘述正確的是（）A．使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中不再滅菌 B．打開含菌種的試管需要通過火焰滅菌，取出菌種后需馬上塞好棉塞 C．將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可 D．最后應(yīng)將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3．下列有關(guān)用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化培養(yǎng)大腸桿菌的敘述，正確的是（）①都需要用固體培養(yǎng)基②都需要使用接種針進行接種③都需要在火焰旁進行接種④都可以用菌落數(shù)來計數(shù)活菌．A．①② B．①③ C．②④ D．③④4．如圖表示培養(yǎng)和純化X細菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．步驟①倒平板操作時，倒好后應(yīng)立即將其倒過來放置 B．步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后迅速沾取菌液后平板劃線 C．步驟③多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落 D．步驟④培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對X細菌進行計數(shù)5．如圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法不正確的是（）A．①步驟使用的培養(yǎng)基已經(jīng)滅菌并調(diào)節(jié)過pH B．①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行 C．操作③到④的過程中，每次接種前后都需要對接種環(huán)進行灼燒處理 D．圖中操作結(jié)束后需在培養(yǎng)皿蓋上標注菌種及接種日期等信息6．關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，敘述錯誤的是（）A．操作順序為計算、稱量、熔化、倒平板、滅菌 B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯 C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進行倒平板 D．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置7．下列有關(guān)微生物分離、純化及計數(shù)的敘述中，錯誤的是（）A．常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌 B．平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散并計數(shù) C．稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分散 D．用血細胞計數(shù)板計數(shù)微生物時，實驗結(jié)果往往偏大8．下列有關(guān)平板劃線操作的敘述，不正確的是（）A．第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物 B．每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種 C．在第二次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液 D．劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)能及時殺死接種環(huán)上的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者9．下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是（）A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4?7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水 B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4?7H2O、葡萄糖、瓊脂、水 C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4?7H2O、尿素、瓊脂、水 D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4?7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水10．下列哪種條件下，醋酸菌將葡萄汁中的糖分分解成醋酸（）A．氧氣、糖源充足 B．氧氣充足、缺少糖源 C．缺少氧氣、糖源充足 D．氧氣、糖源都缺少二．多選題（共5小題）（多選）11．下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述，錯誤的是（）A．與自然發(fā)酵相比，人工接種菌種不易被雜菌污染 B．較高溫度和密閉環(huán)境有利于果醋的發(fā)酵 C．鹽的用量、酒的種類和用量、溫度等均會影響腐乳風味 D．果酒、果醋和腐乳制作的微生物細胞呼吸產(chǎn)生CO2的場所都是細胞質(zhì)基質(zhì)（多選）12．下列關(guān)于高中生物學實驗的原理、方法或選材的敘述，正確的是（）A．制作果醋時，通氧不足或溫度過低會使發(fā)酵受影響 B．利用稀釋涂布平板法對細菌計數(shù)時需借助于顯微鏡 C．用取樣器取樣法調(diào)查土壤小動物豐富度時，可以用目測估計法統(tǒng)計各種群的數(shù)量 D．利用二苯胺試劑鑒定細胞提取物，若產(chǎn)生藍色變化即表明有RNA存在（多選）13．通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細菌和霉菌。利用下述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出（）A．大腸桿菌 B．霉菌 C．放線菌 D．固氮細菌（多選）14．如圖表示果酒和果醋制作過程中的物質(zhì)變化過程，下列敘述正確的是（）A．過程①、②和過程①、③總是同時進行 B．過程③和④都需要氧氣的參與 C．制作果酒和果醋的連續(xù)過程中要保持溫度恒定 D．可利用酸性重鉻酸鉀檢測是否有酒精的產(chǎn)生（多選）15．鈣果又名歐李，果實中含有多種對人體有益的礦物質(zhì)元素，利用其加工成果汁、果酒、果醋等產(chǎn)品。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．利用醋酸菌進行鈣果果醋發(fā)酵時，溫度應(yīng)控制在30～35℃ B．在鈣果果酒發(fā)酵期間，為保持無氧環(huán)境，不能擰松發(fā)酵瓶蓋 C．傳統(tǒng)制作鈣果果酒、果醋時，應(yīng)將原料鈣果果汁進行高壓蒸汽滅菌 D．鈣果果酒的顏色是鈣果果皮和果肉中的色素進入發(fā)酵液形成的三．解答題（共5小題）16．某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料純化乳酸菌．分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸菌能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣．回答下列問題：（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用對泡菜濾液進行梯度稀釋，進行梯度稀釋的理由是．（2）推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有和．分離純化時應(yīng)挑選出的菌落作為候選菌．（3）乳酸菌在﹣20℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的（填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”）．17．回答下列與細菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上（填“能夠”或“不能”）生長，原因是。（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板（填“倒置”或“正置”）。（3）單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是。（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。18．如圖所示是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌的過程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以為唯一氮源，鑒別培養(yǎng)基還需添加作指示劑，產(chǎn)脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成色；（2）在5個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191．該過程采取的接種方法是，每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為×108個，與血細胞計數(shù)板計數(shù)法相比，此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較；（3）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼，終止密碼有UAG、UGA和UAA，突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為，突變基因表達的蛋白含個氨基酸。19．為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌的分離等工作。回答下列問題：（1）細菌生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、四類。該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37．據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。（2）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是。（3）示意圖A和B中，表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的的含量，同時可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高的利用率。20．【生物﹣﹣選修I：生物技術(shù)實踐】回答下列關(guān)于腐乳制作的問題：（1）腐乳是豆腐經(jīng)微生物發(fā)酵后制成的食品．多種微生物參與了該發(fā)酵過程，其中起主要作用的微生物是，其產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解為和；其產(chǎn)生的能將豆腐中的脂肪水解為和．（2）發(fā)酵完成后需加鹽腌制，加鹽還可以抑制生長．（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配制而成的鹵湯．鹵湯具有一定的防腐作用外，還能使腐乳具有獨特的．

2026年高考生物模擬試卷重點知識題型問題與答案匯編——一．選擇題（共10小題）題號12345678910答案CDBCDABCAA二．多選題（共5小題）題號1112131415答案BDACBCDBDAD一．選擇題（共10小題）1．有學生探究檢測大腸桿菌對抗生素的敏感性，實驗操作規(guī)范。如圖示37℃恒溫箱中培養(yǎng)兩天后所見結(jié)果。下列敘述中錯誤的是（）A．①②透明圈的大小差異可能與抗生素種類不同有關(guān) B．②③透明圈的大小差異可能與同種抗生素的濃度不同有關(guān) C．①②③透明圈的大小差異可能與培養(yǎng)基中N源含量不同有關(guān) D．浸有無菌水的圓紙片在本實驗中作為空白對照【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)．【專題】模式圖；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用．【答案】C【分析】抑菌圈的大小可以表示大腸桿菌對抗生素的敏感性的大小，抑菌圈越大說明大腸桿菌對該種抗生素越敏感，否則越不敏感。圖中②的抑菌圈最大，大腸桿菌對該種抗生素最敏感。據(jù)此分析作答?！窘獯稹拷猓篈、抑菌圈的大小與抗生素的種類和濃度有關(guān)，故①②透明圈的大小差異可能與抗生素種類不同有關(guān)，A正確；B、由A選項可知B正確；C、大腸桿菌為異養(yǎng)生物，同一平板的培養(yǎng)基中的含氮量是相同的，C錯誤；D、圖中浸有無菌水的圓紙片在本實驗中作為空白對照，D正確。故選：C?！军c評】題主要考查微生物的微生物的培養(yǎng)等相關(guān)知識，意在強化學生對微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識的理解與運用。2．下列在微生物的實驗室培養(yǎng)過程中，關(guān)于平板劃線操作的敘述正確的是（）A．使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中不再滅菌 B．打開含菌種的試管需要通過火焰滅菌，取出菌種后需馬上塞好棉塞 C．將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可 D．最后應(yīng)將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．【答案】D【分析】平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面；在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離由一個細菌繁殖而來的肉眼可見的子細胞群為菌落．轉(zhuǎn)換劃線角度后要對接種環(huán)進行灼燒滅菌再進行劃線；等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置，目的是防止培養(yǎng)皿內(nèi)壁上出現(xiàn)的冷凝水污染培養(yǎng)基．【解答】解：A、使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中還需滅菌，因為接種環(huán)會感染細菌，故A錯誤。B、打開含菌種的試管需通過火焰滅菌，取出菌種后還需通過火焰滅菌，再塞上棉塞；故B錯誤。C、將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，還需蓋上培養(yǎng)皿蓋，防止空氣中雜菌混入，故C錯誤。D、最后將平板倒置，防止蓋子水滴落引起污染，有利培養(yǎng)基水蒸發(fā)；故D正確。故選：D?！军c評】本題考查平板劃線操作的相關(guān)知識，意在考查學生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)．3．下列有關(guān)用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化培養(yǎng)大腸桿菌的敘述，正確的是（）①都需要用固體培養(yǎng)基②都需要使用接種針進行接種③都需要在火焰旁進行接種④都可以用菌落數(shù)來計數(shù)活菌．A．①② B．①③ C．②④ D．③④【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)．【專題】正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用．【答案】B【分析】分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．篩選或分類微生物時需要使用固體培養(yǎng)基進行平板劃線法或稀釋涂布平板法接種，其中稀釋涂布平板法還可以用來進行微生物的計數(shù)．【解答】解：①平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落，所以都需要用固體培養(yǎng)基，①正確；②稀釋涂布平板法不需要使用接種針進行接種，②錯誤；③為防止雜菌污染，操作時都需要在火焰旁進行接種，③正確；④平板劃線法不能用于計數(shù)活菌，只能用于分離菌種；稀釋涂布平板法可以用來計數(shù)活菌，④錯誤。故選：B。【點評】本題主要考查平板劃線法和稀釋涂布平板法的操作過程，意在強化學生對兩種接種方式的理解與運用．4．如圖表示培養(yǎng)和純化X細菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．步驟①倒平板操作時，倒好后應(yīng)立即將其倒過來放置 B．步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后迅速沾取菌液后平板劃線 C．步驟③多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落 D．步驟④培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對X細菌進行計數(shù)【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)．【答案】C【分析】由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進行平板劃線，④是培養(yǎng)?！窘獯稹拷猓篈、倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿，冷卻后將平板倒過來放置，A錯誤；B、步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以沾取菌液后平板劃線，B錯誤；C、步驟③多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落，C正確；D、步驟④培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對X細菌進行分離得到純種，D錯誤。故選：C。【點評】本題考查微生物的培養(yǎng)和純化，解題的關(guān)鍵是能識別圖示所代表的過程，仔細分析答題。5．如圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法不正確的是（）A．①步驟使用的培養(yǎng)基已經(jīng)滅菌并調(diào)節(jié)過pH B．①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行 C．操作③到④的過程中，每次接種前后都需要對接種環(huán)進行灼燒處理 D．圖中操作結(jié)束后需在培養(yǎng)皿蓋上標注菌種及接種日期等信息【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．【專題】模式圖；正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用．【答案】D【分析】由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進行平板劃線，④是培養(yǎng)。制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的基本過程為計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板五個步驟?！窘獯稹拷猓篈、①步驟表示倒平板，在倒平板之前已經(jīng)滅菌并調(diào)節(jié)過pH，A正確；B、①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行，防止被雜菌污染，B正確；C、接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過灼燒來滅菌，所以完成步驟④中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，C正確；D、圖中操作結(jié)束后需在培養(yǎng)皿底標注菌種及接種日期等信息，D錯誤。故選：D。【點評】本題考查微生物的培養(yǎng)和純化，要求考生識記培養(yǎng)基制備的基本過程，掌握平板劃線法的過程，明確每次劃線之前和之后均需要灼燒滅菌，再結(jié)合所學知識準確判斷各項。6．關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，敘述錯誤的是（）A．操作順序為計算、稱量、熔化、倒平板、滅菌 B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯 C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進行倒平板 D．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置【考點】培養(yǎng)基的配制．【答案】A【分析】用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基進行大腸桿菌的純化培養(yǎng)，可分為制備培養(yǎng)基和純化大腸桿菌兩個階段進行，其中制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。微生物接種的核心是防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。【解答】解：A、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，A錯誤；B、將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，加入少量的水，加熱，B正確；C、待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，C正確；D、待平板冷卻凝固約5～10min后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿低在上，D正確。故選：A。【點評】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，重點考查制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程，要求考生掌握培養(yǎng)基的制備步驟及相關(guān)的操作，相關(guān)知識點只需考生識記即可，屬于考綱識記層次的考查。此類試題需要考生具有扎實的基礎(chǔ)知識，學會構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。7．下列有關(guān)微生物分離、純化及計數(shù)的敘述中，錯誤的是（）A．常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌 B．平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散并計數(shù) C．稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分散 D．用血細胞計數(shù)板計數(shù)微生物時，實驗結(jié)果往往偏大【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的數(shù)量測定；微生物的純培養(yǎng)．【專題】正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用．【答案】B【分析】兩種純化細菌的方法的比較優(yōu)點缺點適用范圍平板劃線分離法可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離不能計數(shù)適用于好氧菌稀釋涂布平板法可以計數(shù)，可以觀察菌落特征吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延適用于厭氧，兼性厭氧【解答】解：A、纖維素是纖維素分解菌的碳源，因此常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌，A正確；B、平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散，但不能用于微生物的計數(shù)，B錯誤；C、稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分散并計數(shù)，C正確；D、用血細胞計數(shù)板計數(shù)微生物時，會將死的微生物計數(shù)在內(nèi)，導致實驗結(jié)果往往偏大，D正確。故選：B?！军c評】本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生掌握稀釋涂布平板法和平板劃線法功能的區(qū)別，掌握微生物計數(shù)的方法，再結(jié)合所學知識準確判斷。8．下列有關(guān)平板劃線操作的敘述，不正確的是（）A．第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物 B．每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種 C．在第二次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液 D．劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)能及時殺死接種環(huán)上的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)．【答案】C【分析】平板劃線法是指通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，最后得到由單個細菌繁殖而來的菌落。【解答】解：A、接種前先要用火焰灼燒接種環(huán)，目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物，A正確；B、每次劃線結(jié)束，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，B正確；C、在第二區(qū)域內(nèi)劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上一次劃線的末端，C錯誤；D、劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者，D正確。故選：C。【點評】平板劃線法是實驗室常用的接種方法，注意的細節(jié)較多，但關(guān)鍵只有一個就是防止雜菌污染，考生需要緊緊圍繞這個關(guān)鍵作答。9．下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是（）A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4?7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水 B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4?7H2O、葡萄糖、瓊脂、水 C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4?7H2O、尿素、瓊脂、水 D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4?7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．【答案】A【分析】篩選目的微生物時，需要使用選擇培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基需要使用尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。尿素分解菌是異養(yǎng)型的細菌。【解答】解：A、該培養(yǎng)基配方有尿素分解菌生活必須的營養(yǎng)物質(zhì)，且尿素是唯一的氮源，屬于選擇培養(yǎng)基，A正確；B、該培養(yǎng)基的配方缺少氮源，尿素分解菌是異養(yǎng)微生物，不能生活在該培養(yǎng)基上，B錯誤；C、尿素分解菌是異養(yǎng)型的細菌，該培養(yǎng)基的配方缺少碳源，尿素分解菌不能在該培養(yǎng)基上生存，C錯誤；D、該培養(yǎng)基是普通的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，大多數(shù)細菌都能夠在該培養(yǎng)基上生存，沒有選擇作用，不能篩選出尿素分解菌，D錯誤。故選：A?！军c評】本題主要考查選擇培養(yǎng)基的配方要求，意在強化學生對選擇培養(yǎng)基的理解與運用。10．下列哪種條件下，醋酸菌將葡萄汁中的糖分分解成醋酸（）A．氧氣、糖源充足 B．氧氣充足、缺少糖源 C．缺少氧氣、糖源充足 D．氧氣、糖源都缺少【考點】果酒、果醋的制作．【答案】A【分析】1、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。2、果醋制作的原理：醋酸菌是一種好氧性細菌，只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動。（1）當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。（2）當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿??！窘獯稹拷猓篈、當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸，A正確；B、當氧氣充足、缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，B錯誤；C、醋酸菌是嗜氧菌，缺少氧氣時，醋酸菌不能進行發(fā)酵，C錯誤；D、醋酸菌是嗜氧菌，缺少氧氣時，醋酸菌不能進行發(fā)酵，D錯誤。故選：A?！军c評】本題考查果酒和果醋的制作，要求考生識記果酒和果醋制作的相關(guān)知識，尤其是果醋制作的原理、醋酸菌的特點，能根據(jù)題干要求選出正確的答案，屬于考綱識記層次的考查。二．多選題（共5小題）（多選）11．下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述，錯誤的是（）A．與自然發(fā)酵相比，人工接種菌種不易被雜菌污染 B．較高溫度和密閉環(huán)境有利于果醋的發(fā)酵 C．鹽的用量、酒的種類和用量、溫度等均會影響腐乳風味 D．果酒、果醋和腐乳制作的微生物細胞呼吸產(chǎn)生CO2的場所都是細胞質(zhì)基質(zhì)【考點】果酒、果醋的制作．【答案】BD【分析】1、在利用酵母菌發(fā)酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時間使其繁殖，再隔絕氧氣進行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性．2、醋酸菌好氧性細菌，當缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃．3、豆腐的主要營養(yǎng)成分是蛋白質(zhì)和脂肪，都是大分子有機化合物，難以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多種微生物分泌的蛋白酶，能將蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多種微生物的協(xié)同下，豆腐轉(zhuǎn)變成腐乳．【解答】解：A、與自然發(fā)酵相比，人工接種過程中利用了嚴格的滅菌措施，可以防止其它雜菌污染，且發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好，A正確；B、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，而醋酸菌是嗜氧菌，也是嗜溫菌，因此果醋發(fā)酵溫度較高，且發(fā)酵過程要特別注意氧氣供應(yīng)，B錯誤；C、腐乳制作過程中，添加的料酒、香辛料和鹽等均具有調(diào)節(jié)腐乳風味的作用，所以鹽的用量、酒的種類和用量、溫度等均會影響腐乳風味，C正確；D、參與果酒制作的酵母菌是兼性厭氧型真核生物，參與果醋制作的醋酸菌是需氧型原核生物，參與腐乳制作的毛霉是需氧型真核生物，所以果酒制作的微生物細胞呼吸產(chǎn)生CO2的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)或線粒體、果醋制作的微生物細胞呼吸產(chǎn)生CO2的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)，而腐乳制作的微生物細胞呼吸產(chǎn)生CO2的場所是線粒體，D錯誤。故選：BD?！军c評】本題考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作，要求考生識記參與果酒制作的微生物及其代謝類型，掌握果酒制作的流程；識記腐乳制作的流程及相關(guān)細節(jié)，能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項．（多選）12．下列關(guān)于高中生物學實驗的原理、方法或選材的敘述，正確的是（）A．制作果醋時，通氧不足或溫度過低會使發(fā)酵受影響 B．利用稀釋涂布平板法對細菌計數(shù)時需借助于顯微鏡 C．用取樣器取樣法調(diào)查土壤小動物豐富度時，可以用目測估計法統(tǒng)計各種群的數(shù)量 D．利用二苯胺試劑鑒定細胞提取物，若產(chǎn)生藍色變化即表明有RNA存在【考點】果酒、果醋的制作；微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)；微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；DNA的粗提取與鑒定；土壤中動物類群豐富度的研究．【答案】AC【分析】1、醋酸菌的代謝類型為異養(yǎng)需氧型，其生存的適宜溫度為30～35℃．2、調(diào)查土壤動物豐富度采用取樣器取樣法，觀察肉眼難識別的小動物使用放大鏡；統(tǒng)計土壤動物豐富度的方法：記名計算法和目測估計法．3、在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色．【解答】解：A、醋酸菌是嗜氧菌，也是嗜溫菌，因此制作果醋時，通氧不足或溫度過低會使發(fā)酵受影響，A正確；B、利用稀釋涂布平板法對細菌計數(shù)時，通過肉眼即可數(shù)出菌落數(shù)，不需借助于顯微鏡，B錯誤；C、土壤小動物豐富度很大時，可以用目測估計法統(tǒng)計，C正確；D、利用二苯胺試劑鑒定細胞提取物，若產(chǎn)生藍色變化即表明有DNA存在，D錯誤。故選：AC。【點評】本題綜合考查果酒和果醋的制作、微生物的培養(yǎng)和分離、調(diào)查土壤小動物豐富度、DNA的粗提取和鑒定，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理，實驗選擇的材料是否合適，實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學習過程中注意積累．（多選）13．通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細菌和霉菌。利用下述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出（）A．大腸桿菌 B．霉菌 C．放線菌 D．固氮細菌【考點】選擇培養(yǎng)基．【答案】BCD【分析】選擇培養(yǎng)基的原理是：不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同。有的適于酸性環(huán)境，有的適于堿性環(huán)境；不同微生物對某些化學藥品的抵抗力不同。利用這些特點，我們便可配制出適于某些微生物生長而抑制其他微生物的選擇培養(yǎng)基。例如從土壤中分離放線菌時，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細菌和真菌的生長；如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽。【解答】解：A、大腸桿菌需要氮源、青霉素抑制大腸桿菌生長、酚也是抑制細菌的生長，A錯誤；B、霉菌是真菌，在培養(yǎng)基中加入青霉素后，青霉素可以抑制細菌和放線菌，但是不抑制真菌，所以加入青霉素的培養(yǎng)基可以選擇出霉菌，B正確；C、培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細菌和霉菌，所以可以篩選放線菌，C正確；D、固氮菌的氮源氮氣，在培養(yǎng)基中不需要氮源，所以缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長，但是固氮細菌可以生長，D正確。故選：BCD?！军c評】本題的知識點是培養(yǎng)基對微生物的選擇作用，加青霉素、苯酚、不含氮源的培養(yǎng)基都會對微生物的選擇作用，主要考查學生對選擇培養(yǎng)基的選擇作用的理解和應(yīng)用能力。（多選）14．如圖表示果酒和果醋制作過程中的物質(zhì)變化過程，下列敘述正確的是（）A．過程①、②和過程①、③總是同時進行 B．過程③和④都需要氧氣的參與 C．制作果酒和果醋的連續(xù)過程中要保持溫度恒定 D．可利用酸性重鉻酸鉀檢測是否有酒精的產(chǎn)生【考點】果酒、果醋的制作．【答案】BD【分析】1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→酶6CO2+12H2O+能量；（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6→酶2CO2+2C2H5OH+2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型．果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸．當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔?、分析題圖：過程①是細胞呼吸的第一階段，過程②是無氧呼吸的第二階段，過程③是有氧呼吸的第二、三階段，過程④是果醋制作．【解答】解：A、在無氧環(huán)境中，酵母菌只能進行過程①②，在氧氣充足的環(huán)境中，酵母菌只進行過程①③，A錯誤；B、過程③表示有氧呼吸的第二和第三階段，該過程需用氧氣的參與，過程④表示果醋發(fā)酵，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此該果醋也需要氧氣的參與，B正確；C、過程③所需的最適溫度為18～25℃，過程④所需的最適溫度為30～35℃，因此制作果酒和果醋的連續(xù)過程中不能保持溫度恒定，C錯誤；D、酒精可用酸性重鉻酸鉀溶液鑒定，顏色由橙色變成灰綠色，D正確。故選：BD?！军c評】本題結(jié)合圖解，考查果酒和果醋的制作，要求考生識記參與果酒和果醋制作的微生物及其代謝類型，掌握果酒和果醋制作的原理及條件，能準確判斷圖中各過程的含義、發(fā)生在場所及條件等知識，再結(jié)合所學的知識準確判斷各選項．（多選）15．鈣果又名歐李，果實中含有多種對人體有益的礦物質(zhì)元素，利用其加工成果汁、果酒、果醋等產(chǎn)品。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．利用醋酸菌進行鈣果果醋發(fā)酵時，溫度應(yīng)控制在30～35℃ B．在鈣果果酒發(fā)酵期間，為保持無氧環(huán)境，不能擰松發(fā)酵瓶蓋 C．傳統(tǒng)制作鈣果果酒、果醋時，應(yīng)將原料鈣果果汁進行高壓蒸汽滅菌 D．鈣果果酒的顏色是鈣果果皮和果肉中的色素進入發(fā)酵液形成的【考點】果酒、果醋的制作．【專題】實驗原理；實驗材料與實驗步驟；正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】AD【分析】1、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～25℃；生產(chǎn)中是否有酒精的產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細菌，只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動，其代謝類型屬于異養(yǎng)需氧型。當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷４姿峋淖钸m生長溫度為30～35℃。【解答】解：A、醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃，故利用醋酸菌進行鈣果果醋發(fā)酵時，溫度應(yīng)控制在適宜其生長的溫度范圍，A正確；B、在鈣果果酒發(fā)酵期間，酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，在發(fā)酵過程需要保持無氧環(huán)境，但需要根據(jù)發(fā)酵進程適時擰松瓶蓋放氣，B錯誤；C、傳統(tǒng)制作鈣果果酒、果醋時，利用的是果汁中帶有的野生型酵母菌，若將原料鈣果果汁進行高壓蒸汽滅菌，會殺死酵母菌，C錯誤；D、鈣果果酒的顏色是鈣果果皮和果肉中的色素進入發(fā)酵液形成的，D正確。故選：AD?！军c評】本題考查果酒和果醋的制作，要求考生識記制作果酒和果醋的原理和過程，意在考查考生運用所學知識綜合分析問題和解決問題的能力。三．解答題（共5小題）16．某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料純化乳酸菌．分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸菌能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣．回答下列問題：（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋，進行梯度稀釋的理由是泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落．（2）推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的識別和分離．分離純化時應(yīng)挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌．（3）乳酸菌在﹣20℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的甘油（填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”）．【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；制作泡菜．【專題】微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】見試題解答內(nèi)容【分析】（1）泡菜的制作原理泡菜的制作離不開乳酸菌．在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸．（2）測定亞硝酸鹽含量的原理在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標準液進行目測對比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量．（3）泡菜的制作（2）亞硝酸鹽含量的測定操作過程【解答】解：（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋；進行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落．（2）在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用是中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的識別和分離；分離純化時應(yīng)挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌．（3）乳酸菌在﹣20℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的甘油．故答案為：（1）無菌水泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落（2）中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸利于乳酸菌的識別和分離在平板上有透明圈（3）甘油【點評】本題主要以泡菜的制作為前提，考查微生物應(yīng)用的相關(guān)知識，意在考查考生把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力．17．回答下列與細菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是蛋白胨（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上能夠（填“能夠”或“不能”）生長，原因是硝化細菌可以利用空氣中的二氧化碳作為碳源。（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板倒置（填“倒置”或“正置”）。（3）單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征。（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過滅菌處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物?！究键c】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；無菌技術(shù)常用的消毒和滅菌方法；微生物的純培養(yǎng)．【專題】正推法；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用．【答案】見試題解答內(nèi)容【分析】1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。2、常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，使用對象主要有接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等；【解答】解：（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是蛋白胨，由于不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同，故制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，硝化細菌屬于自養(yǎng)生物，可以利用空氣中的二氧化碳作為碳源，故在沒有碳源的培養(yǎng)基上能夠生長。（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板倒置，防止冷凝水倒流污染培養(yǎng)基。（3）由于在一定的培養(yǎng)條件下，不同微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征不同，故可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過滅菌處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物，防止污染環(huán)境。故答案為：（1）蛋白胨不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細菌可以利用空氣中的二氧化碳作為碳源（2）倒置（3）在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征（4）滅菌【點評】本題主要考查微生物的分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生對培養(yǎng)基的成分、微生物的培養(yǎng)過程及菌落的特征的記憶與理解，難度不大。18．如圖所示是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌的過程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，鑒別培養(yǎng)基還需添加酚紅作指示劑，產(chǎn)脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成紅色；（2）在5個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191．該過程采取的接種方法是稀釋涂布平板法，每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為1.75×108個，與血細胞計數(shù)板計數(shù)法相比，此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較少；（3）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼，終止密碼有UAG、UGA和UAA，突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為UGA，突變基因表達的蛋白含115個氨基酸?！究键c】微生物的數(shù)量測定；選擇培養(yǎng)基．【專題】圖文信息類簡答題；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用．【答案】見試題解答內(nèi)容【分析】1、鑒定分解尿素的細菌：細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠產(chǎn)生脲酶，并分解尿素。2、mRNA是以DNA的一條鏈為模板轉(zhuǎn)錄形成的，翻譯過程中，mRNA中每3個堿基決定一個氨基酸，所以經(jīng)翻譯合成的蛋白質(zhì)分子中氨基酸的數(shù)目是mRNA堿基數(shù)目的13，是DNA（基因）中堿基數(shù)目的16．即DNA（或基因）中堿基數(shù)：mRNA上堿基數(shù)：氨基酸個數(shù)＝6：3：【解答】解：（1）脲酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，鑒別培養(yǎng)基還需添加酚紅作指示劑。由于尿素被脲酶分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，pH升高，從而使酚紅指示劑變紅。（2）用于計數(shù)細菌菌落數(shù)的常用方法是稀釋涂布平板法，統(tǒng)計的菌落數(shù)應(yīng)介于30～300之間，故選擇細菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計數(shù)。每克該土壤樣品中的菌落數(shù)對應(yīng)的應(yīng)該是每毫升菌液中的細菌數(shù)目，所以每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為（156+178+191）÷3÷0.1×105＝1.75×108．由于兩個或多個細菌連接在一起時，往往統(tǒng)計的是一個菌落，所以用此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較少。（3）密碼子是由三個相鄰的堿基組成，271個堿基和后面2個堿基一起共構(gòu)成91個密碼子，插入的70個核苷酸和后面2個堿基一起共構(gòu)成24個密碼子，后面是UGA，為終止密碼，表示翻譯結(jié)束，所以表達的蛋白質(zhì)含有115個氨基酸。故答案為：（1）尿素酚紅紅（2）稀釋涂布平板法1.75少（3）UGA115【點評】本題考查微生物的分離和轉(zhuǎn)錄、翻譯的相關(guān)知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力，屬于考綱識記和理解層次的考查。19．為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌的分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：（1）細菌生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、氮源和無機鹽四類。該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37．據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×107。（2）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。（3）示意圖A和B中，B表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的溶解氧的含量，同時可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。【考點】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)．【專題】實驗性簡答題；微生物的分離、培養(yǎng)和應(yīng)用．【答案】見試題解答內(nèi)容【分析】分析圖解：圖中細菌的分離的方法為①表示平板劃線法，②表示稀釋涂布平板法。①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！窘獯稹拷猓海?）微生物培養(yǎng)過程中需要的營養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水、無機鹽等。微生物培養(yǎng)過程應(yīng)該進行無菌操作，配制的培養(yǎng)基要進行高壓蒸汽滅菌，可以將滅菌后的空白平板進行培養(yǎng)以檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底；由題意知1ml水樣中的菌落數(shù)是（39+38+37）÷3÷0.1×100＝3.8×104個，每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×104×103＝3.8×107。（2）對接種環(huán)常用的滅菌方法是灼燒滅菌；在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是；將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個細胞繁殖而來的菌落。（3）分析題圖可知，A培養(yǎng)皿采用的接種方法是平板劃線法，B培養(yǎng)皿采用的接種方法是稀釋涂布平板法。（4）由題意可知，振蕩培養(yǎng)比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快，由此可以說明該細菌是需氧菌，由于振蕩培養(yǎng)提高了培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，細菌生長速度加快。故答案為：（1）氮源和無機鹽檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107（2）灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落（3）B（4）溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)【點評】本題主要考查培養(yǎng)基的制作和微生物的接種方法，意在強化學生對實驗室的微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識的理解與掌握。20．【生物﹣﹣選修I：生物技術(shù)實踐】回答下列關(guān)于腐乳制作的問題：（1）腐乳是豆腐經(jīng)微生物發(fā)酵后制成的食品．多種微生物參與了該發(fā)酵過程，其中起主要作用的微生物是毛霉，其產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解為肽和氨基酸；其產(chǎn)生的脂肪酶能將豆腐中的脂肪水解為甘油和脂肪酸．（2）發(fā)酵完成后需加鹽腌制，加鹽還可以抑制微生物生長．（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配制而成的鹵湯．鹵湯具有一定的防腐作用外，還能使腐乳具有獨特的風味．【考點】發(fā)酵工程在食品、醫(yī)藥、農(nóng)牧業(yè)等工業(yè)上的應(yīng)用．【答案】見試題解答內(nèi)容【分析】實驗原理：（1）參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種，其中起主要作用的是毛霉．（2）毛霉是一種絲狀真菌，常見于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有發(fā)達的白色菌絲．（3）毛酶等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸．實驗步驟：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制【解答】解：（1）發(fā)酵過程中起作用的微生物有多種，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解成多肽和氨基酸，產(chǎn)生的脂肪酶能夠?qū)⒍垢械闹舅鉃楦视秃椭舅幔?）發(fā)酵過程中加鹽腌制，不僅可以調(diào)制風味，而且能夠抑制雜菌等其他微生物的生長．（3）腐乳制作后期加入鹵湯，鹵湯不僅可以防腐，還可以使腐乳具有獨特的風味（或香味）．故答案為：（1）毛霉肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸（2）微生物（3）風味【點評】本題考查腐乳制作的原理和流程，設(shè)計到具體操作過程的作用和意義，均為課本上理解識記內(nèi)容，難度不大．

考點卡片1．土壤中動物類群豐富度的研究【知識點的認識】一、實驗前的準備1、實驗目的使每位小組成員通過調(diào)查樣本中小動物的種類和數(shù)量來推測某一區(qū)域內(nèi)土壤動物的豐富度，能從種群的組成上描述群落的實驗目的使小組成員通過調(diào)查樣本中小動物的種類和數(shù)量來推測某一區(qū)域內(nèi)土壤小動物的結(jié)構(gòu)特征，并從中可以感受到采樣地點真實的環(huán)境情況，并使小組成員建立，群落與環(huán)境之間相互聯(lián)系的觀念．2、實驗原理：土壤是無數(shù)小動物的家園，常見的小動物有蜘蛛、鼠婦、蜈蚣、馬陸、蚯蚓以及多種多樣得昆蟲等．大多數(shù)土壤動物身體微小，不適于用“樣方法”或“標志重捕法”進行調(diào)查，在這類研究時，常采用取樣器取樣的方法，即用一定規(guī)格的捕捉器（如采集罐、吸蟲器等）進行取樣，通過調(diào)查樣本中小動物的種類和數(shù)量來推測某一區(qū)域內(nèi)土壤動物的豐富度．3、實驗方法：實驗采用取樣器取樣的方法進行研究，在豐富度統(tǒng)計時采用有兩種統(tǒng)計法：記名計算法、目測估計法．實驗材料和用具：自制取樣器、鏟子、塑料袋、誘蟲器或吸蟲器（裝有酒精的試管、漏斗、漏底花盆，底鋪金屬網(wǎng)、燈）、標簽、瓷盤、解剖針、放大鏡、鑷子（包著紗布或棉花的鑷子）、試管、70%酒精、顯微鏡、解剖鏡（實體鏡）、載（蓋）玻片、土壤動物分類圖譜（或?qū)嵙暿謨裕┑龋?、需了解的實驗中的關(guān)鍵概念與知識：（1）取樣器取樣：即用一定規(guī)格的捕捉器（如采集罐、吸蟲器等）進行取樣，通過調(diào)查樣本中小動物的種類和數(shù)量來推測某一區(qū)域內(nèi)土壤動物的豐富度．（2）豐富度統(tǒng)計方法：①記名計算法．②目測估計法．記名計算法：指在一定面積樣地中，直接數(shù)出各種群個體數(shù)（用于個體較大，種群數(shù)量有限得群落；目測估計法：按預先確定的多度等級來估計單位面積上個體數(shù)量的多少．等級劃分和表示方法：非常多、多、較多、較少、少、很少等．（3）土壤：土壤是巖石圈表面的疏松表層，是陸生植物生活的基質(zhì)和陸生動物生活的基底．土壤不僅為植物提供必需的營養(yǎng)和水分，而且也是土壤動物賴以生存的棲息場所．土壤的形成從開始就與生物的活動密不可分，所以土壤中總是含有多種多樣的生物，如細菌、真菌、放線菌、藻類、原生動物、扁形動物、輪形動物、線形動物、環(huán)節(jié)動物、軟體動物和各種節(jié)肢動物等．土壤無論對植物來說還是對土壤動物來說都是重要的生態(tài)因子．越靠近土壤表層，動物的種類越豐富．土壤動物是最重要的土壤消費者和分解者．可見，土壤是生物和非生物環(huán)境的一個極為復雜的復合體，土壤的概念總是包括生活在土壤里的大量生物．生物的活動促進了土壤的形成，而眾多類型的生物又生活在土壤之中．【命題方向】某同學欲在已經(jīng)棄耕一年的菜地中開展土壤小動物豐富度調(diào)查，下列有關(guān)說法正確的是（）A.對土壤中活動能力強的小動物應(yīng)用標記重捕法調(diào)查B.隨著土層的加深，生物類群會逐漸減少C.人類活動不會影響土壤小動物的分布及數(shù)量D.取樣深度不同，土壤中的生物種類也不同，這體現(xiàn)了群落的水平結(jié)構(gòu)分析：1、許多土壤動物有較強的活動能力，而且身體微小，因此不適于用樣方法進行調(diào)查。在進行這類研究時，常用取樣器取樣的方法進行采集、調(diào)查，常用的統(tǒng)計物種相對數(shù)量的方法有兩種：一是記名計算法；二是目測估計法。2、群落的空間結(jié)構(gòu)包括垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)等。在垂直方向上，大多數(shù)群落都具有明顯的分層現(xiàn)象；植物的垂直分層為動物創(chuàng)造了多種多樣的棲息空間和食物條件，因此，動物也有分層現(xiàn)象。在水平方向上，不同地段往往分布著不同的種群，同一地段上種群密度也有差別，它們常呈鑲嵌分布。解答：A、對土壤中活動能力強的小動物應(yīng)用取樣器取樣法調(diào)查豐富度，A錯誤；B、隨著土層的加深，小動物的生存環(huán)境惡化，生物類群會逐漸減少，B正確；C、人類活動會影響土壤小動物的分布及數(shù)量，C錯誤；D、取樣深度不同，土壤中的生物種類也不同，這是垂直方向上的結(jié)構(gòu)，體現(xiàn)了群落的垂直結(jié)構(gòu)，D錯誤。故選：B。點評：本題考查估算種群密度的方法、土壤中動物類群豐富度的研究，要求考生識記估算種群密度的方法及適用范圍；識記調(diào)查土壤動物類群豐富度的方法，能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項?！窘忸}思路點撥】許多土壤動物有較強的活動能力，而且身體微小，因此不適于用樣方法進行調(diào)查。在進行這類研究時，常用取樣器取樣的方法進行采集、調(diào)查，常用的統(tǒng)計物種相對數(shù)量的方法有兩種：一是記名計算法；二是目測估計法。2．制作泡菜【知識點的認識】泡菜的制作及亞硝酸鹽含量的測定1、原理（1）泡菜的制作原理泡菜的制作離不開乳酸菌．在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸．（2）測定亞硝酸鹽含量的原理在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標準液進行目測對比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量．2、流程（1）泡菜的制作（2）亞硝酸鹽含量的測定操作過程3、實驗分析（1）乳酸菌的種類分析乳酸菌屬原核生物，它是能通過發(fā)酵將糖類轉(zhuǎn)化成乳酸的細菌的總稱，常見的有乳酸桿菌和乳酸鏈球菌，所以乳酸菌不是一個種群，而是一類生物．（2）泡菜在腌制過程中，乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化①發(fā)酵初期：以不抗酸的大腸桿菌和酵母菌的活動為主，同時還有一部分硝酸鹽還原菌活動．該時期利用了氧氣，產(chǎn)生了厭氧環(huán)境，乳酸菌才開始活動．此時乳酸菌和乳酸的量都比較少，而由于硝酸鹽還原菌的活動，亞硝酸鹽含量有所增加．②發(fā)酵中期：由于乳酸菌產(chǎn)生了大量乳酸，其他細菌活動受到抑制，只有乳酸菌活動增強．此時期乳酸菌數(shù)量達到最高峰，乳酸的量繼續(xù)積累．由于硝酸鹽還原菌受抑制，同時形成的亞硝酸鹽又被分解，因而亞硝酸鹽含量下降．所以在整個發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽的含量表現(xiàn)為先增加后下降的趨勢（如圖所示）．③發(fā)酵后期：由于乳酸的積累，酸度繼續(xù)增長，乳酸菌活動也受到抑制．乳酸菌數(shù)量下降，而硝酸鹽還原菌完全被抑制．提醒放置時間長的蔬菜中的硝酸鹽易被滋生的硝酸還原菌還原成亞硝酸鹽．3．果酒、果醋的制作【知識點的認識】（1）利用酵母菌制作果酒的原理是：在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O6+6O2→酶6CO2+12H2O+在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。C6H12O6→酶2CO2+2C2H5OH+（2）利用醋酸菌制作果醋的原理當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。C6H12O6+2O2→酶CH3COOH（醋酸）+2H2O+2CO2+C2H5OH+O2→酶CH3COOH（醋酸）+H2O+（提示：在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的）【命題方向】下列關(guān)于果酒、果醋制作的敘述，錯誤的是（）A．糖源不足時乙醇可以作為果醋發(fā)酵的底物B．酵母菌和醋酸桿菌都屬于異養(yǎng)型微生物C．乙醇發(fā)酵后期可向培養(yǎng)液中加入無菌水進行適當稀釋再制作果醋D．在變酸的果酒表面觀察到的菌膜是酵母菌在液面大量繁殖形成的分析：1、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細菌，只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動，其代謝類型屬于異養(yǎng)需氧型。當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃。2、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～25℃；生產(chǎn)中是否有酒精的產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。解答：A、當缺少糖源時和有氧條件下，醋酸菌可將乙醇（酒精）氧化成醋酸，故糖源不足時乙醇可以作為果醋發(fā)酵的底物，A正確；B、酵母菌和醋酸桿菌都屬于異養(yǎng)型微生物，需要利用現(xiàn)成的有機物維持生命活動，B正確；C、乙醇發(fā)酵后期就大量的二氧化碳和酒精，可向培養(yǎng)液中加入無菌水進行適當稀釋再制作果醋，醋酸菌可將乙醇氧化成醋酸，C正確；D、在變酸的果酒表面觀察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，D錯誤。故選：D。點評：本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識，要求考生識記果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作原理等知識，意在考查考生的識記和分析能力。【解題思路點撥】掌握果酒、果醋的制作的相關(guān)知識是解題的關(guān)鍵。4．培養(yǎng)基的配制【知識點的認識】培養(yǎng)基一般包括：水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。如牛肉膏提供碳源、磷酸鹽和維生素等，蛋白胨提供氮源和維生素等。【命題方向】下表是培養(yǎng)某微生物的培養(yǎng)基的配方，回答下列問題。組分牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水用量5g10g5g20g1000mL（1）培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、和無機鹽。上述培養(yǎng)基配方中能充當碳源的成分是。培養(yǎng)基配制完成以后，一般還要調(diào)節(jié)pH并對培養(yǎng)基進行處理。（2）在配制培養(yǎng)基時，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮、和滲透壓等條件。（3）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行（填“消毒”或“滅菌”）；操作者的雙手需進行清洗和；空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。（4）分離純化微生物最常使用的接種方法是和。（5）在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是。分析：培養(yǎng)基的概念及營養(yǎng)構(gòu)成（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。（2）營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。解答：（1）培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基的成分一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。牛肉膏和蛋白胨能提供碳源和氮源。培養(yǎng)基配制完成后，一般還要調(diào)節(jié)pH并對培養(yǎng)基進行滅菌處理。（2）在微生物培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度、滲透壓等條件。（3）滅菌是用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌；消毒是用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物，操作者的雙手需要進行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。（4）分離純化微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法獲得單菌落。對接種針或涂布器常用灼燒滅菌法進行。（5）培養(yǎng)微生物時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染．對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。故答案為：（1）氮源牛肉膏滅菌（2）溫度酸堿度（3）滅菌消毒變性（4）平板劃線法稀釋涂布平板法（5）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生點評：本題考查微生物與培養(yǎng)基的相關(guān)知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關(guān)鍵?！窘忸}思路點撥】掌握培養(yǎng)基配制的相關(guān)知識是解題的關(guān)鍵。5．無菌技術(shù)常用的消毒和滅菌方法【知識點的認識】1、微生物培養(yǎng)過程中要進行無菌操作，關(guān)鍵就在于防止外來雜菌的入侵。2、實驗室常用的滅菌方法：（1）灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌。（2）干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌。（3）高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min?！久}方向】無菌技術(shù)是微生物培養(yǎng)中的關(guān)鍵技術(shù)之一，內(nèi)容主要包括消毒和滅菌。下列關(guān)于無菌技術(shù)的敘述，錯誤的是（）A．生物消毒法可以殺死物體內(nèi)部包括芽孢和孢子在內(nèi)的所有微生物B．常用的消毒方法主要包括煮沸消毒、化學藥物消毒、紫外線消毒等C．常用的滅菌方法主要包括干熱滅菌、濕熱滅菌、灼燒滅菌等D．為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，消毒滅菌后的操作應(yīng)在超凈工作臺進行分析：1、微生物培養(yǎng)過程中要進行無菌操作，關(guān)鍵就在于防止外來雜菌的入侵。2、實驗室常用的滅菌方法：（1）灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌。（2）干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌。（3）高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。解答：A、殺死物體內(nèi)部包括芽孢和孢子在內(nèi)的所有微生物屬于滅菌，消毒只能殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，不包括芽孢和孢子，A錯誤；B、常用的消毒方法主要包括煮沸消毒、化學藥物（酒精等）消毒、紫外線消毒、巴氏消毒法等，B正確；C、常用的滅菌方法主要包括干熱滅菌、濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）、灼燒滅菌等，C正確；D、為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，消毒滅菌后的操作應(yīng)在超凈工作臺進行，超凈工作臺使用前可以用紫外線照射30min，以殺死物體表面或空氣中的微生物，D正確。故選：A。點評：本題考查消毒滅菌的相關(guān)知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關(guān)鍵?！窘忸}思路點撥】掌握無菌技術(shù)、常用的消毒和滅菌方法的相關(guān)知識是解題的關(guān)鍵。6．微生物的純培養(yǎng)【知識點的認識】（1）由單一個體繁殖所獲得的微生物群體，稱為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。微生物的純培養(yǎng)步驟有配置培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離、培養(yǎng)等。（2）微生物常見的接種的方法：A、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。B、稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。【命題方向】下列有關(guān)微生物的純培養(yǎng)、分離及計數(shù)的敘述，正確的是（）A．培養(yǎng)基配方中都含有碳源、氮源、水、無機鹽及瓊脂等成分B．用纖維素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以選擇分離出尿素分解菌C．用稀釋涂布平板法統(tǒng)計的樣品活菌數(shù)目往往與實際數(shù)目多D．平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散，但不宜用于計數(shù)分析：微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。（2）稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。解答：A、培養(yǎng)基配方中一般都含有碳源、氮源、水、無機鹽等成分，瓊脂是制作固體培養(yǎng)基所需要的凝固劑，A錯誤；B、用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可以選擇分離出纖維素分解菌，用尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以選擇分離出尿素分解菌，B錯誤；C、利用稀釋涂布平板法計數(shù)時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落，所以統(tǒng)計結(jié)果比活菌實際數(shù)目低，C錯誤；D、平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散，但平板劃線法不能對微生物進行計數(shù)，D正確。故選：D。點評：本題主要考查的是培養(yǎng)基的配制、微生物的純培養(yǎng)以及微生物的數(shù)量測定的相關(guān)知識，意在考查學生對基礎(chǔ)知識的理解掌握，難度適中。【解題思路點撥】掌握微生物的純培養(yǎng)的相關(guān)知識是解題的關(guān)鍵。7．微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)8．選擇培養(yǎng)基【知識點的認識】培養(yǎng)基按照用途可分為類型和作用選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指只允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品配制而成的，用以鑒別不同類別的微生物。【命題方向】下列關(guān)于微生物的選擇培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（）A.用纖維素作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基分離獲得纖維素分解菌B.用尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基分離獲得尿素分解菌C.用缺少有機碳源的選擇培養(yǎng)基分離獲得自養(yǎng)型微生物D.用含有青霉素的選擇培養(yǎng)基分離獲得酵母菌和細菌分析：生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。培養(yǎng)基一般都含有水、碳原、氮源和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。牛肉膏和蛋白胨來源于動物，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)。解答：A、篩選纖維素分解菌需以纖維素作為唯一的碳源，A正確；B、篩選尿素分解菌需以尿素作為唯一氮源，B正確；C、自養(yǎng)型微生物可以自身合成有機物，比如一些微生物可以利用光合作用，利用大氣中的二氧化碳合成有機物，對于這類微生物的培養(yǎng)，培養(yǎng)基中可以不加有機碳源，利用空氣中的二氧化碳即可。故用缺少有機碳源的選擇培養(yǎng)基分離獲得自養(yǎng)型微生物，C正確；D、青霉素是一種抗生素，抑制細菌的生長和增殖，對真核細胞不起作用，酵母菌可以在含有青霉素的選擇培養(yǎng)基分離出來，但細菌不可分離出來，D錯誤。故選：D。點評：本題考查培養(yǎng)基的相關(guān)知識，要求考生識記培養(yǎng)基的種類及功能，能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項。【解題思路點撥】分清選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基的特點，針對題干具體分析，不要混淆。9．微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）【知識點的認識】土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)：1．分離菌株的思路（1）自然界中目的菌株的篩選①依據(jù)：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。②實例：PCR技術(shù)過程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶，就是從熱泉中篩選出來的Taq細菌中提取出來的。（2）實驗室中目的菌株的篩選①原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源．缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)