黑色素瘤分子檢測及其診療應(yīng)用的專家共識CONTENTS01020304BRAF基因突變檢測CKIT基因突變檢測NRAS基因突變檢測其他基因融合檢測BRAF基因突變檢測01”02”03”聚合酶鏈式反應(yīng)法在黑色素瘤中的應(yīng)用聚合酶鏈式反應(yīng)法與免疫組織化學(xué)的比較聚合酶鏈式反應(yīng)法的局限性聚合酶鏈式反應(yīng)法聚合酶鏈式反應(yīng)法是檢測BRAF基因突變的常用方法，具有簡便、快速和成本低的優(yōu)勢，為黑色素瘤的常規(guī)檢測手段。免疫組織化學(xué)用于初篩BRAF基因突變，而聚合酶鏈式反應(yīng)法則用于驗證，兩者結(jié)合使用可以提高檢測的準確性。雖然聚合酶鏈式反應(yīng)法操作簡便，但其高通量和全面性不如下一代基因測序法，可能漏檢某些基因突變。NGS技術(shù)具有高通量、全面、能檢測多種突變及基因異常的優(yōu)勢，為黑色素瘤的分子檢測提供了更精確的手段。NGS方法用于驗證免疫組織化學(xué)初篩后的BRAF基因突變，尤其在經(jīng)濟條件允許的情況下推薦使用。盡管PCR法簡便、快速、成本低，但NGS因其全面性和準確性高而被推薦，尤其是在需要全面了解患者遺傳特征時。下一代基因測序法的優(yōu)勢NGS在BRAF基因突變檢測中的應(yīng)用NGS與其他檢測方法的比較下一代基因測序法突變與預(yù)后關(guān)系BRAF突變與黑色素瘤預(yù)后KIT突變與治療反應(yīng)NRAS突變與免疫治療BRAF基因突變是黑色素瘤的主要驅(qū)動因子，突變型患者總生存期更差，常與腦轉(zhuǎn)移相關(guān)。KIT突變的黑色素瘤對KIT抑制劑治療有不同敏感性，影響治療效果和預(yù)后。NRAS突變與預(yù)后不良相關(guān)，影響免疫治療療效，需選擇相應(yīng)靶向治療藥物。CKIT基因突變檢測KIT突變的黑色素瘤治療KIT抑制劑療效與安全性免疫治療在KIT突變黑色素瘤中的應(yīng)用黑色素瘤中KIT基因突變主要在黏膜和肢端病變中多見，對KIT抑制劑治療敏感性不同。KIT抑制劑如瑞派替尼在轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者中抗腫瘤活性良好，確認的ORR為23%，mPFS為7.3個月。接受CTLA-4抑制劑治療的患者ORR為20%，mPFS為3.0個月，中位總生存時間（medianoverallsurvival，mOS）為11.8個月；接受程序性死亡受體-1（programmedcelldeath-1，PD-1）抑制劑治療的患者ORR為35%，mPFS為3.2個月，mOS為22.5個月。KIT抑制劑靶向治療010203KIT外顯子11突變對KIT抑制劑治療具有高度敏感性，是黑色素瘤中最常見的突變類型之一。部分黑色素瘤患者攜帶KIT外顯子13突變，這類突變對KIT抑制劑的反應(yīng)不如外顯子11突變，但仍有一定的治療響應(yīng)率。KIT外顯子17突變在黑色素瘤中較為罕見，且對KIT抑制劑治療通常無效，需要探索其他治療策略。KIT外顯子11突變KIT外顯子13突變KIT外顯子17突變KIT外顯子突變類型010203PD-L1表達水平檢測TMB/TNB與免疫治療療效HED基因型與ICI治療反應(yīng)PD-L1的免疫組織化學(xué)檢測有助于識別對免疫檢查點抑制劑有反應(yīng)的患者。腫瘤突變負荷/腫瘤新生抗原負荷（TMB/TNB）檢測反映腫瘤新生抗原產(chǎn)生的概率，可預(yù)測抗PD-1等免疫治療的療效。HLA-Ⅰ類抗原進化多樣性（HED）檢測通過評估HLA多樣性不僅可以預(yù)測免疫治療的效果，還可以揭示腫瘤免疫肽的多樣性和腫瘤微環(huán)境的特點。免疫治療效果NRAS基因突變檢測聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）是一種常用的分子生物學(xué)技術(shù)，因其操作簡便、快速和成本較低而被臨床常規(guī)采用，用于初步篩查BRAF基因突變。PCR方法的簡便性除了在黑色素瘤的BRAF基因突變檢測中應(yīng)用廣泛外，PCR也適用于其他多種基因突變的檢測，是分子診斷中不可或缺的工具之一。PCR方法的應(yīng)用范圍盡管PCR方法具有操作簡便、快速等優(yōu)點，但其檢測通量有限，可能漏檢一些罕見的基因突變，因此在特定情況下需要結(jié)合其他更全面的檢測技術(shù)如NGS來提高檢出率。PCR方法的局限性PCR方法檢測MEK抑制劑療效通過抑制MEK1/2激酶活性，MEK抑制劑如妥拉美替尼阻斷了RAS/RAF/MEK/ERK信號通路，從而抑制黑色素瘤細胞的生長和增殖。MEK抑制劑的抗腫瘤機制對于NRAS突變的晚期黑色素瘤患者，MEK抑制劑如妥拉美替尼顯示出一定的療效，其ORR為34.7%，mPFS為4.2個月，疾病控制率（DCR）為72.6%。NRAS突變患者的療效評估盡管MEK抑制劑在治療NRAS突變的黑色素瘤中取得了初步成效，但仍需進一步研究以確定其長期療效及安全性，同時考慮與其他治療策略的聯(lián)合使用以提高治療效果。MEK抑制劑的臨床應(yīng)用與挑戰(zhàn)BRAFV600E突變與晚期黑色素瘤患者的預(yù)后顯著相關(guān)，聯(lián)合MEK抑制劑治療可提高療效。BRAF基因突變與黑色素瘤預(yù)后KIT基因突變在黏膜和肢端黑色素瘤中常見，NGS技術(shù)有助于提高檢出率。KIT基因突變在黑色素瘤中的檢測NRAS突變患者對傳統(tǒng)免疫治療反應(yīng)較低，但MEK抑制劑治療顯示出一定的療效。NRAS基因突變對免疫治療的影響臨床研究結(jié)果其他基因融合檢測010203NTRK1-3融合在黑色素瘤中雖不常見，但為特定亞型提供新的治療選擇。NTRK1-3基因檢測的重要性ROS1突變在黑色素瘤中罕見，但其檢測有助于篩選潛在的靶向藥物。ROS1基因變異的臨床意義這些基因的融合或突變可為難治性黑色素瘤患者帶來新的治療機會。ALK、RET及BRAF基因融合的識別NTRK1-3、ROS1等基因基因融合檢測的重要性全外顯子組測序的應(yīng)用RNA轉(zhuǎn)錄組測序的價值對于難治性黑色素瘤，基因融合如NTRK、ALK等的檢測可能揭示新的治療靶點。全外顯子組測序有助于識別不常見的遺傳變異，為多線治療后的黑色素瘤患者提供治療選擇。RNA轉(zhuǎn)錄組測序在多線治療后的黑色素瘤中，能提高對罕見基因突變或融合的檢測靈敏度。難治性病變多線治療后潛在靶向藥物選擇通過基因突變檢測，可以識別黑色素瘤中常見的驅(qū)動基因突變，如BRAF、NRAS等，為靶向治療提供