生物制藥發(fā)酵罐運(yùn)維技師（初級(jí)）考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.發(fā)酵罐常用主體材質(zhì)為______不銹鋼。2.培養(yǎng)基濕熱滅菌溫度通常為______℃（維持30min）。3.適用于氣液混合的攪拌槳類型是______式（如六彎葉渦輪）。4.溶氧（DO）監(jiān)測(cè)常用______電極。5.發(fā)酵罐冷卻介質(zhì)一般為______。6.接種口滅菌常用______方式。7.空氣過濾器作用是去除空氣中的______。8.攪拌軸密封常用______密封（初級(jí)核心類型）。9.pH下降時(shí)常用______（如氨水）調(diào)節(jié)。10.清潔驗(yàn)證核心指標(biāo)是______殘留量。答案：1.316L2.1213.渦輪4.溶氧5.循環(huán)水6.火焰7.微生物8.機(jī)械9.堿性物質(zhì)10.微生物/清潔劑二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.不屬于發(fā)酵罐主體結(jié)構(gòu)的是（）A.罐體B.攪拌系統(tǒng)C.培養(yǎng)基配制罐D(zhuǎn).冷卻夾套2.濕熱滅菌參數(shù)是（）A.100℃/15minB.121℃/30minC.134℃/10minD.160℃/2h3.低粘度發(fā)酵液適合的攪拌槳是（）A.推進(jìn)式B.渦輪式C.錨式D.框式4.溶氧不足時(shí)無效措施是（）A.提攪拌轉(zhuǎn)速B.增通氣量C.降罐壓D.通純氧5.發(fā)酵接種量一般為（）A.1%-5%B.5%-10%C.10%-15%D.15%-20%6.在線監(jiān)測(cè)參數(shù)是（）A.培養(yǎng)基濃度B.溶氧C.產(chǎn)物含量D.細(xì)胞形態(tài)7.滅菌后接種溫度約為（）A.20℃B.30℃C.40℃D.50℃8.空氣過濾器滅菌方式是（）A.濕熱B.干熱C.火焰D.化學(xué)9.不屬于清潔步驟的是（）A.預(yù)沖洗B.堿洗C.酸洗D.培養(yǎng)基配制10.罐壓作用不包括（）A.維持溶氧B.防雜菌入侵C.促進(jìn)攪拌D.防倒吸答案：1.C2.B3.A4.C5.B6.B7.B8.B9.D10.C三、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.發(fā)酵罐基本組成包括（）A.罐體B.攪拌系統(tǒng)C.通氣系統(tǒng)D.冷卻系統(tǒng)2.影響溶氧的因素有（）A.攪拌轉(zhuǎn)速B.通氣量C.罐壓D.發(fā)酵液粘度3.滅菌對(duì)象包括（）A.罐體B.培養(yǎng)基C.空氣D.接種工具4.在線控制參數(shù)是（）A.pHB.溫度C.溶氧D.產(chǎn)物濃度5.攪拌槳作用包括（）A.混合B.氣液分散C.傳熱D.滅菌6.清潔驗(yàn)證項(xiàng)目包括（）A.微生物殘留B.清潔劑殘留C.設(shè)備外觀D.罐體壓力7.接種注意事項(xiàng)（）A.無菌操作B.接種量合適C.菌種活力D.接種溫度8.冷卻系統(tǒng)類型（）A.夾套B.內(nèi)盤管C.外盤管D.噴淋9.空氣過濾器要求（）A.除菌效率高B.阻力小C.耐高溫D.易更換10.pH調(diào)節(jié)常用物質(zhì)（）A.鹽酸B.氨水C.氫氧化鈉D.硫酸答案：1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABC5.ABC6.AB7.ABCD8.ABC9.ABCD10.ABCD四、判斷題（每題2分，共20分）1.培養(yǎng)基可與罐體一起滅菌。（）2.攪拌轉(zhuǎn)速越高，溶氧越高，應(yīng)盡量提高。（）3.機(jī)械密封比填料密封更適合無菌環(huán)境。（）4.罐壓越高，溶氧越高。（）5.清潔后無需驗(yàn)證即可使用。（）6.干熱滅菌溫度比濕熱高。（）7.接種量越大，發(fā)酵周期越短。（）8.溶氧電極使用前需校準(zhǔn)。（）9.冷卻系統(tǒng)僅滅菌后使用。（）10.空氣濾芯無需定期更換。（）答案：1.對(duì)2.錯(cuò)3.對(duì)4.對(duì)5.錯(cuò)6.對(duì)7.錯(cuò)8.對(duì)9.錯(cuò)10.錯(cuò)五、簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）1.簡(jiǎn)述發(fā)酵罐滅菌基本要求答案：需達(dá)到完全無菌，核心要求：①溫度時(shí)間足夠（121℃/30min，殺滅芽孢）；②受熱均勻，無死角（攪拌/通氣輔助）；③滅菌后冷卻至30℃左右接種（防菌種失活）；④蒸汽系統(tǒng)無泄漏，壓力穩(wěn)定；⑤滅菌后驗(yàn)證（微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)確認(rèn)無菌）。2.攪拌系統(tǒng)日常維護(hù)要點(diǎn)答案：①檢查密封（無泄漏、磨損）；②緊固攪拌槳螺栓；③監(jiān)測(cè)電機(jī)電流（異常排查軸承/阻力）；④定期潤(rùn)滑軸承；⑤檢測(cè)振動(dòng)（超標(biāo)校準(zhǔn)同心度）；⑥使用后清潔，避免殘留雜菌。3.通氣系統(tǒng)作用及注意事項(xiàng)答案：作用：供氧氣、排CO?、維持正壓防雜菌。注意：①空氣除菌過濾（高效濾芯）；②通氣與攪拌匹配（提高混合效率）；③定期檢查濾芯阻力（及時(shí)更換）；④管道無泄漏，滅菌后保壓；⑤避免泡沫過多（必要加消泡劑）。4.發(fā)酵罐清潔基本步驟答案：①預(yù)沖洗（清水去殘留）；②堿洗（NaOH去有機(jī)物）；③酸洗（檸檬酸去水垢）；④中和（清水至中性）；⑤滅菌（121℃/30min）；⑥驗(yàn)證（微生物/清潔劑殘留檢測(cè)）。六、討論題（每題5分，共10分）1.發(fā)酵溶氧不足的原因及解決措施答案：原因：通氣不足、攪拌轉(zhuǎn)速低、發(fā)酵液粘度高、罐壓低、電極故障。措施：①增通氣/通純氧；②提攪拌轉(zhuǎn)速；③加消泡劑（減少泡沫影響）；④適當(dāng)提罐壓；⑤校準(zhǔn)/換電極；⑥粘度高則稀釋或補(bǔ)低粘度培養(yǎng)基。需優(yōu)先調(diào)整設(shè)備參數(shù)，避免過度影響菌種。2.如何確保接種無菌性答案：①滅菌：罐體濕熱滅菌，接種口火焰