1《水質(zhì)7種對(duì)苯二胺類化合物醌類次生產(chǎn)物和4-硝基二苯胺的測(cè)定高效液相色譜-編制說明2 4 5 5 5 7 7 9 94.1標(biāo)準(zhǔn)制定的基本原則 94.2標(biāo)準(zhǔn)制定的技術(shù)路線 5.5樣品采集、運(yùn)輸和保存 3 5.9質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 41項(xiàng)目背景與意義抗氧化劑的生產(chǎn)和使用規(guī)模持續(xù)處于較高水平。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2020年我國抗氧化劑產(chǎn)量達(dá)到36.7萬噸。隨著橡膠制品的大量使用和磨損，橡膠磨損顆粒廣泛分布氧化轉(zhuǎn)化，生成對(duì)苯二胺-醌類化合物醌類次生產(chǎn)物。降雨和融雪徑流是進(jìn)入地化學(xué)物質(zhì)溶于雨水，最終匯入水系統(tǒng)中。自2022年對(duì)苯二胺醌類物質(zhì)（6PPD-目前我國《法庭科學(xué)發(fā)射藥中有機(jī)成分檢驗(yàn)液相色譜質(zhì)譜法》（GB/T5現(xiàn)水質(zhì)7種苯二胺類化合物醌類次生產(chǎn)物和4-硝基二苯胺的同時(shí)檢測(cè)。本標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施對(duì)保證苯二胺類化合物醌類次生產(chǎn)物和4-硝基二苯胺檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性2任務(wù)來源和工作簡介14號(hào)廣東省分析測(cè)試協(xié)會(huì)下達(dá)了編制“水質(zhì)13種對(duì)苯二胺類化合物及其次生產(chǎn)物測(cè)定高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜法”的項(xiàng)目計(jì)劃，項(xiàng)目計(jì)劃編號(hào)為學(xué)院測(cè)試分析研究所（中國廣州分析測(cè)試中心）承2024年1月，成立標(biāo)準(zhǔn)編制工作組，由廣東省科學(xué)院測(cè)試分析研究所（中豐富的標(biāo)準(zhǔn)方法研發(fā)經(jīng)驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證能力，能夠62024年2月至5月，標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位查閱了大量文獻(xiàn)與資料，了解了國開發(fā)了采用高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法的水質(zhì)對(duì)苯二胺類化合物醌類次生胺類化合物醌類次生產(chǎn)物和4-硝基二苯胺的測(cè)定，并起草了標(biāo)準(zhǔn)文本的初稿。2024年6月，標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位將完成的標(biāo)準(zhǔn)初稿和標(biāo)準(zhǔn)計(jì)劃項(xiàng)目任務(wù)書提交在2024年7月由廣東省分析測(cè)試協(xié)會(huì)組織召開的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)評(píng)估會(huì)上，“水質(zhì)13種對(duì)苯二胺類化合物及其次生產(chǎn)物測(cè)定高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜在標(biāo)準(zhǔn)研制過程中，編制組圍繞原計(jì)劃納入的13種對(duì)73國內(nèi)外相關(guān)分析方法研究物環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)問題的關(guān)注度不斷提升，PPD上仍以科研文獻(xiàn)報(bào)道為主，尚未形成統(tǒng)一、系統(tǒng)、PPD-Qs在環(huán)境水樣中通常以痕量水平存在，且易發(fā)生氧化、吸附等轉(zhuǎn)化行8便、富集倍數(shù)高、有機(jī)溶劑用量少、重復(fù)性好等優(yōu)勢(shì)，已成為目前水體中PPD-Qs分析應(yīng)用最為廣泛的前處理方式。現(xiàn)有研究普遍采用親水親脂平衡型固相萃有良好的適應(yīng)性，可顯著提高目標(biāo)化合物的回收率和方法穩(wěn)定性。鑒于PPD-Qs中通過添加抗氧化劑等措施，降低目標(biāo)物在前處電化學(xué)分析和光譜法亦有少量研究報(bào)道。其中，色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)因其高靈敏GC及GC-MS技術(shù)適用于揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性較好的化合物，但PPD-Qs普譜在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式下具有靈敏度高、定量精準(zhǔn)和抗基質(zhì)干擾能力強(qiáng)相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在方法成熟度、穩(wěn)定性和推廣應(yīng)用潛力方面具9尚未建立針對(duì)對(duì)苯二胺類化合物醌類次生產(chǎn)物的水質(zhì)檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)。目前僅在和推廣性的水質(zhì)中PPD-Qs和4-NDPA的分析方法標(biāo)準(zhǔn)，以填補(bǔ)國內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域的4.標(biāo)準(zhǔn)制訂的基本原則和技術(shù)路線本標(biāo)準(zhǔn)在制定和編寫過程中，遵循《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第在充分結(jié)合水體中PPD-Qs和4-NDPA的環(huán)境賦存特征和實(shí)際監(jiān)測(cè)需求的基礎(chǔ)本標(biāo)準(zhǔn)采用固相萃取作為前處理技術(shù)，結(jié)合高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜5方法研究報(bào)告本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定水中7種對(duì)苯二胺類化合物醌類次生產(chǎn)物和4-硝基二苯控制在60%～140%精密度要求各實(shí)驗(yàn)室內(nèi)平行樣品測(cè)定結(jié)果(≥7次）的相水樣經(jīng)濾膜過濾去除顆粒物，經(jīng)固相萃取柱富集凈化，用高效液相色譜-三封、避光保存。也可直接購買有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，參照制造（1）樣品采集：采樣前依次采用甲醇和純水清洗1L棕色帶蓋玻璃瓶；采樣時(shí)（2）樣品運(yùn)輸：采集后的樣品應(yīng)放置在加入冰塊或其他制冷劑的保溫箱中，盡（3）樣品保存：水樣運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，立即加入疊氮化鈉以抑制微生物對(duì)目標(biāo)化合檢出限的前提下可適當(dāng)減少樣品體積或增加試樣稀調(diào)節(jié)至中性條件，并采用HLB柱進(jìn)行富集和凈化，可顯著提高方法的穩(wěn)定性并超純水進(jìn)行淋洗以去除基體干擾，隨后使吸附劑脫水至流沙狀；依次采用2mL甲醇、2mL丙酮和3mL二氯甲烷對(duì)目標(biāo)化070301406090007030后運(yùn)行時(shí)間：5min序號(hào)保留時(shí)間（min）母離子子離子碰撞能1IPPD-Q4.220257.3215.0*2824-NDPA4.987215.2167.4*42263DPPD-Q5.153291.3263.1*2477.0654CPPD-Q6.044297.4215.0*325DTPD-Q319.4212.0*202866PPD-Q6.487299.4215.0*3276PPD-Q-D56.446304.3220.1*3287PPD-Q7.493313.4215.0*32977PD-Q9.408335.5237.1*2048注：*為定量離子對(duì)；對(duì)于不同質(zhì)譜儀器，參數(shù)可能存在差異，測(cè)定前應(yīng)將質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化到最佳。和頻次內(nèi)校正高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀的質(zhì)量數(shù)和分辨率，以確保儀器表5-38種目標(biāo)化合物的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、準(zhǔn)確度Y=0.013319x+0.009168圖5-18種目標(biāo)化合物標(biāo)準(zhǔn)曲線按照標(biāo)準(zhǔn)HJ168-2020要求，測(cè)定空白試驗(yàn)中未檢出目標(biāo)物的方法檢出限3～5倍計(jì)算出的方法檢出限的范圍內(nèi)，同時(shí)，至少90%的目標(biāo)物濃度在1～10較合適。對(duì)于初次加標(biāo)樣品測(cè)定平均值與MDL比值不在3～5之間的目標(biāo)物，應(yīng)調(diào)整樣品濃度，重新進(jìn)行平行分析，直至比值在3～5之間。選擇比值在3～5流程空白中均未檢出7種對(duì)苯二胺類化合物醌類次生產(chǎn)物和4-硝基二苯胺，進(jìn)而通過在空白樣品中添加含量為估計(jì)方法檢出限值3～5倍的樣品進(jìn)行n（n≥7）MDL=t(n-1,0.99)×S道的環(huán)境濃度中ng/L級(jí)的要求，因此表5-4超純水中8種目標(biāo)化合物的方法檢出限與測(cè)定下限（ng/L）平行樣品編號(hào)IPPD-Q4-NDPADPPD-QCPPD-QDTPD-Q6PPD-Q7PPD-Q77PD-Q12.02.80.922.02.232.02.92.02.12.043.02.62.82.152.32.22.42.262.42.02.62.02.32.072.52.02.62.12.2平均值-x(ng/L)2.32.62.1標(biāo)準(zhǔn)偏差S(ng/L)0.40.40.20.20.20.10.20.13.1433.1433.1433.1433.1433.1433.1433.143方法檢出限(ng/L)0.80.50.50.40.70.4測(cè)定下限(ng/L)4.55.33.02.02.02.8表5-5實(shí)驗(yàn)用水加標(biāo)測(cè)試結(jié)果（低濃度）平行樣品編號(hào)濃度（含量）1：2ng/LIPPD-Q4-NDPADPPD-QCPPD-QDTPD-Q6PPD-Q7PPD-Q77PD-Q測(cè)定結(jié)果（ng/L）12.02.80.922.02.232.02.92.02.12.043.02.62.82.152.32.22.42.262.42.02.62.02.32.072.52.02.62.12.2平均值-x(ng/L)2.32.62.1標(biāo)準(zhǔn)偏差S(ng/L)0.40.40.20.20.20.10.20.1相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD(%)22.59.28.57.67.3加標(biāo)回收率(%)94.494.692.081.758.8表5-6實(shí)驗(yàn)用水加標(biāo)測(cè)試結(jié)果（中濃度）平行樣品編號(hào)濃度（含量）1：20ng/LIPPD-Q4-NDPADPPD-QCPPD-QDTPD-Q6PPD-Q7PPD-Q77PD-Q測(cè)定結(jié)果（ng/L）127.223.123.5223.321.3327.123.922.423.321.420.3422.721.0522.722.9622.223.8721.922.320.3平均值-x(ng/L)23.922.021.1標(biāo)準(zhǔn)偏差S(ng/L)2.33.22.2平行樣品編號(hào)濃度（含量）1：20ng/LIPPD-Q4-NDPADPPD-QCPPD-QDTPD-Q6PPD-Q7PPD-Q77PD-Q相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD(%)9.621.69.99.87.4加標(biāo)回收率(%)73.995.590.487.171.1表5-7實(shí)驗(yàn)用水加標(biāo)測(cè)試結(jié)果（高濃度）平行樣品編號(hào)濃度（含量）1：100ng/LIPPD-Q4-NDPADPPD-QCPPD-QDTPD-Q6PPD-Q7PPD-Q77PD-Q測(cè)定結(jié)果（ng/L）195.274.183.686.896.288.477.561.3267.584.688.287.182.270.564.2361.284.788.993.785.676.261.8469.895.291.996.985.576.364.1555.290.898.985.184.667.9660.292.792.593.187.083.466.8762.194.987.288.171.0平均值-x(ng/L)64.395.390.695.785.979.565.3標(biāo)準(zhǔn)偏差S(ng/L)8.56.42.85.32.03.5相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD(%)7.85.62.37.65.3加標(biāo)回收率(%)64.395.390.695.785.979.565.3對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差檢驗(yàn)方法精密度，計(jì)算加標(biāo)回收表5-8地下水樣品加標(biāo)測(cè)試結(jié)果（低濃度）平行樣品編號(hào)濃度（含量）1：5.0ng/LIPPD-Q4-NDPADPPD-QCPPD-QDTPD-Q6PPD-Q7PPD-Q77PD-Q測(cè)定結(jié)果（ng/L）15.44.03.84.44.54.34.23.925.24.75.34.55.04.23.92.935.34.24.24.54.74.33.82.944.94.54.44.74.34.23.955.04.14.44.74.34.13.865.44.95.64.84.94.34.13.274.94.85.04.45.04.34.13.6平均值-x(ng/L)5.24.55.04.54.84.34.13.5標(biāo)準(zhǔn)偏差S(ng/L)0.20.40.80.20.20.00.10.4相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD(%)4.78.43.54.10.93.4加標(biāo)回收率(%)89.289.795.586.181.469.1表5-9地表水樣品加標(biāo)測(cè)試數(shù)據(jù)（中濃度）平行樣品編號(hào)濃度（含量）1：20.0ng/LIPPD-Q4-NDPADPPD-QCPPD-QDTPD-Q6PPD-Q7PPD-Q77PD-Q測(cè)定結(jié)果（ng/L）120.6221.9320.0420.5520.16721.6平均值-x(ng/L)20.6標(biāo)準(zhǔn)偏差S(ng/L)0.40.72.70.80.80.5相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD(%)2.66.34.33.82.76.6加標(biāo)回收率(%)76.459.873.692.192.273.956.9表5-10污水處理廠出水樣品加標(biāo)測(cè)試數(shù)據(jù)（高濃度）平行樣品編號(hào)濃度（含量）1：100.0ng/LIPPD-Q4-NDPADPPD-QCPPD-QDTPD-Q6PPD-Q7PPD-Q77PD-Q測(cè)定結(jié)果（ng/L）191.296.4286.799.484.8396.487.798.294.597.189.5496.088.699.197.6591.895.1685.597.897.292.6796.497.185.097.596.8平均值-x(ng/L)88.199.993.3標(biāo)準(zhǔn)偏差S(ng/L)4.27.92.75.73.03.24.7相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD(%)4.17.53.05.72.83.25.0加標(biāo)回收率(%)88.199.993.3實(shí)驗(yàn)室精密度：對(duì)7種對(duì)苯二胺類化合物醌類次生產(chǎn)物和4-硝基二苯胺平實(shí)驗(yàn)室正確度：對(duì)7種對(duì)苯二胺類化合物醌類次生產(chǎn)物和4-硝基二苯胺平廠出水樣品進(jìn)行7次重復(fù)測(cè)定，平均加標(biāo)回收率范圍分別為69.1%～103.0%、圖5-2目標(biāo)化合物機(jī)器內(nèi)標(biāo)物的總離子流色譜圖（目標(biāo)化合物：p=200μg/L，內(nèi)標(biāo)：p=20標(biāo)化合物的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)樣品中該目標(biāo)化合物的保留時(shí)間的相對(duì)偏差的絕對(duì)式中：Ksam——樣品中某目標(biāo)化合物定性離式中：Kstd——標(biāo)準(zhǔn)樣品中某目標(biāo)化合物定性子Astd2——標(biāo)準(zhǔn)樣品中某目標(biāo)化合物定性離子對(duì)響應(yīng)值（峰面積或峰高表5-11相對(duì)離子豐度比的最大允許偏差Kstd（%）Ksam允許的偏差（%）Kstd>50±2020<Kstd≤50±2510<Kstd≤20±30Kstd≤10±50Xs——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的樣品中某目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度，ng/L；結(jié)果以ng/L表示，測(cè)定結(jié)果小數(shù)點(diǎn)后位數(shù)與方法檢出限保持一致，最多保留3位或標(biāo)準(zhǔn)曲線系數(shù)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)≤20%；每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品的計(jì)算濃度應(yīng)為理論濃標(biāo)準(zhǔn)溶液，其測(cè)定結(jié)果與校準(zhǔn)曲線相應(yīng)點(diǎn)濃度的相對(duì)誤差應(yīng)在±20%以內(nèi)，否則后首個(gè)進(jìn)樣測(cè)定，并在最高濃度標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)樣后再次測(cè)定；此后，每分析20個(gè)每20個(gè)樣品或每批次樣品(≤20個(gè)樣品）至少測(cè)定1個(gè)基體加標(biāo)樣品，加6方法驗(yàn)證驗(yàn)證內(nèi)容包括方法檢出限、定量下限、精密度和準(zhǔn)確度樣品，5家實(shí)驗(yàn)室空白試驗(yàn)中均未檢測(cè)出目標(biāo)物質(zhì)，進(jìn)而對(duì)加標(biāo)濃度為2.0ng/L（1）方法檢出限：7種對(duì)苯二胺類化合物醌類次生產(chǎn)物和4-硝基二苯胺的表6-1方法驗(yàn)證的方法檢出限和測(cè)定下限匯總表實(shí)驗(yàn)室編號(hào)12345最大值檢出限（ng/L）IPPD-Q0.80.70.50.24-NDPA0.70.4DPPD-Q0.80.70.80.80.30.8CPPD-Q0.50.40.60.60.10.6DTPD-Q0.50.80.30.46PPD-Q0.40.80.30.40.30.87PPD-Q0.70.60.60.30.30.777PD-Q0.40.60.60.30.20.6測(cè)定下限（ng/L）IPPD-Q4.53.22.90.94.54-NDPA5.34.03.04.05.3DPPD-Q3.02.73.23.03.2CPPD-Q2.02.32.60.62.6DTPD-Q2.04.64.66PPD-Q7PPD-Q2.82.42.42.877PD-Q2.52.52.5表6-2方法精密度匯總表（1）5個(gè)實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)7種對(duì)苯二胺類化合物醌類次生產(chǎn)物和4-硝基二苯再現(xiàn)性限范圍分別為0.5ng/L～1.7ng/L、3.3ng/L～11.4ng/L、11.3ng/L~處理廠出水的統(tǒng)一實(shí)際樣品進(jìn)行了7次重復(fù)測(cè)定：表6-3方法正確度匯總表化合物樣品類型加標(biāo)濃度（ng/L）加標(biāo)回收率范圍（%）P（%）a（%）bP±2SP（%）cIPPD-Q空白加標(biāo)291.1～148.12.2113.0±2.22097.6～136.06.8107.7±6.895.0～119.92.6106.6±2.6地下水593.2～120.33.8103.7±3.8地表水2072.4～84.977.677.6±1.4污水加標(biāo)83.7～105.195.94.795.9±4.74-NDPA空白加標(biāo)263.2～133.090.07.890.0±7.82052.3～112.876.476.4±12.249.4～103.975.875.8±13.8地下水563.7～98.281.56.281.5±6.2地表水2053.5～66.859.459.4±1.9污水加標(biāo)78.8～139.698.66.498.6±6.4DPPD-Q空白加標(biāo)248.5～141.288.629.488.6±29.42058.8～123.9101.9±18.064.1～118.184.784.7±11.4地下水575.9～134.3114.6±12.1地表水2054.4～105.891.691.6±10.9污水加標(biāo)70.9～93.183.45.283.4±5.2CPPD-Q空白加標(biāo)262.6～104.583.49.383.4±9.32075.4～130.198.198.1±15.276.2～99.791.74.091.7±4.0地下水576.3～97.286.03.686.0±3.6地表水2085.8～103.393.32.493.3±2.4污水加標(biāo)85.6～104.693.54.593.5±4.5DTPD-Q空白加標(biāo)261.7～133.199.999.9±11.72070.0～117.593.47.993.4±7.982.5～106.197.24.097.2±4.0地下水568.7～102.393.893.8±1.6地表水2098.2～115.2103.5±1.5污水加標(biāo)90.1～113.93.2100.9±3.26PPD-Q空白加標(biāo)270.7～113.396.66.596.6±6.5化合物樣品類型加標(biāo)濃度（ng/L）加標(biāo)回收率范圍（%）P（%）a（%）bP±2SP（%）c2076.7～106.988.13.476.8～99.288