CAR-T細(xì)胞質(zhì)控專員崗位招聘考試試卷及答案試題部分一、填空題（每題1分，共10分）1.CAR的核心信號(hào)傳導(dǎo)域是______。2.分離PBMC常用的密度梯度介質(zhì)是______。3.細(xì)胞活力檢測(cè)常用的染料是______。4.CAR-T激活T細(xì)胞常用的刺激劑是______包被磁珠。5.細(xì)胞凍存保護(hù)劑常用______（濃度10%）。6.CAR-T產(chǎn)品需符合______（藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范）要求。7.轉(zhuǎn)染效率檢測(cè)常用______技術(shù)。8.CAR-T靶點(diǎn)CD19主要針對(duì)______疾病。9.無菌檢測(cè)合格標(biāo)準(zhǔn)是______。10.內(nèi)毒素檢測(cè)常用______法。二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.CAR的核心功能域是（）A.CD3ζ鏈B.scFvC.跨膜區(qū)D.共刺激域2.分離PBMC的密度梯度介質(zhì)是（）A.PBSB.Ficoll-PaqueC.RPMI1640D.DMSO3.活細(xì)胞臺(tái)盼藍(lán)染色結(jié)果為（）A.藍(lán)色B.無色C.紫色D.紅色4.CAR-T制備中病毒載體常用（）A.慢病毒B.腺病毒C.腺相關(guān)病毒D.逆轉(zhuǎn)錄病毒5.細(xì)胞活力質(zhì)控合格標(biāo)準(zhǔn)一般≥（）A.70%B.80%C.90%D.95%6.CAR-T屬于（）A.生物制品B.化學(xué)藥品C.醫(yī)療器械D.中藥7.細(xì)胞凍存降溫速率一般為（）A.1℃/minB.5℃/minC.10℃/minD.常溫8.支原體污染的檢測(cè)方法不包括（）A.PCRB.培養(yǎng)法C.肉眼觀察D.熒光染色9.CAR-T常見靶點(diǎn)BCMA針對(duì)（）A.骨髓瘤B.肺癌C.肝癌D.胃癌10.轉(zhuǎn)染效率檢測(cè)需測(cè)（）A.CAR陽性細(xì)胞比例B.T細(xì)胞純度C.細(xì)胞大小D.培養(yǎng)基pH三、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.CAR的組成部分包括（）A.scFvB.跨膜區(qū)C.共刺激域D.CD3ζ鏈2.CAR-T制備流程包括（）A.PBMC分離B.T細(xì)胞激活C.病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)D.細(xì)胞擴(kuò)增3.細(xì)胞質(zhì)控關(guān)鍵指標(biāo)有（）A.細(xì)胞活力B.轉(zhuǎn)染效率C.無菌性D.內(nèi)毒素4.常用共刺激分子（）A.CD28B.4-1BBC.CD40LD.IL-2R5.細(xì)胞培養(yǎng)常用培養(yǎng)基（）A.RPMI1640B.DMEMC.IMDMD.PBS6.無菌檢測(cè)方法（）A.薄膜過濾法B.直接接種法C.鱟試劑法D.PCR法7.CAR-T法規(guī)要求（）A.GMPB.IND申報(bào)C.BLA申報(bào)D.臨床試驗(yàn)8.細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)（）A.用DMSOB.緩慢降溫C.快速解凍D.避免反復(fù)凍融9.細(xì)胞污染類型（）A.細(xì)菌B.真菌C.支原體D.病毒10.CAR-T不良反應(yīng)（）A.CRSB.神經(jīng)毒性C.過敏D.感染四、判斷題（每題2分，共20分）1.scFv負(fù)責(zé)結(jié)合靶抗原（）2.密度梯度離心后，上層是紅細(xì)胞（）3.死細(xì)胞臺(tái)盼藍(lán)染色呈無色（）4.CAR-T需符合GMP要求（）5.轉(zhuǎn)染效率≥30%為合格（）6.內(nèi)毒素檢測(cè)用鱟試劑法（）7.CAR靶點(diǎn)只能是CD19（）8.細(xì)胞凍存DMSO濃度5%（）9.支原體污染肉眼可見（）10.細(xì)胞活力低會(huì)影響CAR-T療效（）五、簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）1.簡(jiǎn)述CAR-T細(xì)胞活力檢測(cè)的原理及注意事項(xiàng)。2.簡(jiǎn)述CAR-T轉(zhuǎn)導(dǎo)環(huán)節(jié)的質(zhì)控要點(diǎn)。3.簡(jiǎn)述CAR-T無菌檢測(cè)的方法及合格標(biāo)準(zhǔn)。4.簡(jiǎn)述CRS與CAR-T質(zhì)控的關(guān)聯(lián)。六、討論題（每題5分，共20分）1.若CAR-T培養(yǎng)中細(xì)胞活力持續(xù)＜85%，分析原因及改進(jìn)措施。2.若轉(zhuǎn)染效率＜50%，討論影響因素及解決思路。答案部分一、填空題答案1.CD3ζ鏈2.Ficoll-Paque3.臺(tái)盼藍(lán)4.CD3/CD28抗體5.DMSO6.GMP7.流式細(xì)胞術(shù)8.B細(xì)胞淋巴瘤/白血病9.無菌生長10.鱟試劑二、單項(xiàng)選擇題答案1.A2.B3.B4.A5.C6.A7.A8.C9.A10.A三、多項(xiàng)選擇題答案1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.AB5.ABC6.AB7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD四、判斷題答案1.√2.×3.×4.√5.√6.√7.×8.×9.×10.√五、簡(jiǎn)答題答案1.原理：臺(tái)盼藍(lán)無法透過活細(xì)胞完整細(xì)胞膜，死細(xì)胞因膜破損被染色。注意事項(xiàng)：①樣本新鮮，避免長時(shí)間暴露；②染色3-5分鐘，不過度染色；③計(jì)數(shù)3次取平均，區(qū)分單細(xì)胞；④若活力低，排查培養(yǎng)基、污染、溫度。2.質(zhì)控要點(diǎn)：①病毒載體：滴度≥1E8TU/mL，無菌/內(nèi)毒素合格；②轉(zhuǎn)導(dǎo)條件：MOI5-20，24-48小時(shí)；③檢測(cè)：流式測(cè)CAR陽性率≥30%，活力≥80%；④操作：生物安全柜內(nèi)，記錄參數(shù)符合GMP追溯。3.方法：①薄膜過濾法（0.45μm濾膜）；②直接接種法（需氧/厭氧培養(yǎng)基）。合格標(biāo)準(zhǔn)：14天（需氧/厭氧）、7天（真菌）后無渾濁/菌落。4.關(guān)聯(lián)：①細(xì)胞活力/數(shù)量：活力低影響增殖，過度增殖加重CRS；②轉(zhuǎn)染效率：陽性率不足易引發(fā)不均免疫反應(yīng)；③污染/內(nèi)毒素：未檢出則疊加感染風(fēng)險(xiǎn)；④純度：雜細(xì)胞引發(fā)額外免疫反應(yīng)。質(zhì)控需嚴(yán)格控制這些指標(biāo)。六、討論題答案1.原因：①培養(yǎng)基過期/污染、pH異常；②離心轉(zhuǎn)速過高、凍融不當(dāng)；③培養(yǎng)箱溫度/CO2波動(dòng)；④初始PBMC活力低、激活不充分。改進(jìn)：①每批次驗(yàn)證培養(yǎng)基；②優(yōu)化離心（1500rpm×5min）、用程序降溫盒；③穩(wěn)定培養(yǎng)環(huán)境；④加強(qiáng)PBMC初始質(zhì)控，增加中間檢測(cè)點(diǎn)。2.影響因素：①病毒滴度不足、失活；②MOI不