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文檔簡介
SRBC免疫小鼠
獲取小鼠脾細(xì)胞
SRBC(Ag)+spleencell(Ab)+ComplementMAC
裂解SRBC釋放出血紅蛋白
分光光度計定量測定Principle第1頁SRBCBanti-SRBCAbIMMUNIZEMOUSESRBCCOMPLEMENT第2頁SRBC制備以NS洗滌防凝SRBC兩次以NS稀釋成1.5×108/mlComplement制備豚鼠血清(5)+SRBC(1)4℃吸收30min3000rpm離心15min，上清1:10稀釋備用脾細(xì)胞制備2×107/ml脾細(xì)胞(見步驟)Procedure第3頁脾細(xì)胞制備SRBC免疫小鼠
4天后拉頸處死，取脾
200目銅網(wǎng)上研磨脾臟，搜集脾細(xì)胞懸液rpm離心5min，棄上清
加4.5mlDDW，振蕩45秒,加入0.5ml9%NaCL,rpm離心5min,棄上清（加5mlHank’s液，混勻rpm離心5min，棄上清）
加1mlHank’s液(計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為2×107/ml)Procedure第4頁混勻，37℃孵育1h3000rpm離心5min，取上清721分光光度計測413nm處OD值（Hb量）Procedure試驗管對照管脾細(xì)胞1ml1mlHank’s液SRBC1ml1mlComplement1m
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