T/XXXXXXX—XXXX

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。

本標(biāo)準(zhǔn)由廣西肥料協(xié)會(huì)提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：廣西壯族自治區(qū)分析測(cè)試研究中心、廣西樂(lè)土生物科技有限公司、廣西垂青生物

科技有限公司、廣西壯族自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院、廣西壯族自治區(qū)地質(zhì)礦產(chǎn)測(cè)試研究中心、廣西西

大檢測(cè)有限公司。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：黃一帆、陸明光、韋曉社、陳桂鸞、吉日文、陳裕新、潘揚(yáng)昌、賈虎成、劉輝

庭、呂貴升、周權(quán)能、陸章權(quán)、盧一葉、李輝寧、陳海艷、梁鑫佳、裴根、李義芬、班雁華、鄧藝萍、

黃殿貴、陳小莉、鄧多桓、滕麗娜、莫達(dá)松、陸云、陸銀英、劉永強(qiáng)、陳海燕、唐小麗、許園園、陳艷、

譚燚

I

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含氨基酸水溶肥料

游離氨基酸含量的測(cè)定-分光光度法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水溶肥料中游離氨基酸含量測(cè)定的分光光度法的試驗(yàn)方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于液體或固體水溶肥料中游離氨基酸含量的測(cè)定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T8170數(shù)值俢約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判斷

HG/T2843化肥產(chǎn)品化學(xué)分析中常用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液、試劑溶液和指示劑溶液

NY/T887液體肥料密度的測(cè)定

NY/T1975水溶肥中游離氨基酸含量的測(cè)定

3原理

試樣用活性炭吸附蛋白質(zhì)和消除色素干擾，用EDTA絡(luò)合金屬元素釋放氨基酸，氨基酸與茚三酮反應(yīng)

成藍(lán)色物質(zhì)，在一定濃度范圍內(nèi)，藍(lán)色溶液的吸光度與氨基酸量成正比例關(guān)系，用分光光度法測(cè)定出總

的氨基酸含量，然后再除以矯正系數(shù)，最終得到游離氨基酸含量。

4試劑和材料

本標(biāo)準(zhǔn)中所用的試劑、水和溶液的配制，在未注明規(guī)格和配制方法時(shí)，均應(yīng)符合HG/T2843的規(guī)定。

4.1鹽酸溶液：c(HCl)=0.06mol/L。移取0.25mL鹽酸至50mL容量瓶中，用純水定容，搖勻備用。

4.2活性炭（分析純）。

4.3乙二胺四乙酸二鈉溶液：ρ(EDTA-Na)=10g/L。稱(chēng)取0.5g乙二酸四乙酸二鈉至50ml容量瓶中，用

純水定容，搖勻備用。

4.4乙酸-乙酸鈉緩沖溶液：pH約5.4。

稱(chēng)取13.6g無(wú)水醋酸鈉溶于1000mL水中，再加入1.5mL冰乙酸，攪拌均勻備用。

4.510%異丙醇溶液：稱(chēng)取25g異丙醇到250mL容量瓶中，用乙酸-乙酸鈉緩沖溶液定容，搖勻備用。

4.63%茚三酮溶液：稱(chēng)取1.5g茚三酮指示劑至50mL容量瓶中，用10%異丙醇溶液定容，超聲波震蕩至完

全溶解，搖勻備用（15天內(nèi)用完）。

4.7抗壞血酸溶液：稱(chēng)取0.02g抗壞血酸至25mL容量瓶中，用水定容，超聲波震蕩至完全溶解，搖勻備

用（現(xiàn)配現(xiàn)用）。

4.8氨基酸（亮氨酸）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確稱(chēng)取12mg99%亮氨酸至50mL容量瓶中，用10%異丙醇溶解

定容，超聲波溶解后，搖勻備用。

5儀器

5.1通常實(shí)驗(yàn)室儀器。

5.2紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。

5.3具塞比色管:10mL。

5.4玻璃比色皿：1cm。

1

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6分析步驟

6.1試樣的制備

固體樣品經(jīng)多次縮分后，取出約100g，將其迅速研磨至全部通過(guò)0.50mm孔徑篩（如樣品潮濕，可通

過(guò)1.00mm篩子），混合均勻，置于潔凈、干燥容器中。液體樣品經(jīng)多次搖動(dòng)后，迅速取出約200mL，置

于潔凈、干燥的容器中。

6.2試樣溶液的制備

稱(chēng)取試樣1g～5g（精確到0.001g），置于250mL容量瓶中，用水充分溶解后定容到刻度，搖勻后干過(guò)

濾，棄去20mL初濾液。取約30mL濾液于小燒杯中，加入一勺（約2g）活性炭攪拌2min，靜置5min后干過(guò)

濾，再用0.45微米的微孔濾膜過(guò)濾濾液。準(zhǔn)確移取0.50mL濾液于50mL容量瓶中，加入1.0mLEDTA-Na溶

液（4.3）和1.0mL鹽酸溶液（4.1），用乙酸-乙酸鈉緩沖溶液定容，搖勻后干過(guò)濾，濾液備用待測(cè)。

6.3標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

空白溶液的制備：用移液管依次吸取2.00mL蒸餾水、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗壞血酸溶液、

1.50mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加熱15min，取出冷卻至室溫，搖勻。

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制：用移液管吸取1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液分別置于4個(gè)50mL

容量瓶中，用10%異丙醇溶液定容，搖勻。分別用移液管依次吸取2.00mL上述溶液、1.00mL茚三酮溶液、

0.50mL抗壞血酸溶、1.50mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加熱15min，取出

冷卻至室溫，搖勻。以空白溶液為參比，于波長(zhǎng)573nm出測(cè)定各吸光度。以氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為縱

坐標(biāo)，吸光度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

6.4樣品的測(cè)定

分別用移液管依次吸取2.00mL試樣溶液（6.2）、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗壞血酸溶液、1.50mL

乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加熱15min，取出冷卻至室溫，搖勻。以空白

溶液為參比，于波長(zhǎng)573nm處測(cè)定樣品溶液吸光度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查得相應(yīng)的游離氨基酸質(zhì)量。

7分析結(jié)果的表述

試樣中游離氨基酸含量（ω）以其質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）表示，按式（1）計(jì)算：

v1

6v1

C10Cv

v21002

mfmf104

式中：

ω：游離氨基酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；

C：測(cè)得試樣吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查得對(duì)應(yīng)的以微克為單位的游離氨基酸質(zhì)量；

V1：樣品稀釋總體積，單位為毫升（mL）；

V2：樣品比色用體積，單位為毫升（mL）；

m：樣品的質(zhì)量，單位為克（g）；

?：不同原料或產(chǎn)品的矯正系數(shù)，（樂(lè)土富安含氨基酸水溶肥：?=1.5；酒精廢液：?=1.4；糖蜜液：

?=1.2；酸性氨基酸原粉：?=2.5；堿性氨基酸原粉：?=1.0）

8允許差

平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)值應(yīng)符合表1的要求。

表1

游離氨基酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%＜10.010.0～20.0＞20.0

絕對(duì)值差，%≤1.0≤1.5≤2.0

2

ICS65.080

CCSG20

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/XXXXXXX—XXXX

含氨基酸水溶肥料

游離氨基酸含量的測(cè)定-分光光度法

Water-solublefertilizercontainingamino-acids

Determinationoffreeaminoacidcontent—Spectrophotometry

（征求意見(jiàn)稿）

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

廣西肥料協(xié)會(huì)??發(fā)布

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含氨基酸水溶肥料

游離氨基酸含量的測(cè)定-分光光度法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水溶肥料中游離氨基酸含量測(cè)定的分光光度法的試驗(yàn)方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于液體或固體水溶肥料中游離氨基酸含量的測(cè)定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T8170數(shù)值俢約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判斷

HG/T2843化肥產(chǎn)品化學(xué)分析中常用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液、試劑溶液和指示劑溶液

NY/T887液體肥料密度的測(cè)定

NY/T1975水溶肥中游離氨基酸含量的測(cè)定

3原理

試樣用活性炭吸附蛋白質(zhì)和消除色素干擾，用EDTA絡(luò)合金屬元素釋放氨基酸，氨基酸與茚三酮反應(yīng)

成藍(lán)色物質(zhì)，在一定濃度范圍內(nèi)，藍(lán)色溶液的吸光度與氨基酸量成正比例關(guān)系，用分光光度法測(cè)定出總

的氨基酸含量，然后再除以矯正系數(shù)，最終得到游離氨基酸含量。

4試劑和材料

本標(biāo)準(zhǔn)中所用的試劑、水和溶液的配制，在未注明規(guī)格和配制方法時(shí)，均應(yīng)符合HG/T2843的規(guī)定。

4.1鹽酸溶液：c(HCl)=0.06mol/L。移取0.25mL鹽酸至50mL容量瓶中，用純水定容，搖勻備用。

4.2活性炭（分析純）。

4.3乙二胺四乙酸二鈉溶液：ρ(EDTA-Na)=10g/L。稱(chēng)取0.5g乙二酸四乙酸二鈉至50ml容量瓶中，用

純水定容，搖勻備用。

4.4乙酸-乙酸鈉緩沖溶液：pH約5.4。

稱(chēng)取13.6g無(wú)水醋酸鈉溶于1000mL水中，再加入1.5mL冰乙酸，攪拌均勻備用。

4.510%異丙醇溶液：稱(chēng)取25g異丙醇到250mL容量瓶中，用乙酸-乙酸鈉緩沖溶液定容，搖勻備用。

4.63%茚三酮溶液：稱(chēng)取1.5g茚三酮指示劑至50mL容量瓶中，用10%異丙醇溶液定容，超聲波震蕩至完

全溶解，搖勻備用（15天內(nèi)用完）。

4.7抗壞血酸溶液：稱(chēng)取0.02g抗壞血酸至25mL容量瓶中，用水定容，超聲波震蕩至完全溶解，搖勻備

用（現(xiàn)配現(xiàn)用）。

4.8氨基酸（亮氨酸）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確稱(chēng)取12mg99%亮氨酸至50mL容量瓶中，用10%異丙醇溶解

定容，超聲波溶解后，搖勻備用。

5儀器

5.1通常實(shí)驗(yàn)室儀器。

5.2紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。

5.3具塞比色管:10mL。

5.4玻璃比色皿：1cm。

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6分析步驟

6.1試樣的制備

固體樣品經(jīng)多次縮分后，取出約100g，將其迅速研磨至全部通過(guò)0.50mm孔徑篩（如樣品潮濕，可通

過(guò)1.00mm篩子），混合均勻，置于潔凈、干燥容器中。液體樣品經(jīng)多次搖動(dòng)后，迅速取出約200mL，置

于潔凈、干燥的容器中。

6.2試樣溶液的制備

稱(chēng)取試樣1g～5g（精確到0.001g），置于250mL容量瓶中，用水充分溶解后定容到刻度，搖勻后干過(guò)

濾，棄去20mL初濾液。取約30mL濾液于小燒杯中，加入一勺（約2g）活性炭攪拌2min，靜置5min后干過(guò)

濾，再用0.45微米的微孔濾膜過(guò)濾濾液。準(zhǔn)確移取0.50mL濾液于50mL容量瓶中，加入1.0mLEDTA-Na溶

液（4.3）和1.0mL鹽酸溶液（4.1），用乙酸-乙酸鈉緩沖溶液定容，搖勻后干過(guò)濾，濾液備用待測(cè)。

6.3標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

空白溶液的制備：用移液管依次吸取2.00mL蒸餾水、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗壞血酸溶液、

1.50mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加熱15min，取出冷卻至室溫，搖勻。

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制：用移液管吸取1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液分別置于4個(gè)50mL

容量瓶中，用10%異丙醇溶液定容，搖勻。分別用移液管依次吸取2.00mL上述溶液、1.00mL茚三酮溶液、

0.50mL抗壞血酸溶、1.50mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加熱15min，取出

冷卻至室溫，搖勻。以空白溶液為參比，于波長(zhǎng)573nm出測(cè)定各吸光度。以氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為縱

坐標(biāo)，吸光度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

6.4樣品的測(cè)定

分別用移液管依次吸取2.00mL試樣溶液（6.2）、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗壞血酸溶液、1.50mL

乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加熱15min，取出冷卻至室溫，搖勻。以空白

溶液為參比，于波長(zhǎng)573nm處測(cè)定樣品溶液吸光度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查得相應(yīng)的游離氨基酸質(zhì)量。

7分析結(jié)果的表述

試樣中游離氨基酸含量（ω）以其質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）表示，按式（1）計(jì)算：