PAGE病理活檢制度與流程規(guī)范一、總則（一）目的本制度與流程規(guī)范旨在確保病理活檢工作的準(zhǔn)確性、規(guī)范性和及時性，為臨床診斷、治療及疾病研究提供可靠依據(jù)，保障患者的醫(yī)療安全和權(quán)益。（二）適用范圍本規(guī)范適用于本公司/組織內(nèi)所有涉及病理活檢的部門和人員，包括臨床科室、病理科、手術(shù)室、檢驗(yàn)科等相關(guān)工作人員。（三）相關(guān)法律法規(guī)及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)遵循1.嚴(yán)格遵守《醫(yī)療機(jī)構(gòu)管理?xiàng)l例》、《醫(yī)療事故處理?xiàng)l例》、《病歷書寫基本規(guī)范》等國家法律法規(guī)。2.參照《臨床技術(shù)操作規(guī)范病理學(xué)分冊》、《病理科建設(shè)與管理指南（試行）》等行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范，確保病理活檢工作的質(zhì)量和水平。二、病理活檢申請（一）申請主體臨床醫(yī)師根據(jù)患者病情及診斷需要，負(fù)責(zé)提出病理活檢申請。（二）申請內(nèi)容填寫要求1.申請單應(yīng)包含患者基本信息，如姓名、性別、年齡、聯(lián)系方式、住院號/門診號等。2.詳細(xì)記錄患者的臨床癥狀、體征、病史、各項(xiàng)檢查結(jié)果等相關(guān)信息，以便病理科醫(yī)師全面了解病情。3.準(zhǔn)確填寫標(biāo)本來源、標(biāo)本類型（如手術(shù)切除組織、穿刺活檢組織、內(nèi)鏡活檢組織等）、送檢目的（如明確診斷、鑒別診斷、判斷預(yù)后等）。（三）申請流程1.臨床醫(yī)師在電子病歷系統(tǒng)或紙質(zhì)申請單上完成申請內(nèi)容填寫后，經(jīng)上級醫(yī)師審核簽字確認(rèn)。2.將申請單提交至所在科室的護(hù)士站，由護(hù)士負(fù)責(zé)核對申請信息的完整性和準(zhǔn)確性，并及時送至病理科。三、標(biāo)本采集與送檢（一）標(biāo)本采集原則1.采集標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格遵循無菌操作原則，避免標(biāo)本污染，確保病理診斷結(jié)果的可靠性。2.根據(jù)不同的標(biāo)本類型和檢查目的，選擇合適的采集方法和器械，確保采集的標(biāo)本具有代表性。3.采集過程中應(yīng)盡量減少對標(biāo)本的損傷，避免擠壓、揉搓等操作，保持標(biāo)本的原始形態(tài)。（二）手術(shù)標(biāo)本采集1.手術(shù)醫(yī)師在切除病變組織后，應(yīng)立即將標(biāo)本放入固定液中固定。固定液的選擇應(yīng)根據(jù)標(biāo)本類型和檢查要求確定，常用的固定液為10%中性福爾馬林。2.固定時間一般為624小時，特殊標(biāo)本（如骨髓、穿刺組織等）固定時間可適當(dāng)縮短或延長。3.標(biāo)本固定后，手術(shù)醫(yī)師應(yīng)在標(biāo)本袋或標(biāo)本瓶上準(zhǔn)確標(biāo)記患者信息、標(biāo)本名稱、部位、數(shù)量等，并填寫手術(shù)標(biāo)本送檢單，詳細(xì)記錄手術(shù)過程及標(biāo)本情況。4.將標(biāo)本和送檢單一并交給手術(shù)室護(hù)士，護(hù)士核對無誤后，及時送至病理科。（三）穿刺活檢標(biāo)本采集1.穿刺活檢操作應(yīng)由經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)、具備豐富經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)師進(jìn)行。2.根據(jù)穿刺部位和病變情況，選擇合適的穿刺針具，如細(xì)針穿刺針、粗針穿刺針等。3.在超聲、CT等影像學(xué)引導(dǎo)下，準(zhǔn)確將穿刺針插入病變組織，獲取足夠的標(biāo)本。穿刺過程中應(yīng)密切觀察患者反應(yīng)，確保操作安全。4.將穿刺獲取的標(biāo)本立即涂片或放入固定液中固定，并在標(biāo)本容器上標(biāo)記患者信息、穿刺部位、標(biāo)本類型等。同時填寫穿刺活檢送檢單，記錄穿刺過程及標(biāo)本情況。5.穿刺標(biāo)本由操作人員或相關(guān)護(hù)士及時送至病理科。（四）內(nèi)鏡活檢標(biāo)本采集1.內(nèi)鏡醫(yī)師在進(jìn)行內(nèi)鏡檢查時，發(fā)現(xiàn)可疑病變應(yīng)及時取組織進(jìn)行活檢。2.活檢鉗應(yīng)準(zhǔn)確插入病變部位，選取具有代表性的組織塊，避免取到壞死組織或潰瘍邊緣組織。3.將活檢組織放入固定液中固定，并在標(biāo)本瓶上標(biāo)記患者信息、內(nèi)鏡檢查部位、活檢部位等。填寫內(nèi)鏡活檢送檢單，記錄內(nèi)鏡檢查所見及活檢情況。4.內(nèi)鏡活檢標(biāo)本由內(nèi)鏡室護(hù)士或?qū)Ｈ思皶r送至病理科。（五）標(biāo)本送檢要求1.標(biāo)本送檢應(yīng)及時，一般要求手術(shù)標(biāo)本在術(shù)后12小時內(nèi)送至病理科，穿刺活檢標(biāo)本和內(nèi)鏡活檢標(biāo)本在采集后30分鐘內(nèi)送至病理科。特殊情況（如節(jié)假日、夜間等）應(yīng)提前與病理科溝通協(xié)調(diào)。2.送檢標(biāo)本應(yīng)妥善包裝，防止標(biāo)本損壞或污染。對于易碎、易變形的標(biāo)本，應(yīng)采取相應(yīng)的保護(hù)措施。3.送檢人員應(yīng)與病理科人員進(jìn)行標(biāo)本交接，雙方核對標(biāo)本信息無誤后，在標(biāo)本送檢登記本上簽字確認(rèn)。四、病理科接收與驗(yàn)收（一）接收流程1.病理科工作人員在收到標(biāo)本后，應(yīng)首先核對標(biāo)本送檢單信息與標(biāo)本標(biāo)記信息是否一致，包括患者姓名、住院號/門診號、標(biāo)本類型、部位等。2.檢查標(biāo)本包裝是否完好，固定液量是否充足，標(biāo)本有無滲漏、變形等情況。如發(fā)現(xiàn)問題，應(yīng)及時與送檢科室溝通解決。（二）驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)1.手術(shù)標(biāo)本應(yīng)符合以下要求：標(biāo)本大小應(yīng)滿足病理診斷需要，一般要求切除組織的最大徑不小于0.5cm。標(biāo)本應(yīng)完整，無明顯擠壓、破碎等情況。固定液濃度和固定時間應(yīng)符合要求，固定效果良好，標(biāo)本組織應(yīng)充分固定，無自溶現(xiàn)象。2.穿刺活檢標(biāo)本應(yīng)符合以下要求：穿刺組織應(yīng)包含足夠的細(xì)胞成分或組織條，涂片應(yīng)均勻、無干涸現(xiàn)象。固定液量應(yīng)能充分固定標(biāo)本，避免標(biāo)本干燥。3.內(nèi)鏡活檢標(biāo)本應(yīng)符合以下要求：活檢組織應(yīng)具有一定的長度和厚度，一般要求組織條長度不小于0.2cm。固定液應(yīng)能完全浸泡標(biāo)本，確保固定效果。（三）驗(yàn)收記錄1.病理科驗(yàn)收人員應(yīng)在標(biāo)本送檢登記本上詳細(xì)記錄標(biāo)本驗(yàn)收情況，包括標(biāo)本是否符合要求、存在的問題及處理措施等。2.對于驗(yàn)收不合格的標(biāo)本，應(yīng)及時與送檢科室聯(lián)系，說明原因并要求重新采集標(biāo)本送檢。同時，在病理標(biāo)本拒收登記本上記錄拒收標(biāo)本的相關(guān)信息。五、病理標(biāo)本處理（一）標(biāo)本預(yù)處理1.對于手術(shù)標(biāo)本，在接收后應(yīng)及時進(jìn)行預(yù)處理。首先用流水沖洗標(biāo)本表面的血跡和固定液，然后用濾紙吸干表面水分。2.根據(jù)標(biāo)本大小和質(zhì)地，對標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)?shù)男拚コ嘤嗟闹?、結(jié)締組織等非病變組織，使標(biāo)本能夠平整地放入脫水機(jī)中進(jìn)行脫水處理。3.穿刺活檢標(biāo)本和內(nèi)鏡活檢標(biāo)本在驗(yàn)收合格后，可直接進(jìn)行脫水處理。（二）脫水1.將預(yù)處理后的標(biāo)本依次放入不同濃度的脫水劑中進(jìn)行脫水，脫水劑一般采用梯度酒精，濃度依次為70%、80%、85%、90%、95%、100%，每個濃度脫水時間根據(jù)標(biāo)本大小和質(zhì)地而定，一般為12小時。2.脫水過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行，確保脫水效果。脫水不徹底會影響后續(xù)的透明、浸蠟等處理環(huán)節(jié)，導(dǎo)致病理切片質(zhì)量下降。（三）透明1.脫水后的標(biāo)本放入透明劑中進(jìn)行透明處理，常用的透明劑為二甲苯。透明時間一般為3060分鐘，使標(biāo)本完全透明，便于浸蠟。2.透明過程中應(yīng)注意觀察標(biāo)本的透明情況，確保標(biāo)本各部位均達(dá)到透明狀態(tài)。如發(fā)現(xiàn)標(biāo)本透明不完全，應(yīng)適當(dāng)延長透明時間。（四）浸蠟1.將透明后的標(biāo)本放入熔化的石蠟中進(jìn)行浸蠟，浸蠟一般采用梯度浸蠟法，石蠟熔點(diǎn)根據(jù)季節(jié)和地區(qū)有所不同，常用熔點(diǎn)為5658℃。浸蠟過程中，標(biāo)本依次放入熔點(diǎn)較低的石蠟中（如52℃、54℃），每個溫度下浸蠟12小時，然后再放入熔點(diǎn)較高的石蠟中（如56℃、58℃），每個溫度下浸蠟23小時。2.浸蠟后的標(biāo)本應(yīng)完全被石蠟浸透，質(zhì)地均勻，無氣泡和雜質(zhì)。浸蠟效果直接影響病理切片的質(zhì)量，因此浸蠟過程必須嚴(yán)格控制溫度和時間。（五）包埋1.將浸蠟后的標(biāo)本從石蠟中取出，放入包埋模具中，加入熔化的石蠟，迅速放入包埋機(jī)的冷臺上進(jìn)行包埋。包埋時應(yīng)注意標(biāo)本的擺放方向，使其符合病理切片的要求。2.包埋完成后，待石蠟?zāi)蹋瑢駢K從模具中取出，修整包埋塊表面，使其平整光滑，便于切片。六、病理切片制作（一）切片機(jī)準(zhǔn)備1.選擇合適的切片刀，安裝在切片機(jī)上，并調(diào)整切片厚度。一般病理切片厚度為46μm，特殊情況（如觀察細(xì)胞形態(tài)等）可適當(dāng)調(diào)整切片厚度。2.檢查切片機(jī)的各項(xiàng)參數(shù)設(shè)置是否正確，如切片速度、進(jìn)刀距離等，并進(jìn)行試運(yùn)行，確保切片機(jī)運(yùn)行正常。(二)切片操作1.將包埋塊固定在切片機(jī)的標(biāo)本臺上，調(diào)整標(biāo)本臺位置，使包埋塊的切面與切片刀平行。2.啟動切片機(jī)，按照設(shè)定的切片厚度進(jìn)行切片。切片過程中應(yīng)保持切片的連續(xù)性和完整性，避免出現(xiàn)切片破碎、折疊等情況。3.用鑷子將切下的蠟帶輕輕提起，放在載玻片上，注意蠟帶的擺放應(yīng)平整、無褶皺。（三）烤片1.將帶有蠟帶的載玻片放入烤片機(jī)中進(jìn)行烤片，烤片溫度一般為6065℃，烤片時間為3060分鐘?？酒哪康氖鞘故灣浞秩刍?，組織牢固地附著在載玻片上。2.烤片完成后，待載玻片冷卻至室溫，即可進(jìn)行后續(xù)的染色等處理。七、病理染色（一）染色方法選擇1.常規(guī)病理染色方法為蘇木精伊紅染色（HE染色），適用于大多數(shù)病理標(biāo)本的診斷。HE染色可以清晰地顯示細(xì)胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)，便于病理醫(yī)師觀察病變特征。2.根據(jù)臨床診斷需要和特殊檢查目的，可選擇其他特殊染色方法，如免疫組織化學(xué)染色、原位雜交等。特殊染色方法應(yīng)在申請單上注明，并經(jīng)上級醫(yī)師審核簽字。（二）HE染色流程1.脫蠟水化：將烤好的載玻片依次放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中脫蠟，每個二甲苯中浸泡510分鐘，然后再依次放入梯度酒精（100%、95%、90%、85%、80%、70%）中水化，每個酒精中浸泡35分鐘。2.蘇木精染色：將載玻片放入蘇木精染液中染色510分鐘，然后用流水沖洗1015分鐘，使細(xì)胞核染成藍(lán)色。3.分化：將載玻片放入1%鹽酸酒精中分化數(shù)秒，使細(xì)胞核染色清晰，然后立即用流水沖洗1015分鐘，終止分化。4.伊紅染色：將載玻片放入伊紅染液中染色35分鐘，然后用流水沖洗510分鐘，使細(xì)胞質(zhì)染成粉紅色。5.脫水透明：將載玻片依次放入梯度酒精（70%、80%、85%、90%、95%、100%）中脫水，每個酒精中浸泡35分鐘，然后放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中透明，每個二甲苯中浸泡510分鐘。6.封片：在載玻片上滴加中性樹膠，蓋上蓋玻片，待樹膠干燥后即可進(jìn)行顯微鏡觀察。（三）特殊染色操作1.免疫組織化學(xué)染色：標(biāo)本處理：按照HE染色流程進(jìn)行脫蠟水化。抗原修復(fù)：根據(jù)抗原的性質(zhì)和抗體的要求，選擇合適的抗原修復(fù)方法，如高溫高壓修復(fù)、微波修復(fù)等?？乖迯?fù)的目的是暴露抗原決定簇，提高抗體與抗原的結(jié)合率。封閉：用封閉液封閉非特異性抗原，減少背景染色。封閉時間一般為1530分鐘。一抗孵育：將稀釋好的一抗滴加在載玻片上，放入濕盒中，在37℃孵育12小時或4℃過夜。二抗孵育：用PBS沖洗載玻片后，滴加二抗，放入濕盒中，在37℃孵育3060分鐘。顯色：根據(jù)顯色劑的類型，選擇合適的顯色方法，如DAB顯色、AEC顯色等。顯色時間根據(jù)顏色深淺適當(dāng)調(diào)整，一般為515分鐘。復(fù)染：用蘇木精復(fù)染細(xì)胞核12分鐘，然后用流水沖洗，梯度酒精脫水，二甲苯透明，封片。2.原位雜交：標(biāo)本處理：同免疫組織化學(xué)染色標(biāo)本處理方法。探針變性：將探針在變性液中變性，使其成為單鏈狀態(tài)，便于與靶核酸雜交。雜交：將變性后的探針滴加在載玻片上，放入濕盒中，在適當(dāng)溫度下孵育過夜，使探針與靶核酸雜交。洗脫：用洗脫液沖洗載玻片，去除未雜交的探針。檢測：根據(jù)探針標(biāo)記物的類型，選擇合適的檢測方法，如熒光檢測、酶標(biāo)檢測等。復(fù)染：用蘇木精復(fù)染細(xì)胞核，然后進(jìn)行脫水、透明、封片。八、病理診斷（一）診斷流程1.病理醫(yī)師在顯微鏡下觀察病理切片，首先進(jìn)行低倍鏡觀察，了解組織的整體結(jié)構(gòu)和病變分布情況，然后再進(jìn)行高倍鏡觀察，仔細(xì)觀察細(xì)胞形態(tài)和組織結(jié)構(gòu)特征。2.根據(jù)觀察結(jié)果，結(jié)合患者的臨床癥狀、體征、病史及其他檢查結(jié)果，進(jìn)行綜合分析判斷，做出病理診斷。病理診斷應(yīng)明確病變的性質(zhì)（如腫瘤的良惡性、類型等）、分級、分期等。3.對于疑難病例或診斷存在爭議的病例，病理醫(yī)師應(yīng)組織科室內(nèi)部會診，邀請相關(guān)專家共同討論分析，必要時可申請多學(xué)科會診（MDT），包括臨床科室、影像科、檢驗(yàn)科等相關(guān)專家參與，共同制定最佳的診斷和治療方案。（二）診斷報(bào)告書寫1.病理診斷報(bào)告應(yīng)使用規(guī)范的醫(yī)學(xué)術(shù)語，語言準(zhǔn)確、簡潔、明了。報(bào)告內(nèi)容應(yīng)包括患者基本信息、標(biāo)本類型、病理診斷結(jié)果、特殊檢查結(jié)果（如免疫組化、原位雜交等）、建議等。2.病理診斷報(bào)告應(yīng)由具備資質(zhì)的病理醫(yī)師書寫，并經(jīng)上級醫(yī)師審核簽字確認(rèn)。審核人員應(yīng)認(rèn)真核對報(bào)告內(nèi)容，確保診斷準(zhǔn)確無誤。3.病理診斷報(bào)告應(yīng)及時發(fā)出，一般情況下，普通病理診斷報(bào)告應(yīng)在收到標(biāo)本后35個工作日內(nèi)發(fā)出，疑難病例或特殊檢查報(bào)告時間根據(jù)具體情況適當(dāng)延長，但應(yīng)及時與臨床科室溝通說明。九、病理資料管理（一）標(biāo)本保存1.病理標(biāo)本在完成診斷后，應(yīng)按照規(guī)定進(jìn)行保存。一般手術(shù)標(biāo)本保存期限為15年，穿刺活檢標(biāo)本和內(nèi)鏡活檢標(biāo)本保存期限為5年。2.標(biāo)本應(yīng)保存在專門的標(biāo)本庫中，標(biāo)本庫應(yīng)具備適宜的溫度、濕度條件，防止標(biāo)本霉變、干燥、損壞等。3.標(biāo)本保存應(yīng)分類存放，便于查找和管理。對于有特殊價值或科研需要的標(biāo)本，應(yīng)進(jìn)行單獨(dú)標(biāo)識和妥善保存。（二）病理切片保存及借閱1.病理切片應(yīng)按照編號順序存放在切片柜中，切片柜應(yīng)保持干燥、清潔，防止切片受潮、霉變。2.臨床科室如需借閱病理切片，應(yīng)填寫病理切片借閱申請單，注明借閱目的、借閱時間等，經(jīng)科室主任簽字同意后，到病理科辦理借閱手續(xù)。3.病理科工作人員應(yīng)按照規(guī)定的借閱流程進(jìn)行操作，嚴(yán)格登記借閱信息，包括借閱人姓名、科室、借閱時間、歸還時間等。借閱期