2025年大學(xué)分子生物學(xué)（分子克?。┥蠈W(xué)期期末測試卷

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______一、選擇題（總共10題，每題3分，每題只有一個正確答案，請將正確答案填在括號內(nèi)）1.在分子克隆中，常用的限制性內(nèi)切酶作用于（）。A.磷酸二酯鍵B.氫鍵C.肽鍵D.糖苷鍵2.以下哪種載體常用于構(gòu)建基因文庫（）。A.質(zhì)粒載體B.噬菌體載體C.人工染色體載體D.以上都是3.cDNA文庫構(gòu)建過程中，首先要提取細(xì)胞中的（）。A.DNAB.mRNAC.tRNAD.rRNA4.感受態(tài)細(xì)胞是指（）。A.處于對數(shù)生長期的細(xì)胞B.處于靜止期的細(xì)胞C.能夠攝取外源DNA的細(xì)胞D.能夠表達(dá)外源基因的細(xì)胞5.藍(lán)白斑篩選中，白色菌落表示（）。A.含有重組質(zhì)粒B.含有非重組質(zhì)粒C.質(zhì)粒未導(dǎo)入細(xì)胞D.細(xì)胞死亡6.用于PCR反應(yīng)的酶是（）。A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.限制性內(nèi)切酶7.分子克隆中，連接反應(yīng)的最佳溫度一般是（）。A.4℃B.16℃C.37℃D.65℃8.以下哪種方法可用于鑒定重組質(zhì)粒（）。A.酶切分析B.PCR擴增C.測序D.以上都是9.基因表達(dá)載體中，啟動子的作用是（）。A.啟動基因轉(zhuǎn)錄B.終止基因轉(zhuǎn)錄C.調(diào)控基因翻譯D.編碼蛋白質(zhì)10.蛋白質(zhì)表達(dá)過程中，密碼子與反密碼子的配對遵循（）。A.嚴(yán)格的堿基互補配對B.擺動配對原則C.隨機配對D.以上都不對二、多項選擇題（總共5題，每題5分，每題有多個正確答案，請將正確答案填在括號內(nèi)，少選、多選、錯選均不得分）1.分子克隆中常用的工具酶有（）。A.限制性內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.DNA聚合酶D.逆轉(zhuǎn)錄酶2.以下屬于真核生物表達(dá)載體元件的有（）。A.啟動子B.增強子C.終止子D.核糖體結(jié)合位點3.構(gòu)建基因組文庫時，需要考慮的因素有（）。A.載體容量B.插入片段大小C.宿主細(xì)胞D.篩選方法4.提高PCR反應(yīng)特異性的方法有（）。A.優(yōu)化引物設(shè)計B.提高退火溫度C.增加模板濃度D.減少循環(huán)次數(shù)5.蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)包括（）。A.原核表達(dá)系統(tǒng)B.真核表達(dá)系統(tǒng)C.昆蟲表達(dá)系統(tǒng)D.哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)三、判斷題（總共10題，每題2分，請判斷對錯，在括號內(nèi)打“√”或“×”）1.限制性內(nèi)切酶識別的DNA序列一般具有回文結(jié)構(gòu)。（）2.質(zhì)粒載體都含有抗生素抗性基因，用于篩選陽性克隆。（）3.cDNA文庫包含了細(xì)胞中所有的基因。（）4.感受態(tài)細(xì)胞制備后可長期保存使用。（）5.藍(lán)白斑篩選中，藍(lán)色菌落表示含有重組質(zhì)粒。（）6.PCR反應(yīng)中，引物的長度一般為15-30bp。（）7.連接反應(yīng)中，載體與插入片段的摩爾比一般為1:3-1:10。（）8.重組質(zhì)粒導(dǎo)入宿主細(xì)胞后，都能穩(wěn)定表達(dá)外源基因。（）9.真核生物基因表達(dá)載體中不需要SD序列。（）10.蛋白質(zhì)表達(dá)過程中，密碼子的第三位堿基與反密碼子的第一位堿基配對時存在擺動現(xiàn)象。（）四、簡答題（總共3題，每題10分）1.簡述構(gòu)建基因組文庫的基本步驟。2.說明PCR反應(yīng)的原理及主要步驟。3.闡述原核生物表達(dá)載體與真核生物表達(dá)載體的主要區(qū)別。五、論述題（總共1題，20分）請論述分子克隆技術(shù)在現(xiàn)代生物學(xué)研究中的重要意義及應(yīng)用領(lǐng)域，并舉例說明其在某一領(lǐng)域的具體應(yīng)用。答案：一、選擇題1.A2.D3.B4.C5.A6.A7.B8.D9.A10.B二、多項選擇題1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABD5.ABCD三、判斷題1.√2.√3.×4.×5.×6.√7.√8.×9.√10.√四、簡答題1.構(gòu)建基因組文庫的基本步驟：首先提取基因組DNA并進(jìn)行片段化處理；然后選擇合適的載體，將基因組DNA片段與載體連接；接著將連接產(chǎn)物導(dǎo)入宿主細(xì)胞，形成大量含有不同基因組片段的克??；最后對這些克隆進(jìn)行篩選和鑒定，獲得包含整個基因組的文庫。2.PCR反應(yīng)原理：以擬擴增的DNA分子為模板，以一對分別與模板5'末端和3'末端相互補的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復(fù)制的機制沿著模板鏈延伸直至完成新DNA的合成。主要步驟：變性，將模板DNA加熱至95℃左右使其雙鏈解開；退火，降溫至合適溫度使引物與模板互補結(jié)合；延伸，在DNA聚合酶作用下，以dNTP為原料合成新的DNA鏈。3.原核生物表達(dá)載體與真核生物表達(dá)載體主要區(qū)別：原核載體一般較小，結(jié)構(gòu)簡單，啟動子為原核啟動子，無內(nèi)含子等真核基因元件，翻譯起始依賴SD序列；真核載體較大，有復(fù)雜調(diào)控元件，含真核啟動子、增強子等，有內(nèi)含子，需進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后加工，翻譯起始與原核不同，無SD序列。五、論述題分子克隆技術(shù)在現(xiàn)代生物學(xué)研究中具有極其重要的意義。它是基因工程的核心技術(shù)，為深入研究基因功能、蛋白質(zhì)表達(dá)調(diào)控等提供了關(guān)鍵手段。其應(yīng)用領(lǐng)域廣泛，包括基因治療、藥物研發(fā)、生物制藥、農(nóng)