基因載體構(gòu)建設(shè)備運(yùn)維技師（初級(jí)）考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.基因載體構(gòu)建中，限制性內(nèi)切酶識(shí)別的序列是______2.移液器校準(zhǔn)常用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是______3.離心機(jī)轉(zhuǎn)子使用后需______存放4.PCR儀的核心溫度控制部件是______5.凝膠成像儀常用的激發(fā)光源是______6.電泳儀的主要輸出參數(shù)包括電壓和______7.超凈工作臺(tái)使用前需開啟______滅菌8.基因載體連接常用的酶是______9.設(shè)備運(yùn)維記錄必須包含的基礎(chǔ)信息是______10.恒溫?fù)u床的關(guān)鍵運(yùn)行參數(shù)是溫度和______二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.移液器吸液時(shí)，槍頭應(yīng)浸入液面下（）A.1-2mmB.5mm以上C.接觸容器底部D.懸空2.離心機(jī)使用前需確認(rèn)樣品管（）A.空載B.對(duì)稱放置C.裝滿樣品D.無固定3.PCR儀熱蓋溫度通常設(shè)置為（）A.95℃B.105℃C.120℃D.80℃4.凝膠成像儀拍攝時(shí)需關(guān)閉（）A.紫外光B.白光C.背景燈D.所有光源5.電泳槽使用后應(yīng)（）A.立即浸泡B.晾干存放C.裝滿水D.高溫滅菌6.超凈工作臺(tái)紫外滅菌時(shí)間一般為（）A.5分鐘B.15-30分鐘C.1小時(shí)D.2小時(shí)7.DNA連接反應(yīng)的適宜溫度是（）A.4℃B.16℃C.37℃D.65℃8.設(shè)備故障報(bào)修時(shí)需先記錄（）A.故障現(xiàn)象B.維修人員C.耗材型號(hào)D.環(huán)境溫度9.恒溫?fù)u床轉(zhuǎn)速的單位是（）A.rpmB.km/hC.gD.L/min10.限制性內(nèi)切酶的長期保存溫度是（）A.-20℃B.-80℃C.4℃D.室溫三、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.基因載體構(gòu)建常用設(shè)備包括（）A.移液器B.離心機(jī)C.PCR儀D.顯微鏡2.移液器校準(zhǔn)的注意事項(xiàng)有（）A.環(huán)境溫度穩(wěn)定B.用超純水C.貼校準(zhǔn)標(biāo)簽D.每年1次3.離心機(jī)使用禁忌包括（）A.轉(zhuǎn)子不平衡B.超最大轉(zhuǎn)速C.樣品溢出D.空載運(yùn)行4.PCR儀維護(hù)要點(diǎn)包括（）A.清潔熱蓋B.校準(zhǔn)溫度C.更換燈管D.檢查模塊5.超凈工作臺(tái)維護(hù)內(nèi)容有（）A.換HEPA濾網(wǎng)B.清潔臺(tái)面C.檢查風(fēng)速D.換紫外燈6.凝膠電泳相關(guān)設(shè)備有（）A.電泳儀B.電泳槽C.凝膠成像儀D.恒溫箱7.基因載體構(gòu)建常用耗材有（）A.槍頭B.離心管C.瓊脂糖D.培養(yǎng)皿8.設(shè)備運(yùn)維記錄需包含（）A.設(shè)備編號(hào)B.運(yùn)維內(nèi)容C.操作人員D.下次運(yùn)維時(shí)間9.恒溫?fù)u床故障排查方向包括（）A.溫度異常B.轉(zhuǎn)速異常C.噪音過大D.電源問題10.限制性內(nèi)切酶使用注意事項(xiàng)（）A.冰上操作B.避免反復(fù)凍融C.核對(duì)酶切位點(diǎn)D.計(jì)算酶量四、判斷題（每題2分，共20分）1.移液器吸液后可長時(shí)間懸空等待（）2.不同型號(hào)離心機(jī)轉(zhuǎn)子可通用（）3.PCR儀熱蓋可防止樣品蒸發(fā)（）4.凝膠成像儀紫外燈可直接照皮膚（）5.電泳電壓越高分離效果越好（）6.超凈工作臺(tái)開啟后可立即操作（）7.T4連接酶可連接平末端和粘性末端（）8.初級(jí)技師可自行拆解故障設(shè)備（）9.恒溫?fù)u床轉(zhuǎn)速越高振蕩效果越好（）10.限制性內(nèi)切酶保存需加甘油（）五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述移液器日常維護(hù)的3個(gè)要點(diǎn)2.離心機(jī)使用前需檢查哪些內(nèi)容？3.PCR儀熱蓋的作用及維護(hù)方法？4.超凈工作臺(tái)使用前的準(zhǔn)備步驟？六、討論題（每題5分，共10分）1.分析凝膠成像儀拍攝效果差的常見原因及解決方法2.討論基因載體構(gòu)建中設(shè)備運(yùn)維的重要性及日常注意事項(xiàng)---答案部分一、填空題答案1.回文序列2.超純水3.清潔干燥4.溫度控制模塊5.紫外燈（或LED燈）6.電流7.紫外燈8.T4DNA連接酶9.設(shè)備編號(hào)（或運(yùn)維日期）10.轉(zhuǎn)速二、單項(xiàng)選擇題答案1-5:ABBCB6-10:BBAAB三、多項(xiàng)選擇題答案1.ABC2.ABC3.ABC4.ABD5.ABCD6.ABC7.ABC8.ABCD9.ABCD10.ABCD四、判斷題答案1.×2.×3.√4.×5.×6.×7.√8.×9.×10.√五、簡答題答案1.①每次用后卸槍頭，避免液體殘留腐蝕活塞；②用75%酒精擦外部，忌有機(jī)溶劑；③長期不用調(diào)至最大量程垂直存放；④每年校準(zhǔn)1次（答3點(diǎn)即可）。2.①轉(zhuǎn)子型號(hào)匹配、無裂紋；②樣品管對(duì)稱，重量差合規(guī)；③轉(zhuǎn)子蓋擰緊；④電源正常；⑤轉(zhuǎn)速不超轉(zhuǎn)子限值；⑥離心室無雜物。3.作用：防止樣品蒸發(fā)、管蓋凝結(jié)。維護(hù)：①用后擦熱蓋殘留；②檢查密封圈，老化更換；③定期校準(zhǔn)溫度；④無樣品不長期加熱。4.①提前30分鐘開風(fēng)機(jī)+紫外滅菌；②關(guān)紫外開照明，待氣流穩(wěn)定5-10分鐘；③75%酒精擦臺(tái)面；④檢查風(fēng)速（0.3-0.5m/s）；⑤備耗材放中央；⑥穿無菌服戴手套。六、討論題答案1.原因：①紫外燈老化；②上樣量不當(dāng)；③凝膠濃度不符；④鏡頭/濾光片污染；⑤曝光時(shí)間錯(cuò)。解決：①1000小時(shí)換紫外燈；②調(diào)整上樣量1-5μL；③按片段選凝膠濃度（1kb用1%）；④酒精擦鏡頭濾光片；⑤