CAR-T細(xì)胞制備設(shè)備無菌操作技師（初級）考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.無菌操作的核心原則是______。答案：防止微生物污染2.CAR-T細(xì)胞制備中分離T細(xì)胞的常用設(shè)備是______。答案：磁珠分選儀3.無菌操作區(qū)域空氣潔凈度等級一般要求______級。答案：百4.培養(yǎng)基非高溫滅菌方法是______。答案：過濾除菌5.哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)適宜溫度是______℃。答案：376.無菌操作用生物安全柜級別是______級。答案：II7.手部消毒需持續(xù)______分鐘。答案：2-38.細(xì)胞計數(shù)常用儀器是______。答案：血細(xì)胞計數(shù)板9.CAR-T靶點多為______相關(guān)抗原。答案：腫瘤10.皮膚消毒常用試劑是______。答案：75%酒精二、單項選擇題（每題2分，共20分）1.手套污染后應(yīng)______。A.繼續(xù)用B.立即換C.酒精擦D.晾干用答案：B2.生物安全柜氣流方向是______。A.內(nèi)→外B.外→內(nèi)C.上下循環(huán)D.左右循環(huán)答案：A3.培養(yǎng)基過濾濾膜孔徑______μm。A.0.1B.0.22C.0.45D.0.8答案：B4.細(xì)胞培養(yǎng)箱CO?濃度______%。A.5B.10C.15D.20答案：A5.無菌物品應(yīng)放生物安全柜______。A.風(fēng)口B.中央?yún)^(qū)C.邊緣D.角落答案：B6.磁珠分離目的是______。A.富集T細(xì)胞B.殺腫瘤細(xì)胞C.激活T細(xì)胞D.凍存細(xì)胞答案：A7.無菌區(qū)入口應(yīng)設(shè)______。A.洗手池B.鞋柜C.風(fēng)淋室D.滅火器答案：C8.完全培養(yǎng)基儲存溫度______。A.4℃B.-20℃C.37℃D.室溫答案：A9.細(xì)胞凍存關(guān)鍵是控制______。A.降溫速度B.凍存液體積C.細(xì)胞濃度D.凍存時間答案：A10.生物安全柜使用前檢查______。A.氣流速度B.紫外線強度C.培養(yǎng)基溫度D.細(xì)胞活力答案：A三、多項選擇題（每題2分，共20分）1.無菌操作前個人準(zhǔn)備包括______。A.換無菌服B.戴無菌手套C.戴口罩帽子D.剪指甲答案：ABCD2.CAR-T無菌操作關(guān)鍵步驟______。A.細(xì)胞分離B.轉(zhuǎn)染C.培養(yǎng)D.凍存答案：ABCD3.生物安全柜注意事項______。A.不擋風(fēng)口B.不放無關(guān)物C.慢動作D.定期檢測答案：ABCD4.培養(yǎng)基質(zhì)量控制______。A.無菌性B.pH值C.滲透壓D.細(xì)胞毒性答案：ABCD5.細(xì)胞培養(yǎng)無菌要求______。A.設(shè)備無菌B.試劑無菌C.操作無菌D.環(huán)境無菌答案：ABCD6.CAR-T設(shè)備日常維護(hù)______。A.清潔消毒B.性能校準(zhǔn)C.耗材更換D.記錄維護(hù)答案：ABCD7.污染防控措施______。A.定期滅菌B.規(guī)范操作C.環(huán)境監(jiān)測D.個人防護(hù)答案：ABCD8.細(xì)胞凍存液成分______。A.培養(yǎng)基B.血清C.DMSOD.抗生素答案：ABC9.生物安全柜類型______。A.I級B.II級C.III級D.IV級答案：ABC10.CAR-T關(guān)鍵試劑______。A.磁珠B.病毒載體C.細(xì)胞因子D.凍存液答案：ABCD四、判斷題（每題2分，共20分）1.無菌操作可觸碰無菌物品表面。答案：×2.生物安全柜可放個人水杯。答案：×3.培養(yǎng)基滅菌后需冷卻至37℃使用。答案：√4.培養(yǎng)箱溫度波動±0.5℃不影響細(xì)胞。答案：×5.無菌操作前需換無菌實驗服。答案：√6.磁珠分離后需去磁珠才能回輸。答案：√7.潔凈度越高操作成本越低。答案：×8.高濃度細(xì)胞計數(shù)需稀釋。答案：√9.紫外線消毒后需通風(fēng)30分鐘。答案：√10.過濾除菌培養(yǎng)基無需測無菌性。答案：×五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述CAR-T無菌操作核心要求。答案：①環(huán)境：操作區(qū)達(dá)百級，定期監(jiān)測潔凈度；②物品：試劑/耗材滅菌，使用前查無菌；③操作：避免觸碰無菌區(qū)，動作輕柔防氣溶膠；④防護(hù)：戴無菌手套/口罩，不隨意離區(qū)；⑤設(shè)備：生物安全柜/培養(yǎng)箱定期消毒，使用前驗證性能。2.生物安全柜使用前準(zhǔn)備步驟。答案：①檢查：柜門關(guān)閉，風(fēng)口無遮擋；②預(yù)熱：提前30分鐘開機，調(diào)氣流正常；③消毒：紫外線30分鐘，通風(fēng)10分鐘；④備物：無菌耗材/試劑入柜，不擋風(fēng)口；⑤防護(hù)：換無菌服，戴口罩手套；⑥驗證：煙霧測試氣流，無泄漏。3.細(xì)胞培養(yǎng)常見污染及防控。答案：污染類型：細(xì)菌（渾濁、pH變）、真菌（霉菌絲）、支原體（生長慢）、交叉污染（形態(tài)異常）。防控：①無菌操作；②試劑滅菌；③環(huán)境監(jiān)測；④個人防護(hù)；⑤污染細(xì)胞立即高壓滅菌。4.CAR-T培養(yǎng)基質(zhì)量控制要點。答案：①無菌性：過濾后無菌試驗；②理化：pH7.2-7.4，滲透壓280-320mOsm/kg；③毒性：L929細(xì)胞檢測無毒性；④細(xì)胞因子：符合IL-2等濃度要求；⑤穩(wěn)定：定期檢測，不過期；⑥批次一致：預(yù)實驗驗證不同批次。六、討論題（每題5分，共10分）1.無菌操作失誤后果及改進(jìn)措施。答案：后果：細(xì)胞污染報廢，延誤治療；交叉污染引發(fā)倫理風(fēng)險；感染患者致不良反應(yīng)。改進(jìn)：①強化培訓(xùn)，考核上崗；②嚴(yán)格執(zhí)行SOP；③實時監(jiān)測潔凈度；④建立污染預(yù)警；⑤強制規(guī)范防護(hù)。2.提升無菌操