CAR-T細(xì)胞制備設(shè)備無菌操作技師（中級(jí)）考試試卷及答案CAR-T細(xì)胞制備設(shè)備無菌操作技師（中級(jí)）考試試卷及答案一、填空題（共10題，每題1分，共10分）1.CAR-T細(xì)胞制備的無菌操作局部區(qū)域需達(dá)到______級(jí)潔凈度。2.細(xì)胞培養(yǎng)基過濾除菌常用濾膜孔徑為______μm。3.超凈工作臺(tái)操作時(shí)，物品應(yīng)放置在臺(tái)面______區(qū)域（靠近/遠(yuǎn)離風(fēng)口）。4.細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)CO?濃度通常維持在______%。5.無菌操作前手部消毒常用______（消毒劑名稱）。6.CAR-T制備中分離單個(gè)核細(xì)胞常用______離心機(jī)。7.無菌物品開啟后未污染的有效使用時(shí)間一般為______小時(shí)。8.細(xì)胞凍存常用冷凍保護(hù)劑是______（縮寫）。9.超凈工作臺(tái)HEPA過濾器更換周期通常為______年。10.無菌操作避免交叉污染的核心原則是______（如“不同區(qū)域物品不混用”）。二、單項(xiàng)選擇題（共10題，每題2分，共20分）1.下列不屬于CAR-T制備核心設(shè)備的是？A.流式細(xì)胞儀B.生物安全柜C.冰箱D.打印機(jī)2.無菌操作時(shí)手套污染后應(yīng)立即？A.酒精擦拭繼續(xù)用B.更換新手套C.無菌水沖洗D.繼續(xù)操作3.細(xì)胞培養(yǎng)基滅菌優(yōu)先采用？A.高壓蒸汽B.過濾除菌C.干熱滅菌D.紫外線4.細(xì)胞復(fù)蘇正確步驟是？A.37℃水浴快速解凍B.室溫緩慢解凍C.-80℃解凍D.液氮解凍5.超凈工作臺(tái)開啟后需運(yùn)行多久可操作？A.5-10分鐘B.15-20分鐘C.30分鐘D.1小時(shí)6.細(xì)胞污染的典型表現(xiàn)是？A.細(xì)胞貼壁B.培養(yǎng)基渾濁C.形態(tài)規(guī)則D.顏色不變7.超凈臺(tái)內(nèi)物品擺放應(yīng)？A.隨意放置B.靠近風(fēng)口C.遠(yuǎn)離風(fēng)口D.堆滿臺(tái)面8.病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)常用設(shè)備是？A.離心機(jī)B.培養(yǎng)箱C.轉(zhuǎn)導(dǎo)儀D.顯微鏡9.細(xì)胞培養(yǎng)箱濕度維持在？A.50%B.70%C.90%D.100%10.無菌物品包裝要求是？A.密封完好B.破損可用C.無標(biāo)簽D.潮濕可用三、多項(xiàng)選擇題（共10題，每題2分，共20分）1.無菌操作前準(zhǔn)備包括？A.洗手消毒B.換無菌服C.開超凈臺(tái)D.整理臺(tái)面2.CAR-T制備常見污染類型有？A.細(xì)菌B.真菌C.支原體D.病毒3.超凈臺(tái)日常維護(hù)要點(diǎn)？A.清潔臺(tái)面B.換HEPA濾器C.檢氣流速度D.紫外線消毒4.細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)？A.緩慢降溫B.加冷凍保護(hù)劑C.快速解凍D.標(biāo)記細(xì)胞信息5.CAR-T核心制備步驟？A.單個(gè)核細(xì)胞分離B.T細(xì)胞激活C.病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)D.細(xì)胞擴(kuò)增6.無菌操作防污染措施？A.減少走動(dòng)B.關(guān)超凈臺(tái)側(cè)門C.不交談D.定期消毒7.培養(yǎng)箱日常檢查項(xiàng)目？A.CO?濃度B.溫度C.濕度D.水質(zhì)8.需定期校準(zhǔn)的設(shè)備？A.離心機(jī)轉(zhuǎn)速B.培養(yǎng)箱溫度C.流式細(xì)胞儀D.冰箱溫度9.無菌物品儲(chǔ)存要求？A.陰涼干燥B.遠(yuǎn)離污染源C.有效期內(nèi)用D.隨意堆放10.CAR-T常用耗材？A.無菌培養(yǎng)瓶B.移液管C.離心管D.注射器四、判斷題（共10題，每題2分，共20分）1.超凈臺(tái)開啟后可立即操作。（）2.細(xì)胞培養(yǎng)基可用高壓蒸汽滅菌。（）3.手套被酒精浸濕無需更換。（）4.凍存管直接放入液氮保存。（）5.無菌物品開啟后可無限期使用。（）6.超凈臺(tái)氣流方向從外向內(nèi)。（）7.培養(yǎng)箱溫度維持37℃。（）8.支原體污染肉眼可見。（）9.超凈臺(tái)內(nèi)可放私人物品。（）10.T細(xì)胞激活需添加細(xì)胞因子。（）五、簡答題（共4題，每題5分，共20分）1.簡述CAR-T制備中無菌操作的核心原則。2.說明超凈工作臺(tái)日常維護(hù)的關(guān)鍵步驟。3.簡述細(xì)胞復(fù)蘇的操作要點(diǎn)及注意事項(xiàng)。4.說明CAR-T病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的無菌操作要求。六、討論題（共2題，每題5分，共10分）1.討論CAR-T制備中常見無菌污染風(fēng)險(xiǎn)及防控措施。2.分析CAR-T設(shè)備校準(zhǔn)對(duì)細(xì)胞質(zhì)量的影響及關(guān)鍵校準(zhǔn)要點(diǎn)。---答案部分一、填空題答案1.A級(jí)2.0.223.靠近4.55.75%酒精6.低速大容量7.48.DMSO9.1-210.不同操作區(qū)物品不混用二、單項(xiàng)選擇題答案1.D2.B3.B4.A5.A6.B7.B8.C9.C10.A三、多項(xiàng)選擇題答案1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABD5.ABCD6.ABCD7.ABC8.ABCD9.ABC10.ABCD四、判斷題答案1.×2.×3.×4.×5.×6.×7.√8.×9.×10.√五、簡答題答案1.核心原則：①環(huán)境：保持A級(jí)潔凈度，超凈臺(tái)氣流穩(wěn)定；②人員：穿無菌服、戴雙層手套，減少走動(dòng)交談；③物品：耗材/試劑滅菌，開啟后4小時(shí)內(nèi)使用；④操作：動(dòng)作輕柔，物品靠近風(fēng)口，避免交叉接觸；⑤應(yīng)急：污染后立即隔離，更換耗材并消毒。2.維護(hù)步驟：①每日清潔：75%酒精擦拭臺(tái)面/內(nèi)壁；②消毒：操作前后紫外線照射30分鐘；③氣流檢測：每周用煙霧測試方向（從內(nèi)向外）；④濾器更換：1-2年換HEPA濾器，記錄更換時(shí)間；⑤校準(zhǔn)：每月校準(zhǔn)風(fēng)速、溫度，確保符合標(biāo)準(zhǔn)。3.操作要點(diǎn)：①快速解凍：37℃水浴搖晃1-2分鐘至剩少量冰渣；②稀釋：加預(yù)熱培養(yǎng)基，1500rpm離心5分鐘去凍存液；③計(jì)數(shù)：臺(tái)盼藍(lán)染色測活細(xì)胞率；注意：避免反復(fù)凍融，凍存管提前標(biāo)記，解凍后1小時(shí)內(nèi)處理。4.無菌要求：①環(huán)境：在生物安全柜A級(jí)區(qū)操作，防氣溶膠擴(kuò)散；②人員：戴雙層手套、隔離衣，不交談；③耗材：用病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)專用無菌耗材；④操作：輕柔移液防氣泡，轉(zhuǎn)導(dǎo)后密封培養(yǎng)瓶；⑤消毒：用含氯消毒劑處理臺(tái)面及廢棄物。六、討論題答案1.污染風(fēng)險(xiǎn)及防控：①風(fēng)險(xiǎn)：人員手套破損、超凈臺(tái)氣流失效、耗材過期、試劑支原體污染；②防控：人員定期培訓(xùn)，操作前消毒；每日清潔超凈臺(tái)，每周測潔凈度；耗材檢查有效期，開啟后限時(shí)用；試劑過濾除菌，定