2025年大學醫(yī)學實驗技術(shù)（實驗操作方法）試題及答案

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______第I卷（選擇題，共40分）本大題共20小題，每小題2分。在每小題給出的四個選項中，只有一項是符合題目要求的。1.在進行細胞培養(yǎng)時，對培養(yǎng)液的pH值要求較為嚴格，一般最適宜的pH范圍是（）A.6.0-6.4B.6.4-6.8C.7.2-7.4D.7.6-8.02.以下哪種滅菌方法常用于玻璃器皿的滅菌（）A.高壓蒸汽滅菌B.干熱滅菌C.紫外線滅菌D.化學藥劑滅菌3.進行蛋白質(zhì)定量分析時，常用的方法是（）A.雙縮脲法B.斐林試劑法C.碘量法D.酸堿滴定法4.在核酸提取過程中，用于沉淀核酸的常用試劑是（）A.乙醇B.丙酮C.氯仿D.乙醚5.細胞計數(shù)時，常用的計數(shù)板是（）A.血細胞計數(shù)板B.細菌計數(shù)板C.真菌計數(shù)板D.病毒計數(shù)板6.下列哪種顯微鏡常用于觀察細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)（）A.光學顯微鏡B.電子顯微鏡C.體視顯微鏡D.熒光顯微鏡7.酶活性測定中，反應體系的溫度一般控制在（）A.20℃B.30℃C.37℃D.45℃8.制備抗體時，常用的動物是（）A.小鼠B.大鼠C.兔子D.以上都是9.在PCR反應中，需要的酶是（）A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.限制性內(nèi)切酶10.蛋白質(zhì)電泳分離中，常用的緩沖液是（）A.Tris-HCl緩沖液B.磷酸緩沖液C.硼酸緩沖液D.檸檬酸緩沖液11.細胞培養(yǎng)箱中，維持細胞生長的氣體環(huán)境主要是（）A.氧氣和二氧化碳B.氮氣和二氧化碳C.氫氣和二氧化碳D.氧氣和氮氣12.用于固定組織的常用固定液是（）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.冰醋酸13.以下哪種技術(shù)可用于基因的克隆（）A.PCR技術(shù)B.基因芯片技術(shù)C.蛋白質(zhì)印跡技術(shù)D.免疫組化技術(shù)14.在微生物培養(yǎng)中，接種環(huán)常用的滅菌方法是（）A.灼燒滅菌B.高壓蒸汽滅菌C.干熱滅菌D.化學藥劑滅菌15.測定血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性時，底物是（）A.丙酮酸和谷氨酸B.丙氨酸和α-酮戊二酸C.天門冬氨酸和α-酮戊二酸D.乳酸和丙酮酸16.進行細胞轉(zhuǎn)染時，常用的轉(zhuǎn)染試劑是（）A.LipofectamineB.胰蛋白酶C.膠原酶D.鏈霉蛋白酶17.蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)不包括（）A.α-螺旋B.β-折疊C.無規(guī)卷曲D.結(jié)構(gòu)域18.核酸分子雜交技術(shù)中，常用的探針標記物是（）A.放射性同位素B.熒光素C.生物素D.以上都是19.在細胞凋亡檢測中，常用的方法是（）A.臺盼藍染色B.碘化丙啶染色C.AnnexinV-FITC/PI雙染法D.吉姆薩染色20.以下哪種儀器可用于細胞的分選（）A.流式細胞儀B.離心機C.移液器D.天平第II卷（非選擇題，共60分）21.（10分）簡述細胞培養(yǎng)的基本步驟。22.（）分）請說明蛋白質(zhì)分離純化的常用方法及其原理。23.（15分）在核酸提取實驗中，如何保證提取的核酸質(zhì)量？24.（15分）閱讀以下材料：在醫(yī)學研究中，常常需要對某種疾病的發(fā)病機制進行深入探究。研究人員選取了一定數(shù)量的患有該疾病的患者和健康對照，對他們進行了基因表達譜分析。發(fā)現(xiàn)某些基因在患者中呈現(xiàn)異常高表達，而在健康對照中表達水平較低。請分析這些異常高表達的基因可能與疾病的關(guān)系，并闡述如何進一步驗證這些基因在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用。25.（15分）材料：某研究小組想要研究一種新的藥物對腫瘤細胞增殖的影響。他們將培養(yǎng)的腫瘤細胞分為兩組，一組加入該藥物，另一組作為對照不添加藥物。經(jīng)過一段時間培養(yǎng)后，檢測兩組細胞的增殖情況。請設(shè)計實驗方案，包括實驗分組、檢測指標及預期結(jié)果，并分析該藥物對腫瘤細胞增殖的影響機制。答案：1.C2.B3.A4.A5.A6.B7.C8.D9.A10.A11.A12.A13.A14.A15.B16.A17.D18.D19.C20.A21.細胞培養(yǎng)基本步驟：首先準備合適的細胞培養(yǎng)基，添加血清、抗生素等成分。然后選取合適的細胞系，用胰蛋白酶等消化液將細胞從培養(yǎng)瓶壁上消化下來制成細胞懸液。將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中，置于細胞培養(yǎng)箱中，控制合適的溫度、濕度、氣體環(huán)境等條件進行培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中要定期觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)，適時進行傳代培養(yǎng)。22.常用方法及原理：鹽析法，利用不同蛋白質(zhì)在不同鹽濃度下溶解度不同進行分離；透析法，通過半透膜除去小分子雜質(zhì)；離子交換層析，根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷與離子交換樹脂結(jié)合能力不同分離；凝膠過濾層析，依據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同在凝膠柱中移動速度不同分離；親和層析，利用蛋白質(zhì)與配體特異性結(jié)合特性分離。23.保證核酸提取質(zhì)量：選擇合適的樣本類型和處理方法，避免核酸降解。采用合適的核酸提取試劑盒，嚴格按照操作步驟進行。提取過程中注意控制溫度、pH值等條件。提取后通過電泳、分光光度計等方法檢測核酸的完整性和純度，確保A260/A280在1.8-2.0之間，A260/A230大于2.0。24.這些異常高表達的基因可能是該疾病的致病基因或參與了疾病發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵過程。進一步驗證可采用RNA干擾技術(shù)抑制這些基因表達，觀察疾病相關(guān)表型是否改善；構(gòu)建基因過表達載體，導入細胞或動物模型，觀察是否出現(xiàn)類似疾病的癥狀；進行基因敲除實驗，在動物模型中驗證基因功能。25.實驗