2026年生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)范試題一、單選題（每題2分，共20題）說(shuō)明：下列每題只有一個(gè)正確答案。1.在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，若培養(yǎng)基pH值持續(xù)偏高（>7.4），可能的原因是？A.CO?濃度過(guò)高B.培養(yǎng)基中碳酸氫鈉含量不足C.溫度過(guò)低D.細(xì)胞代謝過(guò)快2.高效液相色譜（HPLC）分析中，若檢測(cè)到基線漂移，最可能的原因是？A.色譜柱老化B.流動(dòng)相pH值不穩(wěn)定C.檢測(cè)器未校準(zhǔn)D.進(jìn)樣器堵塞3.實(shí)驗(yàn)室中處理含氯廢液時(shí)，應(yīng)使用的化學(xué)試劑是？A.硫代硫酸鈉（Na?S?O?）B.氫氧化鈉（NaOH）C.硫酸（H?SO?）D.乙酸（CH?COOH）4.電鏡樣品制備過(guò)程中，干燥處理的目的是？A.減少樣品變形B.增加樣品導(dǎo)電性C.殺滅微生物D.提高樣品透明度5.實(shí)驗(yàn)室冰箱應(yīng)定期清潔消毒，主要目的是？A.防止溫度波動(dòng)B.消除細(xì)菌污染C.延長(zhǎng)壓縮機(jī)壽命D.降低能耗6.WesternBlot實(shí)驗(yàn)中，若條帶模糊，可能的原因是？A.抗體濃度過(guò)高B.轉(zhuǎn)膜不充分C.電泳電壓過(guò)低D.激光強(qiáng)度過(guò)大7.實(shí)驗(yàn)室中使用移液器時(shí)，若吸取不準(zhǔn)確，可能的原因是？A.移液器未歸零B.吸頭未完全密封C.吸取速度過(guò)快D.空氣濕度影響8.PCR實(shí)驗(yàn)中，若擴(kuò)增效率低，可能的原因是？A.引物二聚體形成B.DNA模板濃度過(guò)高C.循環(huán)數(shù)設(shè)置過(guò)多D.退火溫度過(guò)低9.實(shí)驗(yàn)室中儲(chǔ)存液氮的鋼瓶應(yīng)放置在？A.陽(yáng)光直射處B.通風(fēng)良好的陰涼處C.金屬容器內(nèi)D.低溫冷凍柜中10.血液樣本采集后，若未立即處理，應(yīng)置于？A.室溫臺(tái)面B.4℃冰箱C.沸水中D.37℃水浴中二、多選題（每題3分，共10題）說(shuō)明：下列每題有多個(gè)正確答案。1.實(shí)驗(yàn)室生物安全柜的使用規(guī)范包括？A.操作前檢查紫外燈是否正常B.禁止在柜內(nèi)進(jìn)行明火操作C.定期更換HEPA濾網(wǎng)D.手部消毒后才能接觸樣品2.電鏡樣品固定液的主要成分有？A.甲醇B.丙酮C.戊二醛D.甲醛3.實(shí)驗(yàn)室廢棄物分類應(yīng)包括？A.化學(xué)廢液B.生物醫(yī)療廢物C.廢棄玻璃器皿D.廢棄移液器吸頭4.實(shí)驗(yàn)室中使用電子天平時(shí)，需注意？A.稱量前調(diào)零B.防止氣流干擾C.快速稱量以節(jié)省時(shí)間D.保持干燥清潔5.WesternBlot實(shí)驗(yàn)中，若條帶出現(xiàn)拖尾，可能的原因是？A.蛋白質(zhì)降解B.抗體濃度過(guò)高C.電泳緩沖液pH值不當(dāng)D.蛋白質(zhì)過(guò)載6.實(shí)驗(yàn)室中儲(chǔ)存試劑的原則包括？A.密閉保存B.遠(yuǎn)離熱源C.按有效期先后使用D.標(biāo)簽清晰7.電鏡樣品制備中，脫水處理的目的是？A.替代細(xì)胞內(nèi)水分B.防止樣品收縮C.提高導(dǎo)電性D.增強(qiáng)樣品硬度8.實(shí)驗(yàn)室中處理銳器廢棄物應(yīng)使用？A.防刺穿容器B.消毒液浸泡C.直接丟棄D.壓實(shí)后焚燒9.PCR實(shí)驗(yàn)中，若出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增，可能的原因是？A.引物設(shè)計(jì)不合理B.DNA模板純度低C.循環(huán)數(shù)設(shè)置過(guò)高D.退火溫度過(guò)高10.實(shí)驗(yàn)室中儲(chǔ)存血清應(yīng)避免？A.重復(fù)凍融B.直接接觸金屬容器C.長(zhǎng)期暴露于室溫D.使用未消毒的吸管三、判斷題（每題2分，共15題）說(shuō)明：下列每題判斷對(duì)錯(cuò)。1.實(shí)驗(yàn)室中使用酒精燈時(shí)，可以用另一只酒精燈點(diǎn)燃。（×）2.高效液相色譜（HPLC）分析中，流動(dòng)相需每天脫氣。（√）3.電鏡樣品制備中，干燥處理只能使用自然風(fēng)干。（×）4.實(shí)驗(yàn)室中含氯廢液可直接倒入下水道。（×）5.WesternBlot實(shí)驗(yàn)中，封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致背景增強(qiáng)。（√）6.移液器吸取液體時(shí)，應(yīng)緩慢推拉活塞。（√）7.PCR實(shí)驗(yàn)中，DNA模板濃度越高越好。（×）8.實(shí)驗(yàn)室中儲(chǔ)存液氮的鋼瓶蓋應(yīng)擰緊。（√）9.血液樣本采集后，若未立即處理，會(huì)導(dǎo)致凝血反應(yīng)加速。（√）10.電鏡樣品制備中，固定液濃度越高越好。（×）11.實(shí)驗(yàn)室廢棄物可隨意混放。（×）12.實(shí)驗(yàn)室中使用電子天平時(shí)，需佩戴防靜電手套。（√）13.WesternBlot實(shí)驗(yàn)中，抗體濃度越高越好。（×）14.PCR實(shí)驗(yàn)中，引物二聚體形成會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增效率降低。（√）15.實(shí)驗(yàn)室中儲(chǔ)存血清可重復(fù)凍融多次。（×）四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共5題）說(shuō)明：根據(jù)要求簡(jiǎn)要回答問(wèn)題。1.簡(jiǎn)述高效液相色譜（HPLC）分析中，流動(dòng)相pH值選擇的原則。2.解釋電鏡樣品制備中，脫水處理的必要性。3.列舉WesternBlot實(shí)驗(yàn)中，提高條帶亮度的3種方法。4.說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室中處理銳器廢棄物時(shí)，需遵循的3項(xiàng)安全原則。5.描述PCR實(shí)驗(yàn)中，引物設(shè)計(jì)的關(guān)鍵要點(diǎn)。五、論述題（每題10分，共2題）說(shuō)明：根據(jù)要求詳細(xì)回答問(wèn)題。1.結(jié)合實(shí)際案例，論述實(shí)驗(yàn)室生物安全柜的正確使用步驟及常見(jiàn)錯(cuò)誤操作。2.分析電鏡樣品制備過(guò)程中，每個(gè)步驟對(duì)最終成像質(zhì)量的影響，并提出優(yōu)化建議。答案與解析一、單選題答案1.B2.B3.A4.B5.B6.B7.B8.D9.B10.B解析：1.培養(yǎng)基pH值偏高通常因碳酸氫鈉含量不足，無(wú)法有效緩沖CO?影響。8.PCR擴(kuò)增效率低常因退火溫度過(guò)低導(dǎo)致非特異性結(jié)合。二、多選題答案1.B,C,D2.C,D3.A,B,C,D4.A,B,D5.A,B,C6.A,B,C,D7.A,B,D8.A,B,D9.A,B,D10.A,B,C,D解析：3.實(shí)驗(yàn)室廢棄物需分類處理，包括化學(xué)、生物、玻璃、塑料等。10.血清儲(chǔ)存應(yīng)避免反復(fù)凍融、金屬污染、高溫及直接接觸吸管。三、判斷題答案1.×2.√3.×4.×5.√6.√7.×8.√9.√10.×11.×12.√13.×14.√15.×解析：3.干燥處理可使用臨界點(diǎn)干燥或乙醇梯度法，非僅自然風(fēng)干。15.血清反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，應(yīng)盡量避免。四、簡(jiǎn)答題答案1.HPLC流動(dòng)相pH值選擇原則：-應(yīng)與待測(cè)物及色譜柱兼容（如酸性物質(zhì)用pH<7的緩沖液，堿性物質(zhì)用pH>7的緩沖液）。-避免pH值過(guò)高導(dǎo)致柱效下降或檢測(cè)器漂移。-使用適當(dāng)緩沖液（如磷酸鹽、醋酸鹽）維持穩(wěn)定。2.電鏡樣品脫水必要性：-替代細(xì)胞內(nèi)水分，防止樣品收縮變形。-提高樣品導(dǎo)電性，利于電子束穿透。-防止有機(jī)溶劑腐蝕樣品。3.提高WesternBlot條帶亮度的方法：-優(yōu)化抗體濃度（1-2μg/mL為宜）。-延長(zhǎng)孵育時(shí)間（抗體孵育1-2h）。-使用增強(qiáng)型ECL底物。4.處理銳器安全原則：-使用防刺穿容器（如利器盒）。-避免用手直接接觸銳器。-定期檢查容器是否滿載。5.PCR引物設(shè)計(jì)要點(diǎn)：-Tm值（退火溫度）在55-65℃為宜。-避免引物內(nèi)部互補(bǔ)或形成二聚體。-針對(duì)特異性靶序列設(shè)計(jì)。五、論述題答案1.生物安全柜使用及錯(cuò)誤操作：-正確步驟：開(kāi)機(jī)預(yù)冷→打開(kāi)前/后窗（單向流）→放置無(wú)菌耗材→操作→關(guān)閉窗口→紫外滅菌（30min）→排氣。-常見(jiàn)錯(cuò)誤：操作時(shí)關(guān)閉前窗、在