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文檔簡介
2026年微生物檢驗技術(shù)中級職稱考試題庫及答案1.【單項選擇】某腹瀉患兒糞便標(biāo)本直接涂片,革蘭染色鏡檢見大量革蘭陰性、彎曲呈海鷗狀或S形桿菌,最可能的病原體是A.霍亂弧菌B.空腸彎曲菌C.大腸埃希菌D.沙門菌E.志賀菌答案:B解析:空腸彎曲菌典型形態(tài)為“海鷗狀”或“S形”,革蘭陰性,微需氧,42℃生長良好,是嬰幼兒急性腸炎的重要病原。2.【單項選擇】關(guān)于艱難梭菌毒素檢測,下列敘述正確的是A.細胞毒性試驗陽性即可確診,無需核酸檢測B.谷氨酸脫氫酶(GDH)陽性即可報告產(chǎn)毒株C.毒素A/BEIA檢測靈敏度高于PCRD.兩步法推薦先篩查GDH+毒素EIA,再對discrepant標(biāo)本做核酸擴增E.培養(yǎng)后做藥敏試驗是常規(guī)報告內(nèi)容答案:D解析:GDH高度敏感但缺乏特異性;毒素EIA特異性高但靈敏度低;兩步法可兼顧成本與準(zhǔn)確性,discrepant標(biāo)本用核酸擴增確認(rèn)。3.【單項選擇】在血培養(yǎng)瓶中檢測到革蘭陽性球菌,觸酶陰性、PYR陽性、6.5%NaCl不生長,CAMP試驗陰性,最可能為A.金黃色葡萄球菌B.腐生葡萄球菌C.無乳鏈球菌D.化膿鏈球菌E.糞腸球菌答案:D解析:化膿鏈球菌(A群)PYR陽性、CAMP陰性、6.5%NaCl不生長,對桿菌肽敏感;無乳鏈球菌(B群)CAMP陽性;腸球菌耐鹽。4.【單項選擇】某患者支氣管肺泡灌洗液經(jīng)氫氧化鉀處理,鏡下見寬大、無隔、直角分枝的菌絲,最可能的病原是A.曲霉B.毛霉C.青霉D.組織胞漿菌E.念珠菌答案:B解析:毛霉目真菌菌絲寬大(7–15μm)、無隔、直角分枝,KOH壓片即可見;曲霉菌絲較窄、有隔、銳角分枝。5.【單項選擇】下列哪種病毒最適合用膠體金免疫層析法做床旁檢測A.乙腦病毒B.諾如病毒C.登革病毒NS1抗原D.新冠病毒中和抗體E.巨細胞病毒pp65答案:C解析:登革NS1抗原在急性期血清中濃度高,膠體金法15min出結(jié)果,適合基層;諾如抗原糞便中含量低,靈敏度不足;中和抗體需細胞實驗。6.【單項選擇】關(guān)于質(zhì)粒介導(dǎo)的碳青霉烯酶,下列組合正確的是A.KPC-2屬于金屬酶,EDTA可抑制B.NDM-1屬于絲氨酸酶,阿維巴坦可抑制C.OXA-48屬于絲氨酸酶,氯唑西林可抑制D.IMP-4屬于絲氨酸酶,克拉維酸可抑制E.VIM-2屬于絲氨酸酶,EDTA不能抑制答案:C解析:OXA-48屬D類絲氨酸酶,氯唑西林紙片增強試驗陽性;KPC、NDM、IMP、VIM分屬A類或B類;金屬酶需EDTA抑制。7.【單項選擇】某醫(yī)院開展艱難梭菌院內(nèi)監(jiān)測,下列哪項環(huán)境標(biāo)本的陽性率對預(yù)測臨床病例價值最低A.病房床欄B.衛(wèi)生間水龍頭C.醫(yī)護人員手掌D.治療室空氣(暴露5min)E.電子體溫計表面答案:D解析:艱難梭菌以接觸傳播為主,空氣培養(yǎng)陽性率低,與發(fā)病相關(guān)性差;高頻接觸物體表面陽性率高。8.【單項選擇】在自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)報警陽性后,直接涂片革蘭染色見酵母樣菌,下一步優(yōu)先采用的快速鑒定試驗是A.尿素酶試驗B.芽管試驗C.糖同化試驗D.科瑪嘉顯色培養(yǎng)基E.放線菌酮耐受試驗答案:B解析:芽管試驗30min可區(qū)分白色念珠菌(陽性)與非白色念珠菌,指導(dǎo)早期用藥;顯色培養(yǎng)需24h。9.【單項選擇】下列哪項不是細菌外膜囊泡(OMV)的功能A.傳遞耐藥基因B.介導(dǎo)宿主免疫調(diào)節(jié)C.作為疫苗候選抗原D.參與生物被膜形成E.提供ATP合成場所答案:E解析:OMV不含ATP合酶系統(tǒng),能量代謝依賴菌體;其余均為已證實的功能。10.【單項選擇】關(guān)于MALDI-TOFMS鑒定分枝桿菌,下列敘述正確的是A.可直接用固體培養(yǎng)基菌落,無需滅活B.需用乙醇–甲酸法提取蛋白,降低生物危害C.無法區(qū)分結(jié)核復(fù)合群至種水平D.對卡介苗(BCG)鑒定失敗率高E.數(shù)據(jù)庫不含非結(jié)核分枝桿菌答案:B解析:分枝桿菌需化學(xué)滅活提取蛋白,保證安全;現(xiàn)代數(shù)據(jù)庫已覆蓋常見NTM;BCG可被準(zhǔn)確識別。11.【單項選擇】某患兒發(fā)熱,腦脊液常規(guī)WBC800×10?/L,糖1.8mmol/L,革蘭染色見革蘭陽性、矛頭狀成雙排列球菌,最可能的病原是A.無乳鏈球菌B.肺炎鏈球菌C.單核增生李斯特菌D.流感嗜血桿菌E.腦膜炎奈瑟菌答案:B解析:肺炎鏈球菌典型矛頭狀、革蘭陽性、成雙;糖顯著降低;無乳鏈球菌呈鏈狀;李斯特菌為短桿。12.【單項選擇】下列哪種方法最適合快速篩查產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBL)大腸埃希菌A.頭孢西丁紙片B.頭孢噻肟–克拉維酸雙紙片協(xié)同C.苯唑西林紙片D.高濃度慶大霉素紙片E.呋喃妥因紙片答案:B解析:頭孢噻肟±克拉維酸雙紙片法為CLSI推薦ESBL表型確證試驗;頭孢西丁篩查AmpC。13.【單項選擇】關(guān)于幽門螺桿菌表型鑒定,下列哪項試驗最具特異性A.快速尿素酶B.氧化酶C.觸酶D.42℃生長E.馬尿酸水解答案:A解析:幽門螺桿菌產(chǎn)生大量尿素酶,陽性率>95%,且可在胃活檢現(xiàn)場完成;其他試驗非特異。14.【單項選擇】某患者尿液培養(yǎng)出革蘭陰性桿菌,吲哚陽性,甲基紅陽性,VP陰性,枸櫞酸鹽陰性,最可能為A.奇異變形桿菌B.普通變形桿菌C.大腸埃希菌D.克雷伯菌E.腸桿菌答案:C解析:IMViC為++––,典型大腸埃希菌;變形桿菌吲哚陰性或延遲陽性,枸櫞酸鹽多陽性。15.【單項選擇】在VITEK2Compact系統(tǒng)中,檢測誘導(dǎo)型克林霉素耐藥(iMLS_B)的試驗是A.D-試驗B.頭孢西丁篩選C.苯唑西林MICD.紅霉素–克林霉素雙孔E.高濃度mupirocin答案:D解析:儀器通過紅霉素孔誘導(dǎo)克林霉素孔,若克林霉素MIC升高即提示iMLS_B;D-試驗為紙片法。16.【單項選擇】某患者持續(xù)低熱,血清肥達試驗O1:160、H1:320,PA陰性,PB陰性,最可能診斷為A.傷寒B.副傷寒甲C.副傷寒乙D.回憶反應(yīng)E.交叉反應(yīng)答案:A解析:O≥1:80、H≥1:160且PA/PB陰性提示傷寒;副傷寒對應(yīng)H抗體陽性。17.【單項選擇】下列哪項不是病毒細胞培養(yǎng)的典型CPE表現(xiàn)A.細胞圓縮、散落B.合胞體形成C.胞漿內(nèi)包涵體D.菌落溶血環(huán)E.細胞拉網(wǎng)、拉絲答案:D解析:溶血環(huán)為細菌特征;其余均為病毒CPE。18.【單項選擇】關(guān)于環(huán)介導(dǎo)等溫擴增(LAMP),下列敘述錯誤的是A.需4條特異性引物B.擴增產(chǎn)物為梯狀條帶C.可用羥基萘酚藍目視判讀D.對抑制物耐受性低于PCRE.恒溫65℃左右完成答案:D解析:LAMP對血、尿抑制物耐受性高于常規(guī)PCR;目視法無需電泳。19.【單項選擇】某醫(yī)院對手術(shù)部位感染進行目標(biāo)性監(jiān)測,下列哪項數(shù)據(jù)屬于發(fā)病率密度A.感染例數(shù)/出院人數(shù)×100B.感染例數(shù)/手術(shù)臺次×100C.感染例數(shù)/1000住院日D.感染例數(shù)/1000導(dǎo)管日E.感染例數(shù)/1000手術(shù)小時答案:E解析:手術(shù)部位感染率密度以手術(shù)小時為分母,校正手術(shù)時長差異;導(dǎo)管相關(guān)感染用導(dǎo)管日。20.【單項選擇】某菌株經(jīng)微量肉湯稀釋法測得萬古霉素MIC8μg/mL,推測其耐藥機制為A.vanAB.vanBC.vanCD.vanDE.vanE答案:A解析:vanA型可誘導(dǎo)高水平耐藥(MIC≥8μg/mL);vanB多為中介或低水平;vanC為固有低水平。21.【單項選擇】下列哪項不是真菌1,3-β-D-葡聚糖檢測(G試驗)假陽性原因A.輸注白蛋白B.使用纖維素膜透析C.靜脈給予阿莫西林–克拉維酸D.標(biāo)本接觸紗布E.念珠菌血癥答案:E解析:念珠菌血癥為真陽性;其余均可因葡聚糖污染致假陽性。22.【單項選擇】關(guān)于噬菌體治療,下列敘述正確的是A.裂解性噬菌體可傳遞耐藥基因B.需做藥敏試驗匹配抗生素C.對生物被膜無效D.可聯(lián)合抗生素增強療效E.宿主范圍寬,無需鑒定病原答案:D解析:噬菌體與抗生素聯(lián)用可協(xié)同破壞被膜;裂解性噬菌體一般不介導(dǎo)耐藥;需精準(zhǔn)匹配宿主菌。23.【單項選擇】某實驗室開展CARB-X項目,需建立耐碳青霉烯類腸桿菌(CRE)主動篩查,首選標(biāo)本為A.咽拭子B.肛周/直腸拭子C.鼻腔拭子D.腋窩拭子E.傷口分泌物答案:B解析:腸道定植為CRE主要儲庫;直腸拭子靈敏度最高;鼻腔對金葡菌篩查有意義。24.【單項選擇】下列哪項不是細菌基因水平轉(zhuǎn)移方式A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導(dǎo)C.接合D.溶原轉(zhuǎn)換E.點突變答案:E解析:點突變?yōu)榇怪边M化;其余均為水平基因轉(zhuǎn)移。25.【單項選擇】某菌株經(jīng)mCIM試驗陽性,提示其產(chǎn)A.ESBLB.AmpCC.碳青霉烯酶D.甲氧西林酶E.氨基糖苷修飾酶答案:C解析:mCIM(modifiedcarbapeneminactivationmethod)為CLSI推薦碳青霉烯酶表型確證;陽性提示產(chǎn)酶。26.【單項選擇】某患者痰標(biāo)本培養(yǎng)出光滑型白色菌落,尿素酶強陽性,42℃生長,可同化葡萄糖、乳糖,不能同化硝酸鹽,最可能為A.白色念珠菌B.熱帶念珠菌C.克柔念珠菌D.光滑念珠菌E.葡萄牙念珠菌答案:D解析:光滑念珠菌尿素酶強陽性,42℃生長,糖同化特征符合;葡萄牙念珠菌尿素酶陰性。27.【單項選擇】關(guān)于宏基因組測序(mNGS)在腦脊液中的應(yīng)用,下列哪項說法正確A.需先培養(yǎng)富集B.可檢測RNA病毒無需反轉(zhuǎn)錄C.對結(jié)核分枝桿菌靈敏度低于涂片D.可發(fā)現(xiàn)新發(fā)病原體E.人源宿主核酸占比<1%答案:D解析:mNGS無需培養(yǎng),可發(fā)現(xiàn)未知病原;RNA病毒需先反轉(zhuǎn)錄;結(jié)核靈敏度高于涂片;人源核酸常>90%。28.【單項選擇】下列哪項不是布魯菌實驗室獲得性感染的高危操作A.涂片火焰固定B.打開培養(yǎng)皿挑取菌落C.離心后開蓋D.玻片凝集試驗E.超聲破碎菌懸液答案:D解析:玻片凝集使用滅活抗原,風(fēng)險低;其余均可產(chǎn)生氣溶膠;布魯菌為二類病原。29.【單項選擇】某醫(yī)院對ICU患者進行肛周篩查,發(fā)現(xiàn)一株肺炎克雷伯菌,厄他培南MIC>8μg/mL,亞胺培南MIC2μg/mL,最可能機制為A.產(chǎn)KPC-2B.產(chǎn)IMP-4C.產(chǎn)OXA-48D.產(chǎn)CTX-M-15E.產(chǎn)AmpC+孔道缺失答案:C解析:OXA-48對亞胺培南水解活性低,MIC?!?μg/mL,而對厄他培南顯著升高;KPC/IMP對兩藥均高。30.【單項選擇】某菌株經(jīng)E-test測得MIC值,頭孢他啶–阿維巴坦0.25μg/mL,頭孢他啶>256μg/mL,提示A.產(chǎn)金屬酶B.產(chǎn)KPCC.產(chǎn)AmpCD.產(chǎn)OXA-48E.孔道蛋白缺失答案:B解析:阿維巴坦可抑制KPC,恢復(fù)頭孢他啶活性;金屬酶需氨曲南–阿維巴坦組合;OXA-48對阿維巴坦不敏感。31.【多項選擇】下列哪些試驗可用于區(qū)分金黃色葡萄球菌與凝固酶陰性葡萄球菌(CoNS)A.試管凝固酶B.乳膠凝集PBP2aC.耐熱核酸酶D.溶血素基因PCRE.兔血漿纖維蛋白原凝集答案:A、C、E解析:試管凝固酶、耐熱核酸酶、纖維蛋白原凝集(slidecoagulase)均針對金葡菌;PBP2a檢測MRSA;溶血素基因非特異。32.【多項選擇】關(guān)于諾如病毒實驗室診斷,下列說法正確A.電鏡可直接觀察病毒顆粒B.RT-qPCR為參考方法C.抗原檢測靈敏度高于PCRD.環(huán)境拭子可用RT-qPCR監(jiān)測污染E.標(biāo)本需?70℃長期保存答案:A、B、D、E解析:抗原檢測靈敏度僅50–70%,低于PCR;其余均正確。33.【多項選擇】下列哪些屬于真菌雙相型轉(zhuǎn)換A.組織胞漿菌37℃為酵母相B.球孢子菌室溫為絲狀相C.芽生菌37℃為絲狀相D.馬爾尼菲籃狀菌37℃為酵母相E.副球孢子菌室溫為酵母相答案:A、B、D解析:芽生菌37℃為酵母相;副球孢子菌室溫為絲狀相,37℃為酵母相。34.【多項選擇】可導(dǎo)致G試驗假陰性的因素包括A.近平滑念珠菌感染B.標(biāo)本溶血C.使用抗真菌藥D.標(biāo)本儲存于室溫>6hE.隱球菌感染答案:A、B、C、D解析:隱球菌具厚莢膜,葡聚糖暴露少,可致假陰性;其余為常見假陰性原因。35.【多項選擇】下列哪些屬于CLSI規(guī)定的ESBL表型確證試驗A.頭孢噻肟–克拉維酸雙紙片協(xié)同B.頭孢他啶–克拉維酸MIC測定C.阿莫西林–克拉維酸紙片D.頭孢曲松–克拉維酸E-testE.頭孢吡肟–硼酸紙片答案:A、B、D解析:CLSI僅認(rèn)可頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢曲松±克拉維酸;硼酸用于AmpC。36.【多項選擇】關(guān)于結(jié)核分枝桿菌耐藥基因檢測,下列哪些突變與耐利福平相關(guān)A.rpoBS450LB.rpoBH445YC.katGS315TD.inhA-15位E.rpoBD435V答案:A、B、E解析:rpoB507–533核心區(qū)間突變致利福平耐藥;katG、inhA與異煙肼相關(guān)。37.【多項選擇】下列哪些病毒可在Vero細胞產(chǎn)生典型CPEA.寨卡病毒B.登革病毒C.基孔肯雅病毒D.狂犬病毒E.埃博拉病毒答案:A、C、D、E解析:登革病毒需C6/36蚊細胞,Vero不敏感;其余可產(chǎn)生CPE。38.【多項選擇】可導(dǎo)致血培養(yǎng)假陽性的因素包括A.采血前未消毒瓶蓋B.長期使用靜脈脂肪乳C.標(biāo)本冷藏>2hD.皮膚凝固酶陰性菌污染E.使用含溶血素培養(yǎng)瓶答案:A、B、D解析:冷藏降低陽性率;溶血素瓶用于真菌/分枝桿菌,不導(dǎo)致假陽性。39.【多項選擇】下列哪些屬于真菌生物被膜體外模型A.96孔微量板B.CalgarybiofilmdeviceC.離體中央靜脈導(dǎo)管段D.大蠟螟幼蟲E.靜態(tài)玻璃珠柱答案:A、B、C、E解析:大蠟螟為體內(nèi)模型;其余均為體外。40.【多項選擇】關(guān)于噬菌體尾蛋白受體結(jié)合域(RBP)改造,下列目的可行A.擴大宿主譜B.降低免疫原性C.增強被膜穿透D.逃避細菌CRISPRE.提高溫度穩(wěn)定性答案:A、B、C解析:RBP改造直接決定宿主識別;CRISPR針對核酸;溫度穩(wěn)定性與衣殼蛋白相關(guān)。41.【判斷題】耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的mecA基因位于轉(zhuǎn)座子Tn554。答案:錯誤解析:mecA位于葡萄球菌盒式染色體mec(SCCmec),非Tn554;Tn554攜帶ermA。42.【判斷題】馬爾尼菲籃狀菌在SDA25℃培養(yǎng)呈紅色素擴散,可做為鑒定特征。答案:正確解析:室溫絲狀相產(chǎn)生可溶性紅色色素,擴散至培養(yǎng)基,為典型特征。43.【判斷題】EB病毒VCA-IgM抗體陽性即可診斷傳染性單核細胞增多癥,無需檢測EBNA。答案:錯誤解析:VCA-IgM可交叉反應(yīng);需結(jié)合EBNA-IgG區(qū)分急性與既往感染。44.【判斷題】使用質(zhì)譜鑒定曲霉時,需用甲酸乙腈提取蛋白以降低菌絲多糖干擾。答案:正確解析:曲霉細胞壁含大量多糖,直接點樣抑制離子化;提取法可提高成功率。45.【判斷題】產(chǎn)氣莢膜梭菌在牛奶培養(yǎng)基中呈“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象,是由于產(chǎn)膠原酶。答案:錯誤解析:洶涌發(fā)酵由α毒素(卵磷脂酶)分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣;膠原酶為κ毒素,不導(dǎo)致該現(xiàn)象。46.【判斷題】結(jié)核分枝桿菌GeneXpertMTB/RIF系統(tǒng)可同時檢測異煙肼耐藥。答案:錯誤解析:Xpert僅檢測rpoB利福平耐藥;異煙肼需Ultra或加做lineprobe。47.【判斷題】在CLSI文件中,對糞腸球菌氨芐西林敏感即可推斷對哌拉西林–他唑巴坦敏感。答案:錯誤解析:腸球菌對酶抑制劑復(fù)方不敏感,氨芐西林結(jié)果不能外推。48.【判斷題】白念珠菌SC5314為常用實驗室參考株,其MLST型為Clade1。答案:正確解析:SC5314為最早測序株,MLST屬Clade1,廣泛用于抗真菌藥敏質(zhì)控。49.【判斷題】諾卡菌革蘭染色陽性,改良抗酸染色部分陽性,需與結(jié)核分枝桿菌鑒別。答案:正確解析:諾卡菌弱抗酸,常呈部分陽性;結(jié)核強抗酸;二者臨床表現(xiàn)相似。50.【判斷題】使用BDBACTEC9240系統(tǒng),真菌血流感染平均報警時間通常<15h。答案:錯誤解析:真菌生長慢,平均報警24–48h;<15h多見于細菌。51.【填空題】CLSI規(guī)定,對大腸埃希菌ATCC25922,頭孢他啶紙片(30μg)抑菌圈直徑質(zhì)控范圍為____~____mm。答案:25~3252.【填空題】結(jié)核分枝桿菌rpoB基因發(fā)生____密碼子突變時,利福平耐藥率最高。答案:S450W53.【填空題】在真菌藥敏試驗中,____抗真菌藥物屬于棘白菌素類,通過抑制1,3-β-葡聚糖合成起效。答案:卡泊芬凈54.【填空題】產(chǎn)NDM-1菌株對____單藥天然耐藥,因其為金屬酶,不受阿維巴坦抑制。答案:氨曲南55.【填空題】用于病毒RNA保存的____試劑含硫氰酸胍,可裂解蛋白并抑制RNase。答案:TRIzol56.【填空題】在血培養(yǎng)陰性報房前,需持續(xù)培養(yǎng)____天,以滿足CLSI對HACEK生長緩慢菌的要求。答案:557.【填空題】白念珠菌____基因突變可導(dǎo)致氟康唑耐藥,其編碼14α-去甲基化酶。答案:ERG1158.【填空題】噬菌體治療中,____宿主范圍指一株噬菌體能裂解不同種屬細菌的能力。答案:廣譜59.【填空題】在布魯菌血清凝集試驗中,抗體滴度≥____被認(rèn)為具有診斷意義。答案:1:16060.【填空題】用于檢測艱難梭菌毒素的____細胞系對毒素B敏感,呈細胞病變效應(yīng)。答案:Vero61.【簡答題】簡述質(zhì)譜MALDI-TOFMS鑒定細菌時,常見失敗原因及改進措施。答案:1.菌量不足或過度:菌膜<1mm或>5mm均致譜圖弱;應(yīng)挑取單菌落均勻涂靶。2.鹽離子干擾:血平板殘留瓊脂糖鹽,需用70%乙醇–甲酸提取。3.多糖莢膜:肺炎鏈球菌、克雷伯菌需加甲酸裂解。4.蛋白數(shù)據(jù)庫缺失:罕見菌未收錄,需補充本地庫或16SrRNA測序。5.混合菌:應(yīng)分純再測;若無法分純,用生物信息學(xué)解譜。6.儀器校準(zhǔn)偏移:每日用大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn),質(zhì)量軸偏差<200ppm。62.【簡答題】說明結(jié)核分枝桿菌GeneXpertUltra與傳統(tǒng)Xpert的差異。答案:Ultra采用更大反應(yīng)室、雙靶標(biāo)(rpoB及IS1081)及全基因組內(nèi)參,檢測限降至16CFU/mL(Xpert為114CFU/mL);新增mpt64缺失探針,可識別M.tuberculosis復(fù)合群非結(jié)核成員;對利福平耐藥檢測增加“極低”類別,減少假耐藥;對涂片陰性/培養(yǎng)陽性標(biāo)本靈敏度提高8%;可檢測異煙肼耐藥(需加探針);耗材兼容現(xiàn)有模塊,運行時間仍為90min。63.【簡答題】列舉三種非培養(yǎng)法檢測真菌藥敏的技術(shù),并比較其優(yōu)缺點。答案:1.EUCAST微量色氨酸肉湯稀釋:與CLSI一致,耗時24h,需肉眼判讀,成本低,但需嚴(yán)格無菌。2.流式細胞術(shù):2h完成,基于AnnexinV標(biāo)記凋亡,快速,但設(shè)備昂貴,對曲霉孢子聚集敏感。3.時間殺傷曲線:動態(tài)測CFU,可獲殺菌/抑菌曲線,數(shù)據(jù)豐富,操作繁瑣,需生物安全柜。4.熒光探針Resazurin:20h出結(jié)果,顏色判讀直觀,受培養(yǎng)基pH影響。5.mRNA實時RT-PCR:檢測ERG11表達變化,6h完成,反映早期應(yīng)激,但需提取RNA,技術(shù)門檻高。64.【簡答題】闡述CRE主動篩查的實驗室流程及報告策略。答案:1.標(biāo)本采集:直腸拭子或大便,無菌運輸,4h內(nèi)處理。2.增菌:置10mL胰酪大豆肉湯+1μg/mL厄他培南,35℃18h。3.接種:取100μL涂于麥康凱+厄他培寧(1μg/mL)平板,35℃18h。4.初篩:挑取不發(fā)酵乳糖、無色小菌落,做氧化酶、吲哚、科瑪嘉CRE顯色。5.確證:MALDI-TOF鑒定到種,做mCIM及CarbaNP,陽性報“疑似產(chǎn)碳青霉烯酶”。6.基因型:加做XpertCarba-R或NGS,區(qū)分KPC/NDM/OXA-48。7.報告:初篩陽性先電話通知感控,標(biāo)注“定植非感染”;48h內(nèi)補充基因型;建議接觸隔離。65.【簡答題】說明病毒CPE定量評分方法及其在抗病毒藥敏中的應(yīng)用。答案:常用Reed-Muench法或Karber法計算TCID50。將病毒做10倍系列稀釋,接種96孔細胞板,每稀釋度8孔,35℃培養(yǎng)5–7天,記錄每孔CPE。按公式:TCID50=10^(log10最高稀釋度?(累計陽性率?0.5)×log10稀釋系數(shù))。藥物試驗中,將藥物做2倍稀釋,每孔含100TCID50病毒,培養(yǎng)后觀察CPE,用Reed法計算EC50。替代方法可用MTT或中性紅染色,酶標(biāo)儀測OD,用GraphPadPrism擬合四參數(shù)曲線,得EC50、CC50及選擇指數(shù)SI=CC50/EC50。66.【簡答題】解釋何為“分子鐘”及其在暴發(fā)溯源中的作用。答案:分子鐘指基因組隨機突變以相對恒定速率積累,可用SNP數(shù)目除以時間得突變率。暴發(fā)調(diào)查中,對分離株做全基因組測序,構(gòu)建最大似然樹,計算成對SNP距離。若分離時間差Δt與SNP差Δs呈線性,斜率即分子鐘速率。若某病例株與參考株SNP差異顯著小于預(yù)期,提示同屬一次暴發(fā);若差異大且分散,則排除關(guān)聯(lián)。結(jié)合流行病學(xué),可推斷傳播鏈及共同暴露時間窗。67.【簡答題】描述實驗室如何開展一項新型β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的藥敏折點建立。答案:1.收集菌株:納入≥1000株野生型及≥300株產(chǎn)酶株,覆蓋全球地理分布。2.MIC測定:采用微量肉
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