2025年大學(xué)生物科學(xué)（生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)）試題及答案

（考試時(shí)間：90分鐘滿分100分）班級(jí)______姓名______第I卷（選擇題共30分）答題要求：本卷共10小題，每小題3分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。請(qǐng)將正確答案的序號(hào)填在括號(hào)內(nèi)。1.下列關(guān)于生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)中常用儀器的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）A.顯微鏡的目鏡越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越大B.離心機(jī)可用于分離細(xì)胞和細(xì)胞器等C.移液器能精確移取一定體積的液體D.培養(yǎng)箱可提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的適宜條件2.以下哪種染色劑常用于觀察細(xì)胞中的DNA（）A.蘇丹Ⅲ染液B.甲基綠染液C.健那綠染液D.吡羅紅染液3.在蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)中，常用的緩沖液成分不包括（）A.氯化鈉B.氫氧化鈉C.磷酸二氫鈉D.甘氨酸4.關(guān)于PCR技術(shù)，下列敘述正確的是（）A.需要解旋酶解開(kāi)DNA雙鏈B.反應(yīng)體系中需要加入核糖核苷酸C.擴(kuò)增過(guò)程包括變性、退火、延伸D.只能擴(kuò)增特定長(zhǎng)度的DNA片段5.下列哪種技術(shù)可用于檢測(cè)蛋白質(zhì)的表達(dá)水平（）A.凝膠過(guò)濾層析B.蛋白質(zhì)印跡法C.親和層析D.離子交換層析6.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，常用的培養(yǎng)基不包括（）A.RPMI1640培養(yǎng)基B.DMEM培養(yǎng)基C.伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基D.MEM培養(yǎng)基7.用于核酸電泳的緩沖液是（）A.Tris-HCl緩沖液B.檸檬酸鈉緩沖液C.醋酸緩沖液D.硼酸緩沖液8.下列關(guān)于酶標(biāo)儀的說(shuō)法，不正確的是（）A.可用于檢測(cè)酶促反應(yīng)的產(chǎn)物B.能對(duì)樣品進(jìn)行定量分析C.只能檢測(cè)可見(jiàn)光范圍內(nèi)的信號(hào)D.可用于ELISA實(shí)驗(yàn)9.在基因克隆實(shí)驗(yàn)中，常用的載體不包括（）A.質(zhì)粒載體B.噬菌體載體C.人工染色體載體D.核糖體載體10.下列哪種技術(shù)可用于細(xì)胞的轉(zhuǎn)染（）A.電穿孔法B.離心法C.過(guò)濾法D.透析法第II卷（非選擇題共70分）（一）填空題（共15分）答題要求：請(qǐng)?jiān)跈M線上填寫合適的內(nèi)容。1.生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)中，常用的滅菌方法有______、______、______等。2.蛋白質(zhì)的分離方法有______、______、______等。3.細(xì)胞計(jì)數(shù)常用的方法有______、______。4.核酸提取過(guò)程中，常用的裂解液成分有______、______、______等。5.基因表達(dá)載體通常包括______、______、______、______等元件。（二）簡(jiǎn)答題（共20分）答題要求：簡(jiǎn)要回答問(wèn)題，條理清晰。1.簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的原理及主要步驟。2.說(shuō)明蛋白質(zhì)印跡法的基本流程。3.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要注意哪些要點(diǎn)？4.核酸電泳的目的是什么？常用的核酸染料有哪些？（三）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題（共15分）答題要求：根據(jù)給定的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，設(shè)計(jì)合理的實(shí)驗(yàn)方案?，F(xiàn)有一種未知的生物樣本，需要確定其中是否含有某種特定的蛋白質(zhì)。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)方案來(lái)檢測(cè)該蛋白質(zhì)的存在。（四）材料分析題（共10分）材料：在一項(xiàng)關(guān)于細(xì)胞凋亡的研究中，研究人員使用了兩種不同的細(xì)胞系A(chǔ)和B。他們分別用藥物X處理細(xì)胞系A(chǔ)，用藥物Y處理細(xì)胞系B，然后通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。結(jié)果顯示，細(xì)胞系A(chǔ)在藥物X處理后凋亡率明顯升高，而細(xì)胞系B在藥物Y處理后凋亡率沒(méi)有明顯變化。問(wèn)題：1.請(qǐng)分析該實(shí)驗(yàn)中存在的不足之處。2.如何改進(jìn)該實(shí)驗(yàn)以獲得更可靠的結(jié)果？（五）綜合應(yīng)用題（共20分）材料：某研究小組想要研究一種新的基因?qū)?xì)胞生長(zhǎng)的影響。他們構(gòu)建了該基因的過(guò)表達(dá)載體，并將其轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。然后通過(guò)MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況，同時(shí)用熒光定量PCR檢測(cè)該基因及相關(guān)生長(zhǎng)因子基因的表達(dá)水平。問(wèn)題：1.請(qǐng)簡(jiǎn)述MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖的原理。2.熒光定量PCR檢測(cè)基因表達(dá)水平的結(jié)果如何分析？3.根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)，你認(rèn)為該新基因?qū)?xì)胞生長(zhǎng)有怎樣的影響？請(qǐng)說(shuō)明理由。答案：1.A2.B3.B4.C5.B6.C7.A8.C9.D10.A填空題答案：1.高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、紫外線滅菌2.凝膠過(guò)濾層析、離子交換層析、親和層析3.血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法、臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)法4.SDS、蛋白酶K、Tris-HCl5.啟動(dòng)子、終止子、多克隆位點(diǎn)、標(biāo)記基因簡(jiǎn)答題答案：1.PCR技術(shù)原理：以擬擴(kuò)增的DNA分子為模板，以一對(duì)分別與模板5’末端和3’末端相互補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復(fù)制的機(jī)制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成，重復(fù)這一過(guò)程，即可使目的DNA片段得到擴(kuò)增。主要步驟：變性、退火、延伸。2.蛋白質(zhì)印跡法基本流程：蛋白質(zhì)樣品經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后，轉(zhuǎn)移到固相載體（如硝酸纖維素膜或PVDF膜）上，然后用特異性抗體與膜上的目標(biāo)蛋白質(zhì)結(jié)合，再通過(guò)酶標(biāo)二抗等方法檢測(cè)抗體結(jié)合情況，從而確定目標(biāo)蛋白質(zhì)的存在及表達(dá)水平。3.細(xì)胞培養(yǎng)要點(diǎn)：合適的培養(yǎng)基及添加物；無(wú)菌操作；合適的溫度、pH值、氣體環(huán)境；定期傳代；防止污染等。4.核酸電泳目的：分離、鑒定和純化核酸。常用核酸染料：溴化乙錠、SYBRGreen等。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題答案：可采用蛋白質(zhì)印跡法。首先提取生物樣本中的蛋白質(zhì)，進(jìn)行SDS電泳分離，然后將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上，用針對(duì)該特定蛋白質(zhì)的一抗孵育，再用二抗孵育，最后通過(guò)顯色或發(fā)光等方法檢測(cè)是否有特異性條帶，若有則說(shuō)明樣本中含有該蛋白質(zhì)。材料分析題答案：1.不足之處在于沒(méi)有設(shè)置對(duì)照組，無(wú)法確定藥物X和Y本身對(duì)細(xì)胞凋亡率有無(wú)影響，也無(wú)法對(duì)比兩種細(xì)胞系在正常情況下的凋亡差異。2.改進(jìn)方法：增加未處理的細(xì)胞系A(chǔ)和B作為空白對(duì)照，同時(shí)增加只加藥物X的細(xì)胞系B和只加藥物Y的細(xì)胞系A(chǔ)作為平行對(duì)照，以排除藥物本身及細(xì)胞系差異對(duì)結(jié)果的干擾。綜合應(yīng)用題答案：1.MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖原理：活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為難溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶標(biāo)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值OD值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。2.熒光定量PCR檢測(cè)基因表達(dá)水平結(jié)果分析：通過(guò)比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中目的基因及相關(guān)基因的熒光信號(hào)強(qiáng)度，計(jì)算出相對(duì)