2025年大學(xué)生物技術(shù)（基因擴(kuò)增）單元測試卷

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______一、單項選擇題（總共10題，每題3分，每題只有一個正確答案，請將正確答案填入括號內(nèi)）1.基因擴(kuò)增技術(shù)中最常用的酶是（）A.逆轉(zhuǎn)錄酶B.Taq酶C.DNA連接酶D.限制性內(nèi)切酶2.下列關(guān)于PCR反應(yīng)體系的說法，錯誤的是（）A.模板DNAB.引物C.dNTPD.不需要緩沖液3.基因擴(kuò)增過程中，延伸溫度一般為（）A.55℃B.60℃C.72℃D.95℃4.引物設(shè)計時，其長度一般為（）A.5-10bpB.10-15bpC.15-30bpD.30-50bp5.基因擴(kuò)增的循環(huán)數(shù)一般為（）A.10-20次B.20-30次C.30-40次D.40-50次6.實時熒光定量PCR技術(shù)中，熒光信號的產(chǎn)生與（）有關(guān)。A.模板DNA的量B.引物的量C.dNTP的量D.緩沖液的量7.下列哪種情況會導(dǎo)致基因擴(kuò)增失?。ǎ〢.引物濃度過高B.模板DNA質(zhì)量好C.反應(yīng)體系合適D.循環(huán)數(shù)正常8.基因擴(kuò)增技術(shù)可用于（）A.基因克隆B.蛋白質(zhì)表達(dá)C.細(xì)胞培養(yǎng)D.組織切片9.在PCR反應(yīng)中，引物的作用是（）A.提供模板B.催化反應(yīng)C.與模板結(jié)合并引導(dǎo)DNA合成D.提供能量10.基因擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性主要取決于（）A.模板DNAB.引物C.Taq酶D.dNTP二、多項選擇題（總共5題，每題4分，每題有兩個或兩個以上正確答案，請將正確答案填入括號內(nèi)，少選、多選、錯選均不得分）1.基因擴(kuò)增技術(shù)包括（）A.PCRB.LCRC.NASBAD.SDA2.PCR反應(yīng)體系中需要的成分有（）A.模板DNAB.引物C.dNTPD.Taq酶E.緩沖液3.引物設(shè)計的原則包括（）A.長度合適B.堿基分布均勻C.避免形成二聚體D.與模板特異性結(jié)合4.實時熒光定量PCR技術(shù)可用于（）A.基因表達(dá)定量分析B.病原體核酸定量檢測C.基因突變檢測D.基因分型5.基因擴(kuò)增技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域有（）A.醫(yī)學(xué)診斷B.基因治療C.生物制藥D.法醫(yī)鑒定三、判斷題（總共10題，每題2分，判斷下列說法是否正確，正確的打“√”，錯誤的打“×”）1.基因擴(kuò)增技術(shù)只能擴(kuò)增DNA，不能擴(kuò)增RNA。（）2.PCR反應(yīng)中，變性溫度越高越好。（）3.引物的GC含量越高，特異性越好。（）4.實時熒光定量PCR技術(shù)不需要電泳檢測擴(kuò)增產(chǎn)物。（）5.基因擴(kuò)增產(chǎn)物的量與循環(huán)數(shù)成正比。（）6.只要反應(yīng)體系中有模板DNA，基因擴(kuò)增就能成功。（）7.引物的5'端可以與模板非特異性結(jié)合。（）8.基因擴(kuò)增技術(shù)可用于檢測微量的DNA。（）9.不同的基因擴(kuò)增技術(shù)原理相同。（）10.基因擴(kuò)增產(chǎn)物可以直接用于測序。（）四、簡答題（總共3題，每題10分，請簡要回答下列問題）1.簡述PCR反應(yīng)的基本原理。2.引物設(shè)計時需要考慮哪些因素？3.實時熒光定量PCR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)有哪些？五、論述題（總共1題，每題20分，請詳細(xì)論述下列問題）請論述基因擴(kuò)增技術(shù)在醫(yī)學(xué)診斷中的應(yīng)用及前景。答案：一、單項選擇題1.B2.D3.C4.C5.B6.A7.A8.A9.C10.B二、多項選擇題1.ABCD2.ABCDE3.ABCD4.ABCD5.ABCD三、判斷題1.×2.×3.×4.√5.√6.×7.×8.√9.×10.×四、簡答題1.PCR反應(yīng)基本原理：以擬擴(kuò)增的DNA分子為模板，以一對分別與模板5'末端和3'末端相互補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復(fù)制的機(jī)制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成，重復(fù)這一過程，即可使目的DNA片段得到擴(kuò)增。2.引物設(shè)計考慮因素：長度合適（15-30bp）；堿基分布均勻，避免嘌呤或嘧啶堆積；避免形成二聚體；與模板特異性結(jié)合，Tm值合適（55-65℃）；引物3'端不能有錯配。3.實時熒光定量PCR技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，可檢測微量核酸；特異性強(qiáng)，能準(zhǔn)確區(qū)分目的基因；定量準(zhǔn)確，可對核酸進(jìn)行精確定量；操作簡便，無需電泳檢測；可實現(xiàn)自動化，通量高。五、論述題基因擴(kuò)增技術(shù)在醫(yī)學(xué)診斷中應(yīng)用廣泛?？捎糜诓≡w核酸檢測，如病毒、細(xì)菌等，快速準(zhǔn)確診斷感染性疾病，指導(dǎo)治療。還可用于基因分型，輔助疾病診斷和遺傳咨詢。在腫瘤診斷中，檢測