生物藥層析柱壓力穩(wěn)定性測(cè)試技師（初級(jí)）考試試卷及答案填空題（每題1分，共10分）1.生物藥層析常用填料類(lèi)型包括瓊脂糖、______和離子交換樹(shù)脂等。2.層析柱壓力測(cè)試常用壓力單位是______（bar/kPa）。3.壓力穩(wěn)定性測(cè)試前，柱平衡時(shí)間通常不少于______分鐘。4.層析柱壓力波動(dòng)允許范圍不超過(guò)平均壓力的______%。5.壓力測(cè)試常用恒流泵流速設(shè)置為_(kāi)_____mL/min（常規(guī)分析柱）。6.緩沖液pH測(cè)試前誤差需控制在______以內(nèi)。7.壓力穩(wěn)定性測(cè)試需記錄的核心參數(shù)：流速、壓力和______。8.柱效與壓力的關(guān)系通常為_(kāi)_____（正/負(fù)）相關(guān)。9.柱接口檢漏常用試劑是______。10.測(cè)試前需確認(rèn)緩沖液過(guò)濾膜孔徑為_(kāi)_____μm。單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.導(dǎo)致柱壓突然升高的原因是？A.填料破碎B.緩沖液過(guò)濾不徹底C.流速降低D.溫度升高2.判斷柱穩(wěn)定的標(biāo)準(zhǔn)：連續(xù)______分鐘壓力波動(dòng)≤允許范圍。A.10B.20C.30D.603.不適用于生物藥層析的填料是？A.瓊脂糖B.葡聚糖C.正相硅膠D.DEAE樹(shù)脂4.柱壓超耐受值時(shí)應(yīng)立即______。A.提高流速B.更換緩沖液C.關(guān)閉泵D.升溫5.生物藥分析柱常用柱徑范圍是？A.1-5mmB.5-20mmC.20-50mmD.50-100mm6.緩沖液過(guò)濾膜孔徑通常為？A.0.22μmB.0.45μmC.1.0μmD.5.0μm7.與柱壓無(wú)關(guān)的因素是？A.填料粒徑B.柱長(zhǎng)C.樣品濃度D.流速8.壓力測(cè)試目的不包括？A.評(píng)估柱穩(wěn)定性B.檢測(cè)填料破碎C.測(cè)樣品純度D.確定最大耐受流速9.壓力持續(xù)緩慢升高的原因是？A.緩沖液溫度降低B.填料壓實(shí)C.接口漏液D.泵故障10.壓力測(cè)試記錄不需要包含的是？A.測(cè)試日期B.柱型號(hào)C.樣品名稱(chēng)D.壓力波動(dòng)曲線多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.壓力測(cè)試必要準(zhǔn)備工作包括？A.填料活化B.緩沖液過(guò)濾C.柱檢漏D.泵校準(zhǔn)E.樣品稀釋2.柱壓異常升高的常見(jiàn)原因？A.緩沖液含雜質(zhì)B.填料粒徑小C.流速過(guò)快D.柱溫高E.接口漏液3.壓力測(cè)試需記錄的參數(shù)？A.流速B.進(jìn)出口壓力C.平衡時(shí)間D.柱溫E.上樣量4.生物藥層析常用填料？A.瓊脂糖4BB.葡聚糖G-25C.反相C18D.正相硅膠E.DEAE樹(shù)脂5.柱性能良好的指標(biāo)？A.壓力穩(wěn)定B.無(wú)波動(dòng)C.壓力≤耐受值D.塔板數(shù)達(dá)標(biāo)E.回收率高6.柱平衡要求包括？A.緩沖液pH與樣品一致B.壓力穩(wěn)定C.電導(dǎo)穩(wěn)定D.溫度恒定E.上樣體積達(dá)標(biāo)7.壓力突然下降的情況？A.接口漏液B.填料流失C.流速降低D.柱溫升高E.泵故障8.壓力測(cè)試適用場(chǎng)景？A.新柱驗(yàn)收B.柱再生后C.柱用100次后D.純度檢測(cè)前E.緩沖液更換后9.柱最大耐受壓力影響因素？A.填料類(lèi)型B.柱材質(zhì)C.柱徑D.柱長(zhǎng)E.儲(chǔ)存條件10.壓力傳感器校準(zhǔn)目的？A.數(shù)據(jù)準(zhǔn)確B.避免誤判C.符合GMPD.提高柱效E.減少緩沖液消耗判斷題（每題2分，共20分）1.柱壓越高，柱效越好。（×）2.恒壓泵可用于壓力穩(wěn)定性測(cè)試。（×）3.緩沖液過(guò)濾可降低柱壓升高風(fēng)險(xiǎn)。（√）4.生物藥柱可在100℃測(cè)試壓力。（×）5.壓力波動(dòng)≤5%屬于合格。（√）6.新柱驗(yàn)收必須含壓力測(cè)試。（√）7.填料粒徑越小，柱壓越低。（×）8.柱溫升高會(huì)降低柱壓。（√）9.接口漏液導(dǎo)致柱壓升高。（×）10.壓力測(cè)試需記錄測(cè)試人員。（√）簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）1.簡(jiǎn)述壓力穩(wěn)定性測(cè)試基本流程。答案：①準(zhǔn)備：配制過(guò)濾緩沖液（0.22μm），檢查柱接口、泵、傳感器；②平衡：恒流泵以1.0mL/min泵入緩沖液，平衡30min至壓力穩(wěn)定；③測(cè)試：設(shè)置流速，連續(xù)記錄壓力（1min/次）20min；④判斷：波動(dòng)≤平均壓力5%則合格；⑤記錄：填寫(xiě)測(cè)試記錄（日期、柱型、壓力曲線等），不合格排查原因（雜質(zhì)、填料破碎）。2.柱壓持續(xù)緩慢升高的原因及解決方法。答案：原因：①緩沖液含顆粒堵塞；②填料壓實(shí)；③緩沖液粘度升高（溫度低）。解決：①停止測(cè)試，低流速反向沖洗30min；②更換過(guò)濾緩沖液重新平衡；③調(diào)整柱溫至25℃；④若仍升高，檢查填料是否破碎，必要時(shí)更換。3.新柱驗(yàn)收壓力測(cè)試要點(diǎn)。答案：①確認(rèn)柱規(guī)格與要求一致；②用指定緩沖液，控制pH±0.1、電導(dǎo)；③流速不超柱最大耐受壓力（≤0.3MPa）；④平衡30min至壓力穩(wěn)定；⑤連續(xù)記錄20min壓力，波動(dòng)≤5%；⑥記錄環(huán)境溫度（20-25℃）；⑦不合格聯(lián)系供應(yīng)商退換。4.壓力傳感器校準(zhǔn)的重要性及方法。答案：重要性：保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，避免誤判，符合GMP。方法：①連接標(biāo)準(zhǔn)壓力源；②設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)壓力（0.1、0.2MPa），讀取傳感器值；③偏差超±0.01MPa則調(diào)整；④重復(fù)3次確認(rèn)達(dá)標(biāo)；⑤記錄校準(zhǔn)信息，貼標(biāo)簽。討論題（每題5分，共10分）1.如何平衡層析柱流速與壓力的關(guān)系？答案：生物藥層析需兼顧流速（分離效率）與壓力（柱穩(wěn)定、蛋白活性）。①先確認(rèn)柱最大耐受壓力（如瓊脂糖柱≤0.3MPa）；②流速?gòu)牡偷礁撸?.5→1.0→1.5mL/min）測(cè)試，記錄壓力；③流速升高時(shí)壓力未超范圍且波動(dòng)小，可適當(dāng)提高（加快分離）；④壓力驟升則降低流速（避免填料破碎）；⑤結(jié)合生物藥類(lèi)型（親和層析流速可稍高，離子交換適中），選“壓力穩(wěn)定+分離達(dá)標(biāo)”的流速。2.壓力測(cè)試在生物藥生產(chǎn)中的質(zhì)量控制作用。答案：①新柱驗(yàn)收：確保柱性能符合生產(chǎn)要求，避免不合格柱影響產(chǎn)品；②柱使用過(guò)程：定期測(cè)試（每50次），及時(shí)發(fā)現(xiàn)填料破碎、壓實(shí)，防止柱效下降導(dǎo)致純度不達(dá)標(biāo)；③工藝變更：緩沖液更換、流速調(diào)整后測(cè)試，確認(rèn)壓力穩(wěn)定，保證工藝一致性；④GMP合規(guī)：完整記錄滿足追溯要求；⑤風(fēng)險(xiǎn)控制：提前發(fā)現(xiàn)漏液、堵塞，避免生產(chǎn)中斷或產(chǎn)品報(bào)廢，降低成本。參考答案匯總填空題答案1.葡聚糖2.bar3.304.55.1.06.±0.17.溫度8.負(fù)9.肥皂水10.0.22單項(xiàng)選擇題答案1.B2.B3.C4.C5.B6.A7