生物技術(shù)生物科技研發(fā)生物技術(shù)實(shí)習(xí)生實(shí)習(xí)報(bào)告一、摘要2023年7月1日至2023年8月31日，我在XX生物科技公司擔(dān)任生物技術(shù)研發(fā)實(shí)習(xí)生。核心工作成果包括完成3個(gè)基因表達(dá)載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)，成功轉(zhuǎn)化2株重組菌株，并通過(guò)PCR驗(yàn)證獲得1個(gè)陽(yáng)性克隆，純化后測(cè)序準(zhǔn)確率達(dá)99.2%。期間應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)，包括CRISPRCas9基因編輯、qPCR定量分析及蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)，優(yōu)化了細(xì)胞培養(yǎng)流程，使細(xì)胞增殖效率提升18%。提煉出標(biāo)準(zhǔn)化的基因克隆操作SOP，并建立了一套數(shù)據(jù)化記錄表單，確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。通過(guò)實(shí)踐掌握實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、數(shù)據(jù)分析及結(jié)果呈現(xiàn)的專業(yè)方法論，為后續(xù)科研工作奠定基礎(chǔ)。二、實(shí)習(xí)內(nèi)容及過(guò)程1實(shí)習(xí)目的希望通過(guò)實(shí)踐了解生物技術(shù)研發(fā)的實(shí)際流程，掌握分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技能，提升解決實(shí)際問(wèn)題的能力。2實(shí)習(xí)單位簡(jiǎn)介我在一家專注于基因編輯技術(shù)的生物科技公司實(shí)習(xí)，主要研究方向是利用CRISPRCas9技術(shù)改良作物抗病性。公司實(shí)驗(yàn)室設(shè)備齊全，有先進(jìn)的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)施和測(cè)序平臺(tái)。3實(shí)習(xí)內(nèi)容與過(guò)程實(shí)習(xí)期間我參與了兩個(gè)核心項(xiàng)目。第一個(gè)是構(gòu)建基因表達(dá)載體，7月10日到8月5日，我根據(jù)導(dǎo)師提供的序列設(shè)計(jì)，合成了目的基因，并通過(guò)限制性內(nèi)切酶消化和TA克隆將其插入到pCMV載體中。使用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化效率只有52%，遠(yuǎn)低于預(yù)期的70%。導(dǎo)師建議我優(yōu)化連接酶反應(yīng)條件，我調(diào)整了酶量和反應(yīng)時(shí)間，8月12日重新實(shí)驗(yàn)，轉(zhuǎn)化效率提升到63%。通過(guò)測(cè)序驗(yàn)證，最終獲得3個(gè)正確插入的克隆。第二個(gè)項(xiàng)目是篩選抗病突變體，7月20日開(kāi)始。我負(fù)責(zé)建立基因編輯細(xì)胞的篩選體系，使用卡那霉素抗性基因作為篩選標(biāo)記。初期培養(yǎng)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)G418抗性細(xì)胞死亡率過(guò)高，8月5日統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，對(duì)照組細(xì)胞存活率只有35%，而實(shí)驗(yàn)組只有28%。我排查了培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)板問(wèn)題，發(fā)現(xiàn)是血清批次差異導(dǎo)致，更換新批次后，存活率回升到40%。此外，我還學(xué)習(xí)了如何通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期，為后續(xù)篩選提供數(shù)據(jù)支持。4實(shí)習(xí)成果與收獲成功構(gòu)建3個(gè)基因表達(dá)載體，其中2個(gè)測(cè)序正確率達(dá)100%。參與篩選的細(xì)胞系中，找到5株抗性穩(wěn)定的突變體，為后續(xù)功能驗(yàn)證奠定基礎(chǔ)。最大的收獲是學(xué)會(huì)了如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并優(yōu)化流程，比如調(diào)整連接酶反應(yīng)能顯著提高克隆效率。5問(wèn)題與建議實(shí)習(xí)中遇到的最大挑戰(zhàn)是實(shí)驗(yàn)失敗率較高，比如第一次做PCR擴(kuò)增時(shí)，引物二聚體問(wèn)題導(dǎo)致結(jié)果干擾嚴(yán)重。我花了兩天時(shí)間重新設(shè)計(jì)引物，最后用在線軟件預(yù)測(cè)退火溫度，才解決這個(gè)麻煩。不過(guò)公司培訓(xùn)機(jī)制有待改進(jìn)，很多操作只是簡(jiǎn)單演示，缺乏細(xì)節(jié)指導(dǎo)。建議可以建立更系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)記錄模板，比如用Excel表標(biāo)準(zhǔn)化記錄每一步的參數(shù)，避免重復(fù)試錯(cuò)。另外，崗位匹配度上我覺(jué)得可以更側(cè)重本科生，目前很多任務(wù)還是需要較強(qiáng)的獨(dú)立操作能力，對(duì)新手不太友好。如果能增加一些基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的帶教時(shí)間，可能更有利于新手成長(zhǎng)。三、總結(jié)與體會(huì)1實(shí)習(xí)價(jià)值閉環(huán)這8周像把課本知識(shí)燙了個(gè)金，以前覺(jué)得抽象的CRISPR技術(shù)，現(xiàn)在親手建載體、篩細(xì)胞，每個(gè)步驟都實(shí)打?qū)嵰?jiàn)過(guò)。7月剛來(lái)時(shí)，做PCR都怕引物不特異，導(dǎo)師讓我用PrimerBLAST查對(duì)，后來(lái)自己獨(dú)立設(shè)計(jì)時(shí)，果然提高了效率。從最初連細(xì)胞都養(yǎng)不好，到8月底能獨(dú)立跑完整的基因編輯流程，數(shù)據(jù)也出來(lái)了，轉(zhuǎn)化效率從50%多提到65%以上，感覺(jué)就像給理論打了個(gè)補(bǔ)丁，知識(shí)體系一下子就具象化了。2職業(yè)規(guī)劃聯(lián)結(jié)實(shí)習(xí)讓我看清了自己的短板，比如統(tǒng)計(jì)分析能力還差點(diǎn)，流式數(shù)據(jù)看不懂就卡殼?，F(xiàn)在回去就得猛補(bǔ)R語(yǔ)言，打算下學(xué)期考個(gè)基因編輯技術(shù)的專項(xiàng)證書(shū)。之前想當(dāng)純理論的科研狗，現(xiàn)在覺(jué)得技術(shù)員崗位也挺適合，能直接動(dòng)手解決問(wèn)題。8月和導(dǎo)師聊職業(yè)發(fā)展時(shí)，他說(shuō)現(xiàn)在行業(yè)缺能做小實(shí)驗(yàn)的，但得會(huì)標(biāo)準(zhǔn)化操作，這話點(diǎn)醒我了。3行業(yè)趨勢(shì)展望公司現(xiàn)在主推base編輯，我參與的實(shí)驗(yàn)里就用了堿基修飾的試劑，老板說(shuō)年底要推廣這個(gè)技術(shù)。這讓我意識(shí)到，生物技術(shù)迭代太快了，光靠實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)不行，得跟上文獻(xiàn)更新。8月整理實(shí)驗(yàn)記錄時(shí)，看到Nature上面一篇關(guān)于堿基編輯的綜述，現(xiàn)在每天都會(huì)抽空看行業(yè)報(bào)告。感覺(jué)就像在基因編輯領(lǐng)域，現(xiàn)在做基礎(chǔ)研究就像在挖井，但產(chǎn)業(yè)化的水井已經(jīng)快挖到頭了，以后機(jī)會(huì)可能更多在應(yīng)用端。4心態(tài)轉(zhuǎn)變最明顯的變化是抗壓能力。7月有次實(shí)驗(yàn)失敗，培養(yǎng)皿里一片空白，直接對(duì)著燒杯發(fā)呆半小時(shí)。后來(lái)想通，科研哪有不摔跤的，就照著文獻(xiàn)重做參數(shù)，最后數(shù)據(jù)出來(lái)時(shí)直接樂(lè)出聲?，F(xiàn)在遇到問(wèn)題第一反應(yīng)是查SOP，而不是喊導(dǎo)師。8月28日最后一次匯報(bào)時(shí)，導(dǎo)師夸我匯報(bào)時(shí)能直接說(shuō)實(shí)驗(yàn)的3個(gè)變量，他說(shuō)這是從學(xué)生到職場(chǎng)人的關(guān)鍵一步。5未來(lái)行動(dòng)把實(shí)習(xí)用的實(shí)驗(yàn)記錄電子化，整理成模板，以后做實(shí)驗(yàn)效率能高不少。下學(xué)期打算報(bào)個(gè)生物信息學(xué)選修課，現(xiàn)在看基因測(cè)序數(shù)據(jù)還是頭疼，得把統(tǒng)計(jì)學(xué)和編程補(bǔ)上。感覺(jué)這8周最大的收獲是，原來(lái)實(shí)驗(yàn)室也能這么有干勁，每天盯著顯微鏡看細(xì)胞分裂，現(xiàn)在想想還挺帶勁的。四、致謝1感謝公司提供實(shí)習(xí)平臺(tái)，讓我有機(jī)會(huì)將實(shí)驗(yàn)室的理論知識(shí)應(yīng)用于實(shí)際操作。2特別感謝導(dǎo)師的悉心指導(dǎo)，在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、數(shù)據(jù)分析等環(huán)節(jié)給予關(guān)鍵建議，尤其是在基因載體構(gòu)建失敗時(shí)，幫助我調(diào)整思路。3感謝實(shí)驗(yàn)室同事的耐心幫助，比如流