1、第九章傳染與免疫,傳染與免疫是討論病原微生物與其宿主間的相互關(guān)系，是微生物生態(tài)學(xué)中一部分內(nèi)容的深化與發(fā)展。免疫(immunity)：生物體能夠辯認(rèn)自我與非自我，對非我做出反應(yīng)以保持自身穩(wěn)定的功能。傳統(tǒng)的免疫概念：機體抵抗病原微生物的能力，即抗傳染免疫。,意義:,傳染病的防治是微生物學(xué)發(fā)展的主要動力；微生物學(xué)工作者的實際需要；重要理論研究領(lǐng)域中的作用；實踐應(yīng)用領(lǐng)域中的作用。,第一節(jié)傳染,一、傳染與傳染病,傳染?。河捎猩Φ牟≡w引起的疾病，與由其它致病因素引起的疾病在本質(zhì)上是有區(qū)別的。病原微生物，或病原體：寄生于生物(包括人)機體并引起疾病的微生物。,潛伏（隱形傳染）帶菌狀態(tài)傳染病,傳染，又稱

2、感染：機體與病原體在一定條件下相互作用而引起的病理過程。外源或內(nèi)源性病原體突破其宿主的三道防線（機械屏障、非特異性免疫和特異性免疫）后，在宿主的特定部位定植、生長繁殖，并引起一系列病理生理的過程。,二、決定傳染結(jié)局的因素（一）病原體1、毒力2、數(shù)量3、侵入門徑（二）宿主的免疫力（三）環(huán)境因素三、傳染的可能結(jié)局,第二節(jié)非特異免疫,是機體的一般生理防衛(wèi)功能，是在人類長期進化過程中形成的，由先天遺傳而來，防衛(wèi)任何外界異物對機體的侵入而不需要特殊的刺激或誘導(dǎo)，又稱為先天免疫。主要包括生理屏障、細(xì)胞因素和體液因素。,一、生理屏障(機械防線),皮膚與粘膜：1）機械的阻擋和排除作用：健康機體的外表面覆蓋著連

3、續(xù)完整的皮膚和粘膜結(jié)構(gòu)，其外面的角質(zhì)層是堅韌的，不可滲透的，組成了阻擋微生物入侵的有效屏障；機體的機械方式如纖毛運動、咳嗽和噴嚏排除異物2)分泌液中所含化學(xué)物質(zhì)有局部抗菌作用：各種分泌液中的殺菌成分；呼吸道、消化道、泌尿生殖道表面粘膜所分泌的粘液的化學(xué)性屏障作用。眼淚、唾液和尿液的清洗作用。,3）共生菌群人的體表和與外界相通的腔道中存在大量正常菌群，通過在表面部位競爭必要的營養(yǎng)物，或者產(chǎn)生如大腸桿菌素、酸類、脂類等抑制物，而抑制多數(shù)具有疾病潛能的細(xì)菌或真菌生長。臨床上長期大量應(yīng)用廣譜抗菌素，腸道內(nèi)對藥物敏感的細(xì)菌被抑制，破壞了菌群間的拮抗作用，則往往引起菌群失調(diào)癥，如耐藥性金黃色葡萄球菌性腸炎

4、。,2.生理上的屏障結(jié)構(gòu)體內(nèi)的某些部位具有特殊的結(jié)構(gòu)而形成阻擋微生物和大分子異物進入的局部屏障，對保護該器官，維持局部生理環(huán)境恒定有重要作用。1）血腦屏障：主要由軟腦膜、脈絡(luò)叢、腦毛細(xì)血管壁及其外的腦星形細(xì)胞組成，,具有細(xì)胞間連接緊密、胞飲作用弱的特點，可阻擋病原體及其有毒產(chǎn)物從血液透入腦組織或腦脊液，保護中樞神經(jīng)系統(tǒng)的穩(wěn)定。,2）血胎屏障：由懷孕母體子宮內(nèi)膜的底蛻膜和胎兒的絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞共同組成，當(dāng)它發(fā)育成熟（一般在妊娠3個月）后，能阻擋病原微生物由母體通過胎盤感染胎兒，但并不妨礙母子間的物質(zhì)交換。,嬰幼兒因其血腦屏障還未發(fā)育完善，故易患腦膜炎或流行性乙型腦炎等傳染病。,二、吞噬細(xì)胞及其吞

5、噬功能主要是指體內(nèi)的各種吞噬細(xì)胞吞噬病原體及其它各種異物的能力。吞噬細(xì)胞的種類：多形核白細(xì)胞和單核細(xì)胞吞噬細(xì)胞的功能：吞噬細(xì)胞具有吞噬入侵的病原微生物等顆粒的能力。,多形核白細(xì)胞：存在于血液和骨髓中，含大量溶菌酶，以嗜中性粒細(xì)胞最重要。趨化作用：趨化因子吸引粒細(xì)胞到感染部位；調(diào)理作用：抗體與補體等結(jié)合或覆蓋于病原菌表面，使病原菌更易被吞噬；粒細(xì)胞-抗體-抗原吞入作用：吞噬作用，胞飲作用；殺滅作用：酶,巨噬細(xì)胞：存在于血液、淋巴和多種組織中的大型單核細(xì)胞。吞噬和殺菌作用；抗原遞呈作用；免疫調(diào)節(jié)作用；抗癌作用,三、炎癥反應(yīng)炎癥是機體受到有害刺激（包括各種理化因素，但以病原微生物感染為主）時所表現(xiàn)的

6、一系列局部和全身性防御應(yīng)答，可以看作是非特異免疫的綜合作用結(jié)果，其作用于清除有害異物、修復(fù)受傷組織，保持自身穩(wěn)定性。,內(nèi)、外源性熱原物質(zhì)作用于下丘腦導(dǎo)致發(fā)熱（發(fā)燒）；吞噬細(xì)胞的溶酶體酶釋放或泄漏會損傷自身組織成分；各種毒性產(chǎn)物與活性介質(zhì)將刺激正常機體組織；死亡白細(xì)胞與破壞裂解的靶細(xì)胞共同釀成膿液（化膿）,紅、腫、痛、熱和功能障礙是炎癥的五大特征（炎癥）,炎癥既是一種病理過程，又是一種防御病原體的積極方式：動員了大量的吞噬細(xì)胞聚集在炎癥部位；血液中的抗菌因子和抗體發(fā)生局部濃縮；死亡宿主細(xì)胞的堆積可釋放抗微生物物質(zhì)；炎癥中心氧濃度下降和乳酸積累，進一步抑制病原菌的生長；適度的體溫升高可以加速免疫反

7、應(yīng)的進程。,四、體液因素,1、補體系統(tǒng)存在于正常機體體液中的非特異性的血清蛋白，是一種主要含及球蛋白等包括30余種蛋白質(zhì)成分的復(fù)雜系統(tǒng)，主要由肝細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生；通常以無活性形式存在于正常血清和體液中。補體能被任何的抗原-抗體復(fù)合物激活（無特異性），由無活性形式轉(zhuǎn)變?yōu)閷Σ≡w具有殺滅作用的活性形式，稱為補體激活。補體的生物學(xué)功能：溶解和殺傷細(xì)胞；趨化作用；免疫粘附作用；中和病毒；過敏毒素（促進炎癥）作用。,2、干擾素（interferon，IFN）,干擾素（白細(xì)胞干擾素）干擾素（成纖維細(xì)胞干擾素）干擾素（免疫干擾素或型干擾素）干擾素,宿主淋巴細(xì)胞在病毒等多種干擾素誘生劑刺激下產(chǎn)生的一類低分子

8、量糖蛋白。具有廣譜抗病毒的功能。干擾素誘生劑：病毒、dsRNA、細(xì)胞內(nèi)繁殖的各種微生物、微生物產(chǎn)物、多聚物、低分子物質(zhì)、細(xì)胞有絲分裂素、特異性免疫誘導(dǎo)等,干擾素的誘導(dǎo)過程和作用機制,干擾素的誘導(dǎo)過程和作用機制,干擾素的宿主種屬特異性,干擾素制備,人干擾素可用人血白細(xì)胞或可無限繁殖的一種類淋巴細(xì)胞（Namalwa細(xì)胞）來制備；人干擾素可用人成纖維細(xì)胞來制備。人干擾素可用人血白細(xì)胞經(jīng)T細(xì)胞有絲分裂誘生后提取。,功能：干擾素作用于宿主細(xì)胞，使之合成抗病毒蛋白、控制病毒蛋白質(zhì)合成，影響病毒的組裝釋放，具有廣譜抗病毒功能；同時還有多方面的免疫調(diào)節(jié)作用。,第三節(jié)特異性免疫（specificimmunity

9、）,特異性免疫：機體在生命過程中接受抗原性異物刺激后（如微生物感染或接種疫苗）產(chǎn)生的免疫應(yīng)答反應(yīng)。,特點是生物個體在其后天活動中接觸了相應(yīng)的抗原后而獲得的，又稱獲得性免疫；其產(chǎn)物與相應(yīng)的刺激物（即抗原）之間是特異的；包括體液免疫系統(tǒng)（humoralimmunity）和細(xì)胞免疫系統(tǒng)（cellularimmunity）；特異性免疫力在同種生物的不同個體間或同一個體在不同條件下有很大的差別。,特異性免疫力的獲得,免疫應(yīng)答,機體在生活過程中接受抗原刺激，經(jīng)過抗原特異性淋巴細(xì)胞對抗原的識別，使之發(fā)生活化、增殖、分化等一系列變化，最終表現(xiàn)出相應(yīng)的體液免疫或（和）細(xì)胞免疫效應(yīng)。特點：識別異己、特異性、記憶性

10、。,免疫應(yīng)答,1.感應(yīng)階段：機體接受抗原刺激的階段,抗原,巨噬細(xì)胞（抗原遞呈細(xì)胞，APC）,T細(xì)胞,細(xì)胞免疫,B細(xì)胞,體液免疫,2.反應(yīng)階段：淋巴細(xì)胞識別抗原后，即被活化進行增殖、分化。,被特異性抗原激活的T細(xì)胞轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，再增殖、分化，成為有免疫效應(yīng)的致敏淋巴細(xì)胞。,被特異性抗原激活的B細(xì)胞被活化后，轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞，再增殖、分化為漿細(xì)胞，分泌抗體。,受抗原刺激的淋巴細(xì)胞，在分化過程中，還有一部分細(xì)胞在中途停頓下來，不再增殖分化，成為記憶細(xì)胞，在體內(nèi)能較長時間存在。當(dāng)再次受到同種抗原刺激時，能迅速分化增殖成大量致敏淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞，分別產(chǎn)生大量淋巴因子及抗體。,3.效應(yīng)階段：抗原成為被打

11、擊的對象,B細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫：,體液中的抗體與相應(yīng)的抗原進行特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應(yīng)的過程（與抗原特異結(jié)合、激活補體、溶解細(xì)胞等）,T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫：,致敏淋巴細(xì)胞通過與相應(yīng)的抗原接觸直接殺傷病原靶細(xì)胞，或釋放多種可溶性的生物活性物質(zhì)（淋巴因子），發(fā)揮免疫效應(yīng)。,細(xì)胞免疫：機體在抗原刺激下，一類小淋巴細(xì)胞（依賴胸腺的T細(xì)胞）發(fā)生增殖、分化，進而直接攻擊靶細(xì)胞或間接地釋放一些淋巴因子的免疫作用。體液免疫：指機體受抗原刺激后，來源于骨髓的一類小淋巴細(xì)胞（B細(xì)胞）進行增殖并分化為漿細(xì)胞，由它合成抗體并釋放到體液中以發(fā)揮其免疫作用。,一、免疫系統(tǒng)免疫系統(tǒng)是獲得性免疫的物質(zhì)基礎(chǔ)，包括免疫器官、免疫

12、細(xì)胞、免疫分子。1、免疫器官：中樞免疫器官免疫細(xì)胞發(fā)生、分化和成熟的場所，包括骨髓、胸腺、法氏囊（鳥類）等。外周免疫器官免疫細(xì)胞居住和發(fā)生免疫應(yīng)答的場所，包括淋巴結(jié)、脾臟和粘膜相關(guān)淋巴組織。,2、免疫細(xì)胞指一切具有免疫功能的細(xì)胞，主要包括淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。它們均來自骨髓多能干細(xì)胞。免疫活性細(xì)胞：一類能接受抗原刺激，并引起特異性免疫反應(yīng)的細(xì)胞，主要指T細(xì)胞和B細(xì)胞。,起源于骨髓，在胸腺中成熟，然后轉(zhuǎn)移到外周淋巴器官，其功能是執(zhí)行細(xì)胞免疫。參與特異性免疫應(yīng)答的小淋巴細(xì)胞，主要執(zhí)行細(xì)胞免疫功能，包括細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用和遲發(fā)性超敏反應(yīng)，也參與抗體的形成和炎癥反應(yīng)等。,T細(xì)胞,E玫

13、瑰花結(jié)實驗：利用T細(xì)胞表面具有綿羊受體致使結(jié)合在其周圍這一原理來檢測T細(xì)胞數(shù)目的試驗。有絲分裂原：在體外條件下，能與淋巴細(xì)胞表面的相應(yīng)受體結(jié)合并刺激淋巴細(xì)胞，促使其DNA合成和進行有絲分裂而轉(zhuǎn)變?yōu)榱馨湍讣?xì)胞的一類物質(zhì)。T細(xì)胞表面抗原：指T細(xì)胞表面的抗原受體，是執(zhí)行復(fù)雜和精確的識別抗原性異物的物質(zhì)基礎(chǔ)之一，只能識別經(jīng)輔佐細(xì)胞（APC）加工后的遞呈抗原。,T細(xì)胞的表面標(biāo)志（表面受體和表面抗原）綿羊紅細(xì)胞受體（E受體）：能與綿羊紅細(xì)胞相結(jié)合的受體，可使周圍的綿羊紅細(xì)胞結(jié)合在其周圍形成一玫瑰花狀物。,T細(xì)胞,調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(TR)效應(yīng)性T細(xì)胞(TE),輔助性T細(xì)胞(TH)：在體液免疫中發(fā)揮作用，主要功能

14、是輔助B細(xì)胞，促使其活化和產(chǎn)生抗體。抑制性T細(xì)胞(TS)：可抑制TH、TC和B細(xì)胞的功能，由它抑制淋巴細(xì)胞的增殖。,遲發(fā)型超敏T細(xì)胞(TD)：結(jié)合抗原后釋放淋巴因子，引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)表9-2細(xì)胞毒T細(xì)胞(TC)：殺死帶抗原的靶細(xì)胞,T細(xì)胞的種類,骨髓中的多能干細(xì)胞分化成淋巴細(xì)胞，再分化成前B細(xì)胞，進一步發(fā)育成為成熟B細(xì)胞。當(dāng)受抗原刺激后，B細(xì)胞先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞，再分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生并分泌抗體，進行體液免疫。,B細(xì)胞,在哺乳動物的骨髓中或鳥類的腔上囊中分化成熟。,B細(xì)胞的表面受體包括有絲分裂原受體、抗原受體、補體受體和FC（抗體的可結(jié)晶片段）受體?？乖荏w（SmIg）:一類鑲嵌于膜脂質(zhì)雙分子層

15、中的膜表面免疫球蛋白，主要成分是單體的IgM和IgD。表9-3B細(xì)胞與T細(xì)胞的比較,B細(xì)胞的亞群和功能B-1細(xì)胞T細(xì)胞非依賴性B-2細(xì)胞T細(xì)胞依賴性,其他淋巴細(xì)胞,1NK細(xì)胞即自然殺傷細(xì)胞（naturalkillercell）可在無抗體、無補體或無抗原致敏的情況下就去殺傷某些腫瘤細(xì)胞或被病毒感染的細(xì)胞，故稱自然殺傷細(xì)胞。2K細(xì)胞即殺傷細(xì)胞（killercell）即殺傷細(xì)胞，是一類與NK細(xì)胞相似的大顆粒淋巴細(xì)胞。通過IgG分子中的FC片段與K細(xì)胞表面的FC受體的結(jié)合，可觸發(fā)K細(xì)胞的殺傷活性，故能專一地但非特異地殺傷被IgG所覆蓋的靶細(xì)胞。,3、免疫分子,膜表面分子：主要包括膜表面抗原受體、組織相

16、容性抗原、白細(xì)胞分化抗原和粘附分子.B細(xì)胞和T細(xì)胞表面有各自的特異性膜表面抗原受體，能識別不同的抗原并與之結(jié)合，啟動特異性免疫。體液免疫分子：主要包括抗體、補體和細(xì)胞因子。補體和抗體分別是非特異免疫和特異免疫的主要體液成分。細(xì)胞因子具有對細(xì)胞功能的多方面調(diào)節(jié)作用，其中有些還具有細(xì)胞毒性(如腫瘤壞死因子)和抗病毒功能(如干擾素)，直接參與免疫應(yīng)答的效應(yīng)過程。,主要指抗原及抗體,巨噬細(xì)胞（M）,M對抗原無特異性識別作用;以吞噬、吞飲和被動吸附等方式攝取抗原.抗原激活的M激活淋巴細(xì)胞,與淋巴細(xì)胞發(fā)生表面接觸,釋放的活性因子（M因子）,4、產(chǎn)抗體細(xì)胞的激活和抗體的形成,抗原遞呈作用,抗原遞呈作用,B細(xì)

17、胞的活化,TD抗原TD抗體TI抗原TI抗體大多數(shù)天然抗原是TD抗原,B細(xì)胞對TD抗原的應(yīng)答M、T和B（B2）細(xì)胞參與B細(xì)胞進一步分化成能分泌抗體的漿細(xì)胞有再次應(yīng)答B(yǎng)細(xì)胞對TI抗原的應(yīng)答沒有T細(xì)胞的協(xié)同，不必有M參與主要產(chǎn)生IgM，無再次應(yīng)答,B細(xì)胞的活化,粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng),光滑內(nèi)質(zhì)網(wǎng),高爾基體,細(xì)胞膜,核糖體,出芽,抗體,初次免疫應(yīng)答：潛伏期長，抗體多為IgM，效價低，維持時間短;再次免疫應(yīng)答：潛伏期短，抗體以IgG為主，效價高，維持時間長.,5、抗體應(yīng)答規(guī)律,6、抗體形成的機制：克隆選擇學(xué)說,抗體多樣性的分子生物學(xué)機制,體細(xì)胞突變學(xué)說（somaticmutationtheory）高等動物體的細(xì)胞內(nèi)

18、，只存在有限數(shù)量的基因，但在產(chǎn)抗體細(xì)胞的增殖、分化過程中，這些基因很容易發(fā)生突變，并由此產(chǎn)生了為數(shù)眾多的新的基因組合，從而為抗體的多樣性提供了遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ).,利根川進闡明的主要問題,編碼L鏈V區(qū)的基因由VL序列和J序列組成，編碼L鏈C區(qū)的基因稱為C序列;編碼H鏈V區(qū)的基因除VH和J序列外，還有一個較短的D區(qū)，H鏈的C區(qū)則由CH序列所編碼;在胚胎期，編碼L鏈V區(qū)的V和J基因間分得很遠(yuǎn)，在成體的B細(xì)胞中，V和J可連接在一起，但與C序列間仍被內(nèi)含子隔開;V序列有數(shù)百種不同類型，J、D和C序列也有多種;V除與J發(fā)生連接外，偶爾亦可與另一種V發(fā)生誤接.,淋巴細(xì)胞雜交瘤（lymphocytehybrid

19、oma）,單克隆抗體（McAb，monoclonalantibody）淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)建立在克隆選擇學(xué)說這一重要基本理論上建立淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)是生產(chǎn)單克隆抗體的前提,淋巴細(xì)胞雜交瘤是由B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞兩者融合而成的一種既能在體內(nèi)外大量增殖又能產(chǎn)生大量單克隆抗體的雜種細(xì)胞;B淋巴細(xì)胞最早取自小白鼠的脾臟;骨髓瘤是一種癌變的漿細(xì)胞，又稱多發(fā)性骨髓瘤，它可自發(fā)或誘發(fā)形成。,淋巴細(xì)胞雜交瘤（lymphocytehybridoma）,淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備,第四節(jié)免疫學(xué)方法,傳統(tǒng)免疫學(xué)方法又稱為血清學(xué)反應(yīng)?，F(xiàn)代免疫學(xué)方法包括體液免疫，還包括細(xì)胞免疫的各種方法。一、抗原、抗體反應(yīng)的一般規(guī)律1、特異

20、性2、可逆性3、定比性4、階段性5、條件依賴性,（一）凝集反應(yīng)細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原，當(dāng)與相應(yīng)抗體特異結(jié)合后，在適量電解質(zhì)存在的條件下，可逐漸聚集，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象稱為凝集反應(yīng)。反應(yīng)中的抗原稱為凝集原，抗體稱為凝集素.在實際操作時，一般要稀釋抗體。具體的方法有直接法、間接法。,二、抗原、抗體間的主要反應(yīng),早在1896年，Widal就利用傷寒病人血清與傷寒桿菌發(fā)生特異性凝集的現(xiàn)象成功地診斷傷寒病。1900年Landsteiner在特異血凝現(xiàn)象的基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)了人類ABO血型，于1930年獲得諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎。一個世紀(jì)以來，這些經(jīng)典的血清學(xué)方法一直沿用至今，并繼續(xù)造福子人類。根據(jù)凝集反應(yīng)的

21、原理，以后又發(fā)展建立了各種間接凝集試驗、間接凝集抑制試驗以及固相免疫吸附血凝試驗等新方法。,（二）沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)是指可溶性抗原（細(xì)菌培養(yǎng)濾液、細(xì)胞或組織的浸出液、血清蛋白等）與相應(yīng)抗體在液相中特異結(jié)合后，形成的免疫復(fù)合物受電解質(zhì)影響出現(xiàn)的沉淀現(xiàn)象。反應(yīng)中的抗原稱為沉淀原，可以是類脂、多糖或蛋白質(zhì)等；抗體稱為沉淀素。在操作時，一般要稀釋抗原。,早在1897年，Kmus發(fā)現(xiàn)鼠疫桿菌的培養(yǎng)濾液能與相應(yīng)抗血清發(fā)生沉淀反應(yīng)。一個世紀(jì)以來，沉淀反應(yīng)這一古老的經(jīng)典抗原抗體反應(yīng)，經(jīng)過不斷改進和發(fā)展，至今仍然是生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域和臨床檢驗工作中常用的、簡便可靠的一種免疫學(xué)試驗方法。就廣義而言，目前廣泛應(yīng)用的各種

22、高度靈敏和特異的標(biāo)記免疫檢測技術(shù)，如免疫熒光、放射免疫分析及酶免疫分析技術(shù)等，也都是在沉淀反應(yīng)的基礎(chǔ)上發(fā)展建立起來的。,經(jīng)典方法現(xiàn)代方法,環(huán)狀沉淀反應(yīng)絮狀沉淀反應(yīng),單向瓊脂擴散法雙向瓊脂擴散法對流免疫電泳法火箭電泳法雙向免疫電泳法圖9-27,沉淀反應(yīng)的主要方法,（三）補體結(jié)合試驗（complementfixationtest）,補體結(jié)合反應(yīng)的基本原理有二：補體可與任何抗原抗體的復(fù)合物相結(jié)合指示系統(tǒng)如遇補體后就會出現(xiàn)明顯的溶血反應(yīng),補體結(jié)合反應(yīng)是一種有補體參與，并以綿羊紅細(xì)胞和溶血素是否發(fā)生溶血反應(yīng)作指示的一種高靈敏度的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。,補體結(jié)合試驗,補體結(jié)合試驗的優(yōu)點,既可測未知抗體，也可測

23、未知抗原；既可測沉淀反應(yīng)，也可測凝集反應(yīng)；尤其適宜測定微量抗原與抗體間出現(xiàn)的肉眼看不見的反應(yīng)，因此提高了血清學(xué)反應(yīng)的靈敏度。,(四）中和試驗中和試驗是免疫學(xué)和病毒學(xué)中常用的一種抗原抗體反應(yīng)試驗方法，用以測定抗體，中和病毒感染性或細(xì)菌毒素的生物學(xué)效應(yīng)。凡能與病毒結(jié)合，使其失去感染力的抗體又稱中和抗體。能與細(xì)菌外毒素結(jié)合，中和其毒性作用的抗體稱為抗毒素。,中和試驗可以在敏感動物體內(nèi)(包括雞胚)，體外組織(細(xì)胞)培養(yǎng)或試管內(nèi)進行。觀察特異性抗體能否保護易感的試驗動物免于死亡，能否抑制病毒的細(xì)胞病變效應(yīng)或中和毒素對細(xì)胞的毒作用；以及測定抗體的其他生物學(xué)效應(yīng)。,三、現(xiàn)代免疫標(biāo)記技術(shù),將抗原或抗體用熒光素

24、、酶、放射性同位素或電子致密物質(zhì)等加以標(biāo)記，借以提高其靈敏度的一類新技術(shù)。,免疫熒光技術(shù),羅丹明可與抗體球蛋白中賴氨酸的氨基結(jié)合，在藍(lán)紫光激發(fā)下，可分別出現(xiàn)鮮明的黃綠色及玫瑰紅色二氯三嗪基氨基熒光素,酶免疫測定,用酶代替熒光素作標(biāo)記物；顯示酶標(biāo)記抗體的方法是用酶的特殊底物來處理標(biāo)本；通過水解、氧化或還原反應(yīng)而顯示顏色。,優(yōu)點是：由于反應(yīng)的結(jié)果產(chǎn)生顏色，故可用普通光學(xué)顯微鏡觀察結(jié)果；標(biāo)本經(jīng)酶標(biāo)抗體染色后，還可用其他染料復(fù)染，以顯示細(xì)胞的形態(tài)構(gòu)造；標(biāo)本可長久保存，隨時備查；特異性強；靈敏度高。,酶免疫測定,標(biāo)記酶：辣根過氧化物酶（horseradishperoxidase，HRP），底物是二苯基聯(lián)

25、苯胺（DAB）。DAB經(jīng)酶解可產(chǎn)生棕褐色沉淀物，因而可用目測或用比色法測定。,酶免疫測定,酶聯(lián)免疫吸附試驗法（ELISA）,第五節(jié)生物免疫制品,人工自動免疫人工被動免疫,常規(guī)疫苗新型疫苗,疫苗（活疫苗、死疫苗）類毒素自身疫苗,亞單位疫苗化學(xué)疫苗多肽疫苗基因工程疫苗基因疫苗抗抗體疫苗,特異性免疫治療劑免疫調(diào)節(jié)劑,抗毒素抗病毒血清抗菌血清免疫球蛋白制劑免疫核糖核酸,轉(zhuǎn)移因子白細(xì)胞介素胸腺素等,1、侵襲力(invasiveness)：病原菌突破宿主防線，并能于宿主體內(nèi)定居、繁殖、擴散的能力，稱為侵襲力。,毒力，又稱致病力。表示病原體致病能力的強弱。對細(xì)菌而言，包括吸附、侵入、定殖、擴散、抵抗、毒素等

26、因素。,（1）吸附和侵入能力：細(xì)菌通過具有粘附能力的結(jié)構(gòu)，如革蘭氏陰性菌的菌毛，粘附于宿主的呼吸道、消化道及泌尿生殖道粘膜上皮細(xì)胞的相應(yīng)受體，于局部繁殖，積聚毒力或繼續(xù)侵入機體內(nèi)部。,在原處生長繁殖并引起疾病：霍亂弧菌,侵入細(xì)胞內(nèi)生長繁殖并產(chǎn)生毒素，使細(xì)胞死亡，造成潰瘍：痢疾志賀氏菌,通過粘膜上皮細(xì)胞或細(xì)胞間質(zhì)侵入表層下部組織或血液中進一步擴散：溶血鏈球菌,淋病奈瑟氏球菌：菌毛可使其吸附于尿道粘膜上皮的表面而不被尿液沖走；變異鏈球菌、乳桿菌：牙齒表面粘連成菌斑，造成齲齒。,（2）繁殖與擴散能力通過水解性酶類使組織疏松、通透性增加，有利于病原菌擴散。,透明質(zhì)酸酶膠原酶凝固酶鏈激酶卵磷脂酶,b）致

27、病性葡萄球菌產(chǎn)生的血漿凝固酶有抗吞噬作用；c）分泌一些活性物質(zhì)如溶血素，抑制白細(xì)胞的趨化作用，具有抵抗在吞噬細(xì)胞內(nèi)被殺死的能力，能在吞噬細(xì)胞內(nèi)寄生。,（3）對宿主防御機能的抵抗能力a）細(xì)菌的莢膜和微莢膜具有抗吞噬和體液殺菌物質(zhì)的能力，有助于病原菌在體內(nèi)存活，例如肺炎球菌的莢膜；,2、毒素(toxin),細(xì)菌毒素按其來源、性質(zhì)和作用的不同:外毒素、內(nèi)毒素,病原細(xì)菌，主要是一些革蘭氏陽性菌，在生長過程中合成并分泌到胞外的毒素，如破傷風(fēng)痙攣毒素、白喉毒素、肉毒毒素等；也有存于胞內(nèi)當(dāng)細(xì)菌溶解后才釋放的，如痢疾志賀菌的腸毒素。,（1）外毒素（exotoxin）：,幾種主要的外毒素,白喉外毒素白喉桿菌致病

28、性的原因；其是由被噬菌體溶源化的菌株產(chǎn)生；分子量65K的毒性蛋白；致病機理是抑制重要器官蛋白質(zhì)的合成。,破傷風(fēng)外毒素厭氧菌破傷風(fēng)梭菌產(chǎn)生的毒性蛋白質(zhì)；只在具有壞死組織的深度傷口產(chǎn)生；一種神經(jīng)毒素。,肉毒外毒素肉毒梭菌生長于機體外產(chǎn)生，進入消化道后中毒；毒性蛋白；神經(jīng)毒素,特點：,通常為蛋白質(zhì)，抗原性強；可選擇作用于各自特定的組織器官；不同病原菌產(chǎn)生的外毒素不同，所引起的癥狀也不同；其毒性作用強，但毒性不穩(wěn)定，對熱和某些化學(xué)物質(zhì)敏感。,類毒素（toxoid）和抗毒素（antitoxin）：利用外毒素對熱和某些化學(xué)物質(zhì)敏感的特點，用0.3-0.4%甲醛處理，使其毒性完全喪失，但仍保持抗原性，這種經(jīng)

29、處理的外毒素為類毒素，常用來預(yù)防注射。也可用類毒素注射動物（如馬），以制備外毒素的抗體，稱為抗毒素，作治療用。,（2）內(nèi)毒素（endotoxin）革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁物質(zhì)，主要成分是脂多糖(LPS)，于菌體裂解時釋放；作用于白細(xì)胞、血小板、補體系統(tǒng)、凝血系統(tǒng)等多種細(xì)胞和體液系統(tǒng)，引起發(fā)熱、白細(xì)胞增多、血壓下降及微循環(huán)障礙，有多方面復(fù)雜作用；但相對毒性較弱；各種革蘭氏陰性菌的內(nèi)毒素作用相似，且沒有器官特異性。,鱟試劑法,外毒素與內(nèi)毒素的比較：,*1mg肉毒毒素純品可殺死2億（2000萬）只小鼠或一百萬只豚鼠，中毒的死亡率幾近100%，但及時注射抗毒素及對癥治療可使之降低。1mg破傷風(fēng)毒素可殺死1

30、00萬只小鼠，1mg白喉毒素可殺死1000只豚鼠。,病原體數(shù)量因各種病原體的毒力等不同，差異較大。不同病原體引起宿主致病所需的數(shù)量是不同的。傷寒沙門氏菌：108-109個/宿主霍亂弧菌：106個/宿主痢疾志賀氏菌：7個/宿主侵入門徑各種病原菌侵入門徑不一樣，只有在合適的侵入門徑時才能感染宿主。消化道感染呼吸道感染泌尿生殖道感染創(chuàng)口感染,侵入門徑消化道,Salmonellatyphi（傷寒沙門氏菌）Shigelladysenteriae（痢疾志賀氏菌）Vibriocholerae（霍亂弧菌）Helicobacterpylori(幽門螺桿菌）,侵入門徑呼吸道,Mycobacteriumtuberc

31、ulosis（結(jié)核分枝桿菌）Legionellapneumophila（嗜肺軍團菌）Pneumococcuspneumoniae（肺炎鏈球菌）Corynebacteriumdiphthe-riae（白喉棒桿菌）Bordetellapertussis（百日咳博德特氏菌）Neisseriameningitidis（腦膜炎奈瑟氏球菌）,侵入門徑皮膚傷口,金黃色葡萄球菌釀膿鏈球菌銅綠假單胞菌破傷風(fēng)梭菌產(chǎn)氣莢膜梭菌狂犬病毒,侵入門徑泌尿生殖道,Neisseriagonorrhoeae（淋病奈瑟氏球菌）Treponemapallidum（梅毒密螺旋體）HIV（humanimmunodeficiencyvi

32、rus）,多種途徑,Bacillusanthracis（炭疽芽孢桿菌）通過呼吸道、消化道和皮膚等多種途徑侵害宿主，并引起相應(yīng)部位或全身性的疾病,免疫功能的分類,宿主的免疫力,機體識別和排除抗原性異物的一種保護性功能。正常情況下對機體有利；異常情況下對機體不利。,環(huán)境因素,隱性傳染：如果宿主的免疫力很強，而病原體的毒力相對較弱，數(shù)量又較少，傳染后只引起宿主的輕微傷害，且很快就將病原體徹底消滅，因而基本上不表現(xiàn)臨床癥狀。帶菌狀態(tài)：如果病原體與宿主雙方都有一定的優(yōu)勢，但病原體僅被限制于某一局部且無法大量繁殖，二者長期處于僵持狀態(tài)，就稱為帶菌狀態(tài)。這種長期處于帶菌狀態(tài)的宿主，稱為帶菌者，成為該傳染病的

33、傳染源，十分危險?！皞旣悺保阂粋€健康帶菌者，被證實在美國有7個地區(qū)多達1500個傷寒患者都是她傳染的。,顯性傳染：如果宿主的免疫力較低，或入侵病原菌的毒力較強、數(shù)量較多，病原菌很快在體內(nèi)繁殖并產(chǎn)生大量有毒產(chǎn)物，使宿主的組織和細(xì)胞蒙受嚴(yán)重?fù)p害，生理功能異常，于是就出現(xiàn)了一系列臨床癥狀。按發(fā)病時間的長短：急性傳染：病程僅數(shù)日至數(shù)周，如流行性腦膜炎和霍亂等；多為細(xì)胞外寄生物引起！慢性傳染：病程往往長達數(shù)月至數(shù)年，如結(jié)核病、麻風(fēng)病等。多由細(xì)胞內(nèi)寄生物引起！,按發(fā)病部位的不同：局部感染全身感染毒血癥：病原體被限制在局部病灶，只有所產(chǎn)生的毒素進入血液而引起全身癥狀者。如白喉、破傷風(fēng)等。菌血癥：病原體由

34、局部的原發(fā)病灶侵入血液后傳播至遠(yuǎn)處組織，但未在血流中大量繁殖的傳染病。如傷寒病早期。敗血癥：病原體侵入血液并在其中大量繁殖，造成宿主嚴(yán)重?fù)p傷和全身中毒癥狀者。膿毒血癥：一些化膿性細(xì)菌在引起宿主的敗血癥的同時，又在其許多臟器中引起化膿性病灶者。,抗原（Antigen，Ag）,定義：抗原是能誘導(dǎo)機體發(fā)生體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)抗體和T淋巴細(xì)胞在體內(nèi)外發(fā)生特異結(jié)合反應(yīng)的大分子物質(zhì)，又稱為免疫原。,免疫原性或抗原性抗原在體內(nèi)激活免疫系統(tǒng)，使其產(chǎn)生抗體和特異效應(yīng)細(xì)胞的特性。免疫反應(yīng)性或反應(yīng)原性抗原能與相對應(yīng)的免疫應(yīng)答產(chǎn)物（抗體及致敏淋巴細(xì)胞）發(fā)生特異結(jié)合和反應(yīng)的能力。,一、抗原的特性,二、抗原的種

35、類,完全抗原：具有免疫原性和反應(yīng)原性的抗原；不完全抗原或半抗原：只有反應(yīng)原性而沒有免疫原性的抗原,1.分子量大?。和ǔＧ闆r下，抗原的免疫原性與其分子量成正比；2.異物性：抗原大分子與所接觸的機體的物質(zhì)之間的理化性質(zhì)的差異程度；異種間物質(zhì)同種異體間的不同成分自體內(nèi)的隔絕成分其它自體組織蛋白發(fā)生變異,三、抗原免疫原性的物質(zhì)基礎(chǔ),3.結(jié)構(gòu)復(fù)雜性：在大分子中，蛋白質(zhì)的免疫原性最強，其次是復(fù)雜多糖，再次是核酸、類脂物質(zhì)。通常情況下，大分子的結(jié)構(gòu)越復(fù)雜，免疫原性越強。例：多聚Ala-lys10000；連接tyr、Glu構(gòu)象易接近性,抗原物質(zhì)上能夠刺激淋巴細(xì)胞產(chǎn)生應(yīng)答并與其產(chǎn)物特異反應(yīng)的化學(xué)基團。它是抗原特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)。一個抗原的表面可以存在多個不同的抗原決定簇；抗原所攜抗原決定簇的數(shù)目稱為抗原結(jié)合價，一般抗原是多價的。,四、抗原決定簇，或抗