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1、實(shí)驗(yàn)五 離體蛙心灌流實(shí)驗(yàn)一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解蟾蜍離體心臟的灌流的方法。2、觀察細(xì)胞外液鉀離子、鈣離子濃度變化對心臟活動的影響。二 實(shí)驗(yàn)原理心臟離體后,如用人工灌流的方法,保持其新陳代謝的順利進(jìn)行,則心臟仍能有節(jié)律的自動收縮和舒張,并可維持較長的時(shí)間。離體心臟所需的條件應(yīng)與動物內(nèi)環(huán)境的理化性質(zhì)基本相近,因此改變灌流液的理化因素,則可引起心臟活動的變化。1、任氏液:正常對照 含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4 和蒸餾水,其電解質(zhì)、晶體滲透壓、pH值與蛙的組織液相近。2、0.65%NaCl灌流:3、2%CaCl2灌流4、 1%KCl灌流 5、1:10000 E灌流6、
2、1:10000 Ach灌流 7、心得安 1受體阻斷劑,抑制腎上腺素與1受體結(jié)合,使E不能發(fā)揮作用。8.、阿托品 M受體阻斷劑,抑制Ach減慢心率,加速房室傳導(dǎo),增加心房收縮力。三 實(shí)驗(yàn)器材微機(jī)生物信號處理系統(tǒng), physiology系統(tǒng),學(xué)校服務(wù)器系統(tǒng),蟾蜍離體蛙心,任氏液,1%KCl,3%CaCl2,65%NaCl,1/10000 E,心得安+1/10000,1/10000 Ach,阿托品+1/10000 Ach。四 實(shí)驗(yàn)步驟1、標(biāo)本制備(觀看視頻)2、儀器及標(biāo)本的連接3、具體軟件操作:1)離子試劑:任氏液0.65%NaCl溶液任氏液清洗1%KCl溶液任氏液清洗2%CaCl2溶液任氏液清洗2
3、)藥物試劑:腎上腺素(E)任氏液清洗心得安任氏液清洗Ach,任氏液清洗阿托品任氏液清洗。五 實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖1 離體蛙心灌流表1 離體蛙心灌流數(shù)據(jù)記錄實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目收縮強(qiáng)度心率處理前處理后處理前處理后任氏液2.452.45340.65% NaCl2.451,6534342% CaCl21.273.4334381% KCL2.432.4335211:10000E0.93.463335E+心得安1.132.4933341:10000Ach1.051.11330Ach+阿托品1.132.463434六 結(jié)果分析此實(shí)驗(yàn)說明心臟具有自律性,興奮性,傳導(dǎo)性,收縮性,離體心臟靜脈竇還能產(chǎn)生興奮并傳導(dǎo)到心房和心室,引起心臟有節(jié)律的興奮和收縮。體內(nèi)細(xì)胞所直接生存的環(huán)境較為穩(wěn)定,
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