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文檔簡(jiǎn)介

1、臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué) 課件模板-35,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,95%以上的淚液由淚腺分泌,包括基礎(chǔ)分泌和反射分泌。前者的分泌活動(dòng)無神經(jīng)支配,日夜不停;后者的分泌受交感神經(jīng)、副交感神經(jīng)和感覺神經(jīng)等支配。當(dāng)機(jī)體受到局部、全身或精神刺激時(shí),通過神經(jīng)反射產(chǎn)生淚液分泌效應(yīng),大量分泌淚液,形成淚流。 淚液由粘液、漿液和脂質(zhì)組成。粘液比例0.6%(睡眠時(shí)可達(dá)2%);漿認(rèn)占全淚的質(zhì)占全淚的1.4%,散布于漿液表面,形成多分子膜,可反射光腺,賦予光澤,并可減少淚液蒸發(fā)。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,淚液具有多方面的功能:在眼表形成淚膜,防止塵埃、煙霧和微生物直接

2、侵害眼球;清除結(jié)膜囊內(nèi)炎癥產(chǎn)物,微生物等異物及脫落的細(xì)胞;淚液吟吸多種抗微生物物質(zhì),如抗體、溶菌酶、乳鐵蛋白等,可防御病原微生物對(duì)角膜和結(jié)膜的侵襲;在眼瞼和眼球之間起潤(rùn)滑作用,沽少磨擦,便于眼球運(yùn)動(dòng),防止角膜和結(jié)膜損傷;角膜前淚膜,尤其是淚膜表面的脂質(zhì)層,形成完整光滑的光學(xué)表面,能無孔不入反射光線,利于外界景物在視網(wǎng)膜清晰成像;淚液具有營(yíng)養(yǎng)眼表組織和排除代謝產(chǎn)物的作用。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,淚液檢驗(yàn)主要用于評(píng)價(jià)淚腺功能、輔助眼病及某些全身性疾病和診斷和治療藥物的監(jiān)測(cè)。 一、淚樣采集 淚樣采集方法不同時(shí)各成分的含量亦不同,應(yīng)根據(jù)檢查的目的和淚樣用量選擇采淚方法。

3、采集的方法有: 1。刺激采淚法:右采集較多的淚液,發(fā)供多項(xiàng)試驗(yàn)應(yīng)用。采集于下眼瞼皮膚涂一薄層清涼油或針刺睛明穴,待出現(xiàn)反射淚液后用毛細(xì)管在外眥部吸取淚液。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,2。毛細(xì)管采淚法:用內(nèi)徑0.20.3mm毛細(xì)管接觸,淚液被引流進(jìn)入毛細(xì)管。此法采集淚液幾乎不含刺激性反射淚液。 3。吸附采淚法:將已稱重的濾紙片放入受檢者的下結(jié)膜囊內(nèi)吸收淚液,待紙片被淚液飽和后取出稱重。按淚液比密1.005計(jì),求出紙片吸附的淚液量。 二、一般性狀檢查 外觀:正常人淚液化氣無色透明的液體,當(dāng)結(jié)膜、淚腺感染、其炎性分泌物混入淚液進(jìn),可顯不同程度的混濁,甚至呈粘液膿性。,臨床

4、基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,血性淚也可見于結(jié)膜為、淚囊和淚腺腫瘤等。 三、化學(xué)檢查 (一)PH 淚液PH常用精密的PH試紙測(cè)定。亦可直接將微電極放入下穹窿,測(cè)定結(jié)果較準(zhǔn)確。淚液PH與二氧化碳含量有關(guān),故正常人淚液PH變動(dòng)范圍較寬,介于6.47.7之間。在閉眼時(shí)間較和后PH稍降低。干性角結(jié)膜炎、角膜損傷和春季結(jié)膜炎患者淚液PH常增高,而沙眼和細(xì)菌性結(jié)膜炎患者的淚液PH不增高。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,對(duì)眼病患者進(jìn)行人工淚液補(bǔ)液治療時(shí),需嚴(yán)格控制淚液PH值。以期能較好地溶解粘液,改善眼部癥狀。故人工淚配制后須測(cè)定和校準(zhǔn)PH。 (二)蛋白質(zhì) 淚液中

5、蛋白質(zhì)含量較高,在刺激后的淚液中占0.30.7%。淚液中至少有20種蛋白質(zhì)。故淚液蛋白有其特殊性。其中淚白蛋白、溶菌酶和乳鐵蛋白為淚液的主要蛋白質(zhì),占淚總蛋白的3545%,全部來自淚腺。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,其含量高低與淚腺功能有關(guān)。 1??刮⑸锏鞍踪|(zhì)淚中含有多種抗微生物蛋白質(zhì),主要有溶菌酶、乳鐵蛋白、補(bǔ)體和SIGA、IGG、IGM型抗體等。 (1)溶菌酶:人淚溶菌酶濃度很高,約為血清溶菌酶濃度的150200倍。溶菌酶減低見于:StevensJohnson綜合征、Sjogren綜合征、眼瘢痕性類天皰瘡患者,可減至正常人酶含量的一半或更低;其他原因所致的干眼病

6、;感染、化學(xué)氣體及煙霧等所致淚腺組織損傷;使用腎上腺素能受體阻滯劑,如心得寧、噻嗎心安等治療的患者。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,(2)乳鐵蛋白:與鐵有很強(qiáng)的結(jié)合力,與鐵的結(jié)合力比血清TF強(qiáng)300倍。且較穩(wěn)定,在PH210間都能與鐵結(jié)合,LF與Fe3+結(jié)合后,妨礙GN菌對(duì)鐵的利用,從而干擾,抑制其代謝活動(dòng)。LF還有直接殺菌作用。 淚液中的LF主要來自反射分泌和結(jié)膜副淚腺,含量豐富,約占淚蛋白總量的1/4。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,可用單向擴(kuò)散或免疫比濁法測(cè)定,正常人淚液LF含量為1.042.23g/L,40歲后逐漸下降,70歲以上者為0.

7、851.63g/L。反射淚比保留淚LF含量高,正常成人3g/L.LF測(cè)定的臨床意義同溶核輻射酶,但更為敏感。反射淚液LF 2。淚白蛋白:是由淚腺和結(jié)膜漿液腺產(chǎn)生的一種特殊蛋白質(zhì)。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,在區(qū)帶電泳中位于前白蛋白區(qū),但其不與抗前白蛋白抗體發(fā)生反應(yīng)。淚白蛋白具有遺傳多型性,在聚丙烯酰胺電泳時(shí)分為5個(gè)帶。這種遺傳多型性可用于遺傳學(xué)研究,此外,淚白蛋白測(cè)定也可用于評(píng)價(jià)淚腺的功能。 (三)酶類 淚液中有多種酶。臨床意義較明確的有以下幾種: 1。乳酸脫氫酶和蘋果酸脫氫酶:二者都來自角膜上皮,在淚中濃度較高。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查

8、:,LD約為血清中的20倍。正常人淚液LD同工酶的構(gòu)成比與血清相反,從LD1LD5依次遞增,以LD4和LD5最多。淚液MD同工酶用乙酸纖維電泳可分離出MD5和MDM,正常人以MDS為主?;技?xì)菌性角膜潰瘍及化學(xué)性角膜損傷時(shí),淚液LD和MD活性減低。凡角膜上眼損傷者均可引起的LG同工酶H/M比值和MD同工酶中MDk不同程度的增高。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,2。膠原酶:正常人淚液無膠原酶,于感染性角膜潰瘍、干眼病、眼外傷、尤其是化學(xué)傷患者的淚液中可檢出膠原酶的活性。 (四)電解質(zhì) 淚液含多種電解質(zhì),各離子濃度多數(shù)與血液離子濃度相關(guān)。表144為反射淚液的電解質(zhì)測(cè)定參考值。

9、 表14 4 淚液電解質(zhì)參考值 離子名稱離子濃度K+19.15.3mmol/LNa+125.417.1mmol/LCa+0.760.32mmol/LMg2+0.070.28mmol/LZn2+31.9812.09mol/LCu2+0.690.27mol/LFe2+,Fe3+9.315.02mol/LCl106130mmol/LHCO32630mmol/L 淚腺囊性纖維性患者淚液鈣離子濃度增高,而鈉離子濃度減低。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,翼狀胬肉、單純皰疹病毒性角膜炎和慢性結(jié)膜炎患者淚液鈣離子濃度明顯減低。單純皰疹病毒性角膜炎時(shí)淚液鋅也明顯減低,慢性結(jié)膜炎時(shí)還可見淚

10、液鐵明顯減低。淚液鈉、鎂、重碳酸根和氯離子濃度與其在血清中的濃度顯著相關(guān),故其測(cè)定可間接反映血中的離子濃度。 (五)治療藥物監(jiān)測(cè) 一些藥物的淚液中的濃度與其在血漿中的游離濃度基本一致故淚液藥物濃度監(jiān)測(cè)不僅可反映部組織的藥物濃度,也可間接反映血中游離藥物濃度。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,四、顯微鏡檢查 (一)淚液和結(jié)膜分泌物涂片 正常人淚液直接涂片鏡檢,可見少量白細(xì)胞,偶見上皮細(xì)胞?;撔越Y(jié)膜炎的結(jié)膜分泌物混入淚認(rèn),涂片可見大量的分葉核粒細(xì)胞。出血性結(jié)膜炎時(shí)尚可見大量紅細(xì)胞。感染結(jié)膜吸吮線蟲患者淚液涂片可見蟲卵,偶見幼蟲。眼蠅蛆病感染之初和反復(fù)感染者的淚液可檢出蠅卵。

11、,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,涂片經(jīng)瑞物染色后可進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù)?;撔越Y(jié)膜炎主要為大量中性粒細(xì)胞和上皮細(xì)胞,春季結(jié)膜炎和眼寄生蟲病可見嗜酸性粒細(xì)胞增多。Siogren綜合征和淚腺裂頭蚴病的淚腺有淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤(rùn),淚中亦可見淋巴細(xì)胞增多。 (二)角膜棉拭涂片 用棉拭子擦拭角膜后制作涂片,以甲醛復(fù)紅奧新藍(lán)染色后鏡檢。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,正常涂中可見杯狀上皮細(xì)胞和白細(xì)胞。于干性角膜結(jié)膜炎患者的涂片中可見角化上皮細(xì)胞,杯狀細(xì)胞消失。若進(jìn)行Giemsa染色檢查,有時(shí)在結(jié)膜炎患者的上皮細(xì)胞內(nèi)可見到嗜堿性包涵體染藍(lán)色,呈圓形或橢圓形,直徑為

12、0.32.5m,為局部用藥,尤其是新霉素點(diǎn)眼損傷上皮細(xì)胞所致此包涵體不同于沙眼衣原體包涵體。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,幾要時(shí)可用沙眼衣原體單克隆抗體加上鑒別。 (三)結(jié)膜印痕 以乙酸纖維薄膜輕壓于結(jié)膜表面采集脫落細(xì)胞,經(jīng)PAS和蘇木精染色后鏡檢。正常人的結(jié)膜印痕片上的可見密集,互相粘連的小上皮細(xì)胞,其間散在許多橢圓、豐滿、PAS強(qiáng)陽性的杯狀細(xì)胞及PAS陽性碎屑。在眼類天皰瘡患者的印痕片中只見多角形粘連不良的大上皮細(xì)胞,不見杯狀細(xì)胞及胞外PAS陽性碎屑。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,五、免疫學(xué)檢查 淚液中具有多種抗微生物蛋白質(zhì),正常人淚液中

13、的免疫球蛋白以SIGA和IGg 為主。各種Ig 含量的個(gè)體差異較大。淚液雖含多種補(bǔ)體,但臨床應(yīng)用較多者僅C3測(cè)定。 臨床意義 因各家所報(bào)道參考值不一,故對(duì)患者測(cè)定結(jié)果的分析病人最好結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室所用方法考慮。引起的IG及C3變化疾病的有: IGA增高見于細(xì)菌性結(jié)膜炎、角膜炎或角膜潰瘍、流行性出血性結(jié)膜炎。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,減低見于單純皰疹性角膜炎、頑固性結(jié)膜炎、淺層角膜炎和蠶食性角膜炎患者。心得安中毒時(shí)淚中檢不郵IGA。IGG和IGM增高見于流行性出血結(jié)膜炎患者;沙眼無細(xì)菌合并感染時(shí)患者可減低。IGE增高見于春季結(jié)膜炎以及支氣管哮喘患者。C3增高見于急性病毒

14、性角膜炎、流行性出血性結(jié)膜炎等;減低見于虹膜炎。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,六、微生物學(xué)檢查 感染性外眼疾病的淚液與炎癥滲出物混合在一起,難以截然分開。故淚液微生物學(xué)檢查實(shí)際上是對(duì)上述混合物的檢查。 淚液中常見微生物有:細(xì)菌包括革蘭氏陽性與陰性球菌與桿菌,常見者如白色葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、銅綠假單胞菌等;真菌以曲霉菌檢出率較高;病毒:常見者有單純皰疹病毒、腺病毒型和型等;衣原體沙眼衣原體是引起沙眼的病原體。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二節(jié) 淚液檢查,第二節(jié) 淚液檢查:,微生物的檢查可取淚液或結(jié)膜分泌物進(jìn)生涂片染色以顯微鏡觀察或做培養(yǎng)等。沙眼衣原體的檢查也可用

15、免疫學(xué)的方法,以抗沙眼衣原體抗檢查,方法特異。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第三節(jié) 乳頭溢液檢查,第三節(jié) 乳頭溢液檢查:,乳頭溢液分生理性溢液和病理性溢液兩類。前者見于妊娠期和授乳期婦女,后者是乳腺疾病的一種臨床表現(xiàn)。發(fā)生乳頭溢液最常見的疾病是導(dǎo)管內(nèi)乳頭頭瘤占全部乳頭溢液病例的SIZE=”3”70%左右。乳腺癌所致乳頭溢液占溢液總數(shù)的SIZE=”3”10%左歷。此外內(nèi)分泌障礙、乳腺炎、乳腺導(dǎo)管擴(kuò)張癥等亦可引起乳頭溢液。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第三節(jié) 乳頭溢液檢查,第三節(jié) 乳頭溢液檢查:,一、標(biāo)本采集 絕經(jīng)前婦女較易得乳頭分泌物。于月經(jīng)周期的第四周,由于黃體激素的影響,乳腺分泌物增多,利于標(biāo)本采集,采集標(biāo)本前應(yīng)進(jìn)

16、行乳房觸診,檢查有無腫塊及腫塊位置,然后冼凈乳頭,擦干。若采集微生物培養(yǎng)標(biāo)本尚須將乳頭和乳暈部消毒后以無菌操作收集乳頭溢液。若溢液較多,應(yīng)以無菌紗布拭去最初的少量溢液,收集新分泌的溢液:自然溢出液:根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康闹苯邮占谳d玻片上,制備涂片或接種于培養(yǎng)基內(nèi)即可。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第三節(jié) 乳頭溢液檢查,第三節(jié) 乳頭溢液檢查:,若溢液較豐富,亦可收集于小離心管內(nèi),經(jīng)離心處理后取沉淀物涂片或接種培養(yǎng)。有腫塊乳腺分泌物自腫塊的遠(yuǎn)乳頭側(cè)順導(dǎo)管引流方向用手輕按摩和擠壓,則集分泌物。無腫塊乳腺分泌物可沿乳暈周圍輕輕做向心性按摩擠壓,采集分泌物。刮片或印片:乳頭或乳房其它部位有糜爛、潰瘍或瘺管口者,先拭去表面的

17、腐爛壞死組織,再用小刮板刮取病理分泌物涂片,也可用消毒干燥的載正好片在病損部位輕壓印片進(jìn)行檢查。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第三節(jié) 乳頭溢液檢查,第三節(jié) 乳頭溢液檢查:,二、一般性狀檢查 (一)量 病理性乳頭溢液量不定,通常經(jīng)“+”號(hào)表示:“-”:按摩擠壓后不見溢液;“”按摩擠壓后勉強(qiáng)溢出痕量;“+”操作后溢出2-3滴;“2+”輕壓時(shí)呈細(xì)流射出;“3+”自然溢出。 (二)外觀 按外觀性狀可將乳頭溢液分為6類。其中以血性和漿液血性最常見,約占溢液的50%以上;漿液性及乳頭汁樣次之;基客觀存在類型較少見。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第三節(jié) 乳頭溢液檢查,第三節(jié) 乳頭溢液檢查:,1。血性溢液呈深淺不同的紅色或褐色,以導(dǎo)

18、管乳頭狀瘤最多見,其次可能由乳腺癌所致尤其是導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌易致血性溢液。因此50歲以上的婦女特別是一側(cè)乳頭出現(xiàn)單孔血性溢液時(shí)應(yīng)予高度重視,乳腺增生病和乳腺導(dǎo)管擴(kuò)張癥等疾病也可出現(xiàn)血性溢液。 2。漿液性溢液多呈微黃色,稀薄而透明。見于導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤、乳腺增生癥等約2.5%, 由乳腺癌所致。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第三節(jié) 乳頭溢液檢查,第三節(jié) 乳頭溢液檢查:,3。水樣溢液為無色透明,清澈如水。約50%由乳腺癌所致。 4。乳汁樣溢液見于停止授乳后的婦女,有的長(zhǎng)達(dá)數(shù)月甚至數(shù)年仍有少量溢液。此外可見乳腺增生癥、溢乳閉經(jīng)綜合征、口服避孕藥等。 5。粘液性溢液粘稠,常為雙側(cè)多導(dǎo)管自動(dòng)溢液。多見于性功能低下者,如更年期婦女;亦可見于乳腺導(dǎo)管擴(kuò)張癥漿細(xì)胞性乳腺炎。,臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第三節(jié) 乳頭溢液檢查,第三節(jié) 乳頭溢液檢查:,6。膿性溢液:多為黃色或乳黃色,濃稠,有時(shí)帶血,是乳腺炎癥的表現(xiàn)。見于急慢性乳腺炎、乳腺導(dǎo)管擴(kuò)張癥和乳腺結(jié)核。若為放線菌感染所致仔細(xì)檢查可見硫磺樣顆粒。 三、顯微鏡檢查 制備薄膜片以瑞特、H-E或巴氏染色后鏡檢。后二種染色多用于脫落細(xì)胞檢查。 (一)細(xì)胞 1。生理性溢液,可見于少量來自乳腺頭的鱗狀上皮細(xì)胞。,臨床

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