1、固有免疫的組成細(xì)胞,固有免疫亦稱非特異性免疫或天然免疫，是生物體在長(zhǎng)期種系進(jìn)化過(guò)程中逐漸形成的一系列防御機(jī)制。 非特異性抗感染免疫； 參與對(duì)體內(nèi)衰老損傷或畸變細(xì)胞的清除； 在特異性免疫應(yīng)答過(guò)程中發(fā)揮重要作用。 主要包括：?jiǎn)魏送淌杉?xì)胞、DC、 NK細(xì)胞、 NKT細(xì)胞、T細(xì)胞、B1細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞等。,吞噬細(xì)胞,單核吞噬細(xì)胞,中性粒細(xì)胞,血液中單核細(xì)胞,組織器官中巨噬細(xì)胞,定居的巨噬細(xì)胞,游走的巨噬細(xì)胞,定居的巨噬細(xì)胞：所處部位不同而有不同的形態(tài) 游走的巨噬細(xì)胞：血液中單核細(xì)胞衍生而來(lái) 中性粒細(xì)胞： 趨化作用和吞噬功能 調(diào)理作用：IgG Fc受體 補(bǔ)體C3b受體,第一節(jié) 吞噬細(xì)胞,巨噬細(xì)

2、胞是體內(nèi)執(zhí)行非特異性免疫的效應(yīng)細(xì)胞，同時(shí)在特異性免疫應(yīng)答的各個(gè)階段也起重要作用。,巨噬細(xì)胞的生物學(xué)作用,識(shí)別、清除病原體等抗原性異物 參與和促進(jìn)炎癥反應(yīng) 對(duì)腫瘤和病毒感染等靶細(xì)胞的殺傷作用 加工提呈抗原，啟動(dòng)特異性免疫應(yīng)答 免疫調(diào)節(jié)作用,（一）識(shí)別、清除抗原類異物,對(duì)抗原性異物的識(shí)別 對(duì)抗原性異物的殺傷消化與清除,對(duì)抗原性異物的識(shí)別,1.通過(guò)表面模式識(shí)別受體PRR（非調(diào)理性受體） 直接識(shí)別結(jié)合病原體共同表達(dá)的； 宿主衰老損傷細(xì)胞； 凋亡細(xì)胞； 2. 通過(guò)IgG Fc受體和補(bǔ)體受體（調(diào)理性受體） 識(shí)別攝取抗體或補(bǔ)體結(jié)合的病原體等抗原,表面特定的分子結(jié)構(gòu),對(duì)抗原性異物的識(shí)別,1.模式識(shí)別受體及其作

3、用 模式識(shí)別受體為免疫系統(tǒng)細(xì)胞表達(dá)的，與病原微生物或細(xì)胞應(yīng)激相關(guān)的蛋白?？梢员荒Ｊ阶R(shí)別受體識(shí)別的微生物特定分子為病原相關(guān)分子模式（PAMP）。包括細(xì)菌的碳水化合物(脂多糖和甘露糖)；革蘭氏陽(yáng)性菌的肽聚糖和脂磷壁酸，及真菌多糖。 根據(jù)其功能，可分為細(xì)胞內(nèi)吞噬受體或信號(hào)受體。后者包括細(xì)胞膜連的Toll樣受體及胞漿內(nèi)NOD樣受體。內(nèi)吞噬受體促進(jìn)吞噬細(xì)胞對(duì)微生物的附著，吞噬和破壞，而不轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞信號(hào)。 不同種類的微生物可表達(dá)不同的PAMP，主要包括脂多糖、磷壁酸、肽聚糖、甘露糖、細(xì)菌DNA、雙鏈RNA和葡聚糖等。 （1）甘露糖受體 （2）清道夫受體 （3）Toll樣受體,甘露糖受體（MR）,有8個(gè)C型凝

4、集素結(jié)構(gòu)域，借此能與廣泛表達(dá)于病原體細(xì)胞壁糖蛋白和糖脂分子末端的甘露糖和巖藻糖殘基（即相應(yīng)配體）結(jié)合，產(chǎn)生吞噬作用。,清道夫受體(SR),表達(dá)于巨噬細(xì)胞表面，可識(shí)別G-菌脂多糖、G+菌磷壁酸、乙酰化低密度脂蛋白和細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)面翻轉(zhuǎn)到胞膜外側(cè)面的磷脂酰絲氨酸等，參與對(duì)某些病原體、喪失唾液酸的陳舊紅細(xì)胞、某些凋亡細(xì)胞的清除。,Toll樣受體（TLR）,1.TLR家族：TLR1-10 為型跨膜蛋白質(zhì)，分為胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞漿區(qū)。 人TLR胞膜外區(qū)由550-980氨基酸殘基組成，不同TLR之間同源性較差，但其中多有18-31個(gè)富含亮氨酸的重復(fù)基序(LRR)，可與協(xié)同分子如CD14分子中的亮氨酸重復(fù)序列結(jié)

5、合，介導(dǎo)蛋白質(zhì)之間的相互作用。 人TLRs胞漿區(qū)由200多個(gè)氨基酸殘基組成，與IL-1R家族成員胞漿區(qū)高度同源，稱為Toll/IL-1R同源區(qū)(TIR)。TIR區(qū)域是TLR向下游進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)的核心元件，該區(qū)關(guān)鍵位點(diǎn)的突變或序列缺失將阻斷信號(hào)向下傳遞。,TLR1能在所有細(xì)胞包括單核細(xì)胞、多形核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、細(xì)胞中表達(dá)；TLR2、TLR4、TLR5主要表達(dá)在髓源性細(xì)胞，即表達(dá)于除T、B、NK細(xì)胞外的免疫細(xì)胞；TLR3表達(dá)在樹突狀細(xì)胞。 TLR可根據(jù)分布特性如廣泛性(TLR1)、限制性(TLR2、TLR4、TLR5)和特異性(TLR3)進(jìn)行分類。 TLR4還廣泛分布于其他組織細(xì)胞，如心肌細(xì)胞和微血

6、管內(nèi)皮細(xì)胞、人呼吸道上皮細(xì)胞、肺巨噬細(xì)胞和腹腔巨噬細(xì)胞、枯否氏細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞；TLR2還分布在成纖維細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞及巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞。TLR2、TLR4還分布于人類胚胎腎細(xì)胞(HEK293)、齒齦纖維母細(xì)胞、人表皮內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)及THP-1細(xì)胞。,TLR廣泛分布各種細(xì)胞,由TLR介導(dǎo)的功能,TLR是先天免疫模式識(shí)別的主要受體，通過(guò)識(shí)別病原相關(guān)模式分子，激活固有免疫系統(tǒng)產(chǎn)生前炎癥因子、抗微生物肽抵御病原所致?lián)p害，同時(shí)作為預(yù)警信號(hào)，向抗原遞呈細(xì)胞發(fā)出警報(bào)，啟動(dòng)固有疫。因此，對(duì)TLR研究是深入認(rèn)識(shí)固有免疫的關(guān)鍵環(huán)節(jié)和重要基礎(chǔ)。,1 促進(jìn)細(xì)胞因子合成與釋放，引發(fā)炎癥反應(yīng),樹

7、突狀細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等通過(guò)TLR感受入侵病原體的PAMP刺激后，經(jīng)由胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路，最終由進(jìn)入胞核內(nèi)的活化NF-B啟動(dòng)核內(nèi)相關(guān)基因，轉(zhuǎn)導(dǎo)出相應(yīng)的mRNA，從而合成IL-1、IL-6、IL-8、IL-12、TNF-及IFN-等細(xì)胞因子并釋放到胞外，引起粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞趨化聚集，毛細(xì)血管通透性增高，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)等炎癥反應(yīng)，發(fā)揮早期免疫應(yīng)答的效應(yīng)。 不同的TLR接受同一種PAMP刺激，所誘發(fā)產(chǎn)生不同種類的細(xì)胞因子，當(dāng)同一種病原體入侵時(shí)，其往往能活化體內(nèi)多種TLR，從而使得由TLR誘發(fā)的天然免疫應(yīng)答具有多樣性，促使免疫系統(tǒng)對(duì)病原體的殺傷和清除是有效的。,2 促進(jìn)免疫細(xì)胞的成熟和功能化,脂多糖（LP

8、S）可經(jīng)TLR2促進(jìn)靜止樹突狀細(xì)胞表達(dá)CD83、MHC、CD80、CD86、CD54和CD58等膜分子，從而使DC擁有這些處理和提呈抗原所必須的表面分子，進(jìn)而使DC成熟。,3 在抗病毒感染的作用,TLR4能促進(jìn)機(jī)體對(duì)病毒的清除。,4 調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答作用,在一定的條件下，脂多糖結(jié)合蛋白 (LBP)可激活TLR2信號(hào)途徑，產(chǎn)生促凋亡蛋白和Caspase-8，導(dǎo)致表達(dá)TLR2的細(xì)胞發(fā)生凋亡，從而可降低過(guò)度的免疫應(yīng)答，調(diào)控機(jī)體對(duì)入侵病原體的免疫應(yīng)答在適度的水平。 抗原識(shí)別受體和MyD88依賴的TLR家族協(xié)同作用可介導(dǎo)自身反應(yīng)性B細(xì)胞產(chǎn)生IgG類自身抗體，從而參與獲得性免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)。,5 誘導(dǎo)一氧化氮（

9、NO）依賴性殺菌活性,6 TLR間的協(xié)同作用,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有些TLR對(duì)PAMP的識(shí)別有協(xié)同或拮抗的作用。如TLR6可增強(qiáng)TLR2對(duì)G+菌肽聚糖和表皮金葡菌來(lái)源的酚溶性調(diào)劑蛋白的反應(yīng)，但不影響其對(duì)脂肽的識(shí)別。,巨噬細(xì)胞,Fc受體,病原體,2.巨噬細(xì)胞表面的調(diào)理性受體及其作用 （1）IgGFc受體介導(dǎo)的調(diào)理作用 病原體抗原Fab Ig Fc巨噬細(xì)胞,（2）補(bǔ)體受體介導(dǎo)的調(diào)理作用 以補(bǔ)體激活后裂解產(chǎn)物C3b或C4b為橋梁， 病原體氨基端 補(bǔ)體 羧基端巨噬細(xì)胞,巨噬細(xì)胞對(duì)抗原性異物的殺傷、消化、清除,1.氧依賴殺菌系統(tǒng)及其作用 2.氧非依賴殺菌系統(tǒng)及其作用 3.抗原性異物的消化與清除,巨噬細(xì)胞+病原體等抗

10、原性異物,吞噬或吞飲,吞噬體,+溶酶體,吞噬溶酶體,水解酶,消化降解,1.氧依賴殺菌系統(tǒng)及其作用,（1）反應(yīng)性氧中間物系統(tǒng)（ROI) 呼吸爆發(fā) 還原性輔酶 分子氧活化,活性氧物質(zhì)（超氧陰離子，游離羥基，過(guò)氧化氫，單態(tài)氧）,（2）反應(yīng)性氮中間物系統(tǒng)(RNI),還原性輔酶,四氫生物蝶呤,L-精氨酸,NO,胍氨酸,誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶（ iNOS）,殺菌,+氧分子,殺菌,2 .氧非依賴殺菌系統(tǒng),(1)酸性PH：吞噬體或溶酶體形成后，糖酵解導(dǎo)致的乳酸堆積 （2）溶菌酶：酸性條件下，破壞G菌肽聚糖 （3）防御素：由陽(yáng)離子蛋白和多肽組成。在菌細(xì)胞脂質(zhì)雙層形成離子通道,3.抗原性異物的消化與清除,水解酶作用

11、 （脂酶、蛋白酶、核酸酶、磷酸酶）,大片段,具有免疫原性小分子片段,胞吐作用,形成抗原肽MHC復(fù)合物,表達(dá)于巨噬細(xì)胞表面，T細(xì)胞識(shí)別，特異性免疫應(yīng)答,（二）參與和促進(jìn)炎癥反應(yīng),（1）細(xì)胞因子對(duì)巨噬細(xì)胞的趨化 （2）分泌趨化性細(xì)胞因子（MIP-1,M CP-1,IL-8) （3）分泌促炎細(xì)胞因子（IL-1，IL-6,TNF-）炎癥介質(zhì)，補(bǔ)體 （4）分泌IFN-、，胞外酶,（三）對(duì)腫瘤和病毒感染細(xì)胞的殺傷,(1) LPS、IFN-、GM-CSF的激活 (2) 表面調(diào)理/非調(diào)理受體表達(dá)增加 (3) 溶酶體數(shù)目，ROI,RNI,水解膜濃度提高，釋放到胞外，產(chǎn)生效應(yīng) (4) 分泌TNF- (5) ADC

12、C效應(yīng),（四）加工提呈抗原、啟動(dòng)適應(yīng)性免疫應(yīng)答,（1）形成MHC/抗原肽復(fù)合物，供CD4+/CD8+T細(xì)胞識(shí)別；TCR-CD3-CD4/CD8輔助受體分子 MHC/抗原肽復(fù)合物 第一信號(hào) （2）巨噬細(xì)胞B7、ICAM-1與T細(xì)胞表面CD28和LFA-1結(jié)合 共刺激信號(hào)，第二信號(hào),T細(xì)胞活化，啟動(dòng)特異性免疫應(yīng)答,（五）免疫調(diào)節(jié),（1）IL-1：T、B細(xì)胞活化、增殖、分化；造血干細(xì)胞增殖分化 （2）TNF-：促進(jìn)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞 (CTL)功能 （3）IL-6：B細(xì)胞增殖、分化、分泌抗體；T細(xì)胞分化；造血干細(xì)胞增殖 （4）IL-1,IL-18：促進(jìn)T細(xì)胞、NK細(xì)胞功能 （5）IL-10：抑制單核

13、巨噬細(xì)胞活化及抗原呈遞,第二節(jié) 樹突狀細(xì)胞（DC）,廣泛分布于腦以外的全身組織和臟器，數(shù)量較少，僅占外周血單個(gè)核細(xì)胞的1。 成熟DC的表面特征性標(biāo)志為CD1a、CD11c、CD83，可高表達(dá)MHC/類分子和共刺激分子（ B7、ICAM-1）。 功能： 1.專職抗原提呈細(xì)胞，攝取、加工和提呈抗原，啟動(dòng)特異性免疫應(yīng)答。 2.免疫調(diào)節(jié)：IL-12、IL-10、TGF、型IFN,第三節(jié) 自然殺傷細(xì)胞,NK不表達(dá)特異性抗原識(shí)別受體，不同于T、B淋巴細(xì)胞的一類淋巴樣細(xì)胞。其不須抗原預(yù)先致敏，就能直接殺傷某些腫瘤細(xì)胞和病毒感染的靶細(xì)胞。 將CD3-、 CD16+ 、 CD56+淋巴樣細(xì)胞認(rèn)定為NK細(xì)胞。主要

14、分布于外周血和脾，淋巴結(jié)和其他組織中有少量。 目前常用于檢測(cè)人類NK細(xì)胞的表面標(biāo)志有：CD16和CD56。 NK細(xì)胞具有兩種不同的受體。一種是能激發(fā)NK細(xì)胞殺傷作用的受體殺傷細(xì)胞活化受體；另一種是能夠抑制NK細(xì)胞殺傷作用的受體殺傷細(xì)胞抑制受體。,兩種受體對(duì)NK細(xì)胞殺傷作用的調(diào)節(jié) NK細(xì)胞通過(guò)表面殺傷活化受體與自身組織細(xì)胞、病毒感染細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞表面相應(yīng)糖類配體結(jié)合，可經(jīng)活化受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，產(chǎn)生殺傷作用； 通過(guò)表面殺傷抑制受體與細(xì)胞表面MHC-I類分子結(jié)合，可產(chǎn)生殺傷抑制信號(hào)，該信號(hào)在胞內(nèi)起主導(dǎo)作用，能阻斷殺傷活化信號(hào)的傳遞。,識(shí)別HLA類分子受體,1.KIR(殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體）

15、根據(jù)胞膜外Ig樣數(shù)目：KIR2D、KIR3D 根據(jù)作用：KIRDL（胞漿區(qū)氨基酸序列較長(zhǎng)，含免疫受體酪氨酸抑制基序）抑制性R; KIRDS（胞漿區(qū)氨基酸序列較短，無(wú)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能）活化性R,受體酪氨酸 活化基序,賴 +,天冬 -,2.KLR(殺傷細(xì)胞凝集素樣受體） CD94與NKG2A（都為C型凝集素家族成員）通過(guò)二硫鍵組成的異二聚體 CD94/NKG2A：抑制性R CD94/NKG2C:活化性R,CD94,NKG2A/2C,識(shí)別非HLA類分子,1 .NKG2D： 表達(dá)：NK細(xì)胞 作用：與DAP-10結(jié)合發(fā)揮作用 配體：MICA,MICB(MHC I類鏈相關(guān)的A/B分子),具有自然細(xì)胞毒作用的受

16、體，包括NCR和NKG2D,精 +,2.NCR(自然細(xì)胞毒性受體） 表達(dá)：NK細(xì)胞（NKp46， NKp30， NKp44） 作用： NKp46,NKp30：經(jīng)與CD3結(jié)合（ITAM）； NKp444：DAP-12結(jié)合發(fā)揮作用(ITAM); 都為活化信號(hào),NK細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞的作用機(jī)制：,1.穿孔素/顆粒酶作用途徑 2.Fas與FasL作用途徑 3.TNF-與TNFR-作用途徑: TNF-與TNFR-I結(jié)合,TNF-R三聚體,胞漿內(nèi)死亡結(jié)構(gòu)域聚集,穿孔素/顆粒酶作用途徑,腫瘤細(xì)胞,穿孔素,Dead tumor cell,NK,顆粒酶,FasL,Fas,TNF,NK,腫瘤細(xì)胞,死亡結(jié)構(gòu)域DD,TN

17、FR,Inactive procaspase,Actived caspase,Dead tumor cell,FasL-Fas作用途徑,NK細(xì)胞的生物學(xué)功能 1.抗感染和抗腫瘤作用 2.免疫調(diào)節(jié)作用：IL-2、TNF、IFN-,第四節(jié) NKT細(xì)胞,主要分布于骨髓、肝和胸腺， 絕大多數(shù)為CD4-、CD8-雙陰性T細(xì)胞，表面有NK1.1分子和TCR-CD3復(fù)合物分子。 其抗原識(shí)別受體大多數(shù)為TCR型，NKT細(xì)胞表面TCR缺乏多樣性，抗原識(shí)別譜窄，可識(shí)別不同靶細(xì)胞表面CD1分子提呈的共有脂類和糖脂類抗原，且不受MHC限制。 功能： 1.細(xì)胞毒作用：穿孔素、FasL 2.免疫調(diào)節(jié)作用： IL-12、IFN- 、 IL- 4 3.參與炎癥反應(yīng)：MCP-1a,第五節(jié)