1、項(xiàng)目5植物油中磷脂含量的測(cè)定，劉慎勇食品分公司，主要內(nèi)容，實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆沼椭辛字瑴y(cè)定的原理和方法。學(xué)會(huì)繪制吸收曲線和計(jì)算結(jié)果。進(jìn)一步掌握分光光度計(jì)的使用。磷脂的定義、實(shí)驗(yàn)原理、植物油中的磷脂燃燒成五氧化二磷，然后用熱鹽酸將其轉(zhuǎn)化為磷酸，再與鉬酸鈉反應(yīng)生成磷鉬酸鈉，再用硫酸肼還原生成鉬藍(lán)，用分光光度法在680nm處測(cè)定其含量。磷脂測(cè)量儀器和儀器，鉬藍(lán)比色法1。陶瓷坩堝或應(yīng)時(shí)坩堝；2.分光光度計(jì)或帶塞子的50毫升比色管；3.移液管：5，10毫升；4.電爐和高溫爐；5.容量瓶：100、500和1000毫升；6.觀察玻璃、燒杯和量筒；7.恒溫水浴鍋；8.漏斗、坩堝鉗、試劑瓶等。磷脂測(cè)定試劑，1.50氫

2、氧化鉀溶液；2.鹽酸、硫酸、氧化鋅和濾紙；3.0.015硫酸二銨溶液；4.2.5鉬酸鈉稀硫酸溶液：稱取140毫升硫酸，注入300毫升水中，搖勻，冷卻至室溫，加入12.5克鉬酸鈉，溶解后加水至500毫升，搖勻，靜置24小時(shí)。5.磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.4391克無水磷酸二氫鉀，溶于1000毫升水中，作為1號(hào)溶液，含磷0.1毫克/毫升，吸收10毫升1號(hào)溶液，用水稀釋至100毫升，含磷0.01毫克/毫升，作為2號(hào)溶液進(jìn)行比色。操作步驟，1。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：取四個(gè)50毫升比色管，編為1、2、4、8五個(gè)數(shù)字，按數(shù)字順序分別注入1、2、4、8毫升磷標(biāo)準(zhǔn)二號(hào)溶液，然后按順序分別加入9、8、6、2毫升水。然后加入8

3、.0毫升；將0.015的硫酸二銨溶液注入4個(gè)管中的每一個(gè)；加入2.0毫升鉬酸鈉稀硫酸溶液，塞好并搖勻。取下塞子，將4支試管放入沸水浴中，加熱10分鐘，取出，冷卻至室溫，用水稀釋至50毫升，搖勻，靜置10分鐘，然后使用波長為650納米的分光光度計(jì)，使用1厘米的水浴，用水調(diào)節(jié)零點(diǎn)，分別測(cè)量吸光度值。以吸光度為縱坐標(biāo)，磷含量(0.01、0.02、0.04、0.08毫克)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。操作步驟，2。測(cè)量液的制備：用坩堝稱取約10克樣品(精確至0.001克)，加入0.5克氧化鋅(氧化鋅在灰化過程中可與磷形成磷酸鋅，以防止磷以氧化物形式揮發(fā)造成的損失)，首先在電爐中加熱碳化，然后將其送入550，6

4、00的高溫爐中焚燒(白色)約1小時(shí)，取出坩堝并冷卻至室溫。 將灰分溶解在10毫升熱鹽酸(11)中，加熱5分鐘，過濾溶解的溶液，并將其注入100毫升容量瓶中，用熱水沖洗坩堝和濾紙，濾液冷卻至室溫后，用50氫氧化鉀溶液中和至出現(xiàn)渾濁，緩慢加入鹽酸使氧化鋅沉淀完全溶解，然后滴2滴，最后用水稀釋至刻度并搖勻。操作步驟，3。比色法：用移液管吸取10毫升待測(cè)液體，注入50毫升比色管，加入8.0毫升0.015硫酸肼，加入2.0毫升稀鉬酸鈉硫酸溶液，塞住，搖勻。取下塞子，將比色管在沸水浴中加熱10分鐘，取出，冷卻至室溫，用水稀釋至50毫升，搖勻，靜置10分鐘，然后使用波長為650納米的分光光度計(jì)，使用1厘米浴，用水調(diào)節(jié)零點(diǎn)，測(cè)量吸光度值。根據(jù)待測(cè)液體的吸收值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中找出磷含量(P)，并根據(jù)公式(1)計(jì)算磷脂含量。兩個(gè)測(cè)試結(jié)