1、理化因素和藥物對(duì)家兔離體腸肌肉的影響浙江中醫(yī)藥大學(xué)14林爽醫(yī)學(xué)本部3班院長(zhǎng)或目的：探討乙酰膽堿、腎上腺素、NaOH、HCl、低溫泰什溶液、缺氧對(duì)離體兔腸道肌肉的作用和機(jī)制。方法：將隔離兔張根碩根浸泡的38 大液中的乙酰膽堿、腎上腺素、乙氧基、HCl下降2滴，將38大液迅速變成25 大液，停止供氧，恢復(fù)氧氣供應(yīng)，用生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)記錄張根碩收縮。結(jié)果：乙酰膽堿、NaOH下降增加了腸肌肉收縮張力和頻率。加入腎上腺素、HCl，快速將38 的泰拉弗林換成25 的泰液，降低張根碩收縮張力和頻率。停止供氧會(huì)增加長(zhǎng)肌收縮的初始張力和頻率，進(jìn)入后期會(huì)減弱。通氣后頻率先下降，逐漸恢復(fù)正常。結(jié)論：一定濃度的乙

2、酰膽堿、NaOH能促進(jìn)腸肌肉運(yùn)動(dòng)；腎上腺素、HCl和低溫的恒定濃度抑制腸肌肉運(yùn)動(dòng)。短暫的缺氧一開(kāi)始會(huì)加強(qiáng)腸肌肉收縮，后來(lái)會(huì)減弱?！娟P(guān)鍵詞】理化因素；小腸平滑??；兔子；兔子。電氣活動(dòng)1實(shí)驗(yàn)材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)材料1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物兔子(沒(méi)有雌雄限制)。1.1.2實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)備計(jì)算機(jī)化生物信號(hào)收集和處理系統(tǒng)(RM6240系統(tǒng))、梅氏洗澡罐、張力轉(zhuǎn)換器、鐵支架、雙凹夾、恒溫水浴箱、氣泵、溫度計(jì)、燃燒器、螺旋夾、棉線(xiàn)、l型固定掛鉤、剪刀、眼科鑷子泰國(guó)的液體、乙酰膽堿(10-4mol/L)、腎上腺素(10-4mol/L)、氫氧化鈉、鹽酸、阿托品等。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)裝置和設(shè)置儀器參數(shù)安裝瑪

3、斯浴缸，在女仆浴缸中加強(qiáng)定量(10-15毫升)的泰拉蓬，調(diào)節(jié)超級(jí)恒溫器的溫度，使梅格水箱溫度達(dá)到38 。通風(fēng)機(jī)關(guān)95%O2 5%CO2混合煤氣管道。用螺絲夾調(diào)節(jié)煤氣管的煤氣流，直到浴缸里的煤氣一個(gè)一個(gè)地排出。轉(zhuǎn)換器輸出線(xiàn)連接計(jì)算機(jī)生物信號(hào)收集和處理系統(tǒng)，設(shè)定儀器參數(shù)：RM6240，單擊實(shí)驗(yàn)菜單中的腸肌肉記錄，通道時(shí)間常數(shù)為DC，濾波頻率為10Hz，靈敏度為3g，采樣頻率為200Hz，掃描速度為1s/div。1.2.2分離兔腸肌肉的制備抓住一只兔子，用錘子打兔子頭枕頭，迅速切開(kāi)肚子找出偽裝，以胃幽門(mén)和十二指腸為起點(diǎn)，沿著腸邊緣切開(kāi)腸系膜，切下20-30厘米的壯觀(guān)，用4 的液體沖洗，去除長(zhǎng)官內(nèi)容物

4、。清洗后，將部長(zhǎng)切成幾段(約1 1.5厘米)，用新鮮泰國(guó)的液體替換(操作時(shí)注意不要拉，以免影響收縮功能)。把腸子放在裝有桌子液體的培養(yǎng)皿里(空氣一直在流動(dòng))，把線(xiàn)穿在兩端的斜墻上，然后打個(gè)結(jié)。檢查窗管是否打開(kāi)，注意不要關(guān)閉。1.2.3固定標(biāo)本將長(zhǎng)官的一端連接到浴缸固定掛鉤上，然后放在38 的墨西哥浴缸里，將長(zhǎng)官的另一端固定在張力轉(zhuǎn)換器的吊橋墻上。1.2.4實(shí)驗(yàn)觀(guān)察1.2.4.1離體腸肌肉穩(wěn)定后記錄正常張力曲線(xiàn)。然后，將滴管加ACh(10-4mol/L)2放入浴缸內(nèi)，觀(guān)察并記錄其張力曲線(xiàn)，立即從排水口排出浴缸中含有ACh的大液，在側(cè)管內(nèi)添加38 的新鮮大液，重復(fù)2次(用針各提取20mL)，沖洗剩

5、余藥物，使其下降到不合適的濃度，然后。將張力恢復(fù)到大約以前的水平，然后進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)。1.2.4.2滴眼器加腎上腺素(10-4mol/L)2滴到浴缸里，觀(guān)察并記錄其張力曲線(xiàn)，然后按照相同步驟處理含有腎上腺素的酪氨酸溶液。張力恢復(fù)到正常水平后進(jìn)行下一次實(shí)驗(yàn)。在1.2.4.3浴缸中添加兩滴NaOH作為滴管，觀(guān)察并記錄其張力曲線(xiàn)，然后按照相同的步驟處理帶有NaOH的階地液體。將張力恢復(fù)到大約以前的水平，然后進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)。在1.2.4.4浴缸里，用滴眼器觀(guān)察并記錄2滴HCl(實(shí)際運(yùn)行不清楚，所以我們組最終添加4滴)的拉伸曲線(xiàn)，然后按照相同的步驟處理帶HCl的桌子液體。張力恢復(fù)到正常水平后進(jìn)行下一次實(shí)

6、驗(yàn)。將1 . 2 . 4 . 5 38的大型液迅速轉(zhuǎn)化為25 的大液，觀(guān)察并記錄其張力曲線(xiàn)，等待溫升張力恢復(fù)到正常水平，然后進(jìn)行下一次實(shí)驗(yàn)。1.2.4.6在浴缸中觀(guān)察并記錄2滴滴管阿托品、3min后滴滴管ACh(10-4mol/L)在浴缸中的張力曲線(xiàn)，然后按照相同步驟處理階地液體。張力恢復(fù)到正常水平后進(jìn)行下一次實(shí)驗(yàn)。關(guān)閉1.2.4.7電源，停止供氧，5min后恢復(fù)供氧，觀(guān)察并記錄其張力曲線(xiàn)1。2實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)：理化因素和藥物對(duì)家兔離體腸肌肉的影響實(shí)驗(yàn)日期：2016.4.7實(shí)驗(yàn)者：讓埃琳娜施拉迪陳馮孔青青不同因素對(duì)家兔離體腸肌肉的影響圖二乙?；锬憠A對(duì)家兔離體腸肌肉的影響圖像說(shuō)明：添加2滴乙酰

7、膽堿會(huì)使曲線(xiàn)快速增加，圖像說(shuō)明：添加2滴腎上腺素會(huì)使曲線(xiàn)逐漸減少頻率加快，收縮和強(qiáng)度提高，顯示小腸柔軟，基線(xiàn)向下移動(dòng)。收縮寬度、強(qiáng)度降低、頻率減緩、肌肉張力增加，自制力增加。顯示小腸平滑肌張力下降，自律減少。土氫氧化鈉對(duì)家兔離體腸肌肉的影響圖像說(shuō)明：添加2滴氫氧化鈉后曲線(xiàn)上升的圖像說(shuō)明：添加4滴鹽酸后曲線(xiàn)逐漸減少和收縮但是有些不規(guī)則，頻率快，收縮幅度小，強(qiáng)度小，頻率慢，表示小腸平滑肌張力也就是說(shuō)，隨著強(qiáng)度的增加，小腸平滑肌張力增加，張力減少，自制力減少。添加，但收縮性下降。圖6 25 對(duì)家兔離體腸肌肉的影響圖像說(shuō)明：更換25水粉劑后，曲線(xiàn)顯示下降狀態(tài)，頻率減少，振幅，強(qiáng)度減少，小腸平滑肌張力減

8、少，自制力減少。圖7阿托品ACh對(duì)家兔離體腸肌肉的影響視頻說(shuō)明：添加阿托品后，曲線(xiàn)下降一點(diǎn)后迅速恢復(fù)正常，在3毫米后添加ACh后，曲線(xiàn)沒(méi)有明顯變化，可見(jiàn)小腸平滑肌張力和自主性沒(méi)有變化。圖8缺氧對(duì)家兔離體腸肌肉的影響圖像說(shuō)明：停止供氧后，曲線(xiàn)瞬間上升，頻率和振幅增加，以后頻率和寬度略有減少，缺氧早期小腸平滑肌張力和自制力提高，后期減弱。通氣后頻率先下降，逐漸恢復(fù)正常。3實(shí)驗(yàn)討論乙酰膽堿對(duì)家兔離體腸肌肉的影響在浴缸中加入2滴乙酰膽堿，可以看到體外部長(zhǎng)活動(dòng)增加，曲線(xiàn)上升，收縮頻率加快，振幅和強(qiáng)度增加。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的機(jī)制是產(chǎn)生消化道平滑肌細(xì)胞動(dòng)作電位的離子基礎(chǔ)與Ca2的內(nèi)部流動(dòng)有關(guān)。乙酰膽堿能與肌肉膜

9、上的m受體結(jié)合，打開(kāi)兩種類(lèi)型的通道。一個(gè)是電位敏感的Ca2專(zhuān)用通道，另一個(gè)是特定受體激活Ca2專(zhuān)用通道。舊類(lèi)型的通道對(duì)ACh敏感，低容量ACh導(dǎo)致開(kāi)放。后一種通道對(duì)ACh相對(duì)不敏感，只有高容量ACh導(dǎo)致開(kāi)放。兩個(gè)通道都在打開(kāi)的肌肉漿中增加Ca2，激活肌肉纖維蛋白肌凝蛋白ATP系統(tǒng)，收縮平滑肌，增加肌肉張力。腎上腺素對(duì)家兔離體腸肌肉的影響在浴缸里添加2滴腎上腺素，在體外，長(zhǎng)官活動(dòng)減弱，曲線(xiàn)減少，收縮頻率減慢，振幅和強(qiáng)度減少。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的機(jī)制被認(rèn)為與目前腸肌肉細(xì)胞膜上存在和兩種受體有關(guān)，受體又可以分為1和2受體兩種亞型。受體又分為1、2、3受體的三個(gè)亞型2。腎上腺素作用于2受體，隨著腸肌膜上一種

10、特定受體的激活，k流出增加，細(xì)胞膜過(guò)度極化，腸肌興奮減少，肌力下降。腎上腺素對(duì)受體也起作用，一方面由于激活，在腸系膜內(nèi)cAMP合成增加，cAMP在腸系膜和肌肉質(zhì)網(wǎng)內(nèi)激活Ca泵活動(dòng)，降低肌肉質(zhì)的Ca2濃度，減少肌肉張力。另一方面，如果受體被激活，k和Ca2流出量增加，膜的超極化加速，促進(jìn)張根碩肌張力的減少。氫氧化鈉對(duì)家兔離體腸肌肉的影響小腸的PH值約為7.0 8.0，過(guò)高或過(guò)低的PH值會(huì)影響張根碩的收縮。在浴缸中添加兩滴NaOH后，階地的PH值正好在7.0 8.0之間，并且成為最適合長(zhǎng)根收縮的PH值，因此觀(guān)察到加強(qiáng)長(zhǎng)根運(yùn)動(dòng)，曲線(xiàn)有些不規(guī)則，頻率加快，強(qiáng)度增加。但是也有研究結(jié)果顯示，NaOH后腸肌

11、肉收縮減弱或早期抑制興奮等。NaOH對(duì)小腸肌理化環(huán)境的影響與小腸正常定位的堿性環(huán)境相匹配時(shí)，細(xì)胞內(nèi)酶活性增加，肌肉緊張可能與兩種說(shuō)法有關(guān)。過(guò)堿不是適合收藏的生活環(huán)境，因此會(huì)削弱肌肉力量。2.NaOH增強(qiáng)堿性環(huán)境的同時(shí)，改變筋膜對(duì)離子的通透性，提高細(xì)胞外Na的濃度，增加Na的內(nèi)部流動(dòng)，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存的Ca的大量釋放3。3.4鹽酸對(duì)家兔離體腸肌肉的影響在浴缸里添加4滴HCl后(不清楚我們隊(duì)添加了2滴HCl，所以添加了4滴)，可以看出泰的PH低于張根碩肌肉的最佳PH范圍，并減少了張根碩收縮。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機(jī)制；細(xì)胞外h增加時(shí)，Ca2通道的活性受到抑制，Ca2內(nèi)部流動(dòng)減少；另外，妨礙肌肉代謝和肌肉史滑

12、翔的生化過(guò)程也起到了作用。h競(jìng)爭(zhēng)Ca2和鈣調(diào)節(jié)蛋白的結(jié)合部位，減少肌球蛋白ATP酶活性，減少源纖維對(duì)Ca2的敏感性和Ca2肌質(zhì)網(wǎng)中Ca2的釋放量。3.5低溫對(duì)家兔離體腸肌肉的影響可以看到，38 的大型液體取代25 后，長(zhǎng)肌收縮減弱，曲線(xiàn)減少，頻率減少，幅度、強(qiáng)度減少。最適合張根碩運(yùn)動(dòng)的溫度為37.5 到0.5 以上或以下會(huì)影響結(jié)果。溫度下降到25 時(shí)，酶活性下降，每個(gè)離子通道的開(kāi)放數(shù)減少，壯觀(guān)的興奮程度降低。阿托品ACh對(duì)家兔離體腸肌肉的影響添加阿托品時(shí)，與隔離愛(ài)長(zhǎng)官相對(duì)應(yīng)的曲線(xiàn)先下降一點(diǎn)，然后正?；?，原因是阿托品與平滑肌膜的m受體拮抗劑和m受體結(jié)合，神經(jīng)遞質(zhì)作用于m受體，影響沖動(dòng)的傳導(dǎo)，減少

13、了收縮。接著，加入3min阿托品后注入乙酰膽堿，乙酰膽堿不會(huì)與小腸平滑肌肌膜上的m受體結(jié)合，不會(huì)引起小腸平滑肌的興奮性效應(yīng)，因此曲線(xiàn)保持正常。缺氧對(duì)家兔離體腸肌肉的影響停止供氧，曲線(xiàn)瞬間上升，頻率和寬度略有提高，之后頻率和寬度略有減少，通氣后逐漸恢復(fù)正常。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因可能是氧氣不足，張根碩運(yùn)動(dòng)無(wú)法獲得能源供應(yīng)，而張根碩運(yùn)動(dòng)在一段時(shí)間內(nèi)缺氧開(kāi)始增加。因?yàn)锳TP受限，所以下一個(gè)運(yùn)動(dòng)張力和收縮寬度會(huì)減少?；謴?fù)氧氣供應(yīng)后，張根碩獲得能源供應(yīng)，補(bǔ)償運(yùn)動(dòng)消失，因此張根碩收縮活動(dòng)暫時(shí)減少，ATP供應(yīng)恢復(fù)正常，因此逐漸恢復(fù)正常。4實(shí)驗(yàn)結(jié)論乙酰膽堿，NaOH的一定濃度是因?yàn)槟c根膜(acetylcholine)與肌肉膜的m受體結(jié)合，離子通道開(kāi)放，肌肉質(zhì)的Ca2增加，特定濃度的堿性環(huán)境使腸根收縮成為最佳ph。腎上腺素、HCl、低溫的一定濃度，抑制了腸肌肉的運(yùn)動(dòng)，因?yàn)槟I上腺素主要作用于2受體，導(dǎo)致k流出增加，細(xì)胞膜過(guò)度極化，腸肌興奮性減少。同時(shí)，h增加時(shí)，腸肌肉收縮偏離最佳PH。低溫抑制相關(guān)酶活性，抑制腸肌肉收縮。短缺氧可以在早期改善腸