1、復旦大學腫瘤醫(yī)院 蔡三軍 2016-4,Lynch綜合征 復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院工作介紹,結(jié)直腸癌分類,Lynch綜合征,由于Lynch等人的突出貢獻，HNPCC又被稱為 林奇（ Lynch）綜合征,可歸納為“3-2-1”： 3個成員 2代人連續(xù) 1例小于50歲,診斷標準-國際,篩檢標準,中國標準,基因診斷,Lynch綜合征相關(guān)的主要MMR基因： MLH1 定位于 3p21 MSH2 定位于2p16 MSH6 定位于2p16 PMS2 定位于7p22 其他相關(guān)的MMR還有 EPCAM、MLH3、PMS1、EXO1等,檢測 MMR功能 微衛(wèi)星不穩(wěn)定 免疫組織化學 表觀遺傳 基因測序,1987,19

2、93,1994,1997,2002,2007,2009,2014,發(fā)現(xiàn)MLH1、PMS2為Lynch基因位點，描述Lynch相關(guān)性結(jié)直腸癌的病理學,首次發(fā)現(xiàn)MLH1表現(xiàn)突變,EPCAM缺失能引起MSH2表觀突變,MMR缺失導致的MSI在Lynch綜合征中被描述，MSH2認定為首個Lynch基因位點,發(fā)現(xiàn)MSH6為Lynch基因位點，發(fā)表BG標準,發(fā)現(xiàn)MLH1表觀突變的遺傳性,標準化5層分類系統(tǒng)劃分MMR突變的機制，總結(jié)遺傳咨詢方面的技術(shù),國外基因研究發(fā)展,MMR突變的菌株中觀察到微衛(wèi)星序列的不穩(wěn)定性增加,國外代表性研究,對比國內(nèi)研究,國外研究：病例數(shù)較多 檢測開展： IHC結(jié)合MSI的開展 I

3、HC開展MSH6, PMS2檢測較早 半定量IHC在檢測MMRP中的應用 測序普遍包含MLH1及MSH2突變檢測，PMS2及MSH6突變檢測開展較少，其它基因更是未見報道,復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院,臨床研究,1陳瑞武, 莫善兢, 蔡宏, 等. 遺傳性非息肉病性大腸癌（附10個家族報告）J. 中華消化雜志, 1996(06):19-21. 2莫善兢. 遺傳性非息肉病性大腸癌J. 腹部外科, 1996(02):50-52. 3許示心, 莫善兢, 蔡宏. 遺傳性非息肉病結(jié)直腸癌附3個家族報道J. 中國癌癥雜志, 1998(01):61-63. 4徐燁, 蔡三軍, 莫善兢, 等. 遺傳性非腺瘤病性結(jié)直腸癌

4、22個家族的報告: 2000全國腫瘤學術(shù)大會, 中國北京, 2000C. 5徐燁. 遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌的臨床特征與診斷原則 J. 2002(06):479. 6蔡三軍, 蔡崎, 孫孟紅, 等. 遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌家系及臨床病理特征分析J. 中華消化雜志, 2004(02):26-29. 7徐燁, 鄧偉, 蔡三軍, 等. 遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌相關(guān)腫瘤累計危險度分析J. 腫瘤研究與臨床, 2005(05):15-18. 8顏士巖, 周曉燕, 蔡三軍, 等. 遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌家系臨床病理特征分析J. 中華消化雜志, 2007(12):813-816. 9蔡宏, 董銳增, 吳江

5、宏, 等. 多原發(fā)結(jié)直腸癌168例臨床分析J. 中華外科雜志, 2008,46(5):370-374. 10李建勝, 俞美萍, 莫善兢. 遺傳性非息肉病性大腸癌18個家系64例分析J. 中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志, 2010(06):619-623.,臨床研究,Amsterdamcriteria I:AC I;Amsterdamcriteria I: AC II;Japanesecriteria： JC; Bethesda guideline:BG;revised Bethesda guideline： rBG,臨床研究,臨床研究,臨床研究,病理特征,臨床特征,低分化腺瘤常見 粘液腺癌比例升高 多

6、呈膨脹性生長 周圍伴淋巴細胞浸潤或淋巴樣細胞聚集,腫瘤發(fā)生早， 平均發(fā)病在45歲左右 好發(fā)于近端結(jié)腸 同時或異時結(jié)直腸癌發(fā)生率升高 腸外腫瘤 ：子宮內(nèi)膜、胃、小腸等,分子病理/遺傳學研究,1.孫孟紅等, 遺傳性非息肉病性大腸癌患者癌組織的臨床分子病理學特征. 中華醫(yī)學雜志, 2001(20): 第55-56頁. 2.蔡崎, 典型遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌家系臨床病理及分子遺傳學分析. 中國病理學雜志, 2001. 5(30). 3.Cai, Q., et al., Clinicopathological and molecular genetic analysis of 4 typical Ch

7、inese HNPCC families. World J Gastroenterol, 2001. 7(6): p. 805-10. 4.蔡崎等, 中國人遺傳性非腺瘤病性結(jié)直腸癌家系hMSH2和hMLH1基因突變分析. 中華病理學雜志, 2003(04): 第23-28頁. 5.蔡崎等, 中國人遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌錯配修復缺陷表型分析. 中華腫瘤雜志, 2003(05): 第8-12頁. 6.Cai, S.J., et al., Clinical characteristics and diagnosis of patients with hereditary nonpolyposis

8、colorectal cancer. World J Gastroenterol, 2003. 9(2): p. 284-7. 7.蔡三軍等, 遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌家系及臨床病理特征分析. 中華消化雜志, 2004(02): 第26-29頁. 8.王朝夫等. 基于外周血hMLH1和hMSH2 mRNA異常確立遺傳性非息肉性結(jié)直腸癌家系的研究. in 中華醫(yī)學會病理學分會2005年學術(shù)年會. 2005. 中國湖北宜昌.,分子病理/遺傳學研究,9.Luo, D.C., et al., Clinicopathological and molecular genetic analysis of H

9、NPCC in China. World J Gastroenterol, 2005. 11(11): p. 1673-9. 10.Wang, C.F., et al., Detection of germline mutations of hMLH1 and hMSH2 based on cDNA sequencing in China. World J Gastroenterol, 2005. 11(42): p. 6620-3 11.徐燁等, 檢測微衛(wèi)星不穩(wěn)在中國遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌患者診斷中的應用. 中國癌癥雜志, 2006(02): 第128-131頁. 12.王朝夫等, 遺傳性

10、非息肉性結(jié)直腸癌家系的MLH1基因兩個胚系新突變. 中華病理學雜志, 2006(02): 第68-72頁. 13.王朝夫等, MLH1、MSH2基因mRNA突變分析與遺傳性非息肉性結(jié)直腸癌的基因診斷. 中華醫(yī)學遺傳學雜志, 2006(01): 第32-36頁. 14.顏士巖等, 遺傳性非息肉病性結(jié)直腸癌家系臨床病理特征分析. 中華消化雜志, 2007(12): 第813-816頁. 15.Yan, S.Y., et al., Three novel missense germline mutations in different exons of MSH6 gene in Chinese he

11、reditary non-polyposis colorectal cancer families. World J Gastroenterol, 2007. 13(37): p. 5021-4. 16.Wang, C.F., et al., Two novel germline mutations of MLH1 and investigation of their pathobiology in hereditary non-polyposis colorectal cancer families in China. World J Gastroenterol, 2007. 13(46):

12、 p. 6254-8.,分子病理/遺傳學研究,17.Zhou, H.H., et al., MLH1 promoter germline-methylation in selected probands of Chinese hereditary non-polyposis colorectal cancer families. World J Gastroenterol, 2008. 14(48): p. 7329-34. 18.Sheng, X., et al., Germline mutation analysis of hPMS2 gene in Chinese families wi

13、th hereditary nonpolyposis colorectal cancer. World J Gastroenterol, 2010. 16(30): p. 3847-52. 19.Wei, W., et al., Distinct mutations in MLH1 and MSH2 genes in hereditary non-polyposis colorectal cancer (HNPCC) families from China. BMB Rep, 2011. 44(5): p. 317-22. 20.Chen, W., et al., Identification

14、 of chromosomal copy number variations and novel candidate loci in hereditary nonpolyposis colorectal cancer with mismatch repair proficiency. Genomics, 2013. 102(1): p. 27-34. 21.Liu, F., et al., Clinicopathological and genetic features of Chinese hereditary nonpolyposis colorectal cancer (HNPCC).

15、Med Oncol, 2014. 31(10): p. 223. 22.Yuan, L., et al., Immunohistochemistry and microsatellite instability analysis in molecular subtyping of colorectal carcinoma based on mismatch repair competency. Int J Clin Exp Med, 2015. 8(11): p. 20988-1000.,分子病理/遺傳學研究,Amsterdamcriteria :AC Japanesecriteria： JC

16、 Bethesda guideline: BG; Fudan criteria: FD,分子病理-研究進展,腫瘤組織中檢測到高度MSI； hMLH1基因第11個外顯子檢測到回復突變,hMSH2與hMLH1蛋白表達異常與錯配修復基因生殖細胞突變密切相關(guān),12個未經(jīng)報道過的新突變；hMLH1突變集中于外顯子14-16,hMLH1和hMSH2蛋白表達減低或缺失與HNPCC顯著相關(guān),分子病理-研究進展,mRNA 逆轉(zhuǎn)錄擴增后測序,5個測序家系中發(fā)現(xiàn)3個病理性突變，2個未經(jīng)報道的新突變,僅用BAT26可發(fā)現(xiàn)大部分高度微衛(wèi)星不穩(wěn)腫瘤,測序規(guī)模擴大，39個家系進行測序，發(fā)現(xiàn)3種未經(jīng)報道的錯義突變以及1種新的SNP 包括MSH6,分子病理-研究進展,對PMS2進行檢測分析,MLH1-01495,MLH1-01496,MLH1-01497 3種MLH1基因的新的病理性突變 1個MSH2可能的新熱點,進行拷貝數(shù)分析,大規(guī)模測序分析，并比較適合中國人群的診斷標準,袁，2015,優(yōu)化IHC檢測：PMS2與MSH6兩者結(jié)合檢測MMR,簡便準確。,檢測進展,檢測病例數(shù)：1例（1996年）298例（2015年