1、胰島素檢測(cè)常見因素的干擾分析摘要目的分析常見因素對(duì)胰島素檢測(cè)的干擾。方法分別評(píng)價(jià)膽紅素、甘油三酯和蛋白質(zhì)等抗凝劑異常升高的3個(gè)可能的干擾因素、樣品溶血以及樣品保存溫度和時(shí)間對(duì)結(jié)果的影響。結(jié)果乙二胺四乙酸？K2、肝素抗凝，與血清管相比，胰島素試驗(yàn)結(jié)果無明顯差異；高濃度膽紅素、甘油三酯和蛋白質(zhì)對(duì)結(jié)果無明顯干擾。溶血可導(dǎo)致胰島素結(jié)果下降，并與溶血程度和溫度呈正相關(guān)。隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)，胰島素值會(huì)進(jìn)一步降低。結(jié)論乙二胺四乙酸？K2、肝素抗凝劑、高濃度膽紅素、甘油三酯和蛋白質(zhì)在病理?xiàng)l件下不會(huì)引起胰島素試驗(yàn)結(jié)果的顯著變化；溶血可導(dǎo)致胰島素結(jié)果下降，應(yīng)避免。血清胰島素的測(cè)定對(duì)糖尿病的診斷、分類和治療具有重要

2、的指導(dǎo)作用。然而，往往與臨床結(jié)果不一致，給診斷和治療帶來困難。我們分析了一些常見的因素來評(píng)價(jià)用化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測(cè)胰島素的干擾效果。報(bào)告如下。1材料和方法1.1儀器和試劑Abbotti2000是一款全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀，由美國(guó)Abbott Laboratories公司生產(chǎn)，使用原裝胰島素檢測(cè)試劑、標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品和質(zhì)量控制產(chǎn)品。胰島素測(cè)定方法：化學(xué)發(fā)光免疫分析法。標(biāo)本：我院新鮮患者20例，無溶血、血脂和黃疸，胰島素濃度分布范圍為5.7 154.6/l。影響因素評(píng)價(jià)方法：(1)抗凝劑：乙二胺四乙酸？K2、肝素抗凝，與血清管比較。(2)干擾物質(zhì)：在血清中加入高濃度膽紅素、甘油三酯和蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品(均由北京利德曼

3、公司提供)，使不同的病理性高濃度成為可能，并在對(duì)照管中加入等量的生理鹽水，與各管進(jìn)行比較。(3)溶血和標(biāo)本保存條件：在血清中加入血紅蛋白(血紅蛋白是由新血標(biāo)本溶血而成)，使標(biāo)本出現(xiàn)輕微溶血和明顯溶血。對(duì)照組試管加入等量生理鹽水，分別在4下保存1h和4h，檢測(cè)前在25下保存1h和4h。1.2統(tǒng)計(jì)處理各組數(shù)據(jù)用xs表示，并與對(duì)照組進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)。2個(gè)結(jié)果2.1與乙二胺四乙酸？K2、肝素抗凝組與對(duì)照血清組無顯著性差異，結(jié)果見表1。表1不同抗凝劑對(duì)胰島素測(cè)定的影響(略)2.2實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組在病理?xiàng)l件下膽紅素、甘油三酯和蛋白質(zhì)異常升高的干擾方面無顯著性差異。結(jié)果如表2所示。表2三種干擾物對(duì)胰島素測(cè)定的影

4、響(略)2.3正常溶血標(biāo)本在4下保存1小時(shí)和4小時(shí)，25下保存4小時(shí)，與對(duì)照組相比無顯著變化，而輕度溶血標(biāo)本(血紅蛋白濃度0.5 g/l)在4下保存1小時(shí)和4小時(shí)，與對(duì)照組相比無顯著變化，但在25下保存1小時(shí)，與對(duì)照組相比，P0.05。表3溶血標(biāo)本保存條件對(duì)胰島素測(cè)定的影響(略)3討論血清樣品通常用于胰島素檢測(cè)，臨床上常用的乙二胺四乙酸用于本實(shí)驗(yàn)。K2和肝素抗凝，結(jié)果與血清無明顯差異，表明用它們抗凝的血漿樣品也可用于胰島素檢測(cè)。評(píng)價(jià)病理?xiàng)l件下高濃度膽紅素、甘油三酯和蛋白質(zhì)的干擾效果。結(jié)果表明，當(dāng)樣品中總膽紅素、甘油三酯和蛋白質(zhì)含量分別達(dá)到200mol/L、10.0mol/L和120.0g/L時(shí)

5、，差異不顯著，干擾效果不明顯。溶血會(huì)嚴(yán)重影響胰島素的測(cè)定，據(jù)國(guó)內(nèi)報(bào)道，溶血樣品會(huì)影響胰島素的測(cè)定1，這是由于紅細(xì)胞中存在胰島素降解酶，可將胰島素水解成小分子片段，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果下降2？3.從表3可以看出，下降程度與血紅蛋白含量呈正相關(guān)，血紅蛋白含量越高，胰島素下降越明顯。同一溶血樣品在25保存的結(jié)果低于4保存的結(jié)果，說明低溫可以抑制酶活性，4保存的樣品可以有效降低溶血干擾。面對(duì)臨床對(duì)免疫測(cè)定速度的要求，胰島素檢測(cè)標(biāo)本將在4小時(shí)內(nèi)分離和檢測(cè)。我們?cè)u(píng)估了樣本放置時(shí)間對(duì)4小時(shí)內(nèi)胰島素試驗(yàn)的影響。結(jié)果表明，放置1小時(shí)和4小時(shí)后無溶血樣品的胰島素結(jié)果無顯著性差異，表明放置4小時(shí)后無溶血樣品能夠滿足質(zhì)量要求，而放置4小時(shí)后有溶血樣品的結(jié)果將顯著下降。樣品的溶血是胰島素檢測(cè)結(jié)果差異的主要原因。建議在樣品采集和處理過程中盡量避免溶血。據(jù)報(bào)道，溶血的原因和對(duì)策已得到分析4。當(dāng)然，溶血很難完全避免。一旦