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文檔簡介

1、酶標(biāo)儀器,第一,酶標(biāo)儀器的發(fā)展:20世紀(jì)80年代,酶標(biāo)儀器在世界范圍內(nèi)廣泛使用;2.它是在20世紀(jì)80年代中期引入中國的。雖然國內(nèi)有少數(shù)科研單位和廠家開始生產(chǎn)簡單的酶標(biāo)儀器,但其性能遠不如進口設(shè)備。3.在20世紀(jì)90年代之前,進口的微孔板閱讀器是主要的。1.微孔板閱讀器的發(fā)展:4。1993年,第二航空航天研究所開始研制和生產(chǎn)具有國際水平的新一代自動平板微孔板閱讀器;5.1995年正式進入市場;現(xiàn)在它已經(jīng)發(fā)展成為一系列微孔板閱讀器產(chǎn)品,從最初的ZS2型號開始,現(xiàn)在它已經(jīng)推出了ZS-2A、ZS-2000、ZS-3000、ZS-4000、ZS-5000等型號。2.酶標(biāo)儀器1的應(yīng)用。酶標(biāo)儀是一種應(yīng)用廣

2、泛的生物和醫(yī)療儀器。它采用酶聯(lián)免疫吸附測定法,根據(jù)酶標(biāo)記原理,根據(jù)有無有色物質(zhì)和顏色深淺進行定性或定量分析。它可用于單克隆抗體篩選、凝血分析、抗生素敏感性試驗和其他需要比色法的分析工作。2.酶標(biāo)儀器的應(yīng)用:2 .該儀器適用于臨床檢驗、微生物學(xué)、流行病學(xué)、免疫學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)、農(nóng)林科學(xué)等領(lǐng)域。廣泛用于醫(yī)院、血站、防疫站、生物制品等部門。3.衛(wèi)生部明確規(guī)定,多種常見肝炎疾病的診斷不能通過目視檢查進行,必須使用酶標(biāo)儀進行判斷。沒有酶標(biāo)儀或沒有酶標(biāo)儀的醫(yī)院不能分級,他們沒有資格和權(quán)利來判斷肝炎。對于艾滋病病毒的檢測和判斷,有必要建立一個專門的艾滋病實驗室,并使用酶標(biāo)儀進行判斷。二是酶標(biāo)儀器的使用;4.世界

3、上有數(shù)百種匹配試劑用于酶標(biāo)儀器常規(guī)檢測的疾病。中國有幾十種:如癌胚抗原試驗、甲胎蛋白試驗、前列腺試驗等。用酶標(biāo)儀定量檢測可以判斷疾病的性質(zhì)和檢查治療效果。光源燈、彩色濾光片、光電探測器、模擬信號處理、微電腦單元、顯示器、鍵盤、打印機、微孔板、X向驅(qū)動機構(gòu)、Y向驅(qū)動機構(gòu)、控制電路、DC穩(wěn)定電源、單通道微孔板讀數(shù)器工作原理圖因此,其光學(xué)原理與分光光度計相同。酶標(biāo)儀用于測量酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)微孔板中每個孔的光吸收值。通過測量每個微孔的光吸收值,可以確定每個微孔中溶液的濃度,該濃度值可以解釋該測試反應(yīng)中抗原和抗體的結(jié)合反應(yīng)。第三,酶標(biāo)儀的檢測原理,由于結(jié)合使用微處理器,它不僅可以完成光譜數(shù)

4、據(jù)的測量和計算,而且提高了儀器的自動化程度。例如,自動調(diào)零、自動過濾和設(shè)置參數(shù)、設(shè)置上限和下限、自動記錄和自動打印等。微孔板讀數(shù)器的原理是檢測被測物體在特定波長下的吸光度。酶標(biāo)儀光路系統(tǒng)示意圖,光源,光接收器,酶標(biāo)儀與分光光度計的區(qū)別:1。裝有比色溶液的容器不是比色皿,而是塑料微孔板;2.微孔板讀數(shù)器的光束垂直穿過待測溶液,即微孔板;3.酶標(biāo)儀通常用光密度代替吸光度來表示吸光度。酶標(biāo)儀垂直光束的特征是什么?1。樣品的吸光度受液體濃度和稀釋度的影響較??;2.受被測樣品的液位是否水平、酶標(biāo)板的透光率以及微孔板的孔底是否平整影響很大;三種酶標(biāo)板的原理、特點及應(yīng)用實例:4 .酶標(biāo)儀的技術(shù)性能,波長范圍

5、:340納米、399納米、400納米和750納米;濾光器:最多可裝載8個濾光器(標(biāo)準(zhǔn)配置:4個濾光器,340納米、405納米、450納米和620納米);讀取方式:單、雙、多波長檢測樣品形式:96孔微孔板或板條;測量范圍:0.0003.500外徑;精度:1%和0.005度,10度,405納米;四.微孔板讀數(shù)器的技術(shù)性能:線性度:0.5%和0.005 od,范圍為0.1OD至3OD重復(fù)性:0.5%和0.005 od分辨率:0.001 od溫度控制:30,37;打印機:外部標(biāo)準(zhǔn)計算機打印機(并行接口);通信接口:標(biāo)準(zhǔn)RS232串行接口(與計算機相連);電源:電源140伏安,電壓90260伏,頻率47

6、63赫茲;5.微孔板讀數(shù)器的檢測單元:光通過被測物體前后的能量差是被測物體吸收的能量。在特定波長下,同一被測物體的濃度與吸收的能量有定量關(guān)系。檢測單元:由OD值表示,OD是光密度的縮寫,表示被檢測物體吸收的光密度,od10g(1 trans),其中trans是被檢測物體的光透射值。根據(jù)布格-朗伯-比爾定律,OD值與光強有如下關(guān)系:EOD=log0/其中E代表吸收光密度,0代表入射光強度和透射光強度。OD值通過以下公式計算:EOD=鎘碳是測試物質(zhì)的濃度;d是被檢測物體的厚度;是摩爾因子,0,6。微孔板讀數(shù)器的波長選擇。確定每種物質(zhì)在特定的波長下都有其特定的波長,并且在這個波長下,這種物質(zhì)可以吸收

7、最多的光能。如果選擇其他波段,檢測結(jié)果將會不準(zhǔn)確。因此,在確定檢測對象時,我們選擇特定的波長進行檢測,這就是所謂的測量波長。6.酶標(biāo)簽機的波長選擇:2。每種物質(zhì)對光能仍有一定的非特異性吸收。為了消除這種非特異性吸收,我們選擇另一個參考波長來消除這種不準(zhǔn)確性。在參考波長下,檢測對象的光吸收最小。檢測波長和參考波長的吸收值之間的差異可以消除非特異性吸收。第七章。Anthos酶標(biāo)儀檢測值的計算。儀器中的檢測器接收通過被檢測物體傳輸?shù)墓饽?,并將其轉(zhuǎn)換為二進制數(shù)字信號,最大值為4095。儀器在沒有光源的情況下將透射率值定義為0,在沒有檢測對象的情況下定義為100。在實際檢測中,被檢測物體的透過率值都在0

8、到100之間。光透射值計算如下:最大值(最大值);7.Anthos微孔板讀數(shù)器的檢測值計算如下:T(MeasMin)(MaxMin),其中T為光透射值,MeasMin為被檢測物體的二進制值,Min為0時檢測到的二進制值,Max為100時檢測到的二進制值,示例如下:max=3600min分鐘=20毫秒30T=(30-20)/3600-20)0.0028 od1克(1/T)=1克(1/0.0028)=2.5528.Anthos酶標(biāo)儀的中心定位,儀器會自動進行酶標(biāo)孔測試,測試每一個酶標(biāo)儀時,儀器實際應(yīng)測量35點,并選擇中間5點的平均值作為該孔的外徑值。光源的參考通道,用于校準(zhǔn)電壓不穩(wěn)定或燈泡磨損造成

9、的影響。10.測試結(jié)果說明由于影響測試結(jié)果的因素很多,例如,不同的酶標(biāo)板和測試試劑的體積會導(dǎo)致不同的OD值,因此,只能使用與同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑對測試結(jié)果進行比較和分析。應(yīng)根據(jù)試劑盒的說明對結(jié)果進行臨床解釋。11。微孔板讀數(shù)器的調(diào)試;1.微孔板讀數(shù)器由spectr組成2.許多微孔板讀數(shù)器都配有打印機或與打印機一起使用,因此可以直接打印各種測量數(shù)據(jù)。3.由于不同類型的酶標(biāo)儀的操作程序和功能略有不同,因此在調(diào)試和使用前,有必要仔細閱讀該類型酶標(biāo)儀的操作說明。11、微孔板讀取器的調(diào)試,4)取決于所使用的電壓是否與微孔板讀取器所需的電壓一致。5)檢查各鍵的功能是否符合要求。6)按開始按鈕啟動閱讀板,按

10、停止按鈕停止閱讀板,按模式按鈕選擇不同的模式,包括單波長、雙波長、空白設(shè)置、極限設(shè)置等??梢愿鶕?jù)需要選擇;還有回車鍵(回車)、打印鍵(打印)等。查看在輸入并閱讀所需的報告格式后是否可以打印數(shù)據(jù)。7)如果所有功能鍵都符合手冊的要求,機器可以用來讀取酶聯(lián)免疫吸附試驗。十二、使用酶標(biāo)儀時,1)打開電源開關(guān);2)按MODE鍵選擇您需要的模式,如雙波長和單波長;3)按“報告”選擇您需要的格式,如原始數(shù)據(jù)或光吸收值。光吸收值報告是由空白校正的光吸收值,因為微處理器可以平均每個空白控制孔的吸收值,然后從每個孔的原始數(shù)據(jù)中減去平均空白控制值。這樣,獲得光吸收值報告。12、使用微孔板閱讀器,4)各種程序選擇好,

11、然后按回車鍵(ENTRE),以便所有設(shè)置都固定。5)檢查所用濾光器的波長是否正確;6)將待讀取的微孔板放在板閱讀室的板架上,并正確關(guān)閉門。7)按下開始鍵。此時,閱讀進度顯示在顯示屏上,并且在閱讀完成后數(shù)據(jù)可以自己打印。1.工作環(huán)境酶標(biāo)儀是一種精密光學(xué)儀器,良好的工作環(huán)境不僅能保證其精度和穩(wěn)定性,還能延長其使用壽命。a、儀器應(yīng)放置在無強磁場和干擾電壓的位置。b、儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境中。c、為延緩光學(xué)元件的老化,應(yīng)避免陽光直射。使用酶標(biāo)儀的注意事項:d .操作環(huán)境溫度應(yīng)在15至40之間,環(huán)境濕度應(yīng)在15%之間。運行期間電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。f、清潔操作環(huán)境中的空氣,避免水蒸氣和煙霧。g .保持干燥、清潔、水平的工作面和足夠的操作空間。使用酶標(biāo)儀的注意事項:許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀前通過目測來判斷結(jié)果,操作過程是隨機的,所以使用酶標(biāo)儀后必須規(guī)范操作。使用移

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