1、,胸腺依賴性淋巴細(xì)胞 （thymus-dependent lymphocyte)簡稱T 細(xì)胞。 主要內(nèi)容： 一、 T淋巴細(xì)胞的分化發(fā)育 二、 T淋巴細(xì)胞表面分子及其作用 三、 T淋巴細(xì)胞亞群 四、 T淋巴細(xì)胞功能,第十章 T 淋巴細(xì)胞,來源于骨髓在胸腺（thymus）內(nèi)發(fā)育成熟移行至外周淋巴組織執(zhí)行特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答，參與對TD抗原的體液免疫應(yīng)答。 重要事件: 功能性TCR形成（基因重排） 陽性選擇獲得MHC的限制性 陰性選擇獲得對自身抗原的耐受性,第一節(jié) T細(xì)胞的分化發(fā)育,一、T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育 胸腺的組成細(xì)胞： 胸腺細(xì)胞: 發(fā)育為T細(xì)胞 胸腺基質(zhì)細(xì)胞：胸腺上皮細(xì)胞、樹突細(xì)胞（DC）、 巨

2、噬細(xì)胞等 胸腺內(nèi)環(huán)境： 胸腺基質(zhì)細(xì)胞可分泌胸腺素、胸腺生成素、胸腺激素和 IL7等，并表達(dá)高水平的MHC I類、II類分子和黏附分 子，共同構(gòu)成了胸腺的內(nèi)環(huán)境。,在胸腺微環(huán)境、細(xì)胞因子、胸腺激素作用下胸腺細(xì)胞成熟為T細(xì)胞，表現(xiàn)為功能性TCR形成，以及不同分化抗原的表達(dá)（CD3、CD4、CD8）。 成熟過程分為： （1）雙陰性階段：既不表達(dá)CD4分子，也不表達(dá)CD8分 子。CD4-CD8- CD3low（double negative, DN） （2）雙陽性階段：首先表達(dá)CD8分子，CD8分子的出現(xiàn) 促進(jìn)CD4分子的表達(dá)。CD4+CD8+ （double positive，DP） （3）單陽性階

3、段：雙陽性T細(xì)胞在胸腺中經(jīng)選擇過程， 分化為CD4T細(xì)胞或CD8T細(xì)胞，即單陽性T細(xì)胞。 CD4+/CD8+（single positive，SP）,1T細(xì)胞受體（TCR）的發(fā)育 雙陰性階段鏈基因開始重排 前T細(xì)胞（pre-T）表達(dá) 鏈與前T細(xì)胞替代鏈pT（pre T cell ）組裝成一種pT:受體； CD4+CD8+雙陽性細(xì)胞開始表達(dá)有功能性的TCR,2. T細(xì)胞發(fā)育過程中的陽性選擇 DP細(xì)胞能識別胸腺皮質(zhì)中的基質(zhì)細(xì)胞表面的MHC-I、 MHC-II分子，并與它們以適當(dāng)親和力結(jié)合。能發(fā)生結(jié)合 的T細(xì)胞克隆，繼續(xù)發(fā)育分化，即被選擇，為陽性選擇 （positive selection）。 未發(fā)

4、生結(jié)合的T細(xì)胞克隆則發(fā)生凋亡。 能與MHC-I類分子結(jié)合的T細(xì)胞，CD4基因關(guān)閉，成為 CD8陽性的SP T細(xì)胞； 能與MHC-II類分子結(jié)合的T細(xì)胞，CD8基因關(guān)閉，成為 CD4陽性的SP T細(xì)胞。 生物學(xué)意義： 此過程賦予T細(xì)胞具有識別、結(jié)合MHC的能力。即：使T細(xì)胞在識別抗原時能夠顯示MHC限制性。,獲得MHC限制性,DP細(xì)胞的CD4結(jié)合皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞的MHC-II類分子，CD8丟失，成為CD4+T細(xì)胞；而CD8結(jié)合MHC-I類分子，則CD4丟失，成為CD8+T細(xì)胞。,清除無用的T細(xì)胞,T細(xì)胞不能識別胸腺皮質(zhì)上皮細(xì)胞提呈的肽/MHC復(fù)合物，即發(fā)生凋亡。,3. T細(xì)胞發(fā)育過程中的陰性選擇

5、（negative selection） 經(jīng)陽性選擇的SP細(xì)胞既有識別外來異物的T細(xì)胞克隆，也有識別自身抗原的T細(xì)胞克隆。 在胸腺皮髓交界處、髓質(zhì)處，當(dāng)TCR與基質(zhì)細(xì)胞的MHC-自身抗原肽結(jié)合，此T細(xì)胞克隆發(fā)生凋亡。 未與MHC-自身抗原肽結(jié)合的T細(xì)胞克隆繼續(xù)發(fā)育成熟。 生物學(xué)意義： 陰性選擇使T細(xì)胞獲得了對自身抗原的耐受性。是機(jī)體免疫系統(tǒng)識別自己與非己的重要基礎(chǔ)。,清除自身反應(yīng)性（有害）T細(xì)胞,經(jīng)陽性選擇的T細(xì)胞與髓質(zhì)DC和巨噬細(xì)胞提呈的自身肽/MHC復(fù)合物高親和力結(jié)合，則發(fā)生凋亡。,識別和結(jié)合自身MHC的DP細(xì)胞分化為SP細(xì)胞，不結(jié)合者發(fā)生凋亡,高親和力結(jié)合自身肽：MHC復(fù)合物的SP細(xì)胞發(fā)

6、生凋亡，不結(jié)合者分化成熟,第二節(jié) T細(xì)胞表面分子及其作用,1、TCR: （1）是T細(xì)胞特有的表面標(biāo)志。 （2）是T細(xì)胞識別、結(jié)合抗原的 主要單位。 （3）TCR組成與結(jié)構(gòu)： 構(gòu)成TCR的肽鏈有、 、 四種類型 ，分別組合成 TCR 和 TCR 兩種類型。 T,（ 占90-95% ） T, （ 占5-10% ）,一、TCR-CD3復(fù)合物,識別特點： 1）特異性識別抗原提呈細(xì)胞或靶細(xì)胞表面的抗原肽-MHC分子復(fù)合物（pMHC） ； 2）具有雙重特異性：即識別抗原肽的表位，也識別自身MHC分子的多態(tài)性部位。是T細(xì)胞識別抗原具有自身MHC限制性的原因。,(1)是成熟T細(xì)胞又一特征性 表面標(biāo)志。 (2)

7、是TCR-CD3復(fù)合體中信 號轉(zhuǎn)導(dǎo)的亞單位，將 TCR接受的抗原刺激信 號轉(zhuǎn)導(dǎo)至細(xì)胞內(nèi)，使T 細(xì)胞活化。 (3) 組成與結(jié)構(gòu)：由、 、五種肽鏈組成。 以 、 、 （ 或 ） 的六聚體形式與TCR共同 組成復(fù)合體。 (4)每條肽鏈胞質(zhì)區(qū)較長， 均含有1-3個ITAM基序。,2、CD3：,ITAM：(由18個AA組成，含有2個YxxL/V，Y：酪氨酸。 酪氨酸激酶磷酸化后可與胞漿中含SH2結(jié)構(gòu)域的酪氨酸激酶結(jié)合，是T細(xì)胞活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程早期階段的重要生化反應(yīng)之一，因此，CD3分子的功能是：轉(zhuǎn)導(dǎo)TCR識別抗原所產(chǎn)生的活化（第一）信號。),成熟T細(xì)胞只能表達(dá)CD4或CD8分子 。是TCR-CD3的輔助

8、受體（coreceptor），輔助TCR識別抗原和參與T 細(xì)胞活化信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)。,1、CD4基本結(jié)構(gòu)及作用,二、CD4和CD8分子,為單鏈跨膜糖蛋白，胞膜外區(qū)屬IgSF家族，有四個IgSF結(jié)構(gòu)域；胞質(zhì)區(qū)有與蛋白酪氨酸激酶（PTK）結(jié)合的基序。,CD4分子通過胞外第一、二結(jié)構(gòu)域與MHC II類分子的非多態(tài)區(qū)（2結(jié)構(gòu)域）結(jié)合，輔助TCR-CD3對抗原的識別；通過胞質(zhì)區(qū)與PTK p56lck的結(jié)合，參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。 胞外第一結(jié)構(gòu)域是HIV 的受體，HIV膜蛋白gp120與其結(jié)合引起感染。,T細(xì)胞,2、CD8基本結(jié)構(gòu)及作用,由兩條肽鏈構(gòu)成，異聚體， 、鏈胞外區(qū)各有一個V樣結(jié)構(gòu)域（IgSF）。 鏈V樣區(qū)與M

9、HC I類分子非多態(tài)的3區(qū)域結(jié)合，胞漿區(qū)可與p56lck激酶結(jié)合， CD8也是T細(xì)胞的輔助受體，參與T細(xì)胞活化和增殖的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。,CD4和CD8分子又稱為T細(xì)胞的輔助受體。,T cell co-receptor molecules,T細(xì)胞膜,APC膜,功能：是TCR-CD3的輔助受體: 協(xié)助識別MHC分子:是T細(xì)胞識別抗原具有MHC限制性的原因。 幫助TCR的信號傳遞：CD4、CD8分子胞漿區(qū)結(jié)合有酪氨酸蛋白激酶（p56Lck)，可催化CD3的ITAM基序的酪氨酸殘基磷酸化。,1. CD28 表達(dá)于90%CD4+T細(xì)胞和50%CD8+T細(xì)胞。配體 為B7分子包括B7-1（CD80）和B7-2

10、（CD86）。 CD28與CD80/86結(jié)合后，可誘導(dǎo)T細(xì)胞表達(dá)抗凋亡蛋 白（Bcl-XL）， 合成和分泌IL-2及其他細(xì)胞因子， 促進(jìn)T細(xì)胞增殖和分化。,三、協(xié)同刺激分子,位于T細(xì)胞膜上的各種膜分子，通過與APC或靶細(xì)胞上的配體結(jié)合，提供T細(xì)胞活化的第二信號（又稱協(xié)同刺激信號）。,表達(dá)于活化的T細(xì)胞，配體亦是B7分子， CTLA-4與B7的親和力顯著高于CD28與B7的親和力，其與B7結(jié)合后，使已活化T細(xì)胞產(chǎn)生抑制信號，下調(diào)或終止T細(xì)胞活化。,2. CTLA-4（CD152),CTLA-4胞質(zhì)區(qū)有免疫受體酪氨酸抑制基序（ITIM）,3. CD40L(CD154) 表達(dá)于活化的CD4+T細(xì)胞，

11、與APC上的CD40結(jié)合。 作用：促進(jìn)APC活化。在B細(xì)胞活化中，CD40-CD40L的 結(jié)合，有促進(jìn)B細(xì)胞活化、記憶性B細(xì)胞形成的作用。 4. LFA-和 ICAM- 介導(dǎo)細(xì)胞與抗原提呈細(xì)胞或靶細(xì)胞間的粘附。 5. CD2分子（LFA-） 人CD2表達(dá)在95%成熟T、50%-70%胸腺細(xì)胞及部分NK細(xì)胞。又稱綿羊紅細(xì)胞受體（SRBC)，與CD58（LFA-3)和CD48（小鼠和大鼠）結(jié)合，除介導(dǎo)T細(xì)胞與APC或靶細(xì)胞之間的黏附外，還為T細(xì)胞提供活化信號。,6. ICOS（inducible costimulator） 表達(dá)于活化的T細(xì)胞，人的ICOS配體為ICOSL/B7-H2。 初始T細(xì)胞

12、的活化主要依賴CD28提供協(xié)同刺激信號；而 ICOS則在CD28之后起作用，調(diào)節(jié)活化T細(xì)胞多種CK的 產(chǎn)生，并促進(jìn)T細(xì)胞增殖。 7. PD-1（programmed death 1） 表達(dá)于活化的T細(xì)胞，配體為PD-L1和PD-L2。PD-1與相 應(yīng)配體結(jié)合后，可抑制T細(xì)胞的增殖及IL-2和IFN-等CK 的產(chǎn)生，并抑制B細(xì)胞的增殖、分化和Ig的分泌。PD-1還 參與外周免疫耐受的形成。,CD40,CD40L,四、絲裂原（mitogen）受體和其它表面分子 絲裂原：ConA、PHA、PWN。 細(xì)胞因子受體（CKR） T細(xì)胞表面有許多CKR，靜止和活化的T細(xì) 胞表面CKR的數(shù)目和親和力差別很大。

13、 MHC 分子 MHC-I類分子存在于所有T細(xì)胞表面， MHC-II類分子只表達(dá)在活化的T細(xì)胞表面 。 凋亡分子 活化的T細(xì)胞表達(dá)FasL（CD95）等。,分類方法： 1、按所處的活化階段分為： 初始T細(xì)胞（naive T cell） 效應(yīng)T細(xì)胞（effector T cell ） 記憶T細(xì)胞（memory T cell ） 2、按TCR類型分為： T細(xì)胞 和 T細(xì)胞,第三節(jié) T淋巴細(xì)胞亞群,3、按是否表達(dá)CD4或CD8分子分為： CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞 4、按T細(xì)胞功能分為： 輔助性T細(xì)胞（help T cell，Th） 細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxic T cell，CTL/Tc

14、） 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cell，Treg）,一、初始T細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞、記憶T細(xì)胞,初始T細(xì)胞（naive T cell）：初始T細(xì)胞是指從未接受過抗原刺激的成熟T細(xì)胞，主要表達(dá)CD45RA和CD62L。主要功能是識別抗原，受刺激后分化為效應(yīng)T細(xì)胞和記憶性T細(xì)胞。參與淋巴細(xì)胞再循環(huán)。 活化T細(xì)胞（activated T cell ）：效應(yīng)T細(xì)胞高表達(dá)IL-2R及整和素、CD44和CD45RO，不參與淋巴細(xì)胞再循環(huán)。而是向外周炎癥組織遷移。 記憶T細(xì)胞（memory T cell ）：存活期長，亦表達(dá)CD45RO，參與再次免疫應(yīng)答。再次接受抗原后，立即活化，并分化為記憶性T

15、細(xì)胞和效應(yīng)性T細(xì)胞。,根據(jù)趨化因子受體CCR7的表達(dá)可將記憶性T細(xì)胞分為：, CCR7-記憶性T細(xì)胞： 主要存在于血液、脾臟和非淋巴組織中，受到抗原刺激后能迅速分化為效應(yīng)細(xì)胞，產(chǎn)生效應(yīng)分子，又稱為效應(yīng)性記憶T細(xì)胞（effector memory T cells，TEM）。 CCR7+記憶性T細(xì)胞 主要存在于淋巴結(jié)、脾臟和血液中，受到抗原刺激后其分化成效應(yīng)細(xì)胞并產(chǎn)生細(xì)胞因子，對靶細(xì)胞的殺傷作用較慢，又稱為中央型記憶T細(xì)胞（central memory T cells，TCM）。,記憶性T細(xì)胞不是靜止的，通過有規(guī)律的自發(fā)增殖來補(bǔ)充其數(shù)量。,二、 T細(xì)胞和 T細(xì)胞,皮膚表皮,（CD1）,無,缺乏多樣

16、性,高度多樣性,90%95%,5%10%,占外周血T比例,三、 CD4 +T細(xì)胞及CD8+T細(xì)胞 1、CD4+T： 表型為CD3+、CD2+、 CD4+、CD8-； 主要為 T細(xì)胞 ，其TCR識別MHC 類 分子-抗原肽復(fù)合物。 活化后分化的效應(yīng)T細(xì)胞主要為輔助性T細(xì)胞 （Th），也有少數(shù)CD4+效應(yīng)性T細(xì)胞具有細(xì)胞 毒作用和免疫抑制作用。,2、CD8+ T細(xì)胞 表型為CD3+、CD4-、CD8+； TCR可為 型 或型。CD8分子表達(dá)于30%35% T細(xì)胞。 CD8+ T細(xì)胞主要識別MHC 類分子-抗原肽復(fù)合物。 活化后，分化的效應(yīng)細(xì)胞為細(xì)胞毒T細(xì)胞（ CTL或 Tc），具 有細(xì)胞毒作用，可

17、特異性殺傷靶細(xì)胞。,CD4+T,CD8+T,CD4+T與CD8+T細(xì)胞的比較 CD4+T細(xì)胞 CD8+T細(xì)胞 表型 CD3+CD4+CD8- CD3+CD8+CD4- 識別抗原肽 1318AA 810AA MHC限制性 MHC-II類分子 MHC-I類分子 Th + - Tc + +,四、 Th、CTL和 Treg細(xì)胞,（一） Th細(xì)胞 初始CD4+T細(xì)胞活化后可分化為Th1、Th2 和Th17三類效應(yīng)性Th細(xì)胞。 Th1：主要分泌IFN-、TNF、IL-2等，在細(xì)胞免疫中發(fā)揮 重要作用； Th2：主要分泌IL-4、IL-5、IL-10、IL-13等，在體液免疫 中發(fā)揮重要作用； Th17：通

18、過分泌IL-17參與固有免疫和某些炎癥的發(fā)生。 此外，初始CD4+T細(xì)胞活化后還可分化為Th3和Tr1，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。,（二）CTL（Tc）細(xì)胞,廣義上，具有細(xì)胞毒作用的T細(xì)胞包括：CD8+T、T和NK T細(xì)胞。 細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）通常指CD8+T細(xì)胞。 CTL依據(jù)其分泌的CK不同，可進(jìn)一步分為Tc1和Tc2兩個亞型。 Tc1：分泌的CK與Th1類似； Tc2：分泌的CK與Th2類似。,（三）調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）,1. 自然調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（nTreg） 直接從胸腺中分化而來，組成性高表達(dá)IL-2受體的鏈 （CD25）分子。人體中nTreg占外周血CD4+T細(xì)胞總數(shù)的 5%10%。

19、nTreg的表型為CD4+CD25+ Foxp3+。 Foxp3是nTreg的一種重要標(biāo)志，參與Treg的分化和功能。 nTreg的主要功能是： 通過抑制CD4+和CD8+T細(xì)胞的活化與增 殖達(dá)到免疫的負(fù) 調(diào)節(jié)作用，主要抑制自身反應(yīng)性T細(xì)胞應(yīng)答。,nTreg發(fā)揮負(fù)調(diào)控作用的方式：, 主要通過與靶 細(xì)胞直接接觸 發(fā)揮抑制作用； 分泌具有抑制 作用的細(xì)胞因子 TGF-、IL-10、 IL-35等。,2. 適應(yīng)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 又稱誘導(dǎo)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（iTreg），一般在外周由抗原及其他因素（如TGF-）誘導(dǎo)產(chǎn)生，表型與nTreg相同，但Foxp3表達(dá)量稍低。 主要包括： Tr1：主要分泌IL-10及

20、TGF-; Th3：主要產(chǎn)生TGF-。 iTreg的主要作用是抑制Th1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)。抑制B細(xì)胞、CTL細(xì)胞和NK細(xì)胞的增殖和功能。 3. 其它調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 除CD4+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞外，尚發(fā)現(xiàn)CD8+Treg，Th1、Th2、 NK、NK T、 T等也具有免疫調(diào)節(jié)活性。,兩類調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的比較,特點 自然調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 適應(yīng)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 誘導(dǎo)部位 胸腺 外周 CD25表達(dá) + + 轉(zhuǎn)錄因子Foxp3 + + 抗原特異性 自身抗原（胸腺中） 組織特異性抗原和外來抗原 發(fā)揮效應(yīng)作用的方式 細(xì)胞接觸為主，分泌CK 分泌細(xì)胞因子為主 功能 抑制自身反應(yīng)性T細(xì)胞應(yīng)答 抑制自身損傷性炎癥反應(yīng)

21、和移 植排斥反應(yīng)，有利于腫瘤生長,第四節(jié) T淋巴細(xì)胞的功能 一、CD4輔助型T細(xì)胞（Th） （一） CD4 Th的分化 初始T細(xì)胞首先分化為Th0細(xì)胞，Th0繼續(xù)分化為Th1、 Th2、 Th3和Th17四個亞群，分泌不同的細(xì)胞因子，執(zhí)行不同的功能。 Th1：分泌IL-2、IFN- 、TNF Th2：分泌IL-4、 IL- 5、IL-6、IL-10、 IL-13 Th3：TGF- Th17：分泌IL-17 不同亞群只是反映細(xì)胞處于不同分化狀態(tài)，這種分化狀態(tài)不是恒定不變的，可發(fā)生轉(zhuǎn)化。,（二） CD4 Th細(xì)胞分化的調(diào)節(jié),TGF-、IL-4、IL-10則能促進(jìn)Th3的分化。 除CK外，APC表達(dá)的協(xié)同刺激分子對Th0 的分化方向亦發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。,CD4+T細(xì)胞在不同細(xì)胞因子作用下分化為不同T細(xì)胞功能亞群,（三）CD4 Th細(xì)胞亞群的效應(yīng)功能,1. Th1細(xì)胞功能 增