1、第二章 藥物的鑒別試驗(yàn)（Identification test）教學(xué)目的和要求1理解藥物鑒別試驗(yàn)是為了鑒別藥物的真?zhèn)?。熟悉我?guó)藥典鑒別的項(xiàng)目、鑒別試驗(yàn)的條件及靈敏度的意義 2掌握我國(guó)藥典藥物的一般鑒別方法 3掌握各類(lèi)有機(jī)物、無(wú)機(jī)物的鑒別試驗(yàn)方法及原理一、概述依據(jù)藥典進(jìn)行的藥物分析主要有三大項(xiàng)：鑒別、檢查和含量測(cè)定。藥物的鑒別試驗(yàn)（identification test）是用于鑒別藥物的真?zhèn)?，在藥物分析中屬首?xiàng)工作，只有證實(shí)被分析的藥物是真的，才有必要接著進(jìn)行檢查、含量測(cè)定。 藥典所收載的藥物項(xiàng)下的鑒別試驗(yàn)方法，僅適用于貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物，用以證實(shí)是否為其所標(biāo)示的藥物。它與分析化學(xué)中的定性

2、鑒別有所區(qū)別。這些試驗(yàn)方法不能賴(lài)以鑒別未知物。二、鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目1、性狀: 藥物的性狀反映了藥物特有的物理性質(zhì)。 包括外觀,嗅味,溶解度及物理常數(shù)等。物理常數(shù)：熔點(diǎn)、比旋度、吸收系數(shù)。比旋度：在一定波長(zhǎng)與溫度下，偏振光透過(guò)長(zhǎng)1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時(shí)測(cè)得的旋光度稱(chēng)為比旋度。它是反映手性藥物特性及其純度的主要指標(biāo)。吸收系數(shù)：在給定波長(zhǎng)、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時(shí)的吸收度稱(chēng)為吸收系數(shù)。有兩種表示方式：摩爾吸收系數(shù)和百分吸收系數(shù)。百分吸收系數(shù)：在一定波長(zhǎng)下，溶液濃度為1%（W/V），厚度為1cm時(shí)的吸收度，用表示，是吸光物質(zhì)的重要物理常數(shù)。2、一般鑒別實(shí)

3、驗(yàn)(general identification test)。一般鑒別實(shí)驗(yàn)是以藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其物理化學(xué)性質(zhì)為依據(jù),通過(guò)化學(xué)反應(yīng)鑒別藥物的真?zhèn)?。一般鑒別試驗(yàn)僅供確認(rèn)單一的化學(xué)藥物，如為數(shù)種化學(xué)藥物的混合物或有干擾物質(zhì)存在時(shí)，除另有規(guī)定外，應(yīng)不適用。 *通過(guò)一般鑒別試驗(yàn)只能證實(shí)是某一類(lèi)藥物，而不能證實(shí)是哪一種藥物。例如，經(jīng)一般鑒別反應(yīng)的鈉鹽試驗(yàn)，證實(shí)某一藥物為鈉鹽，但不能辨認(rèn)是氯化鈉、苯甲酸鈉或者是其它某一種鈉鹽藥物。要想最后證實(shí)被鑒別的物質(zhì)到底是哪一種藥物，必須在一般鑒別試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，再進(jìn)行專(zhuān)屬鑒別試驗(yàn)，方可確認(rèn)。通過(guò)一般鑒別反應(yīng)只能證實(shí)是某一類(lèi)藥物,不能證實(shí)是哪一類(lèi)藥物。無(wú)機(jī)物:陰,陽(yáng)離子的

4、特殊反應(yīng)。有機(jī)物:采用藥典的官能團(tuán)反應(yīng)。一般鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目： 丙二酰脲類(lèi)、托烷生物堿類(lèi)、芳香第一胺類(lèi)、有機(jī)氟化物類(lèi)、無(wú)機(jī)金屬鹽類(lèi)（鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、鈣鹽、鋇鹽、銨鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋁鹽、鋅鹽、銅鹽、銀鹽、汞鹽、鉍鹽、銻鹽、亞錫鹽）、有機(jī)酸鹽（水楊酸鹽、枸櫞酸鹽、乳酸鹽、苯甲酸鹽、酒石酸鹽）、無(wú)機(jī)酸鹽（亞硫酸鹽或亞硫酸氫鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、硼酸鹽、碳酸鹽與碳酸氫鹽、醋酸鹽、磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物）。（一）有機(jī)氟化物 1鑒別試驗(yàn) 取供試品約7mg，照氧瓶燃燒法（附錄VIIC）進(jìn)行有機(jī)破壞，用水20ml與0.01mol/L氫氧化鈉溶液6.5ml為吸收液，俟燃燒完全后，充分振搖；取吸收液2ml，

5、加茜素氟藍(lán)試液0.5ml，再加12%醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2ml，用水稀釋至4ml，加硝酸亞鈰試液0.5ml，即顯藍(lán)紫色；同時(shí)做空白對(duì)照試驗(yàn)。 2試驗(yàn)原理 有機(jī)氟化物經(jīng)氧瓶燃燒法破壞，為堿性溶液吸收成為無(wú)機(jī)氟化物后，與茜素氟藍(lán)、硝酸亞鈰形成藍(lán)紫色絡(luò)合物。 （二）有機(jī)酸鹽 1水楊酸鹽 鑒別試驗(yàn)一 取供試品的稀溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色。 原理 本品在中性或弱酸性條件下，和三氯化鐵試液生成配位化合物，在中性時(shí)呈紅色，弱酸性時(shí)呈紫色；若在強(qiáng)酸性中，配位化合物分解生成游離水楊酸。 本反應(yīng)極為靈敏，只需取稀溶液進(jìn)行試驗(yàn)，如取用量大，產(chǎn)生顏色過(guò)深時(shí)，可加水稀釋后觀察。 鑒別試驗(yàn)二 取供試品溶液，加

6、稀鹽酸，即析出白色水楊酸沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液中溶解。 原理 水楊酸不溶于水（0時(shí)溶解度為1g/1500L），故供試液加酸即析出游離水楊酸。由于水楊酸的酸性（K1.0610-3，25）大于醋酸（K1.8510-5，25），故能與醋酸銨作用釋出醋酸，而本身形成銨鹽溶解。析出的水楊酸亦可經(jīng)冷水洗滌、干燥后測(cè)定熔點(diǎn)（158-161）。 2苯甲酸鹽 3乳酸鹽 4枸櫞酸鹽 5酒石酸鹽 6醋酸鹽 鑒別試驗(yàn) 取供試品，加硫酸和乙醇后加熱，即產(chǎn)生乙酸乙酯的香氣。 （三）無(wú)機(jī)金屬鹽 1鈉鹽 鑒別試驗(yàn)一 取鉑絲，用鹽酸濕潤(rùn)后，蘸取供試品，在無(wú)色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色。 原理 鈉的火焰光譜在可見(jiàn)光區(qū)，有5

7、89.0nm、589.6nm主要譜線，故其燃燒火焰顯黃色。本焰色反應(yīng)極為靈敏（最低檢出限量為0.1ng鈉離子）。因此，對(duì)所用儀器和試劑要求必須很?chē)?yán)格。在檢測(cè)前應(yīng)將鉑絲燒紅，趁熱浸入鹽酸中，如此反復(fù)數(shù)次，直至火焰不染黃色后，再蘸取供試品進(jìn)行測(cè)定。只有當(dāng)強(qiáng)烈的黃色火焰持續(xù)數(shù)秒鐘不退，才能確認(rèn)為鈉鹽。 鑒別試驗(yàn)二 取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色沉淀。 原理 其反應(yīng)式為： 本試驗(yàn)中，供試品溶液應(yīng)為中性；有些有機(jī)酸鹽（如水楊酸鈉）遇醋酸氧鈾鋅試液能生成有色配位化合物，故在試驗(yàn)前應(yīng)對(duì)供試液進(jìn)行預(yù)處理。其處理方法是，在供試液中加入稀鹽酸，濾過(guò)，取濾液蒸干，加水溶解后，再供試驗(yàn)用；試驗(yàn)中，醋

8、酸氧鈾鋅試液要加多過(guò)量；必要時(shí)，還需用玻璃棒摩擦試管壁，以促進(jìn)黃色沉淀的析出。 2鉀鹽 鑒別試液一 焰色反應(yīng)顯紫色，但有少量鈉鹽混存時(shí)，須隔色玻璃透視，方能辨認(rèn)。 原理 鉀的火焰光譜在可見(jiàn)光區(qū)有766.49nm、769.90nm與404.4nm幾條譜線，其中以766.49nm與769.90nm兩條譜線最強(qiáng)。由于人眼在此波長(zhǎng)附近敏感度較差，故鉀鹽的燃燒火焰顯紫色。如有鈉鹽混存，因鈉焰靈敏度很高，需透過(guò)藍(lán)色鈷玻璃將鈉焰黃色濾去，此時(shí)火焰顯粉紅色。 鑒別試驗(yàn)二 取供試品，加熱熾灼，除去可能含有的銨鹽，放冷后，加水溶解，再加0.1%四苯硼鈉溶液與醋酸，即生成白色沉淀。 原理 其反應(yīng)式為： 若有NH4+

9、存在，顯相同反應(yīng)，故必須預(yù)先加熱熾灼除去，以免干擾試驗(yàn)結(jié)果的辨認(rèn)。 3銨鹽 鑒別試驗(yàn)一 取供試品，加過(guò)量氫氧化鈉試液后，加熱，即分解，發(fā)生氨臭；遇濕潤(rùn)的紅色石蕊試紙，能使之變藍(lán)，并能使硝酸亞汞試液濕潤(rùn)的濾紙顯黑色。 原理 其反應(yīng)式為： 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： 4鈣鹽鑒別試驗(yàn)一 焰色反應(yīng)顯磚紅色（622nm）。鑒別試驗(yàn)二 取供試品溶液（120），加甲基紅指示液2滴，用氨試液中和，再滴加鹽酸至呈酸性，加草酸銨試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀不溶于醋酸，但可溶于鹽酸。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （白色）5鎂鹽 鑒別試驗(yàn)一 取供試品溶液，加氨試液，即生成白色沉淀；滴加氯化銨試液，沉淀溶解；再加磷酸氫二鈉

10、試液1滴，振搖，即生成白色沉淀。沉淀在氨試液中不溶。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： 6，鋰鹽鑒別試驗(yàn)一 焰色試驗(yàn)顯黃綠色（553.56nm，500nm），通過(guò)綠色玻璃透視，火焰顯藍(lán)色（488nm）。鑒別試驗(yàn)二 取供試品溶液，加稀硫酸，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。7，鍶鹽鑒別試驗(yàn)一 取供試品溶液，加氫氧化鈉試液堿化后，加入碳酸鈉試液，煮沸，即生成白色沉淀（Li2O）；分離，沉淀能在氯化銨試液中溶解(NH3)。 鑒別試驗(yàn)二 焰色試驗(yàn)顯胭脂紅色。（670.78nm） 鑒別試驗(yàn)三 取供試品適量，加入稀硫酸或可溶性硫酸鹽溶液，不生成沉淀（與鍶鹽區(qū)別） 試驗(yàn)原理 鋰鹽和稀硫酸或可溶性硫酸鹽

11、溶液不發(fā)生沉淀反應(yīng)，而鍶鹽則相反，以此可區(qū)別鋰鹽和鍶鹽。 8鐵鹽 （1）亞鐵鹽： 鑒別試驗(yàn)一 取供試品溶液，加鐵氰化鉀試液，即生成深藍(lán)色沉淀，分離，沉淀在稀鹽酸中不溶，但加氫氧化鈉試液，即分解成棕色沉淀。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （深藍(lán)色藤氏藍(lán)）（棕色） 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： (深紅色)鑒別試驗(yàn)一 取供試品溶液，加亞鐵氰化鉀試液，即生成深藍(lán)色沉淀，分離，沉淀在稀鹽酸中不溶，但加氫氧化鈉試液，即分解成棕色沉淀。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （深藍(lán)色普魯士藍(lán)）試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （血紅色）本試驗(yàn)一般應(yīng)在鹽酸溶液中進(jìn)行；不能用硝酸，因硝酸中可能含有亞硝酸，干擾試驗(yàn)結(jié)果。 （紅色）9，汞鹽（1）亞汞

12、鹽 鑒別試驗(yàn)一 取供試品，加氨試液或氫氧化鈉試液，即變?yōu)楹谏?試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （黑色）（黑色）試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （黃色）（黑色）鑒別試驗(yàn)一 取供試品溶液，加氫氧化鈉試液，即生成黃色沉淀(HgO)。鑒別試驗(yàn)二 取供試品的中性溶液，加碘化鉀試液，即生成猩紅色沉淀，能在過(guò)量碘化鉀試液中溶解；再以氫氧化鈉堿化，加銨鹽即生成紅棕色沉淀。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （猩紅色） 10, 銀鹽鑒別試驗(yàn)一 取供試品溶液，加稀鹽酸，即生成凝乳狀沉淀，分離，沉淀能在氨試液中溶解，加硝酸沉淀又重新出現(xiàn)。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： 鉻酸銀沉淀能溶于硝酸中，也可和氨試液作用生成Ag(NH3)2+而溶解，但不溶

13、于酸性較弱的醋酸中。 11銅鹽鑒別試驗(yàn)一 取供試品溶液，滴加氨試液，即生成淡藍(lán)色沉淀，再加過(guò)量氨試液，沉淀即溶解，生成深藍(lán)色溶液。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （紅棕色） 12，鉍鹽鑒別試驗(yàn)一 取供試品溶液，加碘化鉀試液，即生成紅棕色溶液或暗棕色沉淀，分離，沉淀能在過(guò)量碘化鉀試液中溶解成黃棕色的溶液，再加水稀釋?zhuān)稚沙壬恋怼?試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： 鉍鹽量少時(shí)，則形成紅棕色溶液。 （紅棕色溶液）加水稀釋?zhuān)葱纬沙壬牡饣蹉G沉淀。 （橙色）如鉍鹽濃度較小時(shí)，這一反應(yīng)現(xiàn)象不明顯。鑒別試驗(yàn)二 取供試品溶液，用稀硫酸酸化，加10%硫脲溶液，即顯深黃色。 試驗(yàn)原理 鉍鹽和硫脲在

14、酸性條件下，具有特別靈敏的顏色反應(yīng)（1），其顏色取決于生成沉淀的組成，沉淀的組成取決于反應(yīng)的條件，Bi3+與SC(NH2)2的比例為11時(shí)為黃褐色；12時(shí)為黃色；13時(shí)為黃褐色。硫脲和多數(shù)金屬離子都可發(fā)生顏色反應(yīng)。 13鋅鹽 鑒別試驗(yàn)一 取供試品溶液，加亞鐵氰化鉀試液，即生成白色沉淀，分離，沉淀在稀鹽酸中不溶解。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （白色）亞鐵氰化鉀試劑過(guò)量時(shí)則生成溶解度更小的亞鐵氰化鋅鉀白色沉淀。 （白色）沉淀不溶于稀酸或氨試液，但可溶于強(qiáng)堿。 鑒別試驗(yàn)二 取供試品溶液，以稀硫酸酸化，加0.1%硫酸銅試液1滴及硫氰酸汞銨試液數(shù)滴，即生成紫色沉淀。 試驗(yàn)原理 鋅鹽和硫氰酸汞銨于酸性條件下

15、反應(yīng)，生成白色硫氰酸汞鋅沉淀，當(dāng)有銅鹽存在時(shí)，則生成混晶而顯色。若Zn2+/Cu2+不同，則所產(chǎn)生沉淀的顏色也不同。14銻鹽 鑒別試驗(yàn)一 供試品溶液，加醋酸成酸性后，置水浴上加熱，趁熱加硫代硫酸鈉試液數(shù)滴，逐漸生成橙紅色沉淀。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （橙紅色）酸化溶液時(shí)，可用鹽酸，然后再加水稀釋至恰有白色沉淀渾濁發(fā)生（SbOCl），即為所需酸度。由于不易控制，所以一般采用醋酸。 鑒別試驗(yàn)二 取供試品溶液，加鹽酸成酸性后，通硫化氫氣，即生成橙色沉淀，分離，沉淀在硫化銨試液或硫化鈉試液中溶解。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （橙色）（橙色）沉淀可和硫化銨或硫化鈉作用，生成硫銻酸鹽SbS43-和亞硫銻酸

16、鹽SbS33-而溶解。其反應(yīng)式為： 15鋁鹽 鑒別試驗(yàn)一 取供試品溶液，加氫氧化鈉試液，即生成白色膠狀氫氧化鋁沉淀；分離，沉淀能溶于過(guò)量氫氧化鈉試液中。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： （白色膠狀）當(dāng)pH值超過(guò)10時(shí)，則氫氧化鋁沉淀溶解。 鑒別試驗(yàn)二 取供試品溶液，加氨試液至生成白色膠狀沉淀，滴加茜素磺酸鈉指示液數(shù)滴，沉淀即顯櫻紅色。 試驗(yàn)原理 其反應(yīng)式為： 16亞錫鹽 鑒別試驗(yàn) 取供試品水溶液1滴，點(diǎn)于磷鉬酸銨試紙上，試紙應(yīng)顯藍(lán)色。 試驗(yàn)原理 亞錫鹽和三氯化銻一樣不但能將可溶性的磷鉬酸銨鹽還原,而且也能使不溶性的磷鉬酸鹽還原,生成一種鉬的低價(jià)氧化物的膠體分散混合物即鉬藍(lán)，其主要成分大概是2MoO3M

17、o2O5。3、專(zhuān)屬鑒別反應(yīng)(specific identification test)。藥物的專(zhuān)屬鑒別反應(yīng)是證實(shí)某一種藥物的依據(jù).它是根據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)性質(zhì)的不同,選用某些特有的靈敏定性反應(yīng),鑒別藥物的真?zhèn)?。綜上所述，一般鑒別試驗(yàn)是以某些類(lèi)別藥物的共同化學(xué)結(jié)構(gòu)為依據(jù)，根據(jù)其相同的物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行藥物真?zhèn)蔚蔫b別，以區(qū)別不同類(lèi)別的藥物。而專(zhuān)屬鑒別試驗(yàn)，則是在一般鑒別試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，利用各種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)差異，來(lái)鑒別藥物，以區(qū)別同類(lèi)藥物或具有相同化學(xué)結(jié)構(gòu)部分的各個(gè)藥物單體，達(dá)到最終確證藥物真?zhèn)蔚哪康摹Ｒ话汨b別反應(yīng):以某些類(lèi)別藥物的共同化學(xué)結(jié)構(gòu)為依據(jù),進(jìn)行鑒別.以區(qū)別不同類(lèi)

18、別的藥物。專(zhuān)屬鑒別反應(yīng):利用各種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)差異，來(lái)鑒別藥物，區(qū)別同類(lèi)藥物。三、 鑒別方法化學(xué)鑒別：干法：火焰（鹽類(lèi)藥物）；濕法光譜鑒別色譜鑒別生物學(xué)法要求：專(zhuān)屬性強(qiáng)、再現(xiàn)性好、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、快速。（一） 化學(xué)鑒別法1、干法：將供試品加適當(dāng)試劑在規(guī)定的溫度條件下（一般是高溫）進(jìn)行試驗(yàn)，觀測(cè)此時(shí)所發(fā)生的特異現(xiàn)象。焰色反應(yīng): 利用某些元素所具有的特異焰色，可鑒別它們?yōu)槟囊活?lèi)鹽類(lèi)藥物。取鉑絲，用HCL濕后，取供試品在無(wú)色火焰中燃燒特殊顏色。加熱分解:在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下，加熱使供試品分解，生成有特殊氣味的氣體。2、濕法：系指將供試品和試劑在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，于一定條件下進(jìn)行反應(yīng)，發(fā)生易于觀測(cè)的化學(xué)

19、變化，如顏色、沉淀、氣體、熒光等。供試品試劑+溶劑化學(xué)變化（顏色，沉淀，氣體）(1)呈色反應(yīng)鑒別法：系指供試品溶液中加入適當(dāng)?shù)脑噭┤芤海谝欢l件下進(jìn)行反應(yīng)，生成易于觀測(cè)的有色產(chǎn)物。在鑒別試驗(yàn)中最為常用的反應(yīng)類(lèi)型有： 1)三氯化鐵呈色反應(yīng)-酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基； 2)異羥肟酸鐵反應(yīng)-多為芳酸及其酯類(lèi)、酰胺類(lèi)； 3)茚三酮呈色反應(yīng)-脂肪氨基； 4)重氮化-偶合顯色反應(yīng)-芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯氨基；5)氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)。 （2）沉淀生成反應(yīng)鑒別法：常用的這類(lèi)反應(yīng)有： )與重金屬離子的沉淀反應(yīng)在一定條件下，藥物和重金屬離子反應(yīng)，生成不同形式的沉淀； 2)與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）的沉淀反

20、應(yīng)多為生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機(jī)堿及其鹽； 3)其它沉淀反應(yīng)。 （3）熒光反應(yīng)鑒別法：常用的熒光發(fā)射形式有以下類(lèi)型： 1)藥物本身可在可見(jiàn)光下發(fā)射熒光； 2)藥物溶液加硫酸使呈酸性后，在可見(jiàn)光下發(fā)射熒光； 3)藥物和溴反應(yīng)后，于可見(jiàn)光下發(fā)射出熒光；4)藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其它反應(yīng)后，發(fā)射熒光。(4)氣體生成反應(yīng)鑒別法：1)大多數(shù)的胺（銨）類(lèi)藥物、酰脲類(lèi)藥物以及某些酰胺類(lèi)藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后，加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣； 2)化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體； 3)含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣；含醋酸酯和乙酰胺類(lèi)藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可

21、產(chǎn)生乙酸乙酯的香味。（二） 光譜鑒別法1、UV法 標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照法； 規(guī)定吸收波長(zhǎng)法； 規(guī)定吸收波長(zhǎng)和相應(yīng)的吸收度法； 規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)法； 規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收度比值法。2、IR法：紅外光譜法是一種專(zhuān)屬性很強(qiáng)、應(yīng)用較廣（固體、液體、氣體樣品）的鑒別方法。標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法：中國(guó)藥典和BP 對(duì)照品法：USP 專(zhuān)屬性很強(qiáng)，新藥的鑒別。（三） 色譜法利用不同物質(zhì)在不同色譜條件下，產(chǎn)生各自的特征色譜行為（Rf值或保留時(shí)間）進(jìn)行鑒別試驗(yàn)。常用的方法有：1、TLC:Rf值（標(biāo)準(zhǔn)品與供試品）一致。在實(shí)際工作中，一般采用對(duì)照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）比較法，要求供試品斑點(diǎn)的Rf值應(yīng)與對(duì)照品斑點(diǎn)一致。2、HPLC：峰值tR一

22、致（標(biāo)準(zhǔn)品與供試品）一般規(guī)定按供試品含量測(cè)定項(xiàng)下的高效液相色譜條件進(jìn)行試驗(yàn)。要求供試品和對(duì)照品色譜峰的保留時(shí)間應(yīng)一致。含量測(cè)定方法為內(nèi)標(biāo)法時(shí)，可要求供試品溶液和對(duì)照品溶液色譜圖中藥物峰保留時(shí)間與內(nèi)標(biāo)物峰的保留時(shí)間比值應(yīng)相同。3、GC法：同上4、(PC)紙色譜法：分離效能低，分析時(shí)間長(zhǎng)，以被TLC或其他色譜法所取代（正相分配色譜法）。（四） 生物學(xué)法利用微生物或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物進(jìn)行鑒別的方法（五） 藥物鑒別方法新動(dòng)向1，儀器方法大大增加，尤其是紅外光譜和高效液相色譜。2，制劑廣泛采用紅外法鑒別。3，鑒別條目簡(jiǎn)練，選擇專(zhuān)屬的方法進(jìn)行鑒別，平均每個(gè)品種收載2條左右。四、鑒別試驗(yàn)條件鑒別試驗(yàn)是以所采用的化學(xué)反

23、應(yīng)或物理特性產(chǎn)生的明顯的易于覺(jué)察的特征變化為依據(jù)。在規(guī)定的條件下完成。否則鑒別試驗(yàn)的結(jié)果是不可信的。影響鑒別反應(yīng)的因素主要有：被測(cè)物濃度，試劑的用量、溶液的溫度、pH、反應(yīng)時(shí)間和共存的干擾物質(zhì)等。（一）溶液的濃度。主要指被鑒別藥物的濃度，及所用試劑的濃度。由于鑒別試驗(yàn)多采用觀測(cè)沉淀、顏色或各種光學(xué)參數(shù)（、A、等）的變化，來(lái)判定結(jié)果，而藥物和有關(guān)試劑的濃度會(huì)直接影響上述的各種變化，必須嚴(yán)格規(guī)定溶液的濃度。觀察沉淀,顏色或光學(xué)參數(shù)(入max,入min,A,E1%1cm)變化,判定結(jié)果。藥物的濃度或試劑的濃度影響上述的條件變化。（二）溶液的溫度:每升高10,反應(yīng)速度升高24倍。（三）溶液的酸堿度許多

24、鑒別反應(yīng)都需要在一定酸堿度的條件下才能進(jìn)行。溶液酸堿度的作用，在于能使各反應(yīng)物有足夠的濃度處于反應(yīng)活化狀態(tài)，使反應(yīng)生成物處于穩(wěn)定和易于觀測(cè)的狀態(tài)。H+ ,OH- 條件,使反應(yīng)處于穩(wěn)定的狀態(tài)。（四）干擾成分的存在。在鑒別試驗(yàn)中，如藥物結(jié)構(gòu)中的其它部分或藥物制劑中的其它組分也可參加鑒別反應(yīng)，產(chǎn)生干擾，應(yīng)選擇專(zhuān)屬性更高的鑒別反應(yīng)將其消除或?qū)⑵浞蛛x, 消除干擾成分的存在。（五）試驗(yàn)時(shí)間有機(jī)化合物的化學(xué)反應(yīng)和無(wú)機(jī)化合物不同，一般反應(yīng)速度較慢，達(dá)到預(yù)期試驗(yàn)結(jié)果需要較長(zhǎng)的時(shí)間。這是因?yàn)橛袡C(jī)化合物是以共價(jià)鍵相結(jié)合，化學(xué)反應(yīng)能否進(jìn)行，依賴(lài)于共價(jià)鍵的斷裂和新價(jià)鍵形成的難易，這些價(jià)鍵的更替需要一定的反應(yīng)時(shí)間和條件。

25、同時(shí)在化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中，有時(shí)存在著許多中間階段，甚至需加入催化劑才能啟動(dòng)反應(yīng)。因此，使鑒別反應(yīng)完成，需要一定時(shí)間。有機(jī)化合物:反應(yīng)速度慢,加入催化劑。無(wú)機(jī)化合物:反應(yīng)速度快。五、鑒別試驗(yàn)的靈敏度（一）反應(yīng)靈敏度和空白試驗(yàn)在一定條件下能在盡可能稀的溶液中觀測(cè)出盡可能少量的供試品.反應(yīng)對(duì)這一要求所能滿足的程度稱(chēng)為反應(yīng)的靈敏度(sensitivity)。以兩個(gè)相互有關(guān)的量來(lái)表示: 最低檢出量，最低檢出濃度。最低檢出量(minimum detectalbe quantity，又稱(chēng)檢出限量)(以m表示)單位通常用g表示。1g=10-6g最低檢出量愈小，反應(yīng)愈靈敏。但最低檢出量不能充分表示反應(yīng)的靈敏度，因?yàn)?/p>

26、沒(méi)有說(shuō)明溶液的濃度。最低檢出濃度(minimum detectable concentration，又稱(chēng)界限濃度)應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定條件下，能夠觀測(cè)出供試品的最低濃度，常以1G(1V)來(lái)表示。G和 V表示含有1g重某供試品的溶液的克(ml)數(shù)。最低檢出量和最低檢出濃度之間的關(guān)系用下式表示 ，表示所取供試液的最小體積(ml) G單位g/g。在選用靈敏度很高的反應(yīng)時(shí)，必須采用高純度的試劑和非常潔凈的器皿，才能保證鑒別試驗(yàn)的結(jié)果可靠性。為了消除試劑和器皿可能帶來(lái)的影響，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)（blank test）以供對(duì)照。空白試驗(yàn)：在與供試品鑒別試驗(yàn)完全相同的條件下，除不加供試品外，其它試劑均同樣加入而進(jìn)行試驗(yàn)。反應(yīng)的靈敏度與分析方法、觀察方式、反應(yīng)條件、人的觀察能力等因素有關(guān)。（二）提高靈敏度的方法在實(shí)際工作中，常采用下列措施提高反應(yīng)的靈敏度1、加入與水互不相溶的有機(jī)溶劑.濃集有色生成物，使有機(jī)溶劑中顏色變深，易于觀測(cè)。2、改進(jìn)觀測(cè)方法例如，將目視觀測(cè)溶液的顏色，改為