1、2020/7/28,1,實(shí)驗(yàn)六,臨床生化檢驗(yàn)試劑盒性能評價試驗(yàn)線性范圍試驗(yàn),2020/7/28,2,臨床生化試劑盒性能指標(biāo)主要有,1.線性范圍 這一點(diǎn)在試劑盒評價中很重要,是指試劑盒按說明書使用可準(zhǔn)確測量的范圍。試劑盒測定線性范圍是衡量其質(zhì)量的重要指標(biāo),也是保證正確使用和鑒定試劑盒關(guān)鍵指標(biāo)之一。,2020/7/28,3,臨床生化試劑盒性能指標(biāo)主要有,2.酶促反應(yīng)時間曲線或化學(xué)反應(yīng)速度時間曲線觀察. 以吸光度為縱坐標(biāo)，反應(yīng)時間為橫坐標(biāo)作圖，觀察動態(tài)期（包栝延遲期，線性期，混和期）和平衡期出現(xiàn)，持續(xù)和終止的時間，分析有關(guān)性能指標(biāo)。,2020/7/28,4,臨床生化試劑盒性能指標(biāo)主要有,3.穩(wěn)定性

2、是指試劑盒在規(guī)定條件下儲存仍保持其性能指標(biāo)的期限 包栝原包裝和工作液在指定條件下穩(wěn) 定性,2020/7/28,5,線性范圍實(shí)驗(yàn),目的與要求 掌握檢測臨床生化檢驗(yàn)商品試劑盒測定線性范圍的原理和方法,計量反應(yīng)曲線的繪制,統(tǒng)計方法和性能評價;熟悉線性范圍變窄的原因;了解影響線性的因素.,2020/7/28,6,原理,使用不同濃度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,用GOD-POD法試劑測定各自的吸光度,以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),以其對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),在方格紙上作圖.即可繪制出一條直線,即劑量反應(yīng)曲線(dose-response curve).,2020/7/28,7,試劑,25mmol/L葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液 其他試劑同GO

3、D-POD法試劑,試劑配制:用蒸餾水將試劑2進(jìn)行10倍稀釋,然后等量與試劑1混合成酶,2020/7/28,8,操作步驟,按表操作.為提高計量反應(yīng)曲線制作的可靠性,可將表中葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液和蒸餾水同時擴(kuò)大10倍,制備1,2,3,4各濃度管,然后分別取20ul,各加GOD-POD試劑3ml測定.,2020/7/28,9,血糖與GOD-POD試劑劑量反應(yīng)曲線的制作,2020/7/28,10,結(jié)果計算,1.測定結(jié)果 5個不同濃度的標(biāo)本,(應(yīng)每管平行做3管取平均值) 2.線性評價統(tǒng)計 采用回歸分析,求出此直線的截距a和斜b,建立直線回歸方程y=a+bx;并作相關(guān)分析,求出相關(guān)系數(shù)(r).,2020/7/28

4、,11,注意事項(xiàng),1.葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的加量必須十分準(zhǔn)確,應(yīng)用計量性能準(zhǔn)確度很高的微量進(jìn)樣器加樣. 2.本方法線性可達(dá)22.24mm/L,(指生化分析儀)造成線性變窄的原因試劑配料中組分投料不足;試劑配制后組分穩(wěn)定性差;因運(yùn)輸或儲存不當(dāng)?shù)葘?dǎo)致試劑組分的含量發(fā)生變化. 3.酶法測定時,有時當(dāng)酶量相對不足時,用標(biāo)準(zhǔn)液所作的線性范圍可以達(dá)到指定的高值,但在測定同樣高值樣本時,結(jié)果卻明顯偏低,這往往 是樣本中介質(zhì)效應(yīng)引起的，值得注意.,2020/7/28,12,線形回歸計算法,1.按下【MODE】【2】.進(jìn)入回歸分析狀態(tài),顯示“LR”,同樣數(shù)據(jù)前要先按【INV】【AC】,以清除可能存儲的其他數(shù)據(jù),輸入X值后既按【X.Y】鍵，輸入Y值后既按【DATA】鍵.若已知變量X的一個觀察 值，求估計值Y時，可直接輸入X值，隨后按【Y】即可求得；若已知Y值求估計值X，則輸入Y值后按【INV】【X】即可求得X值,2020/7/28,13, 操作進(jìn)入LR狀態(tài)，清除內(nèi)存【MODE】【2】 【INV】【AC】 輸入原始