1、新版藥典微生物學(xué)檢查方法增修定內(nèi)容,2010年版中國(guó)藥典分為三部出版,生物制品 化學(xué)藥 中藥,各部?jī)?nèi)容主要包括凡例、標(biāo)準(zhǔn)正文和附錄三部分，其中附錄由制劑通則、通用檢測(cè)方法、指導(dǎo)原則及索引等內(nèi)容構(gòu)成。 藥典二部收載化學(xué)藥品、抗生素、生化藥品、放射性藥品以及藥用輔料等。 藥典三部收載生物制品。,本版藥典具有以下幾個(gè)特點(diǎn),一是新增與淘汰并舉，收載品種有較大幅度的增加； 二是藥品檢測(cè)項(xiàng)目和檢測(cè)方法增加，標(biāo)準(zhǔn)提高； 三是中藥標(biāo)準(zhǔn)有突破和創(chuàng)新； 四是新版藥典在凡例、品種的標(biāo)準(zhǔn)要求、附錄的制劑通則等方面均有較大的變化和進(jìn)步； 五是力求覆蓋國(guó)家基本藥物目錄品種和社會(huì)醫(yī)療保險(xiǎn)報(bào)銷藥品目錄品種。,2010年版藥典

2、微生物學(xué)檢查方法增修定內(nèi)容,一、修改內(nèi)容,培養(yǎng)條件 細(xì)菌及控制菌培養(yǎng)溫度3537修改為3035；,二、增修訂內(nèi)容,(一)結(jié)果報(bào)告 特殊品種可以最小包裝單位報(bào)告 特殊品種包括 1.藥典規(guī)定微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減 2.一些貴重藥品也應(yīng)考慮檢驗(yàn)量,（二）檢驗(yàn)量增修訂內(nèi)容,1.中藥膜劑檢驗(yàn)量50 cm2 修改為100cm2 。 2.沙門菌檢驗(yàn)量修改為檢驗(yàn)量為20 g或20ml并注明（其中10 g用于陽(yáng)性對(duì)照）。,（三）供試液的制備增修訂內(nèi)容,1.供試品檢查時(shí)使用表面活性劑應(yīng)證明其對(duì)微生物生長(zhǎng)和存活無(wú)影響修改為無(wú)毒性。 2.供試液的制備若需加溫時(shí)，可采用其他經(jīng)驗(yàn)證的方法，但應(yīng)均勻加熱，且溫度不應(yīng)超

3、過(guò)45。,3.新增貼劑供試液制備 經(jīng)驗(yàn)證方法制備成供試液在無(wú)菌環(huán)境進(jìn)行。 避免粘貼面粘合在一起。 置于含有表面活性劑（如聚山梨酯80或卵磷脂）的稀釋劑中，制成供試液。 充分振搖。 也可采用以其他適宜的方法制備成供試液。,（四）具抑菌活性的供試品增修訂內(nèi)容,刪除應(yīng)消除供試液的抑菌活性修改為當(dāng)供試品具有抑菌活性時(shí)，應(yīng)盡量選擇操作簡(jiǎn)便、快速的方法，應(yīng)避免損傷供試品中污染的微生物。在供試品溶液性狀允許的情況下，應(yīng)盡量選用薄膜過(guò)濾法。,細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)增修訂內(nèi)容,新增 計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查 菌種 大腸埃希菌（Escherichia coli）CMCC（B） 44102 金黃色葡萄球菌（Staph

4、ylococcus aureus）CMCC（B） 26 003 枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）CMCC（B） 63 501 白色念珠菌（Candida albicans）CMCC（F） 98 001 黑曲霉（Aspergillus niger）CMCC（F） 98 003, 增加了菌懸液的制備及保存條件 菌懸液制備后在室溫下放置應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用，若保存在28可以在24小時(shí)內(nèi)使用。黑曲霉孢子懸液可保存在 28，在驗(yàn)證過(guò)的貯存期內(nèi)使用，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，按規(guī)定條件培養(yǎng)計(jì)數(shù)，同時(shí)用相應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述試驗(yàn)。 增加了對(duì)照培養(yǎng),（五）供試品檢查

5、增修訂內(nèi)容,1.平皿法 刪去采用平皿法進(jìn)行菌數(shù)測(cè)定時(shí)，連續(xù)23個(gè)稀釋級(jí)的供試液。修改為按計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證試驗(yàn)確認(rèn)的程序 進(jìn)行供試液制備。,2.培養(yǎng)時(shí)間修改內(nèi)容 除另有規(guī)定外，細(xì)菌培養(yǎng)48小時(shí)改為3天，霉菌、酵母菌培養(yǎng)72小時(shí)改為 5天，必要時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至7天進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)并報(bào)告。,3.菌數(shù)報(bào)告規(guī)則增修訂內(nèi)容,(1).若同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落平均數(shù)不小于15，則兩個(gè)平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。 (2).細(xì)菌、酵母菌和霉菌平均菌落數(shù)在30300 、30100之間的稀釋級(jí)修改為選取菌落數(shù)小于300cfu和100cfu的稀釋級(jí)作為菌數(shù)報(bào)告的依據(jù)。,4.薄膜過(guò)濾法增修訂內(nèi)容,(1).新增內(nèi)容

6、采用其它直徑的濾膜，沖洗量應(yīng)相應(yīng)的進(jìn)行調(diào)整（如使用膜直徑增大沖洗液量也應(yīng)相應(yīng)增加，可保證沖洗液覆蓋整個(gè)濾膜）。 (2). 刪去每片濾膜的總過(guò)濾量不宜過(guò)大，修改為總沖洗量不得超過(guò)1000ml。,5.控制菌檢查法增修訂內(nèi)容,(1).疑似致病菌的確證,微生物控制菌檢查中沒(méi)有規(guī)定進(jìn)一步確證疑似致病菌的方法。選擇已被認(rèn)可的菌種鑒定方法。如伯杰氏細(xì)菌鑒定手。 (2).控制菌檢查方法驗(yàn)證刪去陰性菌對(duì)照組。 (3).大腸菌群檢查用膽鹽乳糖培養(yǎng)基 改為乳糖膽鹽。 (4).改梭菌檢查用庖肉培養(yǎng)基為梭菌增 菌培養(yǎng)基。 (5).改梭菌培養(yǎng)時(shí)間7296小時(shí)為48小時(shí)。 (6).增加了白色念珠菌檢驗(yàn)方法增菌培養(yǎng) 沙氏葡萄

7、糖肉湯培養(yǎng)基。,典型菌落,沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 菌落呈乳白色偶見(jiàn)淡黃色，表面光滑有濃酵母氣味，時(shí)間稍久則菌落增大，顏色變深、質(zhì)地變硬或有皺摺。 念珠菌顯色培養(yǎng)基 菌落呈綠色或翠綠色菌落生長(zhǎng)。,三、新增微生物限度檢查法指導(dǎo)原則,（一）抑菌劑效力檢查法指導(dǎo)原則,目的 一是為測(cè)定滅菌、非滅菌制劑中抑菌劑的活性，以評(píng)價(jià)最終產(chǎn)品的抑菌效力及生產(chǎn)企業(yè)在制劑研發(fā)階段抑菌劑的確定提供指導(dǎo)。 二是為防止藥品由于微生物污染而引起變質(zhì)，對(duì)服用者造成不良反應(yīng)，在藥品生產(chǎn)過(guò)程中加入一定劑量的抑菌劑。 三是抑菌劑不能用于替代藥品生產(chǎn)的GMP管理，不能作為非滅菌制劑降低微生物污染的唯一途徑，也不能作為控制多劑量包裝制劑滅菌

8、前的生物負(fù)載的手段。,使用范圍及原則,使用范圍 如果藥物本身不具有充分的抗菌活性，應(yīng)根據(jù)制劑特性添加適宜的抑菌劑，以防止制劑在正常貯藏和使用過(guò)程中可能發(fā)生的微生物污染和繁殖，對(duì)患者造成傷害。,使用原則,所有抑菌劑都具有一定的毒性，添加抑菌劑時(shí)應(yīng)注意以下原則: 抑菌劑的用量應(yīng)為最低有效量。 具有抗菌活性的制劑應(yīng)確認(rèn)其抗菌效力。 應(yīng)驗(yàn)證最終容器中的抑菌劑效力在效期內(nèi)不因貯藏條件而降低。 本試驗(yàn)方法和抑菌劑抑菌效力判斷標(biāo)準(zhǔn)用于包裝未啟開(kāi)的成品制劑。,抑菌劑抑菌效力的測(cè)定,供試品的分類 分為四類，但對(duì)于一些抗酸性制劑和含活生物制劑應(yīng)考慮會(huì)降低有益菌的生物活性。,產(chǎn)品分類 藥品 1 類 注射劑、 其他非

9、腸道制劑， 包 括乳劑、耳用制劑、無(wú)菌鼻用制劑及眼用制劑。 2 類 局部給藥制劑、非滅菌鼻用制劑及用于黏膜的乳劑。 3 類 口服非固體制劑（非抗酸制劑）。 4 類 非固體抗酸制劑。,（二）藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則,目的 是為所采用的試驗(yàn)方法能否替代藥典規(guī)定的方法用于藥品微生物的檢驗(yàn)提供指導(dǎo)。 在控制藥品微生物質(zhì)量中，需要采用替代方法 時(shí)，應(yīng)進(jìn)行方法的驗(yàn)證，確認(rèn)其應(yīng)用效果優(yōu)于或等同于藥典的方法。,微生物檢驗(yàn)的類型及驗(yàn)證參數(shù),藥品微生物檢驗(yàn)方法主要分兩種類型 定性試驗(yàn) 定量試驗(yàn) 生物試驗(yàn)的特殊性 抽樣誤差 操作誤差 稀釋誤差 培養(yǎng)誤差 計(jì)量誤差 計(jì)數(shù)誤差,（三）藥品微生物限度檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則,目的 為更好的應(yīng)用微生物限度檢查法及限度標(biāo)準(zhǔn)的合理執(zhí)行提供指導(dǎo)。,用途 用于判斷非規(guī)定滅菌制劑及原料、輔料是否符合藥典的規(guī)定，也可用于指導(dǎo)制劑、原料、輔料的微生物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定，及指導(dǎo)生產(chǎn)過(guò)程中間產(chǎn)品微生物質(zhì)量的監(jiān)控。,（四）藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則,目的 該指導(dǎo)原則用于指