1、中職學(xué)校畜牧獸醫(yī)專業(yè)骨干教師國家級培訓(xùn) 電子教案,動物微生物學(xué) 第八章巴氏桿菌科及相關(guān)屬 授課教師 周江山 2007年12月23日,第一節(jié) 巴氏桿菌屬 第二節(jié) 嗜血桿菌屬 第三節(jié) 放線桿菌屬,第八章巴氏桿菌科及相關(guān)屬,第一節(jié) 巴氏桿菌屬,一屬微小、粗短、卵圓形的G桿菌。 為法國微生物學(xué)家、化學(xué)家巴斯德最早發(fā)現(xiàn)，故名。,本屬細(xì)菌的共同特性：,1、 G、細(xì)小短桿菌；兩極染色；無鞭毛；無芽胞； 2、需氧或兼性厭氧； 3、普通培養(yǎng)基多生長不良，血或血清可促進(jìn)生長； 4、分解糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不液化明膠； 5、 氧化酶陽性。,本屬細(xì)菌主要的菌種,多殺性巴氏桿菌（P. multocida） 溶血性巴氏桿菌（

2、P. haemolytica） 脲巴氏桿菌（P. ureae） 嗜肺巴氏桿菌（P. pneumotropica）,其中多殺巴氏桿菌和溶血巴氏桿菌是引起畜禽巴氏桿菌病的主要病原體。,一、多殺性巴氏桿菌,形態(tài)特性 培養(yǎng)特性 生化特性 抵 抗 力 抗原結(jié)構(gòu) 致 病 性 微生物學(xué)診斷,1、多殺巴氏桿菌的形態(tài)特性,G，細(xì)小短桿菌兩端鈍圓，中央凸起，近似橢圓形。 無芽胞，無鞭毛，有莢膜。 兩極染色（美蘭染色）。,多殺性巴氏桿菌模式圖,2、多殺性巴氏桿菌的培養(yǎng)特性,需氧或兼性厭氧；最適溫度37，pH7.27.4。 普通培養(yǎng)基中加蛋白胨、酪蛋白水解物、血液、血清或微量血紅蛋白時可促進(jìn)生長。 菌落形態(tài)： 血清瓊

3、脂：淡灰白、露珠樣小菌落，邊緣整齊、表面光滑。 血液瓊脂：濕潤、水滴樣小菌落，不溶血。 血清肉湯或1%胰蛋白胨肉湯：均勻混濁，軸性沉淀，形成菌環(huán)。,本菌在瓊脂上的菌落分為3種類型： 粘液型(M型)：菌落大,有粘稠性，對小鼠中等毒力 平滑型( 熒光)：菌落中等大小,對小鼠毒力很強(qiáng) 粗糙型( 藍(lán)色)：菌落小, 能自家凝集，對小鼠毒力弱 粗糙型無莢膜，而粘液型和平滑型均有莢膜,糖類利用情況： 分解葡、蔗、果、甘露和半乳，產(chǎn)酸，不產(chǎn)氣。 大多數(shù)發(fā)酵甘露醇。 一般對乳糖、鼠李糖、楊苷、肌醇、菊糖和側(cè)金盞花醇不發(fā)酵。 H2S、NH3、IMViC、還原硝酸鹽、還原美藍(lán)、接觸酶 氧化酶、明膠液化、石蕊牛乳、尿

4、素酶、賴氨酸脫羧酶等 ,3、多殺性巴氏桿菌的生化特性,4、多殺性巴氏桿菌的抵抗力,本菌抵抗力不強(qiáng) 易被普通的消毒藥、陽光或熱殺死。如： 3%石炭酸、3%福爾馬林、10%石灰乳、0.5l%氫氧化鈉、0.1%升汞及2%來蘇兒經(jīng)12min可被殺死。 水浴5615min、6010min內(nèi)被殺死。 陽光曝曬10min可失活。,5、多殺性巴氏桿菌的抗原結(jié)構(gòu),抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜，主要有莢膜抗原和菌體抗原。,莢膜抗原分成A、B、C、D四個血清群。后來C型被取消。1987年Rimler和Rhoade從火雞中又分離出E型。 菌體抗原（O抗原）共有16個型。 我國禽巴氏菌以5:A最多,其次是8:A； 豬以5 : A、6

5、:B為主，其次是8:A和2:D； 牛、羊以6:B最多； 家兔以7:A為主，其次是5:A。,6、多殺性巴氏桿菌的致病性,可引起多種畜禽巴氏桿菌病(亦稱出血性敗血癥) 。 不同動物的巴氏桿菌，常對該種動物呈現(xiàn)較強(qiáng)致病力,對其他動物較少引起交叉感染。 豬巴氏桿菌?。贺i肺疫 馬巴氏桿菌病 牛巴氏桿菌?。号３鲅詳⊙Y 羊巴氏桿菌病 家兔巴氏桿菌病 禽巴氏桿菌?。呵莼魜y 鹿巴氏桿菌病 貂巴氏桿菌病：貂出血性敗血癥 駱駝巴氏桿菌病,分離培養(yǎng)：新鮮病料接種于鮮血瓊脂和麥康凱瓊脂。 菌落觀察：麥康凱上不生長，鮮血瓊脂平板上生長，24h后，可形成淡灰色、圓形、濕潤、露珠樣小菌落，不溶血。 革蘭氏染色為陰性的短小

6、桿菌 美蘭染色兩極濃染。 生化試驗：見前述,7、多殺性巴氏桿菌的微生物學(xué)診斷,動物感染試驗,血瓊脂培養(yǎng)物,懸浮于2ml生理鹽水中,動物死后剖檢，觀察病變,注射小白鼠、家兔,血液、肝、脾組織,美藍(lán)染色和革蘭氏染色,心血、肝、脾等組織,血瓊脂平板，觀察菌落,二、溶血性巴氏桿菌,形態(tài)和多殺巴氏桿菌相似，呈球狀或桿狀，但較大， 0.5um 2.5um，。 G 、無芽胞、無鞭毛、有莢膜，兩極著色。 營養(yǎng)要求不嚴(yán)格， 普通瓊脂生長良好，24h后，菌落呈圓形、光滑、濕潤，半透明 血瓊脂上，新分離菌微弱的溶血。連續(xù)傳代培養(yǎng)，溶血性便減弱或消失。 麥康凱上緩慢生長。,發(fā)酵某些糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(如葡、麥、蔗、半乳、

7、果、甘露醇等), 與多殺巴氏桿菌相比不產(chǎn)生靛基質(zhì)、紫乳變酸且凝固，有些菌株產(chǎn)生硫化氫。 抵抗力與多殺巴氏桿菌相似。 按生化特性和致病力可分為兩個生物型： A生物型包括1、2、5、6、7、8、9和11、12、13、14血清型； B生物型分為3、4、10、15血清型。 引起牛和綿羊的肺炎、新生羔羊敗血癥。,鴨疫里默氏桿菌（Riemerella anatipestifer）,感染是家鴨、火雞和多種鳥類，為接觸性傳染病。 主要發(fā)生于710周齡鴨，死亡率10%，也稱為傳染性漿膜炎、新鴨病。 鵝也可發(fā)生，稱為鵝滲出性敗血癥。 呈急性或慢性敗血癥，特征病變：纖維素性心包炎、肝周炎、氣囊炎、干酪性輸卵管炎和腦

8、膜炎； 也可能發(fā)生無任何癥狀的呼吸道感染。,補(bǔ)充：,該菌曾稱為“鴨疫巴氏桿菌”為什么？,形態(tài)與巴氏桿菌相似，為G,有莢膜,無芽胞,不運(yùn)動,兩極著色 菌落形態(tài)也與巴氏桿菌相同 培養(yǎng)特性：在巧克力瓊脂、血瓊脂、姨酶大豆瓊脂生長良好 （但該菌培養(yǎng)時需要5%的CO2） 生化特性：與敗血性巴氏桿菌基本相同。 由于以上等因素，把鴨疫里默氏桿菌稱為“鴨疫巴氏桿菌”,現(xiàn)在為什么稱為 “鴨疫里默氏桿菌”,我們必須了解該菌的歷史。 Hendrickson和Hilbert對該菌進(jìn)行了分離鑒定，稱為“鴨疫斐佛氏菌” Bruner和Fabricant認(rèn)為該菌與莫拉氏菌有較多的共同點(diǎn)，建議命名為“鴨疫莫拉氏菌”。 第7版

9、伯杰氏細(xì)菌學(xué)鑒定手冊列為鴨疫巴氏桿菌。 第8版、第9版伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊列為分類地位未定種。但將該菌從莫拉氏菌、巴氏桿菌中劃分出來。 Segers等，據(jù)DNA-rRNA雜交分析、蛋白質(zhì)、脂肪酸組成和表型特征（如不產(chǎn)生色素、產(chǎn)生呼吸醌“7-甲基萘醌”）等，建議將該菌單獨(dú)列為“里默氏桿菌屬”，將該菌命名為“鴨疫里默氏桿菌”,第二節(jié) 嗜血桿菌屬,某蛋雞場，產(chǎn)蛋率由90%降至65%，無死亡。病初表現(xiàn)發(fā)熱、精神不振，食欲減退，有時下痢。眼瞼和面部腫脹，流淚。從鼻道和竇腔內(nèi)流出漿液性分泌物，并有難聞氣味。嚴(yán)重者整個頭部水腫，眼垢粘著眼瞼，造成暫時性失明。病雞呼吸困難，氣管羅音，張口伸頸，不斷搖頭甩出泡沫

10、狀粘液。 剖檢變化：鼻腔和竇腔炎癥，粘膜充血水腫，表面有大量粘液和炎性滲出物的凝塊結(jié)痂，嚴(yán)重者氣管粘膜也有類似的炎癥。眼結(jié)膜充血、腫脹，眼部皮下水腫。病程較長者鼻腔、眶下竇和眼結(jié)膜內(nèi)有干酪樣物。,1、嗜血桿菌的染色與形態(tài)特性,染色： G 。 大?。盒〉街械却笮?，0.4-0.81.0-3.0m 。 形態(tài)：單個、成對分布，兩極著色重 ，菌體形態(tài)似“啞鈴” 。有時形成絲狀，表現(xiàn)為多形性。 新分離菌株有時能見到莢膜；無芽胞；無鞭毛。,流感嗜血桿菌,酶系統(tǒng)不完善，培養(yǎng)時需加入X和V兩種生長因子。 血液中有X和V兩種生長因子 X因子是指具有生長促進(jìn)作用的血紅蛋白衍生物 V因子是輔酶I或輔酶II兩種脫氫酶

11、的一種 需氧或兼性厭氧， 雞嗜血桿菌培養(yǎng)時需要5%的CO2環(huán)境。,2、嗜血桿菌的培養(yǎng)特性,常用巧克力培養(yǎng)基。 普通瓊脂和鮮血瓊脂生長不良。 衛(wèi)星現(xiàn)象：在血瓊脂上培養(yǎng)時，如同時有葡萄球菌生長,由于葡萄球菌可合成較多的V因子，因此可出現(xiàn)葡萄球菌周圍的嗜血桿菌菌落較大，離葡萄球菌或遠(yuǎn)則越小。 菌落特點(diǎn)：呈針尖大小的露滴狀菌落 菌落光滑、透明、不溶血，邊緣整齊。,糖發(fā)酵試驗： 能發(fā)酵：葡、麥、甘、蔗； 不發(fā)酵：乳、伯膠糖等。 硝酸鹽還原、H2S、明 膠 液 化、靛基質(zhì) 氧化酶和接觸酶：因不同菌株而有差異。,3、嗜血桿菌的生化特性,嗜血桿菌的抵抗力不強(qiáng)： （1）常用消毒劑可殺滅； （2）一般在60條件下

12、1020分鐘即可殺滅； （3）室溫下只能生存24天。,4、嗜血桿菌的抵抗力,制定合適的防疫程序，加強(qiáng)預(yù)防力度，可減少傳染病的發(fā)生。（以傳染性鼻炎為例） 接種傳染性鼻炎菌苗能有效地預(yù)防本病的發(fā)生，現(xiàn)國內(nèi)外都有這類商品性滅活菌苗供應(yīng)。 在雞傳染性鼻炎的防制上，一般是在68周齡時進(jìn)行第一次菌苗接種，34周以后或產(chǎn)蛋前再加強(qiáng)免疫接種一次，可獲良好的免疫保護(hù)效果。,5、嗜血桿菌的免疫,嗜血桿菌屬共有19個種 對人有致病性的有9種； 對動物有致病性的有以下幾種： 副雞嗜血桿菌雞傳染性鼻炎 雞 嗜 血 桿 菌雞鼻腔卡他性炎癥 豬 嗜 血 桿 菌流感病豬并發(fā)感染或漿膜腔、腦膜、 關(guān)節(jié)的纖維素性炎癥 副豬嗜血桿

13、菌分離自豬體 綿羊嗜血桿菌綿羊肺炎或支氣管肺炎 昏睡嗜血桿菌牛腦炎、牛流產(chǎn)、敗血癥、關(guān)節(jié)炎、 喉炎 等等，在此不做祥述，其它參見教科書。,6、嗜血桿菌屬的致病力,以傳染性鼻炎為例 病原分離鑒定： 取病禽眶下竇中粘液或漿液，在鮮血瓊脂上劃線，并取保姆菌交叉劃線，于蠟燭瓶或CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1824小時，若分離菌在血瓊脂平板上生長呈現(xiàn)“衛(wèi)星現(xiàn)象”，呈露滴狀、針尖大小的菌落，且過氧化物酶試驗呈現(xiàn)陰性，則可作出診斷。 由于嗜血桿菌在體外存活時間很短，對該菌的分離必須及時。 除了傳統(tǒng)的分離鑒定及常規(guī)的血清學(xué)方法外，還建立了更加特異敏感的ELISA方法、DNA探針及PCR診斷技術(shù),7、嗜血桿菌的微生物學(xué)檢查,第三節(jié) 放線桿菌屬Actinobacillus,本屬細(xì)菌為G桿菌，兩極染色，兼性厭氧 對家畜有致病性的主要有3種：,豬胸膜肺炎放線桿菌 林氏放線桿菌 駒放線桿菌,1、形態(tài)、染