1、酶聯(lián)免疫測定常用儀器設備的使用和維護，衛(wèi)生部臨床檢測中心王露楠，主要儀器設備，取樣器加系統(tǒng)洗衣機酶標全自動檢測系統(tǒng)，酶標酶標的發(fā)展，功能的擴大測定更廣的吸光度范圍。 從可見光擴展到紫外檢測。 追加溫度調節(jié)功能。 追加了酶動力學和凝聚等測定功能。 追加濾波器自動識別功能與顏色測量前的振動板功能相比，追加了2波長或多波長測量功能。 追加定性定量測量統(tǒng)一分析軟件的功能。 酶標記物酶標記物的發(fā)展、適用性的擴增酶標記物可從常規(guī)的96孔檢測模式擴增到384，1536孔模式，該酶標記物對功量大、檢測項目多的實驗室可加快檢測速度。 酶標由簡單的比色儀器發(fā)展為發(fā)光、熒光、時間分辨率熒光、紫外檢測相結合的多功能檢

2、測儀器。 Wallac ViewLux還具有比色、發(fā)光、熒光、時間分辨率熒光測定功能。 這些多功能免疫測定儀器的出現(xiàn)，使實驗室在進行ELISA測定的同時，可以很容易地展開使用發(fā)光、熒光、時間分辨率熒光法的檢查項目，不需要追加購買儀器設備，可以大幅節(jié)省實驗室的空間。 酶標記物-酶標記物的使用，1 .測定波長范圍： 400 nm750或800 nm常用波長： 450 nm和492 nm目前國內常見的ELISA試劑盒中使用的標記酶均為辣根過氧化物酶(HRP )。 基質通常為四甲基聯(lián)苯胺(TMB )和鄰苯二胺(OPD )的2波長比色： 620 nm或630 nm或650 nm和405 nm的波長的濾光

3、片， 酶標記物酶標記物的使用2 .測定的吸光度范圍通常在： 02.5之間可以滿足ELISA的測定放大：3.5以上的要求：不必對酶標記物的吸光度范圍有意地追求大的吸光度范圍，主要需要看一定吸光度范圍內的線性和精度酶標記-酶標記的使用，3 .光學系統(tǒng)：也有酶標記單通道)檢查，一般是硅光管或光纖，除了測定通道以外，一部分酶標記也有參照通道，每次測定都可以自我校正。 性能指標：吸光度范圍、線性、精密度和準確度的多通道：測量的精密度與測量通道之間的均勻性有直接關系。 單通道：可以避免通道差異造成的差異，酶標記酶標記的使用，4 .檢測速度酶標記的檢測速度是完成比色測定所需的時間。 有利于檢測速度快，提高檢

4、測的精密度，即避免由于測定中的測定時間的不同而導致的各細孔間的吸光度的不同。 酶標記物-酶標記物的使用，5 .振動板功能振動板的目的：板孔內顏色均勻6 .溫育功能不再需要外接溫箱。 溫育功能是酶標記的附加功能，是否能夠說明酶標記等級的高低和機器的優(yōu)劣。 是否選擇作為實驗室，可以根據自己實驗室的條件和需要來決定。 酶標記物-酶標記物的使用，7 .軟件功能：指酶標記物具有的ELISA定性和定量測定以及其他測定方式，如酶標記物動力學、紫外和凝聚等統(tǒng)一分析和結果報告的功能。 灰區(qū)：軟件功能是中高級酶標記的非常重要的功能。 如果酶標記具有陽性判定值(CUTOFF )及其測定“灰區(qū)”(即測定吸光度在CUT

5、OFF周圍的一定區(qū)域，該區(qū)域內的結果為“可疑”)的統(tǒng)一校正計算功能，則不僅在實驗室工作人員，在某些特定情況下也具有較高的實用價值。 定量：四殘奧儀方程能較好地反映免疫測定的劑量反應曲線，最適合定量酶聯(lián)免疫測定的曲線擬合。 選擇酶標記的酶標記，(1)工作所需的(2)酶標記的性能：測定波長范圍、濾波器配置、檢測速度、吸光度范圍、線性范圍、分辨率、精度、精度等。(3)實驗室財力(4)售后服務(5)外語水平、酶標記的酶標記的選擇、酶標記的中心標記會自動對酶標記的孔進行中心標記，中心標記是為了消除酶標記的孔底凹凸造成的厚度不均而進行檢查的不正確光源的參照通道參照通道用于校正電壓不穩(wěn)定或燈泡磨損的影響，酶

6、標記酶標記的自測和校正，1 .外觀酶標記需要儀器名稱、型號、編號、廠家、出廠日期和電源電壓。 每個調節(jié)旋鈕、按鈕和開關都必須正常工作，外表面沒有明顯機械損傷的顯示文本必須完整。 2 .酶標記的穩(wěn)定性(漂移)選擇492nm的波長，測定吸光度為0.0A、標稱值為1.0A的光譜中性濾波器(測定操作按照機器的說明進行)，記錄機器的顯示值或平均值，10分鐘后再次記錄機器的顯示值或平均值，前后2次的測定值之差為0.5 酶標記-酶標記的自測和校準，3 .吸光度測定的精度選擇405、492和620 nm的波長，以空氣為參考，分別測定標稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃過濾器，用專用的測試板代替酶標記，設備說

7、明通4 .吸光度測定的再現(xiàn)性酶靶的第1列加入空白溶液，第2列加入濃度200g/ml的重鉻酸鉀溶液，重復測定5次。 酶標記-酶標記的自測和校準，5 .將酶標記的線性選擇540nm波長、標稱值0.5、1.0a中性濾波器分別放入專用測試板的樣品位置，以空氣為參考，各重復測定3次后， 將以上2片中性過濾器重疊放置在專用測試板的同一孔位置，重復測定3次。線性誤差6 .測定速度的檢定選擇492nm波長，放入96孔酶目標進行測定，用秒表校正測定器打印所有數據的時間。 酶標記物-酶標記物的自測和校準，7 .通道差檢測：取酶標記物的小孔杯(杯底光滑、透明、無損傷、無污染)，以酶標記物架為載體，分別放入3種不同濃

8、度的甲基橙溶液200 ul，8通道的蒸餾水為零的8 .孔隙差的測定：選擇同一制造商、同一批號的酶標板(修訂96孔8根)，分別加入200 ul的甲基橙溶液(吸光度調整為0.065 0.070 A )，放入同一通道，蒸餾水為零，采用雙波長檢查，其酶標記的雙波長問題、雙波長測定：由于標本中干擾成分的存在及孔杯本身的質量等原因，測定結果的假性多增高，酶標記所提供的雙波長測定功能可以消除干擾成分或因素對測定結果的影響。 關于樣品中干擾成分的去除，在選擇參照波長時，必須研究干擾成分的光譜，正確地選擇參照波長，另一方面，為了消除孔杯本身的質量問題等干擾因素，只要選擇遠離測定波長的參照波長即可，在保證測定結果

9、的正確性方面非常重要。旋切機-旋切機的選擇、1 .清洗功能的充分性基本殘奧表：旋切機次數、根數、浸漬時間盡可能：底部清洗、兩點吸液最小殘留量2 .板孔的互換性和擴張性互換性主要是針對國內規(guī)格、尺寸稍有不同的微孔板的兼容性， 機器應該具有微孔板的位置調節(jié)功能，可擴展性主要是為了適應86式微板等新出現(xiàn)的一些應用情況，很多清洗機不能清洗。旋切機-旋切機的選擇，(3)機器本身和清洗效果的可靠性1是機器本身的可靠性，保證機器在使用壽命期內能夠正常顯示、精確運動，這可以通過調查機器制造商的技術和生產實力來論證，二是洗滌效果的可靠性，即用手代替洗滌(4)部件是否充分提供經常使用的易損件，如清洗頭，應該準備8

10、道、12道，定期淘汰，如清洗液瓶、硅膠管等應該能方便購買，清洗機清洗機的選擇，5 .售后服務沖壓機的注意事項為：1.以一定的清洗次數多次清洗有利于獲得良好的效果，一般為6次以下。 2 .每個孔的加液量最好加滿，但不要溢出，一般建議在每個孔300微升3 .清洗前進行位置調節(jié)，吸針進入細孔底部，降低殘留量。 4 .為了獲得高清洗效果，建議采用2點吸液和底部清洗方式。 5 .每天使用后，用雙蒸水清洗管道。 6 .定期維修、檢修設備及配件。采樣器-采樣器的類型、單通道連續(xù)可變式移液管多通道連續(xù)可變式移液管單通道移液管組合使用的移液管、采樣器-采樣器-采樣器的校正、校正環(huán)境和工具的要求：室溫： 2025

11、電子天平：無塵和受振動的影響稱量時，為了確保天平內的濕度(相對濕度60-90% )，在天平內放置裝有10 ml蒸餾水的小燒杯。 燒杯：體積510 ml。 測定液體：溫度2025的脫氣雙蒸水。 選定的校準體積：取樣器校準體積的中間體積最小可調體積(要校準的體積的10%以上)。 對于偽校準體積固定體積取樣器，校準體積只有一個。 取樣器-取樣器的校正、校正步驟：將取樣器調整為校正體積，選擇適當的吸引頭，調節(jié)天平，往復吸引蒸餾水3次，使吸引頭濕潤，用紗布擦拭吸引頭，垂直握住取樣器，將吸引頭浸漬在液面23 mm，緩慢(13秒) 一致吸引蒸餾水的吸引頭離開液面，靠近管壁，除去吸引頭外部的液體，將模板以30

12、角稱量放入燒杯中，慢慢一致，將模板按到第1段，等待13秒后按到第2段， 完全排出吸引頭內的液體，擦拭記錄稱量值的吸收頭外部，按照上述順序稱量10次，用最后的取樣器吸引10次，將10次的測定值的平均值作為蒸餾水重量，用附表所示的蒸餾水z因子修正體積。 根據校正結果調整取樣器。 取樣器的注意事項是，根據必要的取液量選擇相應的移液管和吸液頭吸液時，要慢慢等速吸液，避免液體的回吸。 調整吸取液量的旋鈕時，請注意不要過度用力，計數器上顯示的數值不要超出可調范圍。 連續(xù)調整式移液管在沒有吸頭時不能使用。 吸頭有液體時不能弄平或倒置。 操作時必須慢且穩(wěn)定，吸嘴浸入液體的深度適當，吸液過程必須盡可能保持一定在吸入不同的液體、樣品或試劑前更換吸嘴如果發(fā)現(xiàn)吸嘴內有殘留液，需要更換使用新吸嘴前取樣器的注意事項最好是使用有酸或腐蝕蒸汽的溶液后，取下套筒，用蒸餾