1、家兔腸缺血/再灌注損傷 Ischemia-Reperfusion Injury in Rabbit (I/R),中南大學病理生理學教研室,【定 義】,缺血的組織、器官經(jīng)恢復血液灌注后不 但不能使結構和功能恢復，反而加重其 功能障礙和結構損傷的現(xiàn)象稱為缺血- 再灌注損傷(ischemia-reperfusion Injury，I/R),【區(qū) 別】,缺血-再灌注與缺血-再灌注損傷 缺血損傷與缺血再灌注損傷,【影響缺血再灌注損傷發(fā)生的因素】,缺血時間 缺血程度 組織缺血前的狀態(tài)： 側支循環(huán) 對氧需求 組織缺血前的機能狀態(tài) 再灌注條件： 壓力、溫度、pH值、再灌液成分等,掌握缺血再灌注損傷模型的復制，

2、比較缺血損傷和缺血再灌注損傷的區(qū)別 觀察缺血再灌注損傷的表現(xiàn)，理解缺血再灌注損傷發(fā)生的機制,【目的要求】,【實驗設計原理】,通過腸系膜上動脈結扎，即SMAO(Superior Mesentery Artery Occlusion)來阻斷部分 腸的血液供應一段時間后再恢復血流灌注， 以復制腸缺血/再灌注損傷的動物模型，探 討缺血/再灌注損傷的發(fā)生機制,組：持續(xù)缺血組 結扎腸系膜上動脈 2h 組：缺血-再灌注組 結扎腸系膜 上動脈1h，再恢復血流 1h,【實驗分組】,【實驗動物】 家兔（性別、體重）,【實驗方法與步驟】,1. 稱重 2. 全麻（耳緣靜脈注射烏拉坦4ML/kg） 麻醉效果：角膜反射

3、基本消失，鉗夾家兔 大腿肌肉無反應,3. 仰臥固定（背部交叉）、備皮 頸部正中（甲狀軟骨下緣胸骨上切跡） 腹部正中（劍突下1.5cm起向下5-10cm） 注意：平貼皮膚剪毛，勿拎起皮膚！,4.頸部正中切口進行頸動脈插管 切口范圍：頸部正中，甲狀軟骨下緣胸骨上切跡，長約5-10cm,左側頸總動脈：胸骨舌 骨肌與胸鎖乳突肌之間 深面的頸動脈鞘內，與 氣管平行，顏色鮮紅、 觸之有搏動感，長約2- 3cm,注意：（1）鈍性分離 （2）辨清頸A鞘內的血管神經(jīng),先結扎遠心端，后夾閉近心端，剪口部位盡量靠近遠心端，成45度角朝向近心端剪一小口，約為管徑的1/3-1/2，插管方向朝向近心端，插入1-1.5cm

4、,【插管的注意事項】,插管內事先應加入肝素以防凝血；排凈氣泡，記錄前應關閉三通管 插管易滑脫，應雙線固定，結扎牢靠 勿使插管尖端與血管壁形成角度，避免刺破血管，或者管子被血管壁堵住測不出數(shù)據(jù),5.腹部正中切口： 腹正中線自劍突下1.5-2cm起向下做8-10cm切口 6.尋找腸系膜上動脈： 將家兔腹腔內臟向左上方推，找到齊右腎門對側垂直向腹主動脈分出的腸系膜上動脈，穿雙線，待血壓穩(wěn)定后結扎（缺血再灌組結扎時注意墊橡皮管）,腸系膜上A示意圖：,1. 移動內臟時，動作要輕柔 2. 分離腸系膜上A時需小心細致，不要使用銳利器械，以免損傷血管造成大出血 3. 腸系膜上A夾閉要徹底，結扎時注意墊橡皮管，恢復血流灌流（復流）要完全,【注意】,6.分組進行試驗并記錄以下指標,/夾閉,【思考題】,模型復制是否成功？ 比較兩組所得的結果有何不同？ 實驗過程中各組血壓變化的機制是什么？,【缺血再灌注損傷的發(fā)生機制】,（1）活性氧的作用 （2）鈣超載 （3）白細胞的作用 （4）高能磷酸化合物生成障礙,（1）盡早恢復血流灌流，縮短缺血時間 （2）再灌注時遵循低壓、低溫、低鈣的原則 （3）清除活性氧 （4）Ca2+拮抗劑的使用 （5）減少白細胞的激活和炎性介質的釋放 （6）補充能量及促進能量生成 （7）啟動細胞內源性保護機制,【如何防治I/R