1、新藥的非臨床安全性評(píng)價(jià),廣州藍(lán)韻醫(yī)藥研究有限公司 專注中藥新藥及保健食品研發(fā)技術(shù)服務(wù),2020/8/10,2,新藥的安全性及有效性,藥理學(xué)研究 主要藥效學(xué) 一般藥理學(xué) 藥代動(dòng)力學(xué) 毒理學(xué)研究,2020/8/10,3,毒理學(xué)研究,急性毒性 長(zhǎng)期毒性 局部特殊毒性 免疫毒性 遺傳毒性 生殖毒性 致癌性 依賴性 復(fù)方制劑,2020/8/10,4,評(píng)價(jià)目的,確定潛在的毒性靶器官和毒性反應(yīng)出現(xiàn)的時(shí)間、性質(zhì)、程度及其可逆性 確定臨床監(jiān)測(cè)的安全性參數(shù) 推算人體使用的安全起始劑量以及隨后的劑量遞增方案,2020/8/10,5,具體問題具體分析品種特點(diǎn) 最大限度暴露毒性（如果臨床上存在某些方面的安全性擔(dān)憂時(shí)則應(yīng)

2、進(jìn)行該方面的非臨床安全性研究） 執(zhí)行GLP 毒性暴露結(jié)果向臨床過渡，利弊權(quán)衡重在“評(píng)價(jià)” 藥理毒理研究的整體性、綜合性、階段性 說明書：“嚴(yán)進(jìn)”、“寬進(jìn)”,一般原則,2020/8/10,6,何謂具體問題具體分析？,研究?jī)?nèi)容（重點(diǎn)） 研究階段性 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 結(jié)果評(píng)價(jià),CASE（要素） CASE（評(píng)價(jià)） 產(chǎn)品的設(shè)計(jì)思路 分子結(jié)構(gòu) 作用機(jī)制、活性特點(diǎn) 安全性擔(dān)憂 相關(guān)動(dòng)物 免疫原性 臨床適應(yīng)癥、用藥人群 臨床用藥周期 已有相關(guān)安全性信息 技術(shù)、經(jīng)濟(jì)可行性等等,藥理學(xué)研究,2020/8/10,8,主要藥效學(xué)研究,體內(nèi)和體外兩種以上實(shí)驗(yàn)方法，其中一種必須是整體的正常動(dòng)物或模型動(dòng)物 空白對(duì)照及已知陽性藥物對(duì)

3、照 作用機(jī)制研究,2020/8/10,9,一般藥理學(xué)（General Pharmacology）研究,對(duì)主要藥效學(xué)（Primary Pharmacodynamic）作用以外的廣泛的藥理學(xué)研究 次要藥效學(xué)（Secondary Pharmacodynamic ） 安全藥理學(xué)（Safety Pharmacology ） 中樞神經(jīng)系統(tǒng) 心血管系統(tǒng) 呼吸系統(tǒng),2020/8/10,10,追加的 補(bǔ)充的 可免做的,一般藥理研究的特殊情況,2020/8/10,11,藥物在體內(nèi)的處置，ADME的過程及特點(diǎn) 吸收（Absorption） 分布（Distribution） 代謝（Metabolism） 排泄（Exc

4、retion）,藥代動(dòng)力學(xué)研究,2020/8/10,12,血藥濃度時(shí)間曲線 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的估算（見后） 藥物的吸收 藥物的分布 藥物的排泄 尿糞排泄 膽汁排泄 物料平衡（Mass Balance） 藥物與血漿蛋白的結(jié)合 代謝轉(zhuǎn)化試驗(yàn) 對(duì)藥物代謝酶活性的影響,具體研究項(xiàng)目,2020/8/10,13,血藥濃度時(shí)間曲線下面積（AUC） 半衰期（t1/2） 吸收速率常數(shù)（Ka） 消除速率常數(shù)（Ke） 峰濃度（Cmax） 達(dá)峰時(shí)間（Tmax） 表觀分布容積（Vd） 清除率（CL） 生物利用度（F）,主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),2020/8/10,14,藥代動(dòng)力學(xué)研究,動(dòng)物 劑量 多次給藥 藥代動(dòng)力學(xué)研究 組織

5、分布研究 生物樣本的藥物測(cè)定方法 色譜法 放射性核素標(biāo)記法 免疫學(xué)方法 微生物學(xué)方法,2020/8/10,15,藥代動(dòng)力學(xué)研究,方法學(xué)確證 選擇性 靈敏度 準(zhǔn)確度 精密度 重現(xiàn)性 穩(wěn)定性 標(biāo)準(zhǔn)曲線質(zhì)控樣品,毒理學(xué)研究,2020/8/10,17,一次或24小時(shí)內(nèi)多次給予 動(dòng)物 給藥途徑 陰性對(duì)照組 判斷安全范圍,急性毒性研究,2020/8/10,18,急性毒性研究,最大無反應(yīng)劑量 未見反應(yīng)劑量（NOEL） ：No Observed Effect Level 未見不良反應(yīng)劑量（NOAEL）： No Observed Adverse Effect Level 最小毒性反應(yīng)劑量 最大耐受量（MTD）：

6、Maximal Tolerance Dose 最小致死劑量（MLD）：Minimal Lethal Dose 半數(shù)致死量（LD50）：Median Lethal Dose,2020/8/10,19,急性毒性研究試驗(yàn)方法,最大耐受量法 最大給藥量法 半數(shù)致死量（）法 固定劑量法 上下法（階梯法，序貫法） 近似致死劑量法 累積劑量設(shè)計(jì)法（金字塔法）,2020/8/10,20,相關(guān)動(dòng)物 給藥途徑 劑量 毒代動(dòng)力學(xué)藥代研究在毒理學(xué)研究的延伸 階段性以不同給藥期限的長(zhǎng)期毒性研究來分別支持藥物進(jìn)入 期、期或期臨床試驗(yàn)（生產(chǎn)）,長(zhǎng)期毒性研究,2020/8/10,21,支持臨床療程超過2 周的藥物II 期和I

7、II 期臨床試驗(yàn)所需動(dòng)物長(zhǎng)期毒性研究的最短給藥期限,2020/8/10,22,檢測(cè)指標(biāo),常規(guī)指標(biāo)（一般癥狀、體重、攝食量） 血液學(xué)指標(biāo) ：10項(xiàng) 血液生化學(xué)指標(biāo) ：12項(xiàng)（非嚙齒類16項(xiàng)） 尿液分析指標(biāo)：9項(xiàng)（非嚙齒類） 體溫、血壓、呼吸、心電圖及眼科檢查（非嚙 齒類） 組織病理學(xué)檢查 臟器系數(shù)：12項(xiàng) 組織病理學(xué)檢查：30項(xiàng)（非嚙齒類33項(xiàng)） 恢復(fù)期,2020/8/10,23,局部用藥特殊毒性研究,刺激性 給藥部位的可逆性炎癥改變 過敏性（變態(tài)反應(yīng)或超敏反應(yīng)） 特異性免疫反應(yīng)，表現(xiàn)為組織損傷或生理功能紊亂，異?；虿±硇缘?型，快發(fā)或速發(fā)過敏型，IgE介導(dǎo) 型，細(xì)胞毒型或溶細(xì)胞型，IgG介導(dǎo)

8、型，免疫復(fù)合物型或血管炎型，IgG、IgM介導(dǎo) 型，遲發(fā)型或結(jié)核菌素型，T淋巴細(xì)胞介導(dǎo) 光敏性 光毒性（光刺激性） 光過敏性（光變態(tài)反應(yīng)） 型變態(tài)反應(yīng) 溶血性 溶血及紅細(xì)胞凝聚 免疫性溶血型和 型過敏反應(yīng) 非免疫性溶血,2020/8/10,24,刺激性,制劑 陰性對(duì)照 皮膚刺激性 注射給藥部位刺激性 眼刺激性 其他途徑給藥部位刺激性,2020/8/10,25,過敏性,注射給藥 全身主動(dòng)過敏試驗(yàn)（ASA） 皮膚被動(dòng)過敏試驗(yàn)（PCA） 經(jīng)皮給藥 豚鼠最大化試驗(yàn)（GPMT） Buehler試驗(yàn)（BT） 吸入給藥 豚鼠吸入誘導(dǎo) 刺激試驗(yàn) 皮膚光毒性試驗(yàn) 皮膚光過敏性試驗(yàn) 陽性和陰性對(duì)照,2020/8/

9、10,26,溶血性,體外試管法（肉眼觀察） 分光光度法 陰性對(duì)照 陽性對(duì)照（視情況）,2020/8/10,27,免疫毒性研究,評(píng)價(jià)潛在的免疫原性 檢測(cè)血清抗體滴度 免疫復(fù)合物形成 間接引起生物活性分子釋放 病理毒性（結(jié)合在長(zhǎng)毒中觀察） 淋巴器官稱重 血液學(xué)，血細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 免疫器官組織病理學(xué)檢查,2020/8/10,28,免疫毒性研究,對(duì)免疫功能的影響 對(duì)脾抗體形成細(xì)胞（PFC）的影響（體液免疫功能HMI）溶血空斑試驗(yàn) 對(duì)小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)的影響（DTH，細(xì)胞免疫功能CMI）放免/DNFB二硝基氟苯 淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)：有絲分裂原（PHA，ConA， LPS，PWM）刺激成淋巴細(xì)胞化作用 NK細(xì)

10、胞活性測(cè)定：乳酸脫氫酶（LDH）釋放法 過敏反應(yīng)-人源蛋白豚鼠價(jià)值很小，尚無可靠手段,2020/8/10,29,鼠傷寒沙門氏菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型回復(fù)突變?cè)囼?yàn) （Ames試驗(yàn)） 陰性及陽性對(duì)照 S9代謝激活 中國(guó)倉鼠肺成纖維細(xì)胞（CHL）染色體畸變?cè)囼?yàn) 空白、溶劑、陽性對(duì)照 S9代謝激活 嚙齒動(dòng)物（小鼠）微核試驗(yàn) 陰性及陽性對(duì)照,遺傳毒性（致突變）研究,2020/8/10,30,段 一般生殖毒性試驗(yàn) 雌性受孕、分娩、活胎與死胎、外觀、骨骼與內(nèi)臟等 雄性生育能力 段 致畸敏感期毒性試驗(yàn) 胚胎毒性和潛在的致畸性 段 圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn) 子代動(dòng)物,生殖毒性研究,2020/8/10,31,致癌性研究,創(chuàng)新藥 短期致癌試驗(yàn) 哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化試驗(yàn) 小鼠腫瘤誘發(fā)試驗(yàn) 長(zhǎng)期致癌試驗(yàn),2020/8/10,32,具有精神神經(jīng)作用的藥物需要提供 身體依賴性試 鎮(zhèn)痛藥、鎮(zhèn)靜催眠藥 催促試驗(yàn) 誘導(dǎo)試驗(yàn) 自然戒斷試驗(yàn)或替代試驗(yàn) 精神依賴性試驗(yàn) 自身給藥,藥物依賴性研究,2020/8/10,33,科學(xué)的，“case-by-case” 的設(shè)計(jì)思路 通過藥理作用來選擇相關(guān)動(dòng)物 可采用一種動(dòng)物 免疫原性非常重要 遺傳毒性通常不要求 代謝研究通常不要求 兩年的致癌性試驗(yàn)通常不要求 沒有仿