犐犆犛０７．０８０

犃２１

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犌犅／犜３８１４９—２０１９

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犜犲犮犺狀犻犮犪犾狊狆犲犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳犲犳犳犻犮犪犮狔犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀犳狅狉犱犲犵狉犪犱犪狋犻狅狀狅犳

犮犪狉犫犪犿犪狋犲狆犲狊狋犻犮犻犱犲狊犫狔犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾狆狉狅犱狌犮狋狊

２０１９１０１８??２０１９１０１８??

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前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院、河北科技大學(xué)、北京工商大學(xué)、北京薩姆伯科

技有限公司、浙江東杰生物科技有限責(zé)任公司、中國生物技術(shù)發(fā)展中心。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：霍書英、程書梅、馬愛進(jìn)、賈英民、孫紀(jì)錄、王志新、郝帥、楊志堅、鄭剛、何蕊。

Ⅰ

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生物產(chǎn)品降解氨基甲酸酯類

農(nóng)藥功效評價技術(shù)規(guī)范

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了生物產(chǎn)品降解氨基甲酸酯類農(nóng)藥功效評價的一般原則、基本要求、評價方法和結(jié)果表述。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于生物產(chǎn)品降解氨基甲酸酯類農(nóng)藥的功效評價。

２規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

ＧＢ２３２００．９０食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)乳及乳制品中多種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的測定液相色

譜質(zhì)譜法

３術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

３．１

生物產(chǎn)品犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾狆狉狅犱狌犮狋狊

由生物技術(shù)制備的產(chǎn)品。

注：本標(biāo)準(zhǔn)中的生物產(chǎn)品特指具有降解氨基甲酸酯類農(nóng)藥功能的微生物及酶產(chǎn)品。

３．２

氨基甲酸酯類農(nóng)藥犮犪狉犫犪犿犪狋犲狆犲狊狋犻犮犻犱犲狊

氨基甲酸的犖甲基取代酯類農(nóng)藥。

注：包括四類，即雜環(huán)甲基氨基甲酸酯類、萘基氨基甲酸酯類、苯基氨基甲酸酯類、氨基甲酸肟酯類。

４一般原則

４．１生物產(chǎn)品標(biāo)簽或說明書有明確的微生物和酶名稱的方可開展評價。

４．２科學(xué)、公正開展功效評價工作，

評價過程及評價方法科學(xué)。

４．３評價結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，采用科學(xué)的統(tǒng)計方法進(jìn)行比較，

不得偽造、變造檢驗報告或者數(shù)據(jù)、結(jié)果。

５基本要求

５．１按照相關(guān)法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)要求對樣品進(jìn)行接收、

保管、交接、配制、回收、退還／銷毀處理，并制定相

應(yīng)的管理制度和程序。

５．２應(yīng)具備與功效評價相適應(yīng)的專業(yè)技術(shù)人員。

５．３實驗室環(huán)境條件應(yīng)滿足評價要求，

開展微生物評價的實驗室應(yīng)符合生物安全一級要求。

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５．４功效評價使用的儀器與設(shè)備種類、

數(shù)量、性能、量程、精度應(yīng)能滿足功效評價的需要。微生物產(chǎn)品

功效評價需要的器皿材料應(yīng)經(jīng)過無菌處理。

５．５功效評價使用的試劑應(yīng)為分析純，

水應(yīng)符合ＧＢ／Ｔ６６８２中規(guī)定的二級水。

５．６功效評價選用的氨基甲酸酯類農(nóng)藥純度應(yīng)大于或等于９５％。應(yīng)根據(jù)微生物種類選擇培養(yǎng)基。

５．７實驗結(jié)束后，實驗材料應(yīng)經(jīng)過無害化處理，

保證實驗環(huán)境的潔凈與安全要求。

６評價方法

６．１試驗設(shè)計

應(yīng)符合表１要求。

表１試驗設(shè)計

項目

產(chǎn)品種類

微生物產(chǎn)品酶產(chǎn)品

處理設(shè)計供試樣品、失活樣品、空白對照

氨基甲酸酯類農(nóng)藥選擇根據(jù)評價需要選擇一種或幾種

重復(fù)次數(shù)不少于３次

反應(yīng)體系按正交試驗結(jié)果確定ａ

ａ微生物和酶產(chǎn)品說明書中有明確反應(yīng)體系的按說明書要求進(jìn)行。

６．２溶液制備

準(zhǔn)確稱取一定量的氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品用甲醇配制成１００ｍｇ／Ｌ的農(nóng)藥儲備液或直接購買帶

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書、濃度為１００ｍｇ／Ｌ的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，４℃冷藏，用錫箔紙避光保存。用時稍微加熱溶解完

全，并用緩沖液稀釋成一定濃度的工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

６．３樣品處理

６．３．１供試樣品

供試微生物和酶產(chǎn)品若為塊狀固體產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)行研磨處理，稱取一定質(zhì)量的供試固體樣品，采用不同

ｐＨ

的緩沖液按要求稀釋為不同濃度（ｇ／ｍＬ）備用；若供試樣品為液體，用不同

ｐＨ

的緩沖液按要求稀釋

為不同濃度（ｍＬ／ｍＬ）備用。

６．３．２失活樣品

取部分供試樣品在１２１℃處理３０ｍｉｎ，備用。

６．３．３空白樣品

用不同

ｐＨ

的緩沖液代替待測生物產(chǎn)品，備用。

６．４反應(yīng)體系確定

設(shè)計正交試驗，影響因素宜選取樣品濃度、底物濃度、

ｐＨ

、溫度、時間等影響微生物或酶產(chǎn)品作用的

因素確定反應(yīng)體系。

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６．５降解處理

６．５．１微生物產(chǎn)品降解處理

?。玻担埃恚倘瞧浚箓€，其中空白樣品３個、供試樣品３個、失活樣品３個。按照最佳反應(yīng)體系確

定的底物濃度，微生物添加量，制備成反應(yīng)體系為１００ｍＬ的培養(yǎng)液，在最佳反應(yīng)體系條件下進(jìn)行降解

反應(yīng)。

６．５．２酶產(chǎn)品降解處理

取５０ｍＬ離心管９個，空白樣３個，供試樣品３個，失活樣品３個。按照最佳反應(yīng)體系確定的酶的

添加量、底物濃度，制備成反應(yīng)體系為１５ｍＬ的反應(yīng)液，在最佳反應(yīng)體系條件下進(jìn)行降解反應(yīng)。

６．６測定

降解處理結(jié)束后，?。保担恚痰姆磻?yīng)液，加入３０ｍＬ乙腈，按照ＧＢ２３２００．９０要求進(jìn)行處理和測定。

６．７降解率計算

按照式（１）計算：

犚＝（

ρｉ－ρａ）－（ρｉ－ρｂ）－（ρｉ－ρｃ）

ρｉ

×１００……（１）

式中：

犚———降解率，％；

ρｉ

———底物原始濃度，單位為毫克每升（

ｍｇ

／Ｌ）；

ρａ

———供試樣品降解反應(yīng)終點底物濃度，單位為毫克每升（

ｍｇ

／Ｌ）；

ρｂ

———失活樣品降解反應(yīng)終點底物濃度，單位為毫克每升（

ｍｇ

／Ｌ）；

ρｃ

———空白樣品降解反應(yīng)終點底物濃度，單位為毫克每升（

ｍｇ

／Ｌ）。

以平行樣的平均值為最終的降解率值，計算結(jié)果保留到小數(shù)點后兩位。

７結(jié)果表述

７．１評價結(jié)果應(yīng)包括降解率和降解效果，

見表２。

表２評價結(jié)果

降解率（犚）降解效果

犚≥８０％好

６０％≤犚＜８０％

良好

４０％≤犚＜６０％

較好

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