1、醫(yī)院清洗消毒滅菌效果監(jiān)測方法進(jìn)展,概述,醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測用設(shè)施設(shè)備儀器和器材 醫(yī)院消毒效果監(jiān)測方法 其他監(jiān)測方法 醫(yī)療器械清洗消毒滅菌效果監(jiān)測結(jié)果 醫(yī)院環(huán)境微生物污染和消毒效果監(jiān)測 結(jié)果,一、消毒滅菌效果監(jiān)測用設(shè)施設(shè)備儀器和器材,實(shí)驗(yàn)室和主要監(jiān)測用儀器設(shè)備 常用消毒滅菌效果監(jiān)測器材,（一）實(shí)驗(yàn)室和常用儀器設(shè)備,1.百級(jí)潔凈實(shí)驗(yàn)室 2.微生物實(shí)驗(yàn)室 3.空氣采樣器 4.紫外線測定儀 5.細(xì)菌過濾器 6.ATP檢測儀 7.溫度/壓力記錄儀 8.溫度記錄儀 9.溫度/相對(duì)濕度記錄儀 10.干熱溫度測試儀,1. 100級(jí)潔凈實(shí)驗(yàn)室,基本設(shè)施設(shè)備：緩沖間、風(fēng)淋設(shè)備、百級(jí)凈化設(shè)備，全不銹鋼桌臺(tái)面、傳遞

2、窗、紫外線燈等 用于滅菌物品的無菌檢驗(yàn) 各種滅菌物品、一次性使用衛(wèi)生用品和一次性使用醫(yī)療用品。,100級(jí)潔凈實(shí)驗(yàn)室要求,2. 微生物實(shí)驗(yàn)室,基本設(shè)施設(shè)備：實(shí)驗(yàn)臺(tái)、洗手池、洗眼器、紫外燈、二級(jí)生物安全柜、電冰箱、培養(yǎng)箱、壓力蒸汽滅菌器、微波爐、恒溫水浴箱等。 用途：各種常見條件致病菌的檢測、細(xì)菌總數(shù)的檢測、消毒滅菌效果的檢測。,3.六級(jí)篩孔空氣撞擊式采樣器,組成：六級(jí)篩孔采樣器、真空泵、流量計(jì)、定時(shí)器 用途：用于室內(nèi)空氣中細(xì)菌總數(shù)檢測和消毒效果監(jiān)測,六級(jí)篩孔空氣撞擊式采樣器,六級(jí)篩孔空氣撞擊式采樣器指標(biāo),第一級(jí)：7.0m 孔徑1.18mm 第二級(jí)：4.7m7.0m 孔徑0.91mm 第三級(jí)：3.

3、3m4.7m 孔徑0.71mm 第四級(jí)：2.1m3.3m 孔徑0.53mm 第五級(jí)：1.1m2.1m 孔徑0.34mm 第六級(jí)：0.65m1.1m 孔徑0.25mm 測量范圍內(nèi)捕獲率98%,4.三聯(lián)細(xì)菌過濾器,組成：真空抽氣泵、濾器、0.45微米的濾膜 用途：用于內(nèi)鏡消毒效果檢測,細(xì)菌過濾裝置,5.ATP檢測儀 ATP熒光素酶結(jié)合，在熒光素酶的結(jié)合作用Mg+參與反應(yīng)發(fā)出熒光降解成ADTAMP,三磷酸腺苷（ATP）方法用于清洗效果的檢測,在生物化學(xué)中，三磷酸腺苷（Adenosine triphosphate, ATP）是一種核苷酸（又叫腺苷三磷酸），作為細(xì)胞內(nèi)能量傳遞的“分子通貨”，儲(chǔ)存和傳遞化

4、學(xué)能。ATP在核酸合成中也具有重要作用。 ATP是三磷酸腺苷的英文名稱縮寫。ATP分子的結(jié)構(gòu)是可以簡寫成A-PPP，其中A代表腺苷，P代表磷酸基團(tuán)，代表一種特殊的化學(xué)鍵，叫做高能磷酸鍵，高能磷酸鍵斷裂時(shí)，大量的能量會(huì)釋放出來。,進(jìn)行ATP檢測,污染物的ATP含量,醫(yī)療器械使用后會(huì)受到體液、血液、組織細(xì)胞以及微生物等污染。 體液和血液中有大量的體細(xì)胞，每個(gè)體細(xì)胞的ATP含量大約為1x10-15mol ATP，每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中大約含有210-18mol ATP 單個(gè)體細(xì)胞ATP含量大約是單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的500倍,細(xì)菌ATP檢測試劑盒,細(xì)菌ATP裂解劑,ATP標(biāo)準(zhǔn)品,ATP檢測液,細(xì)菌外ATP消去劑,試

5、劑盒檢測細(xì)菌的原理,每個(gè)細(xì)菌中含有 210-18mol的ATP,基于熒光素酶催化的化學(xué)發(fā)光原理，首先利用細(xì)菌外ATP消除劑排除非細(xì)菌產(chǎn)生的ATP干擾，再利用細(xì)菌ATP裂解劑將細(xì)菌裂解，通過ATP檢測液檢測總細(xì)菌ATP的發(fā)光量，達(dá)到檢測細(xì)菌的目的,light,Oxyluciferin+AMP+Pyrophosphate+,6. 新型多點(diǎn)紫外線輻照儀,六大創(chuàng)新,多點(diǎn)監(jiān)測，能同時(shí)監(jiān)測5個(gè)紫外燈管并一起打印保存。 手持遙控，主機(jī)與探頭分離，室外監(jiān)測，徹底避免紫外輻射傷害。 即時(shí)打印，可保存原始記錄。 數(shù)據(jù)線USB端口與電腦相連，可在電腦里編輯儲(chǔ)存監(jiān)測記錄。 專用盲管紫外線傳感技術(shù)，避免其它波段紫外線干

6、擾，監(jiān)測數(shù)據(jù)更為精確。 余弦修正技術(shù)，不受角度誤差影響。,7.雙通道溫度/壓力數(shù)據(jù)記錄器,外殼材質(zhì)：不銹鋼，硅橡膠 鎧裝探針：探針長40mm，直徑 3mm 探針材質(zhì)：英科鎳合金 溫度記錄范圍：0150 ，精度： 0,1C 壓力傳感器： 壓電電阻,帶溫度補(bǔ)償 壓力范圍：1 毫巴 4000 毫巴 壓力精度： 10毫巴 記錄容量：100,000個(gè)數(shù)據(jù) 溫度傳感器：鉑電阻PT1000 溫度記錄容量：100,000個(gè)數(shù)據(jù) 記錄間隔：1秒24小時(shí)任意設(shè)定 防護(hù)等級(jí)：IP68（全密封防水） 承壓：20公斤，電池：耐高溫鋰電池，壽命2年 主機(jī)尺寸： 46 mm x 24 mm，主機(jī)重量：70,功能： 完成1個(gè)

7、點(diǎn)溫度、1個(gè)點(diǎn)壓 力與時(shí)間的檢測、記錄 附加無線發(fā)送信號(hào)功能,8.單通道主機(jī)/探針一體溫度記錄器,外殼材質(zhì)：不銹鋼，硅橡膠 探針材質(zhì)：不銹鋼探針 長100mm 直徑 3mm 溫度記錄范圍：-85400 精度：0.5 （-85 -40） 0.2 （-40 0） 0.1（0 +140） 0.2 （+140 +250） 0.5（+250 +400) 溫度傳感器：鉑電阻PT1000 溫度記錄容量：100,000個(gè)數(shù)據(jù) 記錄間隔：1秒24小時(shí)任意設(shè)定 防護(hù)等級(jí)：IP68（全密封防水）,完成1個(gè)點(diǎn)的溫度與 時(shí)間檢測、記錄 附加無線發(fā)送信號(hào) 功能,單通道主機(jī)/探針一體溫度記錄器,外殼材質(zhì)：不銹鋼，硅橡膠 鎧

8、裝探針：探針長250/500mm，直徑 1,5mm 探針材質(zhì)：英科鎳合金 溫度記錄范圍：-85400 精度：0.5 （-85 -40） 0.2 （-40 0） 0.1（0 +140） 0.2 （+140 +250） 0.5（+250 +400) 溫度傳感器：鉑電阻PT1000 溫度記錄容量：100,000個(gè)數(shù)據(jù) 記錄間隔：1秒24小時(shí)任意設(shè)定 防護(hù)等級(jí)：IP68（全密封防水） 承壓：20公斤，電池：耐高溫鋰電池，壽命2年 主機(jī)尺寸： 46 mm x 24 mm，主機(jī)重量：70克,單溫度探針；完成1個(gè)點(diǎn)的 溫度與時(shí)間檢測、記錄鎧裝 探針可任意彎曲 附加無線發(fā)送信號(hào)功能,雙通道主機(jī)/探針一體溫度記

9、錄器,外殼材質(zhì)：不銹鋼，硅橡膠 鎧裝探針：探針長500mm，直徑 1,5mm 探針材質(zhì)：英科鎳合金 溫度記錄范圍：-85400 精度：0.5 （-85 -40） 0.2 （-40 0） 0.1 （0 +140） 0.2 （+140 +250） 0.5 （+250 +400) 溫度傳感器：鉑電阻PT1000 溫度記錄容量：100,000個(gè)數(shù)據(jù) 記錄間隔：1秒24小時(shí)任意設(shè)定 防護(hù)等級(jí)：IP68（全密封防水） 承壓：20公斤，電池：耐高溫鋰電池，壽命2年 主機(jī)尺寸： 46 mm x 24 mm，主機(jī)重量：70克,完成2個(gè)點(diǎn)的溫度與時(shí)間 檢測、記錄鎧裝探針可 任意彎曲 附加無線發(fā)送信號(hào)功能,硅橡膠隔

10、熱盒,智能數(shù)據(jù)交換平臺(tái),專用電源、天線 配套軟件(光盤) 中文軟件操作說明 功能： 編程及讀取數(shù)據(jù) 同時(shí)為4個(gè)數(shù)據(jù)記錄器編程、讀取4個(gè)記錄器記錄數(shù)據(jù), USB 接口，彩色背景信號(hào),附加無線接收信號(hào)功能,9.無線溫度/相對(duì)濕度實(shí)時(shí)監(jiān)測儀,無線主機(jī)探針一體溫度/濕度記錄器,溫度范圍及精度:1085 0.1 溫度記錄容量：8,000個(gè)數(shù)據(jù) 濕度范圍及精度：0%100%RH 濕度記錄容量：8,000個(gè)數(shù)據(jù) 電池：AA鋰電池（可更換） 尺寸：直徑22mm高117mm （直徑相當(dāng)于一元硬幣) 完成1個(gè)點(diǎn)的溫度與時(shí)間及1個(gè)濕度點(diǎn)的檢測、記錄；可同步顯示實(shí)時(shí)溫度數(shù)值,MPIII主機(jī)探針一體溫度/濕度記錄器,溫

11、度范圍及精度:1085 0.1 溫度記錄容量：81085,000個(gè)數(shù)據(jù) 濕度范圍及精度：0%100%RH 2%RH v記錄容量：8,000個(gè)數(shù)據(jù) 電池：紐扣電池（可更換） 尺寸：直徑18mm高66mm 單通道無線溫度探針；完成1個(gè)點(diǎn)的溫度與時(shí)間檢測、記錄；同步顯示實(shí)時(shí)溫度數(shù)值；用于消毒滅菌過程的檢測,MPRF無線主機(jī)探針一體溫度記錄器,工作站 智能微機(jī)信號(hào)轉(zhuǎn)換器（實(shí)時(shí)傳輸）配套軟件(光盤)，可兼容以上系列產(chǎn)品信息處理完成數(shù)據(jù)編程和讀??； 可實(shí)時(shí)傳輸數(shù)據(jù)。,10.干熱溫度測試儀,LH-X多路溫度測試儀主要參數(shù),傳感器：標(biāo)配（K型）熱電偶2米 測溫范圍： -1001000；精度：0.5級(jí) 0-10

12、00 (讀數(shù)值0.5%+1) -100-0 (讀數(shù)值0.5%+2) 機(jī)箱尺寸：260（寬）160（高）360（深）(mm) 溫度信號(hào)輸入通道數(shù)：8路、16路、24路、32路、40路、48路、56路、64路可選 重量約6.0Kg,LH-X多路溫度測試儀工作原理,LH-X多路溫度測試儀是由兩條不同金屬連接著一個(gè)靈敏的電壓計(jì)所組成，金屬接點(diǎn)在不同的溫度下，會(huì)在金屬的兩端產(chǎn)生不同的電壓差，電壓差非常微小，故需靈敏的電壓計(jì)才能測的，由電壓計(jì)的度數(shù)便可反應(yīng)溫度值。,（二）常用消毒滅菌效果監(jiān)測器材,1.化學(xué)指示物 2.生物指示物 3.滅菌過程驗(yàn)證裝置（PCD） 4.消毒劑濃度測試卡 5.中和劑 6.采樣液

13、7.規(guī)格板（5.05.0cm） 8.采樣用棉拭子,1.化學(xué)指示物 chemical indicator（CI）,定義： 顯示由暴露于某一滅菌過程中的物理和（或）化學(xué)條 件的改變導(dǎo)致的一個(gè)或多個(gè)預(yù)定過程變量變化的系統(tǒng)。,分類,第1類 過程化學(xué)指示卡（ process indicators） 用于單個(gè)物品或包裝，指示物品是否經(jīng)過了滅菌過 程，以區(qū)分滅菌或未滅菌物品，例如 化學(xué)指示膠帶，化 學(xué)指示標(biāo)簽及用于單一器械滅菌過程指示的器材指示卡。,第2類 特殊檢測化學(xué)指示卡 （ indicators for use in specific tests ） 用于滅菌器或滅菌標(biāo)準(zhǔn)的特效實(shí)驗(yàn)操作，例如，各種 B

14、-D試紙，用于監(jiān)測在133135預(yù)真空滅菌器： 冷空氣排出效果 飽和蒸汽穿透效果 漏氣情況,Class 2 Indicator,Class 2 Indicator,反復(fù)使用的B-D測試裝置,可反復(fù)使用15次 成本節(jié)省30%,判斷B-D測試結(jié)果簡便,設(shè)備正常：顏色完全由藍(lán)色變?yōu)楹谏?設(shè)備不正常：指示試紙的中心區(qū)域呈藍(lán)色到灰色，表明有殘留空氣或者蒸汽穿透不完全。,第3類 單一參數(shù)化學(xué)指示卡Single-parameter indicators 用于滅菌過程中單一關(guān)鍵參數(shù)的測試，例如：溫度 指示卡（劑）、氣體濃度指示卡（EO、甲醛）等。,第4類 多參數(shù)化學(xué)指示卡(Multi-parameter i

15、ndicators) 具有兩個(gè)或以上關(guān)鍵參數(shù)，例如，環(huán)氧乙烷滅菌指 示卡，設(shè)定值為900mg/L，60min 根據(jù)ISO15882-2003提供的上下限值，相對(duì)濕度大于 30%，時(shí)間至少45min，環(huán)氧乙烷濃度為675mg/L時(shí)，指 示卡可達(dá)到終點(diǎn)，相對(duì)濕度小于30%，指示卡不能達(dá)到 終點(diǎn)。,0,時(shí)間,溫度 (oC),121,134,多參數(shù)化學(xué)指示劑（第4類）,兩個(gè)或以上 關(guān)鍵參數(shù) 和生物不完 全一致 誤差：寬,第5類綜合性化學(xué)指示卡（ integgrating indicators） 是一種專用于對(duì)各滅菌過程中規(guī)定范圍內(nèi)的所有評(píng)價(jià) 參數(shù)起作用的指示卡，其設(shè)定值需達(dá)到滅活值，該滅活 值是通過參

16、考設(shè)定的試驗(yàn)菌的D值和Z值確定的。,第 5類 綜合指示卡,50,20,10,5,2,1,0.5,Time (Min.),Temperature ,121,134,Integrating Indicator Accept Points (SVs),G. stearothermophilus Thermal Death Time,Class 5 Integrating Indicator,第6類 模擬化學(xué)指示卡 emulating indicators 用于對(duì)各滅菌周期規(guī)定的范圍內(nèi)所有評(píng)價(jià)參數(shù)起作 用的指示卡， 其設(shè)定值以所選的滅菌程序設(shè)置值為依 據(jù)。,Class 6 Emulating Indi

17、cators,第6類的允許指示最嚴(yán)格的，因此此類化學(xué)指示卡的對(duì)特 定滅菌過程中關(guān)鍵參數(shù)指示的可信度最高。 例如，蒸汽滅菌指示卡 設(shè)定值：134 維持時(shí)間：3.0min 依據(jù)ISO15882-2003的要求（溫度，時(shí)間） 暴露條件，溫度132， 時(shí)間2.75min ， 可接受的指 示卡應(yīng)顯示失敗 暴露條件時(shí)間134， 時(shí)間3.0min ， 可接受的指示卡 應(yīng)顯示通過,6類指示物美國ST79:2010規(guī)范,在1-6類指示物中，只有6類指示物可以作為周期驗(yàn)證指示物，有能力監(jiān)測滅菌過程中各項(xiàng)評(píng)價(jià)參數(shù)是否達(dá)到了預(yù)期的設(shè)定值。 根據(jù)滅菌周期不同，6類指示物派生了不同滅菌周期參數(shù)的產(chǎn)品 例如分別有監(jiān)測134

18、 3.5分鐘、18分鐘，或者132 4分鐘，10分鐘，15分鐘和20分鐘的產(chǎn)品?？梢愿鶕?jù)需要選擇不同參數(shù)的產(chǎn)品。 第六類指示物可用于監(jiān)測越來越常見的復(fù)雜外科器械的延長循環(huán)。,ANSI/AAMI ST79:2010/A3:2012 ISO 11140-1 2005,Class 4, 5, and 6 CIs,Pass/Fail Testing Steam Class 4, 5, and 6 Indicators Pass Condition Stated Value Fail Condition S.V. Minus Values from Standard Class TimeTemperat

19、ure 4 25%2C 6 6%1C 5(3 Temperatures15， 1C ),應(yīng)用,包外化學(xué)指示卡 包外化學(xué)指示卡的作用是區(qū)分已處理和未處理的物品， 而不是鑒別是否達(dá)到了適當(dāng)?shù)臏缇鷧?shù)，主要包括第1類過 程指示卡。所有需進(jìn)行滅菌的設(shè)備，其包裝上都應(yīng)附有或印 有滅菌指示帶、指示卡、指示圖。所有執(zhí)行滅菌操作的包裝 上也應(yīng)附有或印有指示卡。在滅菌后和使用前均應(yīng)對(duì)這些指 示帶、指示卡或指示圖進(jìn)行驗(yàn)證，以確保物品已經(jīng)過了滅菌 處理。,包內(nèi)化學(xué)指示卡 化學(xué)指示卡用于進(jìn)行滅菌處理的包裹、托盤、容器 內(nèi)部時(shí)，可反映這些特定位置的關(guān)鍵參數(shù)達(dá)成情況，例 如，填充物、填充方式、打包技術(shù)及滅菌器故障等諸多

20、因素對(duì)關(guān)鍵參數(shù)的達(dá)成造成的影響。 化學(xué)指示卡應(yīng)放置在包裹、托盤、容器內(nèi)滅菌劑可 滲入的區(qū)域，該區(qū)域可以是包裹、托盤、容器或滅菌器 空腔的中心，對(duì)于未包裝的物品，至少應(yīng)在需要滅菌的 物品的托盤上放置一個(gè)化學(xué)指示卡。包內(nèi)化學(xué)指示卡通 常在3、4、5、6類化學(xué)指示卡種選擇。還可配合滅菌過 程驗(yàn)證裝置（PCD）使用。,特殊監(jiān)測指示卡 用于蒸汽滲入或空氣排出測試，需要在空的滅菌器 中進(jìn)行，測試包裝可以是用戶提供的、事先制造的，一 次性的或使用次數(shù)有限的。這些設(shè)備的使用要參考廠家 的技術(shù)說明書。,2.滅菌效果監(jiān)測生物指示物,定義： 含有對(duì)特定的滅菌過程具有確定抗力的可存活微生 物的測試系統(tǒng)。 分類：按制作

21、工藝結(jié)構(gòu)分類 普通型生物指示劑 嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指示物通過 2496小時(shí)培養(yǎng)，以顏色變化判斷結(jié)果 快速型生物指示劑雙重監(jiān)測系統(tǒng)（快速酶熒光生物指示劑或者快速讀出生物指示劑）,Bacillus atrophaeus the spore in EO BI,Geobacillus stearothermophilus the spore in the steam BI,生物指示劑變色原理,pH值敏感的溴甲酚紫 pH 顏色變化,嗜熱脂肪桿菌芽孢中葡萄苷 酶代替細(xì)菌芽孢 快速: 機(jī)器測熒光 常規(guī): 肉眼判斷 快速和常規(guī)結(jié)果完全吻合,熒光激發(fā)器 熒光閱讀器 底物 酶被催化產(chǎn)生可發(fā)熒光的物質(zhì)在機(jī)器口通

22、過熒光激發(fā)器（紫外線）熒光閱讀器判斷通過或失 敗,快速讀出技術(shù)（酶反應(yīng)） 14小時(shí)提供生物監(jiān)測結(jié)果，指示劑結(jié)果為陰性后方可 放行 熒光出現(xiàn)在132135下排氣時(shí)為1小時(shí) 熒光出現(xiàn)在132135預(yù)真空或者121下排氣時(shí)為3小時(shí) 也可通過48小時(shí)進(jìn)一步培養(yǎng)通過顏色變化進(jìn)行,菌懸液指示物 含有嗜熱脂肪桿菌芽孢的安甁 Prospore Ampoule,屬于自含式生物指示劑 用于指示較長時(shí)間液體滅菌效果監(jiān)測 也適用于非液體負(fù)載滅菌效果監(jiān)測 菌片 含有保護(hù)劑的染菌載體,生物指示劑的應(yīng)用：,滅菌過程監(jiān)測方法中最嚴(yán)格的方法，滅菌效果監(jiān)測、生物 監(jiān)測、裝載控制 壓力蒸汽滅菌器常規(guī)BI監(jiān)測 美國醫(yī)療中心服務(wù)專業(yè)人

23、員協(xié)會(huì)規(guī)定每天進(jìn)行BI監(jiān)測，植 入物每鍋進(jìn)行監(jiān)測，生物監(jiān)測結(jié)果為陰性后方可放行。 美國手術(shù)室注冊(cè)護(hù)士協(xié)會(huì)/醫(yī)療器械促進(jìn)委員會(huì)規(guī)定每周進(jìn) 行BI監(jiān)測，推薦每天監(jiān)測。對(duì)植入物要求每鍋進(jìn)行監(jiān)測， 生物監(jiān)測結(jié)果為陰性后方可放行。,作為植入物放行的依據(jù) 根據(jù)AAMI ST79，2006之規(guī)定，只有在生物監(jiān)測結(jié)果出 來，并為陰性后，方可對(duì)植入物的滅菌放行。 快速滅菌不應(yīng)該用于植入物，如果出現(xiàn)緊急情況需要使 用快速滅菌方法進(jìn)行植入物的處理時(shí)，必須使用快速生 物指示劑和第五類化學(xué)指示劑進(jìn)行監(jiān)測。直到快速生物 監(jiān)測結(jié)果為陰性后，方可放行。 配合滅菌過程驗(yàn)證裝置（PCD）使用。,中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) WS

24、310.32009中對(duì)生物監(jiān)測的使用,應(yīng)每周監(jiān)測一次。 緊急情況滅菌植入型器械時(shí)，可在生物PCD中加用5類化學(xué)指示物。5類化學(xué)指示物合格可作為提前放行的標(biāo)志，生物監(jiān)測的結(jié)果應(yīng)及時(shí)通報(bào)使用部門。 采用新的包裝材料和方法進(jìn)行滅菌時(shí)應(yīng)進(jìn)行生物監(jiān)測。 小型壓力蒸汽滅菌器因一般無標(biāo)準(zhǔn)生物監(jiān)測包，應(yīng)選擇滅菌器常用的、有代表性的滅菌包制作生物測試包或生物PCD，置于滅菌器最難滅菌的部位，且滅菌器應(yīng)處于滿載狀態(tài)。生物測試包或生物PCD應(yīng)側(cè)放，體積大時(shí)可平放。 采用快速壓力蒸汽滅菌程序滅菌時(shí)，應(yīng)直接將一支生物指示物，置于空載的滅菌,干熱滅菌生物指示物,ISO11138-4：2006 醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指 示劑

25、第四部分 干熱滅菌用生 物指示物 160，D值2.5min 菌株枯草桿菌黑色變種 (ATCC9372)芽胞 菌數(shù)1106cfu/單位,3.滅菌過程驗(yàn)證裝置 （PCD）,定義： 對(duì)某一滅菌過程構(gòu)成特定的抗力，用于評(píng)價(jià)該滅 菌過程有效性的裝置。,分類,根據(jù)包裹分類： 對(duì)于壓力蒸汽滅菌，根據(jù)抗力或滅菌因子穿透難度 的不同,包裹可以分為下列幾類： （1）實(shí)體器材（solid goods ） 指實(shí)心而沒有孔洞的器材 （2）布包/敷料包/多孔物品（porous goods） 如，標(biāo)準(zhǔn)測試包 美國4kg ，歐洲7kg （）化學(xué)指示卡測試包（美國 3M）,歐洲標(biāo)準(zhǔn)包美國標(biāo)準(zhǔn)包,一次性使用標(biāo)準(zhǔn)測試包,螺旋型滅菌

26、過程驗(yàn)證裝置，由一個(gè)不銹鋼管和一個(gè)在一端與其相連的含有化學(xué)指示卡的金屬艙組成。,Line Pickerell 螺旋,S.J. Line and J.K. Pickerell (1973) Journal of Clinical Pathology 26, 716-720 不銹鋼管道 內(nèi)徑為3.0mm (0.118 in.) 長為4.55米(15 ft.) 長/內(nèi)徑比為1500:1 內(nèi)部體積為32ml（測試囊腔為0.85ml）,聚四氟乙烯型低溫蒸汽甲醛螺旋型PCD,DIN 58946, 第13章甲醛氣體滅菌器性能測試 特富龍管腔 2mm內(nèi)徑 1.5米長 盲端結(jié)構(gòu)（ Dead end lumen）

27、,蒸汽滅菌批量監(jiān)測PCD,由一個(gè)聚四氟乙烯管和一個(gè)在一端與其相連的含有化學(xué)指示卡的金屬艙組成,長度為1.5米，直徑2mm 用于滅菌過程的批量監(jiān)測,緊湊型滅菌過程驗(yàn)證裝置（compact-PCD） 構(gòu)成 ： 內(nèi)部為金屬管，金屬管一端和一個(gè)含有化學(xué)指示條的 金屬容器相連, 外部為人造材料保護(hù)外艙,根據(jù)PCD內(nèi)所放置的指示物分類 化學(xué)PCD 一片第五類CI 生物PCD 一支BI或一支含酶BI 生物和化學(xué)混合PCD 一支BI和一片第五類CI或一支BI和一支含酶CI,化學(xué)PCD 將第五類化學(xué)指示物置入PCD夾子內(nèi),生物PCD將菌片置入PCD夾子內(nèi)的過程,3.按不同滅菌方法的效果監(jiān)測進(jìn)行分類 壓力蒸汽滅菌

28、 環(huán)氧乙烷滅菌 低溫甲醛蒸汽滅菌 低溫等離子體滅菌,壓力蒸汽滅菌PCD,空腔負(fù)載試驗(yàn)的過程挑戰(zhàn)裝置（PCD） 空腔負(fù)載試驗(yàn)的過程挑戰(zhàn)裝置PCD 由管蓋、連接器、指示物固定器、軟管組成。 化學(xué)指示物應(yīng)符合GB18282.1 的要求，制造商提供化學(xué)指示物的選擇和使用方法。 過程挑戰(zhàn)裝置符合如下要求： 材料：聚四氟乙烯（）； 管壁厚度：（0.50.025 ）mm； 管內(nèi)直徑：（2.00.1 ）mm；,軟管長度：（150015 ）mm； 密封艙重量：（10.00.1 ）g； PCD 內(nèi)部自由容積：裝置內(nèi)部總?cè)莘e減去指示物固定器容積的（）% 注：可使用其它證實(shí)等同性的材料。當(dāng)使用其它材料時(shí)，壁厚與指示物

29、固定器重量可相應(yīng)改變。,環(huán)氧乙烷PCD不銹鋼型,根據(jù)EN1422制作，適用于環(huán)氧乙烷滅菌的批量監(jiān)測和設(shè)備的驗(yàn)證。 PCD的長度是4.55米，管腔的直徑是3mm。,環(huán)氧乙烷PCD 高分子/不銹鋼型,根據(jù)EN1422制作，適用于環(huán)氧乙烷滅菌器的過程監(jiān)測和效果驗(yàn)證。采用不銹鋼和高分子材料，用于批量監(jiān)測。管腔長1.5米。直徑2mm。 難度略低于前面的全不銹鋼裝置,低溫蒸汽甲醛滅菌PCD,符合EN14180和15424的規(guī)定 用于低溫蒸汽甲醛滅菌的批量監(jiān)測和驗(yàn)證。,過氧化氫氣體等離子體低溫滅菌PCD,將染菌不銹鋼針載體（長度：4cm、直徑：0.5mm）放置于聚四氟乙烯材質(zhì)導(dǎo)管（長度2000mm，內(nèi)徑：1

30、mm；）中間，整個(gè)聚四氟乙烯材質(zhì)導(dǎo)管用過氧化氫等離子體專用包裝袋包裝。 2.放置于不銹鋼導(dǎo)管（長度500mm，內(nèi)徑：1mm；）中間,過氧化氫氣體等離子體滅菌效果監(jiān)測用PCD,PCD在滅菌過程監(jiān)測中的應(yīng)用 PCD的選擇 PCD的選擇與滅菌的方法、滅菌器類型和滅菌物品的種類有關(guān)，目前沒有適用于所有滅菌器及滅菌方法的萬能PCD，不同的滅菌物品，如： 中空物、（燒杯、容器、管狀物） 多孔物（包布，衣物、紡織品） 無孔物（手術(shù)器械或?qū)嵭奈锲罚?應(yīng)使用相應(yīng)的PCD。,PCD的放置位置,用于日常監(jiān)測 滅菌過程的驗(yàn)證相當(dāng)于性能和運(yùn)行的再確認(rèn)，應(yīng)使 用確認(rèn)時(shí)的檢測方法。因?yàn)镻CD可以很容易、方便、快 捷的使用，

31、故可以用于日常監(jiān)測。 不同類型PCD的應(yīng)用 16條手術(shù)巾生物驗(yàn)證（挑戰(zhàn)）測試包及一次性使用化 學(xué)指示卡測試包，可用于對(duì)織物類包裹和實(shí)心器械滅菌 效果的監(jiān)測。,緊湊型PCD主要用于實(shí)心器材、簡單的腔體器材和輔料類物品滅菌效果的監(jiān)測 螺旋型PCD主要用于低溫滅菌技術(shù)中對(duì)管腔類物品滅菌效果的監(jiān)測,衛(wèi)生部醫(yī)院消毒供應(yīng)中心滅菌效果監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)（已通過專家評(píng)審）中規(guī)定： 滅菌管腔類器械宜進(jìn)行管腔PCD監(jiān)測； 生物監(jiān)測每周一次可使用生物PCD或一次性標(biāo)準(zhǔn)生物測試包; 小型滅菌器因無標(biāo)準(zhǔn)生物測試包，可使用PCD。,4. 消毒劑濃度測試卡,戊二醛濃度濃度測試卡 含氯消毒劑濃度測試卡 過氧乙酸濃度測試卡 二氧化氯濃度

32、測試卡 鄰苯二甲醛濃度測試卡（強(qiáng)生、鍵之素牌）,2%戊二醛濃度測試卡,適用于1.8%-2.2%戊二醛消毒劑最低有效濃度的檢測。 根據(jù)接觸規(guī)定濃度的戊二醛后測試卡是否由白色變?yōu)榫鶆虻狞S色來檢測戊二醛的含量。 國內(nèi)首家研制生產(chǎn)，有包裝專利。（單片獨(dú)立真空包裝，避免交叉污染）。,有效氯濃度試紙,適用于含氯消毒劑有效氯含量的檢測。 測試范圍有效氯含量為20mg/L-1000mg/L。 根據(jù)接觸規(guī)定濃度的有效氯，試紙變色情況，檢測含氯消毒劑的有效氯含量。,過氧乙酸濃度測試卡,濃度范圍0.52000mg/L,二氧化氯濃度測試卡,標(biāo)準(zhǔn)比色卡范圍：5ppm-10ppm -30ppm-50ppm-100ppm-

33、200ppm -300ppm-500ppm二氧化氯殘留濃度范圍：0.2-10ppm反應(yīng)顏色為淺藍(lán)藍(lán)色 深藍(lán)藍(lán)黑-到黑色 反應(yīng)顏色容易比對(duì)。,鄰苯二甲醛濃度檢測卡,美國強(qiáng)生公司Cidex OPA濃度測試條 健之素牌鄰苯二甲醛濃度檢測卡I型 北京長江脈醫(yī)藥科技有限責(zé)任公司,5. 中和劑,定義： 在微生物殺滅試驗(yàn)中，用以消除試驗(yàn)微生物與消毒劑的混懸液中和微生物表面上殘留的消毒劑，使其失去對(duì)微生物抑制和殺滅作用的試劑。,中和劑鑒定試驗(yàn)方法,中和劑對(duì)消毒劑的中和作用,中和劑鑒定試驗(yàn)的目的,在消毒劑殺菌試驗(yàn)中,消毒劑除對(duì)微生物具有殺滅作用外，也具有一定抑制作用,為了正確判斷其殺菌效果,必須排除殘留消毒劑對(duì)

34、微生物的抑制作用, 從而使其在復(fù)蘇培養(yǎng)基中生長繁殖，獲得正確試驗(yàn)結(jié)果。,理想的中和劑的條件,1. 能有效地中和相應(yīng)的消毒劑。 2.中和作用迅速。 3.中和劑及其與消毒劑的中和產(chǎn)物對(duì)微生物無不良影響。 4.中和劑與消毒劑不應(yīng)有協(xié)同殺菌作用。 5.對(duì)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分無破壞作用，不與培養(yǎng)基形成對(duì)微生物有害的產(chǎn)物，不影響培養(yǎng)基的透明度。,常用中和劑配方,季銨鹽 類消毒劑的中和劑 吐溫80 30ml 皂角苷 1g 組氨酸 1g 色氨酸 1g 0.03moLPBS 至 1L,常用中和劑配方,葡萄糖酸氯己定類消毒劑的中和劑 吐溫80 30ml 卵磷脂 3g 組氨酸 1g 0.03moLPBS 至 1L,常

35、用中和劑配方,PVP碘伏或含氯類消毒劑的中和劑 吐溫80 30ml 卵磷脂 3g 組氨酸 1g 硫代硫酸鈉 1g 牛血清白蛋白 lyophilized 1g 0.03moLPBS 至 1L,常用中和劑配方,酚類消毒劑的中和劑 吐溫80 30ml 卵磷脂 3g 組氨酸 1g 硫代硫酸鈉 5g 0.03moLPBS 至 1L,6. 采樣液,含0.1%吐溫80的0.03mol/L磷酸鹽緩沖液 含0.1%吐溫80的生理鹽水 含相應(yīng)中和劑的0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水 壓力蒸汽滅菌后備用,7. 規(guī)格板和棉拭子,規(guī)格板 內(nèi)框面積為55cm的不銹鋼框 棉拭子 脫脂棉纏牢竹棒，脫脂棉直徑大于0.5

36、cm，長度大于2. 0 cm,二、醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測方法,采樣方法:直接用平板采樣、用棉簽采樣、用沖洗過濾器采樣 培養(yǎng)方法：培養(yǎng)基、接種方法、培養(yǎng)溫度時(shí)間、結(jié)果記錄、結(jié)果評(píng)價(jià),（一）采樣方法（主要依據(jù)GB15982-2012醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)）,器材 1.采樣器：選擇六級(jí)撞擊式空氣采樣器 2.平板：普通營養(yǎng)瓊脂平板(90mm) 3.規(guī)格板:內(nèi)框面積為55cm的不銹鋼框 4.保溫箱：內(nèi)有制冷劑的保溫箱 5.采樣液或洗脫液： 無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水或含相應(yīng)中和劑的0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水,（一）采樣方法,6.棉拭子：脫脂棉纏牢竹棒，脫脂棉直徑 大于0.5cm，

37、長度大于1. 0 cm 壓力蒸汽滅菌后備用 7.無菌注射器:100ml注射器 8.無菌試管：18180mm 9.無菌吸管 1ml、5ml、10ml 10.三角燒瓶 250ml、500ml,采樣操作方法1.空氣采樣,（1）采樣時(shí)間 類環(huán)境在潔凈系統(tǒng)自凈后與從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣；、類環(huán)境在消毒或規(guī)定的通風(fēng)換氣后與從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣。 （2）采樣方法 類環(huán)境選擇空氣采樣器法，采樣時(shí)，將六級(jí)撞擊式空氣采樣器置于室內(nèi)中央0.8m1.5m高度，按采樣器使用說明書操作，每次采樣時(shí)間不應(yīng)超過30min。房間大于10m2者，每增加10m2增設(shè)一個(gè)采樣點(diǎn)。然后蓋上平皿蓋，立即放入保溫箱，及時(shí)送檢。,1.空氣采樣（續(xù)

38、）,、類環(huán)境采用平板暴露法：室內(nèi)面積30m2 ，設(shè)內(nèi)、中、外對(duì)角線3點(diǎn)，內(nèi)、外點(diǎn)應(yīng)距墻壁1m處；室內(nèi)面積30m2，設(shè) 4 角及中央 5 點(diǎn)，4角的布點(diǎn)部位應(yīng)距墻壁1m處。將普通營養(yǎng)瓊脂平板(90mm)放置各采樣點(diǎn)，采樣高度為距地面0.8m1.5m；采樣時(shí)將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露規(guī)定時(shí)間，類環(huán)境暴露15min，、類環(huán)境暴露5min，然后蓋上平皿蓋，立即放入保溫箱，及時(shí)送檢。,2. 物體表面采樣,（1）采樣時(shí)間 潛在污染區(qū)、污染區(qū)消毒后采樣。清潔區(qū)根據(jù)現(xiàn)場情況確定。 （2）采樣面積 被采表面100cm2，取全部表面；被采表面100cm2，取100cm2。 （3）采樣方法 用5cm5cm滅菌

39、規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣14個(gè)規(guī)格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10mL采樣液的試管中送檢。門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體采樣。若采樣物體表面有消毒劑殘留時(shí)，采樣液應(yīng)使用含相應(yīng)中和劑的采樣液。,3.醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生采樣,（1）采樣時(shí)間 手衛(wèi)生后，在接觸病人或從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣。 （2）采樣面積 取雙手指曲面從指跟到指端來回涂擦各兩次，按一只手涂擦面積平均約30cm2 （3）采樣方法 將浸有采樣液（若采樣時(shí)手上有消毒劑殘留，采樣液應(yīng)含相應(yīng)中和劑）的棉拭子

40、一支在雙手指曲面從指跟到指端來回涂擦各兩次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣棉拭子，然后以無菌操作方式，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有10mL采樣液的試管內(nèi)，立即放入保溫箱，及時(shí)送檢。,4.醫(yī)療器材采樣,（1）采樣時(shí)間 在消毒或滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣 （2）采樣面積 可用破壞性方法取樣的，如一次性輸液（血）器、注射器和注射針等按照中華人民共和國藥典無菌檢查法采樣 不可用破壞性方法取樣的，不能用破壞性方法取樣的醫(yī)療器材，取全部表面或不少于100cm2；,（3）滅菌醫(yī)療器材采樣方法,可用破壞性方法取樣的，如一次性輸液（血）器、注射器和注射針等按照中華人民共和國藥典無菌檢查法進(jìn)行。 對(duì)不能用破壞性方法取樣的，

41、應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子在被檢物體表面涂抹，采樣取全部表面或不少于100cm2；然后以無菌操作方式，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有10mL采樣液的試管內(nèi)，立即放入保溫箱內(nèi)，及時(shí)進(jìn)行無菌檢查（消毒技術(shù)規(guī)范2.1.9.2） 。,（4）牙科手機(jī)采樣： 應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中，將每支手機(jī)分別置于含20mL25mL采樣液的無菌大試管（內(nèi)徑25mm）中，液面高度應(yīng)大于4.0cm，于旋渦混合器上洗滌震蕩30s以上，及時(shí)進(jìn)行無菌檢查（消毒技術(shù)規(guī)范2.1.9.2）。,

42、（5）消毒醫(yī)療器材采樣 可整件放入無菌試管的，用洗脫液浸沒后振蕩30s以上。 可用破壞性方法取樣的，在100級(jí)潔凈工作臺(tái)稱取1g 10g樣品，放入裝有10mL采樣液的試管內(nèi)進(jìn)行振蕩洗脫。 對(duì)不能用破壞性方法取樣的醫(yī)療器材，在100級(jí)潔凈實(shí) 驗(yàn)室或工作臺(tái)，用浸有采樣液的棉拭子在被檢物體表面涂 抹采樣，全部表面（小于100cm2）或取100cm2 （大于 100cm2） ，然后以無菌操作方式，剪去手接觸部位，將棉 拭子放入裝有10mL采樣液的試管內(nèi)進(jìn)行振蕩洗脫。,（6）消毒后內(nèi)鏡采樣 取清洗消毒后內(nèi)鏡，用無菌注射器抽取50mL含相應(yīng)中和劑的洗脫液，以無菌操作方式，從活檢口注入沖洗內(nèi)鏡管路，用100

43、ml大試管在活檢通道出口全量收集洗脫液振蕩混勻，然后進(jìn)行檢測。,（7）使用中的消毒液染菌量檢查采樣方法 采樣時(shí)間 正在使用的消毒劑 用無菌吸管按無菌操作方法吸取1.0mL使用中的消毒劑，加入到含9mL相應(yīng)中和劑的試管中。,（8）醫(yī)院污水采樣方法按GB 18466 規(guī)定 采樣時(shí)間 消毒前后 采樣量 至少500ml 用滅菌刻度量杯接取污水500ml加入到2個(gè)500ml滅菌三角瓶中，若樣品為經(jīng)過氯消毒的污水，應(yīng)在采樣后立即加入終濃度為0.1硫代硫酸鈉溶液充分中和余氯，立即放入保溫箱，及時(shí)送檢。,（二）接種與培養(yǎng)方法,用平板采樣的，或自含式生物指示物直接放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 用棉簽采樣的，分別取1ml振蕩

44、洗脫后樣液，以傾注法接種2個(gè)平皿，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 直接采的液體樣品（如醫(yī)院污水等），振蕩混勻，分別取1ml樣液，以傾注法接種2個(gè)平皿，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 需要過濾的，用細(xì)菌過濾器過濾后，將濾膜有菌面朝上，貼于平板表面。 對(duì)滅菌效果進(jìn)行無菌檢驗(yàn)，按消毒技術(shù)規(guī)范2.1.9.2 無菌檢驗(yàn)試驗(yàn)進(jìn)行。,無菌檢驗(yàn),實(shí)驗(yàn)器材：需氧-厭氧菌培養(yǎng)基 無菌試驗(yàn)用真菌培養(yǎng)基 無菌檢驗(yàn)用洗脫液 實(shí)驗(yàn)室要求：百級(jí)潔凈實(shí)驗(yàn)室或百級(jí)層流潔凈臺(tái)。 對(duì)室內(nèi)地板、桌面和實(shí)驗(yàn)臺(tái)面擦拭消毒，將試驗(yàn)用的培養(yǎng)基、洗脫液、供試品及其他需用器材 擺放好后，開啟紫外線燈消毒1h。 人員要求：穿戴無菌隔離衣，無菌帽子、口罩、鞋，用75%乙醇消毒

45、雙手，戴無菌手套。,無菌檢驗(yàn)采樣方法,輔料、手術(shù)衣等非管道類樣本，取兩個(gè)包裝，于不同部位剪取1cm3cm的樣片21片，每片放于一支含40ml培養(yǎng)基的試管中； 輸液（血）器等管腔類樣本，在7個(gè)最小包裝中各選1支為樣本，以無菌注射器吸取510ml洗脫液注入管腔內(nèi)，往返搖蕩5次，作為試驗(yàn)樣本； 注射針、針灸針、縫合針、棉簽等樣本直接放入試管中； 注射器吸取采樣液，將注射器芯拉到全程，振搖5次； 其他樣本用無菌棉試子涂抹法采樣，涂采面積不少于25cm2,無菌檢驗(yàn),以上樣本各接種5支需氧-厭氧菌培養(yǎng)基試管中和2支真菌培養(yǎng)基試管中，5ml以上注射器和輔料類的培養(yǎng)基為40ml，其余樣本均為15ml，在其中一

46、支需氧-厭氧菌培養(yǎng)管中加入1ml金黃色葡萄球菌作為陽性對(duì)照。 試驗(yàn)開始前，取需氧-厭氧菌培養(yǎng)管和真菌培養(yǎng)管各1支，打開試管帽置實(shí)驗(yàn)臺(tái)上直至實(shí)驗(yàn)完畢，作為陰性對(duì)照。 將陰性、陽性對(duì)照與試驗(yàn)樣品一同培養(yǎng)，需氧-厭氧菌培養(yǎng)管置30-35培養(yǎng)5d，真菌培養(yǎng)管20-25培養(yǎng)7d；除陽性對(duì)照管外，樣本管、陰性對(duì)照管均無菌生長為滅菌合格。,內(nèi)鏡消毒洗脫樣品的接種,將洗脫液充分混勻，取洗脫液1.0mL接種平皿，將冷至4045的熔化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15mL20mL，搖勻，凝固后放361恒溫箱培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)（cfu/件）。將剩余洗脫液在無菌條件下采用濾膜（0.45m）過濾，將濾膜有菌面朝上接種于凝固

47、的營養(yǎng)瓊脂平板上（注意不要產(chǎn)生氣泡），置 361溫箱培養(yǎng) 48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。,內(nèi)鏡室用水污染情況,多酶洗液清洗后 EOW消毒后 “無菌水”沖洗后,培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間,培養(yǎng)基 對(duì)細(xì)菌繁殖體和芽孢，使用胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用于消毒效果監(jiān)測；胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（TSB）或營養(yǎng)肉湯用于滅菌效果監(jiān)測。 對(duì)真菌，使用沙堡瓊脂培養(yǎng)基 或沙堡液體培養(yǎng)基 。 對(duì)嗜熱脂肪桿菌芽孢，使用溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基。,培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間,對(duì)細(xì)菌繁殖體，監(jiān)測消毒效果，溫度361，分別培養(yǎng)48h 對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢，監(jiān)測消毒或滅菌效果，溫度361，分別培養(yǎng)72h或7天

48、對(duì)真菌，監(jiān)測消毒效果，溫度251，培養(yǎng)7天 （GB15979-2002一次性使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)） 對(duì)嗜熱脂肪桿菌芽孢，監(jiān)測滅菌效果56，培養(yǎng)7天。 對(duì)自含式生物指示物，按廠家說明書進(jìn)行。,結(jié)果的判定空氣消毒效果評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),醫(yī)務(wù)人員手消毒評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),衛(wèi)生手消毒后醫(yī)務(wù)人員手表面的菌落總數(shù)應(yīng)10cfu/cm2 外科手消毒后醫(yī)務(wù)人員手表面的菌落總數(shù)應(yīng) 5cfu/cm2,醫(yī)療器材消毒滅菌效果評(píng)價(jià),高度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材應(yīng)無菌。 中度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材的菌落總數(shù)應(yīng)20cfu/件 （cfu/g或cfu/100cm2），不得檢出致病性微生物。 低度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材的菌落總數(shù)應(yīng)200cfu/件 （cfu/g或cfu/100cm2）

49、，不得檢出致病性微生物。,使用中的消毒劑微生物污染測定,使用中消毒液的有效濃度應(yīng)符合使用要求；連續(xù)使用的消毒液每天使用前應(yīng)進(jìn)行有效濃度的監(jiān)測。 滅菌用消毒液的菌落總數(shù)應(yīng)為0cfu/mL； 皮膚黏膜消毒劑的菌落總數(shù)為：完整皮膚的消毒劑菌落總數(shù)應(yīng)50cfu/mL；霉菌和酵母菌10cfu/mL；不得檢出致病菌。破損皮膚的消毒劑應(yīng)無菌。 其他使用中消毒液的菌落總數(shù)應(yīng)100cfu/mL，不得檢出致病性微生物。,醫(yī)院污水處理,污水排放應(yīng)符合GB 18466 要求。 醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水排放標(biāo)準(zhǔn)值,三、其他監(jiān)測方法,（一）使用各種指示物和測定儀監(jiān)測滅菌效果的方法（二）紫外線強(qiáng)度檢測方法 （三）ATP的檢測方法 （四

50、）使用各種消毒劑有效濃度測試卡檢測消毒劑濃度的方法,（一）使用各種指示物和測定儀監(jiān)測滅菌效果的方法WS310.3-2009醫(yī)院消毒供應(yīng)中心第3部分：清洗消毒及滅菌效果監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn),1. 壓力蒸汽滅菌的監(jiān)測 物理監(jiān)測法：每次滅菌應(yīng)連續(xù)監(jiān)測并記錄滅菌時(shí)的溫度、壓力和時(shí)間等滅菌參數(shù)。溫度波動(dòng)范圍在3以內(nèi)，時(shí)間滿足最低滅菌時(shí)間的要求，同時(shí)應(yīng)記錄所有臨界點(diǎn)的時(shí)間、溫度與壓力值，結(jié)果應(yīng)符合滅菌的要求。,化學(xué)監(jiān)測法 應(yīng)進(jìn)行包外、包內(nèi)化學(xué)指示物監(jiān)測。具 體要求為滅菌包包外應(yīng)有化學(xué)指示物，高度危險(xiǎn)性物品包內(nèi)應(yīng)放置包內(nèi)化學(xué)指示物，置于最難滅菌的部位。如果透過包裝材料可直接觀察包內(nèi)化學(xué)指示物的顏色變化，則不必放置包外化

51、學(xué)指示物。通過觀察化學(xué)指示物顏色的變化，判定是否達(dá)到滅菌合格要求。 采用快速壓力蒸汽滅菌程序滅菌時(shí)，應(yīng)直接將一片 包內(nèi)化學(xué)指示物置于待滅菌物品旁邊進(jìn)行化學(xué)監(jiān)測。,生物監(jiān)測法 應(yīng)每周監(jiān)測一次，具體監(jiān)測方法為：將生 物指示物置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包的中心部位。標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包由16條 41cm66cm的全棉手術(shù)巾制成。制作方法：將每條手術(shù)巾 的長邊先折成3層，短邊折成2層，然后疊放，制成23cm 23cm15cm大小的測試包。經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，在無 菌條件下取出標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄 糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，經(jīng)561培養(yǎng)7d(自含式生物指 示物按產(chǎn)品說明書執(zhí)行)，觀察培養(yǎng)結(jié)果。 結(jié)果判定: 陽性對(duì)照組

52、培養(yǎng)陽性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，試 驗(yàn)組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。,緊急情況滅菌植入型器械時(shí)，可在生物PCD中加用5類化學(xué)指示物。5類化學(xué)指示物合格可作為提前放行的標(biāo)志，生物監(jiān)測的結(jié)果應(yīng)及時(shí)通報(bào)使用部門。 B-D 試驗(yàn) 預(yù)真空（包括脈動(dòng)真空）壓力蒸汽滅菌器 應(yīng)每日開始滅菌運(yùn)行前進(jìn)行。 B-D測試，B-D測試合格后，滅菌器方可使用。B-D測試失敗，應(yīng)及時(shí)查找原因進(jìn)行改進(jìn)，監(jiān)測合格后，滅菌器方可使用。,2.干熱滅菌的監(jiān)測 物理監(jiān)測法：每滅菌批次應(yīng)進(jìn)行物理監(jiān)測。監(jiān)測方法為將 多點(diǎn)溫度檢測儀的多個(gè)探頭分別放于滅菌器各層內(nèi)、中、外各點(diǎn)，關(guān)好柜門，由記錄儀中觀察溫度上升與持續(xù)時(shí)間。溫度在設(shè)定時(shí)間內(nèi)均達(dá)到預(yù)置

53、溫度，則物理監(jiān)測合格。 化學(xué)監(jiān)測法：每一滅菌包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示物，每一 滅菌包內(nèi)應(yīng)使用包內(nèi)化學(xué)指示物，并置于最難滅菌的部位。對(duì)于未打包的物品，應(yīng)使用一個(gè)或者多個(gè)包內(nèi)化學(xué)指示物，放在待滅菌物品附近進(jìn)行監(jiān)測。經(jīng)過一個(gè)滅菌周期后取出，據(jù)其顏色的改變判斷是否達(dá)到滅菌要求。,生物監(jiān)測法：應(yīng)每周監(jiān)測一次，將枯草桿菌芽孢菌片 分別裝入無菌試管內(nèi)（1片/管）。滅菌器與每層門把手 對(duì)角線內(nèi)，外角處放置2個(gè)含菌片的試管，試管帽置于試 管旁，關(guān)好柜門，經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，待溫度降至80 時(shí)，加蓋試管帽后取出試管。在無菌條件下，加入普通 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（5ml/管），361培養(yǎng)48h，觀察 初步結(jié)果，無菌生長管繼續(xù)

54、培養(yǎng)至第7日。 結(jié)果判定：陽性對(duì)照組培養(yǎng)陽性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰 性，若每個(gè)指示菌片接種的肉湯管均澄清，判為滅菌合 格；監(jiān)測方法見附錄B。,3.環(huán)氧乙烷滅菌的監(jiān)測 物理監(jiān)測法：每次滅菌應(yīng)連續(xù)監(jiān)測并記錄滅菌時(shí)的溫 度、壓力和時(shí)間等滅菌參數(shù)。滅菌參數(shù)符合滅菌器的使用說明或操作手冊(cè)的要求。 化學(xué)監(jiān)測法：每個(gè)滅菌物品包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示 物,作為滅菌過程的標(biāo)志；每包內(nèi)最難滅菌位置放置包內(nèi)化學(xué)指示物，通過觀察其顏色變化，判定其是否達(dá)到滅菌合格要求。,生物監(jiān)測法：每滅菌批次應(yīng)進(jìn)行生物監(jiān)測，監(jiān)測方法 為：用枯草桿菌黑色變種芽孢置于常規(guī)生物測試包內(nèi)， 對(duì)滅菌器的滅菌質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)測。常規(guī)生物測試包放在滅 菌器最難

55、滅菌的部位（整個(gè)裝載滅菌包的中心部位）。 滅菌周期完成后應(yīng)立即將生物指示物從被滅菌物品中取 出，36 1培養(yǎng)7d(自含式生物指示物應(yīng)遵循產(chǎn)品說 明)，觀察培養(yǎng)基顏色變化。 結(jié)果判定：陽性對(duì)照組 培養(yǎng)陽性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陰性，判 定為滅菌合格,4.過氧化氫等離子滅菌的監(jiān)測 物理監(jiān)測法 每次滅菌應(yīng)連續(xù)監(jiān)測并記錄每個(gè)滅菌周期 的臨界參數(shù)如艙內(nèi)壓、溫度、過氧化氫的濃度、電源輸入和滅菌時(shí)間等滅菌參數(shù)。滅菌參數(shù)符合滅菌器的使用說明或操作手冊(cè)的要求。 化學(xué)監(jiān)測法 每個(gè)滅菌物品包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示物, 作為滅菌過程的標(biāo)志；每包內(nèi)最難滅菌位置放置包內(nèi)化學(xué)指示物，通過觀察其顏色變化，判定其是否達(dá)

56、到滅菌合格要求。 生物監(jiān)測法 應(yīng)每天至少進(jìn)行一次滅菌循環(huán)的生物監(jiān)測，監(jiān) 測方法應(yīng)符合國家的有關(guān)規(guī)定。,5.低溫甲醛蒸汽滅菌的監(jiān)測 物理監(jiān)測法 每滅菌批次應(yīng)進(jìn)行物理監(jiān)測。詳細(xì)記錄滅 菌過程的參數(shù)，包括滅菌溫度、濕度、壓力與時(shí)間。滅菌參數(shù)符合滅菌器的使用說明或操作手冊(cè)的要求。 化學(xué)監(jiān)測法 每個(gè)滅菌物品包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示物 ,作為滅菌過程的標(biāo)志；每包內(nèi)最難滅菌位置放置包內(nèi)化學(xué)指示物，通過觀察其顏色變化，判定其是否達(dá)到滅菌合格要求。 生物監(jiān)測法 應(yīng)每周監(jiān)測一次，監(jiān)測方法應(yīng)符合國家的 有關(guān)規(guī)定。,（二）紫外線強(qiáng)度檢測方法,紫外線輻照強(qiáng)度檢測時(shí)，對(duì)室內(nèi)環(huán)境 的要求：電壓為220V5V，溫度為2025，

57、相對(duì)濕度為 60%。 輻射照度測定 使用中的燈管，可在原裝置處進(jìn)行測定。測定位置在燈管下方垂直距離1m 的中心處。使用中30W普通直管型紫外線燈管的輻射照度值應(yīng)不低于 70 W/cm2，低于此值者應(yīng)予更換。,可同時(shí)檢測紫外線燈管,（三）ATP法測定方法1.清洗效果,使用后、清洗后和消毒后的采樣液（50ml裝在100ml的玻璃試管里），在手心拍打均勻，用移液器吸取50微升的樣液，置入微試管中，然后吸入50微升裂解液，輕輕拍打，5-10s后加入400微升的熒光素酶，放入儀器中讀值為M1，然后加入10微升的ATP標(biāo)準(zhǔn)品，讀值為M2，由儀器自動(dòng)計(jì)算出ATP的amol值。,樣品ATP的計(jì)算,例如，ATP

58、標(biāo)準(zhǔn)品為1015amol，10微升的標(biāo)準(zhǔn)品中含有ATP量為1010amol（10151010-6=1010amol），對(duì)應(yīng)的RLU(相對(duì)吸光度值)為100RLU。當(dāng)測試的樣品測得的吸光度值為50RLU時(shí)，對(duì)應(yīng)樣品中ATP的含量為： X1010 50100=X1010 X=0.51010 amol 注：amol=10-18mol,ATP檢測試劑,關(guān)于清洗效果的合格標(biāo)準(zhǔn),ATP 測定方法目前尚無標(biāo)準(zhǔn)，正在制定過程中 可能考慮為2000amol/件？,2.ATP法測定細(xì)菌含量 ATP消除劑,ATP水解酶,細(xì)胞裂解液 即水解酶稀釋液,細(xì)菌外ATP消除劑,ATP消去劑（又稱體細(xì)胞消去劑）能夠裂解非細(xì)菌的

59、細(xì)胞， 并水解非細(xì)菌產(chǎn)生的游離ATP，消除細(xì)菌外ATP的干擾,待檢測樣品,器械表面可能殘留含ATP的細(xì)菌、 細(xì)胞以及游離的ATP，用消去劑 消除細(xì)菌外的ATP對(duì)檢測結(jié)果的影響,采樣及并消除非細(xì)菌細(xì)胞產(chǎn)生的ATP,3、采樣拭子放回試管，與ATP消除劑混合靜置10分鐘,1、試管中加細(xì)菌外ATP消除劑，并將潤濕拭子,細(xì)菌ATP,ATP水解酶,細(xì)菌外ATP,采樣及靜置過程中，ATP消除劑裂解非細(xì)菌的細(xì)胞，并水解細(xì)菌外的游離ATP；細(xì)菌ATP受到細(xì)胞壁的保護(hù)，免受水解,細(xì)菌裂解,細(xì)菌裂解液,不含游離ATP的拭子,細(xì)菌ATP,失活的ATP水解酶,被消除劑處理后不含游離ATP的拭子用細(xì)菌裂解液浸潤； 細(xì)菌裂解液在中和ATP水解酶同時(shí)，將細(xì)菌