1、單選題雙選題 20分名詞解釋 53分 英+漢簡答題 35分論述題 1(2)10( + )分A 細胞與大分子1 分泌蛋白的糖基化作用發(fā)生在（ C ）A線粒體 B過氧化物酶體 C內(nèi)質(zhì)網(wǎng) D核2 以下哪一個是核蛋白（ B ）A角蛋白 B染色質(zhì) C組蛋白 D蛋白聚糖3以下哪一個不是多糖（ D ）A幾丁質(zhì) B支鏈淀粉 C黏多糖 D甘油4 跨膜蛋白（ B ） A將兩個脂雙層連接一起 B有胞內(nèi)和胞外結(jié)構(gòu)域 C完全包埋在膜內(nèi) D很容易從膜上去除下來5 名詞解釋：微體、核蛋白。微體（microbody或cytosome）是一些由單層膜包圍的小體。它的大小、形狀與溶酶體相似，二者區(qū)別在于含有不同的酶。微體內(nèi)含有氧

2、化酶和過氧化氫酶類。在植物細胞里，還存在另一種過氧化物酶體，進行乙醛酸循環(huán)，稱為乙醛酸循環(huán)體。根據(jù)微體內(nèi)含有的酶的不同可以將微體分為溶酶體、過氧化物酶體和乙醛酸循環(huán)體。核蛋白（nuclear protein）是指在細胞質(zhì)內(nèi)合成，然后運輸?shù)胶藘?nèi)起作用的一類蛋白質(zhì)，由核酸與蛋白質(zhì)組成。如核糖體、染色質(zhì)。病毒也是一種核蛋白復(fù)合體。6 簡答：真核與原核生物核糖體的主要區(qū)別？原核生物的核糖體較小，沉降系數(shù)為70S，相對分子質(zhì)量為2.5MDa，由50S（23S rRNA、5S rRNA和31種蛋白質(zhì)）和30S（16S rRNA和21種蛋白質(zhì)）兩個亞基組成；而真核生物的核糖體體積較大，沉降系數(shù)是80S，相對

3、分子質(zhì)量為3.94.5MDa，由60S（28S rRNA、5.8S rRNA、多種5S rRNA和約33種蛋白質(zhì)）和40S（18S rRNA和約49種蛋白質(zhì)）兩個亞基組成。典型的原核生物大腸桿菌核糖體是由一個50S大亞基和一個30S小亞基組成的。B 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)1 以下哪一個是亞氨基酸（ A ） A 脯氨酸 B 羥賴氨酸 C 色氨酸 D 組氨酸2 以下哪一個不是蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)（ C ） A -螺旋 B 三股螺旋 C 雙螺旋 D -折疊片3 在等電聚焦電泳中蛋白質(zhì)按（ A ）分離 A pH梯度 B 鹽梯度 C 密度梯度 D 溫度梯度4 Edman降解法（ D ）對多肽進行測序 A 用一段cDNA

4、測序 B 按照質(zhì)量 C 從C端到N端 D 從N端到C端5 名詞解釋：抗原決定部位或表位抗原表位（antigenic determinant，AD）是決定抗原性的特殊化學(xué)基團，是由58個氨基酸組成的短序列。大多存在于抗原物質(zhì)的表面，有些存在于抗原物質(zhì)的內(nèi)部，須經(jīng)酶或其他方式處理后才暴露出來。6 簡述蛋白質(zhì)的功能蛋白質(zhì)具有廣泛的功能： 酶可催化絕大多數(shù)生化反應(yīng)，底物的結(jié)合取決于特異的非共價相互作用； 當與配體結(jié)合時，膜受體蛋白將信號傳入細胞內(nèi)部； 轉(zhuǎn)運和儲存，如血紅蛋白在血液中轉(zhuǎn)運氧、鐵蛋白在肝臟內(nèi)儲存鐵； 膠原和角蛋白是重要的結(jié)構(gòu)蛋白，肌動蛋白和肌球蛋白構(gòu)成有收縮力的肌肉纖維； 酪蛋白和卵清蛋白

5、是為生長提供氨基酸的營養(yǎng)蛋白； 免疫系統(tǒng)依賴抗體蛋白抵御感染； 調(diào)節(jié)蛋白（如轉(zhuǎn)錄因子）具有結(jié)合并調(diào)節(jié)其他分子（如DNA）的功能。7 在蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)中，維持空間構(gòu)象穩(wěn)定的力都有哪些？蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)（Quaternary structure）是具有三級結(jié)構(gòu)的各條多肽鏈之間，相互作用所形成的，更為復(fù)雜的聚合物的一種結(jié)構(gòu)形式，主要描述蛋白質(zhì)亞基空間排列，以及亞基之間的連接和相互作用，不涉及亞基內(nèi)部結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)亞基之間主要通過疏水作用、氫鍵、離子鍵等作用力形成四級結(jié)構(gòu)，其中最主要的是疏水作用。C 核酸的性質(zhì)1 DNA中的一段5-AGTCTGACT-3序列等同于RNA中的哪一片段？（ A ） A 5

6、-AGUCUGACU-3 B 5-UGTCTGUTC-3 C 5-UCAGUCGUA-3 D 5-AGUCAGACU-32 以下哪一個是對A-DNA的正確描述（ C ） A是右手反向平行雙螺旋，每圈10個堿基，堿基平面與螺旋軸垂直。 B是左手反向平行雙螺旋，每圈12個堿基，有交替的嘌呤-嘧啶序列形成。 C是右手反向平行雙螺旋，每圈11個堿基，堿基的朝向與螺旋軸有關(guān)。 D是球狀結(jié)構(gòu)，由單鏈核酸中形成的短的分子內(nèi)螺旋構(gòu)成。3雙鏈DNA變性涉及（ B ） A斷裂為短的雙鏈片段 B 分開成為單鏈C DNA骨架分解 D 堿基從戊糖-磷酸骨架上分離下來4 以下哪一個在260 nm波長下具有最大單位質(zhì)量吸收

7、（ B ） A 雙鏈DNA B單核苷酸 C RNA D 蛋白質(zhì)5 型DNA拓撲異構(gòu)酶（ C ） A 使連接數(shù)改變2 B 需要TAP C 將DNA雙螺旋中的一條鏈打斷 D 是抗生素類藥物的靶向6 簡述DNA的A、B、Z型雙螺旋結(jié)構(gòu)特點。一般將沃森和克里克提出的雙螺旋構(gòu)型稱為B-DNA。B-DNA是DNA在生理狀態(tài)下的構(gòu)型?；罴毎袠O大多數(shù)DNA以B-DNA形式存在。但當外界環(huán)境條件發(fā)生變化時，DNA的構(gòu)型也會發(fā)生變化。當DNA在低溫條件下，則以A-DNA形式存在。A-DNA是DNA的脫水構(gòu)型，它也是右手螺旋。A-DNA比較寬而緊密，大溝深而窄，小溝寬而淺。在體內(nèi)DNA并不以A構(gòu)型存在，但細胞內(nèi)D

8、NA-RNA或RNA-RNA雙螺旋結(jié)構(gòu)，卻與A-DNA非常相似。還有某些DNA序列可以以左手螺旋的形式存在，稱為Z-DNA。當某些DNA序列富含G-C，并且在嘌呤和嘧啶交替出現(xiàn)時，可形成Z-DNA。但Z-DNA不是體內(nèi)DNA的主要形式。A-DNA、B-DNA和Z-DNA的主要結(jié)構(gòu)特點A-DNAB-DNAZ-DNA螺旋方向右手右手左手直徑約2.6nm約2.0nm約1.8nm每一轉(zhuǎn)的堿基對數(shù)111012（6個二聚體）每對堿基旋轉(zhuǎn)角度333660（每個二聚體）每對堿基沿螺旋軸上升的距離0.26nm0.34nm0.37nm螺距2.8nm3.4nm4.5nm堿基對相對中心軸的傾斜角度2067大溝窄，深寬

9、，深平坦小溝寬，淺窄，深窄，深糖苷鍵antiantianti (嘧啶)syn (嘌呤)7 RAN 同DNA相比為何極不穩(wěn)定？因為RNA是單鏈結(jié)構(gòu)，而DNA是雙鏈雙螺旋結(jié)構(gòu)，有氫鍵存在，分子內(nèi)作用力較強，所以更穩(wěn)定。其次RNA不穩(wěn)定的主要原因是細胞及外界環(huán)境中有很多RNA酶，RNA極容易被降解掉。D 原核與真核生物的染色體結(jié)構(gòu)1 以下哪一個是大腸桿菌和真核生物染色體的共同之處（ D ） A DNA是環(huán)狀的 B DNA被包裝成核小體 C DNA位于核中 D DNA是負超螺旋 2 由166bpDNA組蛋白八聚體和組蛋白H1組成的復(fù)合體叫做（ D ） A 核小體核心 B 螺線管 C 30nm纖維 D

10、核小體3分裂間期染色體轉(zhuǎn)錄發(fā)生在什么區(qū)域（ C ） A 端粒 B 著絲粒 C 常染色質(zhì) D 異染色質(zhì)4 以下關(guān)于CpG島和甲基化的陳述那個是錯誤的（ A ） A CpG島對DNase有部分抗性 B CpG甲基化是真核生物對CpG突變?yōu)門pG的反應(yīng) C CpG島出現(xiàn)在活性基因啟動子附近 D CpG甲基化伴隨著染色質(zhì)失活5 以下哪個是高度重復(fù)DNA （ C ） A Alu元件 B 組蛋白基因庫 C DNA微衛(wèi)星 D 散在重復(fù)DNA 6 名詞解釋：端粒、衛(wèi)星DNA、RNA編輯、持家基因、染色小體、核小體核心顆粒。端粒：是形成真核生物線性DNA分子末端的特化的序列，由數(shù)以百計的短重復(fù)序列構(gòu)成，這些序列

11、是端粒酶以獨立于正常DNA復(fù)制的機制合成的。它能保護染色體末端免遭降解。衛(wèi)星DNA：是一類高度重復(fù)序列DNA離心后，不同層面的DNA形成了不同的條帶。根據(jù)熒光強度的分析，可以看到在一條主帶以外還有一個或多個小的衛(wèi)星帶。這些在衛(wèi)星帶中的DNA即被稱為衛(wèi)星DNA。真核生物基因組中高度重復(fù)DNA由一些2bp至2030bp的極短序列，以數(shù)千個拷貝的串聯(lián)方式排列。RNA編輯：指在mRNA水平上改變遺傳信息的過程。具體說來，指基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA分子中，由于核苷酸的缺失，插入或置換，基因轉(zhuǎn)錄物的序列不與基因編碼序列互補，使翻譯生成的蛋白質(zhì)的氨基酸組成，不同于基因序列中的編碼信息的現(xiàn)象。持家基因：又稱管家

12、基因，是指所有細胞中均要表達的一類基因，其產(chǎn)物是對維持細胞基本生命活動所必需的，它是一類始終保持著低水平的甲基化并且一直處于活性轉(zhuǎn)錄狀態(tài)的基因。染色小體：當核小體核心顆粒上有H1組蛋白結(jié)合時，用微球菌核酸酶酶解分離出的DNA片段為166bp，由這個166bp的DNA繞在組蛋白八聚體外面形成兩圈超螺旋，并由H1分子在進口處將DNA“鎖定”，這樣的結(jié)構(gòu)稱之為染色小體。核小體核心顆粒加上一個H1分子構(gòu)成染色小體。核小體核心顆粒：由長度為146bp的DNA區(qū)段與各兩分子的H2A、H2B、H3和H4組蛋白八聚體組成。7 原核生物與真核生物基因表達主要區(qū)別？原核生物真核生物RNA聚合酶RNA聚合酶IRNA

13、聚合酶啟動子有有終止子有無前mRNA無有編碼蛋白質(zhì)單/多順反子單順反子mRNA兩端5端磷酸 3端羥基5甲基帽 3polyA尾RBS有無轉(zhuǎn)錄、翻譯同時進行在核內(nèi)轉(zhuǎn)錄，胞質(zhì)內(nèi)翻譯E DNA復(fù)制1一個典型的哺乳動物細胞中復(fù)制子的數(shù)目是（ D ） A 40200 B 400 C 10002000 D 500001000002 原核生物中，后隨鏈的引物是被（ C ）清除的。 A 3-5外切核酸酶 B DNA連接酶 C DNA聚合酶 D DNA聚合酶3 在大腸桿菌復(fù)制起始點處的基本起始蛋白是（ A ） A DnaA B DnaB C DnaC D DnaE4 如果細胞在R點前缺乏有絲分裂劑，它將進入（ D

14、 ）期 A G1 B S C G2 D G05 以下哪一個陳述是正確的（ A ） A一旦細胞與越過R點，細胞分裂就不可避免 B G1細胞周期蛋白-CDK復(fù)合體對Rb的磷酸化是進入S期的關(guān)鍵 C G1細胞周期蛋白-CDK復(fù)合體對E2F的磷酸化是進入S期的關(guān)鍵 D 細胞周期蛋白D1和INK4 p16是腫瘤抑制蛋白6 在真核生物中，常染色體優(yōu)先在（ A ）復(fù)制 A S期早期 B S期中期 C S期晚期 D G 2期7 原核生物的質(zhì)粒如果含有酵母的（ C ）就可以在酵母細胞中復(fù)制 A ORC B CDR C ARS D RNA8簡述原核生物的DNA復(fù)制過程。起 始 復(fù)制是通過起始的速率來調(diào)控的。E.c

15、oli的起始位點位于遺傳基因座oriC，并與細胞膜相連。oriC包含4個9bp的起始因子DnaA蛋白的結(jié)合位點。當DnaB蛋白達到足夠量，即形成由3040個分子構(gòu)成的復(fù)合體，每一個分子結(jié)合1分子ATP，在其周圍的oriC DNA呈纏繞形。該過程需要DNA形成負超螺旋。負超螺旋有助于3個13bp長的富含AT的重復(fù)序列的解鏈，結(jié)果有利于DnaB蛋白的結(jié)合。DnaB是DNA解旋酶，利用ATP水解的能量結(jié)合并解開雙鏈DNA（或RNA），產(chǎn)生的單鏈泡被單鏈結(jié)合蛋白（SSB）所覆蓋，以防止發(fā)生斷裂及重新復(fù)性。DNA引發(fā)酶結(jié)合到DNA上并合成一段短的RNA引物，從而引發(fā)第一個復(fù)制叉的先導(dǎo)鏈的復(fù)制，接下來是雙

16、向復(fù)制。解 旋 親本鏈DNA被DNA解旋酶及單鏈結(jié)合蛋白作用而解旋，產(chǎn)生的正超螺旋對于復(fù)制叉的不斷前進不足，于是被型拓撲異構(gòu)酶，即DNA旋轉(zhuǎn)酶作用引入負超螺旋而得到不斷釋放。延 伸 隨著新形成的復(fù)制叉替代親本鏈的后隨鏈，1個包含DnaB解旋酶和DNA引物酶的引發(fā)體在后隨鏈上合成多個RNA引物，DNA聚合酶全酶的二聚體延伸前導(dǎo)鏈及后隨鏈，亞基聚合DNA，亞基校正新生DNA分子，亞基將聚合酶結(jié)合于DNA。在每一個單體中的其余亞基各不相同，以保證全酶分別在先導(dǎo)鏈上和后隨鏈上合成長的或短的DNA片段。一旦后隨鏈的引物被DNA聚合酶延伸，會由DNA聚合酶I的5-3外切核酸酶活性切去，同時用DNA填補缺口

17、，然后DNA連接酶將后隨鏈上的片段連成一體。終止和分離 E.coli的兩個復(fù)制叉在與復(fù)制起始點成180的復(fù)制終點相遇，相互連鎖的子鏈在DNA拓撲異構(gòu)酶（一種型DNA拓撲異構(gòu)酶）的作用下相分離。9 名詞解釋：特許因子。特許因子：DNA復(fù)制起始所必須的，并在作用后失活的特定蛋白，只有在有絲分裂期核膜解體時才能進入核內(nèi)，防止了復(fù)制完成前的再次起始。F DNA損傷、修復(fù)與重組1 異常重組又被稱為（ B ） A 位點特異性重組 B 轉(zhuǎn)座 C 同源重組 D 轉(zhuǎn)移損傷DNA合成2 在患有（ C ）的個體中缺乏對紫外線誘導(dǎo)DNA損傷的切除修復(fù)A 患遺傳型結(jié)腸癌B Crohn氏癥C 典型的DNA修復(fù)酶缺乏病D

18、DNA修復(fù)酶缺乏病的變型3 名詞解釋：異常重組。異常重組（轉(zhuǎn)座作用）：完全不依賴于序列間的同源性，而使一段較短的DNA序列（如轉(zhuǎn)座子或轉(zhuǎn)座元件）轉(zhuǎn)移進細胞基因組的幾乎任何位置，但在形成重組分子時往往是依賴于DNA復(fù)制而完成重組的過程。G 基因操作1 細菌培養(yǎng)物中某種質(zhì)粒的存在通常用（ B ）來確定 A 藍白顏色篩選 B 在抗生素存在下生長 C 一種限制酶降解 D 瓊脂凝膠電泳2 堿性磷酸酶（ D ） A將雙聯(lián)DNA片段連接起來 B 在DNA的5端加上一個磷酸基團 C 切斷雙聯(lián)DNA D 從DNA的5端脫去一個磷酸基團3 轉(zhuǎn)化是（ A ） A 細菌吸收一個質(zhì)粒 B 細菌表達一個基團 C 細菌吸收

19、一個噬菌體 D 從細菌中分離一個質(zhì)粒4 T4 DNA連接酶（ A ） A需要ATP B將具有相鄰3-磷酸和5-羥基的雙鏈DNA片段連接 C需要NADH D將單鏈DNA連接起來5 在瓊脂糖凝膠電泳中（ D ） A DNA向負極移動 B超螺旋質(zhì)粒泳動的比其帶切口的異構(gòu)體慢 C 大分子比小分子泳動快 D溴化乙錠被用來顯色DNA6 名詞解釋：黏末端、亞克隆、回文序列、單克隆、cDNA文庫黏末端：含有單鏈末端的限制性內(nèi)切核酸酶酶解產(chǎn)物被稱為黏末端，具有突出末端，其特性在于它們可通過單鏈末端的堿基配對，與其他任何具有相同突出序列的末端結(jié)合。亞克隆：將已克隆的DNA片段從一載體向另一載體的轉(zhuǎn)移的過程。回文序

20、列：雙鏈DNA中的一段倒置重復(fù)序列，當該序列的雙鏈被打開后，可形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，這段序列被稱為回文序列。單克隆：帶有重組DNA的宿主細胞的增殖構(gòu)成了一群具有遺傳一致性的個體，稱為單克隆。cDNA文庫：以mRNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當?shù)妮d體（常用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后轉(zhuǎn)化受體菌，則每個細菌含有一段cDNA，并能繁殖擴增，這樣包含著細胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合，稱為該細胞的cDNA文庫。7 作為載體所具有的三大特點？ 具有與特定受體細胞相適應(yīng)的復(fù)制位點或整合位點，能夠在宿主細胞中獨立復(fù)制，并穩(wěn)定地保存； 具有多種單一的限制酶切位點； 具有合適的選擇性標記，分

21、子量小，以提高其裝載能力。H 克隆載體1 藍白篩選被用于（ D ） A 檢測細菌中某一質(zhì)粒的存在 B 提示一個克隆化DNA片段的性質(zhì) C 表示一個克隆化基因 D 檢測質(zhì)粒中某一插入片段的存在2 多克隆位點（ B ） A 含有許多拷貝的克隆化基因 B 是對克隆所用的限制酶的選擇具有靈活性 C 是對克隆所用的生物種類的選擇具有靈活性 D 含有許多拷貝的同一種限制酶切位點3 噬菌體對大腸桿菌的感染一般用（ C ）檢測 A 細菌對某種抗生素的抗性 B 單菌落在瓊脂平板上的生長 C 瓊脂平板上產(chǎn)生裂解細菌區(qū)域 D 細菌DNA的限制性消化4 哪一個載體適用于150kbDNA片段的克隆（ C ） A 質(zhì)粒

22、B 噬菌體 C BAC D YAC5 要在植物中表達一個外源基因，應(yīng)該選用哪個載體（ D ） A桿狀病毒載體 B 反轉(zhuǎn)錄病毒載體 C Yep載體 D T-DNA載體6 名詞解釋：cos位點cos位點：當噬菌體DNA進入細菌細胞后，便迅速通過黏性末端配對形成雙鏈環(huán)狀的DNA分子，這種黏性末端結(jié)合形成雙鏈的區(qū)域稱為cos位點。7 質(zhì)粒、噬菌體、黏粒、BAC、YAC載體最大可分別容納多大DNA片段？優(yōu)缺點各是什么？載體插入的片段大小上限（kb）優(yōu)點缺點質(zhì)粒10具有合適的選擇性標記，分子量小，并穩(wěn)定地保存可能在DNA的純化過程中發(fā)生鏈的斷裂噬菌體23無需體外包裝，轉(zhuǎn)染的效率比質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率高，可通過溶

23、原反應(yīng)整合到宿主基因組包裝過程復(fù)雜，效率不穩(wěn)定，用途沒有質(zhì)粒廣泛黏粒45包含質(zhì)粒的復(fù)制起點、選擇性標記以及噬菌體cos位點，在氨芐青霉素的選擇壓力下擴增噬菌體顆粒包裝過程復(fù)雜，效率不穩(wěn)定BAC載體350穩(wěn)定、容易轉(zhuǎn)化、在大腸桿菌宿主中生長迅速、應(yīng)用標準質(zhì)粒小量制備技術(shù)拷貝數(shù)小，制備難度大YAC載體1000對巨大基因組的大規(guī)模結(jié)構(gòu)進行作圖時很有效克隆的片段在增殖中會丟失部分DNAI 基因文庫與篩選1 以下關(guān)于基因組文庫陳述哪兩個是錯誤的（ A E ） A 基因組文庫是用cDNA制備的 B 包括某種生物所有基因的基因組文庫，必定是代表性文庫 C 若要含有某種生物的所有基因，基因子文庫就必須含有最少

24、的重組子 D DNA必須先被切成適合用于所用的載體的大小 E 真核生物DNA的基因組文庫通常用質(zhì)粒載體2 以下對cDNA克隆步驟的描述哪一個是正確的（ A ） A mRNA的反轉(zhuǎn)錄，第二鏈合成，cDNA末端修飾，連接到載體上 B mRNA制備，用反轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA，用末端轉(zhuǎn)移酶合成第二鏈，連接到載體上 C 用RNA聚合酶合成mRNA，mRNA的反轉(zhuǎn)錄，第二鏈合成，連接到質(zhì)粒上 D 雙鏈cDNA合成，限制酶消化，加接頭，連接到載體上3 以下哪一種方法對于篩選文庫是無效的（ D ） A 用核酸探針對菌落和（或）噬菌體溶出的DNA進行雜交 B 用目標蛋白的抗體篩選表達文庫 C 從其生物活性的表達文

25、庫中篩選克隆 D 用抗體作探針對菌落和（或）噬菌體溶出的DNA進行雜交4 什么是基因組文庫？一個生物體的基因組DNA用限制性內(nèi)切酶部分酶切后，將酶切片段插入到載體DNA分子中，所有這些插入了基因組DNA片段的載體分子的集合體，將包含這個生物體的整個基因組，也就是構(gòu)成了這個生物體的基因組文庫。5 簡述菌落及噬菌斑雜交原理。把基因組中含有特定堿基序列的噬菌體，通過與RNA或DNA雜交，再從多數(shù)噬菌體的噬菌斑中選出的方法。將在瓊脂培養(yǎng)基上形成的噬菌體的噬菌斑，拓印移于硝酸纖維素濾紙上，再用堿處理將噬菌體粒子破壞使DNA變性，然后使之固定于硝酸纖維素濾紙上，再與用放射性同位素標記的特定的RNA或DNA

26、片段進行雜交，通過放射自顯影法來識別含有所需DNA序列的噬菌體的噬菌斑，然后根據(jù)其在硝酸纖維素濾紙上的位置，從原來的瓊脂培養(yǎng)基對應(yīng)位置處中選出與其對應(yīng)的噬菌斑。包括轉(zhuǎn)移，結(jié)合，雜交，檢測，鑒別。J 克隆DNA的分析與應(yīng)用1一個線性DNA片段的一端被100%標記且有3個EcoRI位點，如果該片段被EcoRI部分消化并得到所有可能產(chǎn)生的片段，將會有多少片段被標記，多少片段未被標記？（ A ） A 4, 6 B 4, 4 C 3, 5 D 3, 3酶切片段：被標記：A AB ABC ABCD；未被標記：B BC BCD C CD D2以下關(guān)于PCR的陳述哪一個是錯誤的？（ D ） A PCR循環(huán)包括

27、模板變性，引物退火和核苷酸聚合 B PCR要用熱穩(wěn)定的DNA聚合物 C 理想的PCR引物要長度和G+C含量都相似 D PCR條件的優(yōu)化通常包括鎂離子濃度的變化和聚合溫度的變化 E 如果PCR的效率達到100%，那么在n個循環(huán)之后目標分子將被擴增2n倍3以下關(guān)于基因作圖技術(shù)的陳述哪兩個是正確的（ C D ） A S1核酸酶作圖法確定的是基因中的非轉(zhuǎn)錄區(qū) B 引物延伸法確定的是基因中的非轉(zhuǎn)錄區(qū) C 凝膠阻滯法可以顯示蛋白能否與某一DNA片段結(jié)合并阻滯該片段通過瓊脂糖凝膠的遷移 D DNaseI足跡法確定蛋白結(jié)合到某一DNA片段中的哪一個區(qū)域 E 基因啟動子中DNA序列的功能可以通過將其連接到報道基

28、因下游并分析其表達來確定4關(guān)于誘變技術(shù)的陳述哪一個是錯誤的（ A ） A 外切酶將DNA的一條鏈從5凹端按5-3方向切除 B 外切酶將DNA的一條鏈從3凹端按3-5方向切除 C 在PCR中可以用誘變引物來引入堿基變化 D 可以用誘變引物、單鏈模板和DNA聚合酶來引入堿基變化 E 可用限制酶產(chǎn)生缺失突變5關(guān)于基因克隆的陳述哪一個是錯誤的（ B ） A 可以用克隆來大量表達重組蛋白 B DNA足跡法被用于檢測與DNA結(jié)合的蛋白 C 被克隆的基因可被用于檢測致病基因的攜帶者 D 基因治療是通過將正確的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)以糾正原有的錯誤 E 遺傳修飾生物已被用來生產(chǎn)臨床上有重要用途的蛋白6 簡述PCR原

29、理、特點PCR的基本原理是以擬擴增的DNA分子為模板，以一對分別與模板序列的兩端相互補的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復(fù)制的機制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成，不斷重復(fù)這一過程，即可使目的DNA片段得到擴增。因為新合成的DNA也可以作為模板，因而PCR可使DNA的合成量呈指數(shù)增長。包括變性，引物退火，延伸三步。特點：靈活，時間短，高效，專一性強。靈敏度高，簡便，純度要求低。7 簡述幾種PCR派生技術(shù)復(fù)合PCR：PCR可用于擴增同一反應(yīng)中多個DNA片段，用多套引物。反向PCR：先用限制性內(nèi)切酶消化DNA，然后用連接酶連接環(huán)化，一對背對背的引物可用于從已知序列區(qū)域擴增

30、該圓環(huán)以獲得5到3側(cè)翼區(qū)直到連接的限制位點。cDNA末端快速擴增：RACE(rapid-amplification of cDNA ends)是基于PCR技術(shù)基礎(chǔ)上由已知的一段cDNA片段，通過往兩端延伸擴增從而獲得完整的3端和5端。PCR誘變：將特異突變引入到一特定DNA片段中。定量PCR：在擴增前的樣品中加入已知數(shù)量的相似DNA片段，如含有短的缺失的DNA片段，兩種產(chǎn)物的比例取決于加入的缺失片段數(shù)量，并可算出目標分子的數(shù)量。不對稱PCR：只有一條鏈被擴增。K 原核生物的轉(zhuǎn)錄1以下關(guān)于轉(zhuǎn)錄的陳述哪兩個是正確的（ B D ） A RNA合成按3-5方向進行的 B RNA聚合酶按5-3方向沿DN

31、A有義鏈移動 C RNA聚合酶按5-3方向沿DNA模板鏈移動 D轉(zhuǎn)錄所得到的RNA與模板鏈互補 E RNA聚合酶將核苷酸添加到正在生成的RNA鏈的5端 F RNA聚合酶將脫氧核苷酸添加到正在生成的RNA鏈的5端2以下關(guān)于大腸桿菌RNA聚合酶的陳述哪一個是錯誤的（ B ） A 全酶包括因子 B 核心酶包括因子 C 需要Mg2+才有活性 D 需要Zn2+才有活性3以下哪個陳述是不正確的（ C ） A大腸桿菌RNA聚合酶有兩個亞基 B大腸桿菌RNA聚合酶有一個亞基 C大腸桿菌有一個因子 D大腸桿菌RNA聚合酶亞基被利福平抑制 E利迪鏈菌素可抑制轉(zhuǎn)錄延伸 F發(fā)夾結(jié)構(gòu)是聚陰離子，它可與亞基結(jié)合4以下關(guān)于

32、大腸桿菌轉(zhuǎn)錄的陳述哪一個是正確的？（ E ） A -10序列通常正好位于轉(zhuǎn)錄其實點上游10bp處 B 起始核苷酸通常是G C -35和-10序列間的間隔序列是保守的 D 轉(zhuǎn)錄起始位點后的序列對于轉(zhuǎn)錄效率不重要 E -35和-10序列的距離對于轉(zhuǎn)錄效率非常重要5以下關(guān)于大腸桿菌轉(zhuǎn)錄的陳述哪一個是正確的？（ B ） A RNA聚合酶的核心酶與DNA的結(jié)合是非特異，不穩(wěn)定的 B 因子大大提高了聚合酶對正確啟動子位點的親和力 C 幾乎所有RNA起始位點都由一個嘌呤殘基組成，而且A比G出現(xiàn)的頻率高 D 所有啟動子都被負超螺旋所抑制 E 終止子通常是A-U發(fā)夾結(jié)構(gòu)6名詞解釋：有義鏈、反義鏈、閉合復(fù)合物、開

33、放復(fù)合物有義鏈（編碼鏈）：兩條DNA鏈中有一條無轉(zhuǎn)錄功能的鏈，稱為有義鏈。DNA雙鏈在轉(zhuǎn)錄過程中與轉(zhuǎn)錄形成的mRNA序列相同（T對應(yīng)U）的那條單鏈叫做有義鏈。反義鏈（模板鏈）：基因的DNA雙鏈中，轉(zhuǎn)錄時作為mRNA合成模板的那條單鏈叫做模板鏈或反義鏈。閉合復(fù)合物：聚合酶與處于堿基配對狀態(tài)的啟動子DNA所形成的最初的復(fù)合物。開放復(fù)合物：DNA的初始解旋導(dǎo)致DNA與聚合酶形成開放復(fù)合物。7舉例說明原核生物的轉(zhuǎn)錄過程。轉(zhuǎn)錄是指以雙鏈DNA為模板合成單鏈RNA。RNA的合成沿5-3方向進行，其序列與DNA有義鏈（編碼鏈）相一致。起 始 轉(zhuǎn)錄的起始涉及RNA聚合酶與雙鏈DNA的結(jié)合。RNA聚合酶的核心酶

34、為2，負責(zé)轉(zhuǎn)錄延伸。因子對于轉(zhuǎn)錄的正確起始是必需的。核心酶加上因子組成了全酶。它們結(jié)合到待轉(zhuǎn)錄序列上游的啟動子部位。聚合酶通過沿著DNA鏈滑動，并與啟動子形成閉合復(fù)合物來識別啟動子的-35和-10序列。為使模板鏈能與堿基配對，DNA雙螺旋必須局部解旋。解旋從RNA聚合酶結(jié)合的啟動子部位開始，然后從一特定的起始位點的核苷酸處起始RNA鏈的合成。RNA的合成無需引物。RNA鏈以GTP或ATP開始，接著繼續(xù)鏈其余部分的合成。延 伸 起始成功后，聚合酶釋放出因子。RNA聚合酶沿5-3方向延伸正在伸長的RNA鏈，同時沿著反義DNA鏈（模板鏈）的3-5方向移動，酶移動時局部解旋DNA，使兩條DNA鏈分開暴

35、露出模板鏈，這段始終保持的解旋區(qū)稱為轉(zhuǎn)錄泡。聚合酶在轉(zhuǎn)錄泡的前方解旋DNA，而在其后方復(fù)旋DNA。每加一個核苷酸到RNA鏈上RNA-DNA雙螺旋轉(zhuǎn)一次。終 止 基因3端自身互補的序列會在RNA中形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)作為終止子。發(fā)夾的莖部通常（G+C）含量較高，使其穩(wěn)定性增強，從而使聚合酶在此停頓。有些基因的終止序列需要一個輔助的蛋白質(zhì)因子才能有效地終止轉(zhuǎn)錄。是一個六聚體蛋白質(zhì)，在有單鏈DNA存在時可水解ATP，沿新生RNA鏈向轉(zhuǎn)錄復(fù)合物移動，能使RNA聚合酶在依懶性終止子處終止轉(zhuǎn)錄。L 原核生物的轉(zhuǎn)錄調(diào)控1以下陳述哪兩個是正確的？（ A E ） A 含有5-GGATCGATCC-3序列的雙鏈DNA序列

36、是一個回文結(jié)構(gòu) B 含有5-GGATCCTAGG-3序列的雙鏈DNA序列是一個回文結(jié)構(gòu) C Lac阻抑蛋白抑制聚合酶與lac啟動子的結(jié)合 D lac操縱子直接被乳糖誘導(dǎo) E Lac阻抑蛋白與異乳糖的結(jié)合降低了它與lac啟動子的親和力 F IPTG是lac啟動子對的天然誘導(dǎo)劑2以下關(guān)于色氨酸操縱子的陳述哪一個是正確的（ F ） A 色氨酸操縱子的RNA產(chǎn)物很穩(wěn)定 B Trp阻抑蛋白是色氨酸操縱子的產(chǎn)物 C Trp阻抑蛋白和Lac阻抑蛋白一樣，是相同亞基的四聚體 D 色氨酸激活色氨酸操縱子的表達 E 色氨酸操縱子只被色氨酸阻抑蛋白所調(diào)控 F Trp阻抑蛋白與色氨酸結(jié)合3以下對于色氨酸操縱子的弱化作

37、用的陳述哪兩個是正確的（ B F ） A 弱化作用是rho依賴性的 B 弱化序列的缺失會導(dǎo)致色氨酸啟動子轉(zhuǎn)錄的基本和激活水平的上升 C 弱化子位于色氨酸操縱序列的上游 D 弱化作用不需要轉(zhuǎn)錄和翻譯的密切結(jié)合 E 當色氨酸缺乏時，核糖體在前導(dǎo)肽上兩個色氨酸密碼子之間的暫停導(dǎo)致弱化作用 F 當色氨酸缺乏時，一種叫做反終子的發(fā)夾結(jié)構(gòu)阻止了終止發(fā)夾的形成，導(dǎo)致trpE基因的轉(zhuǎn)錄通讀4以下關(guān)于因子的陳述哪兩個是錯誤的（ D F ） A 缺乏因子亞基的大腸桿菌RNA聚合酶核心酶不能從啟動子處起始轉(zhuǎn)錄 B 不同的因子識別不同系列的啟動子 C 因子識別-10和-35啟動子元件 D 大腸桿菌熱休克啟動子有不同的

38、-35和-10序列且與17種不同的熱休克因子結(jié)合 E B.subtilis的孢子形成受多種因子調(diào)節(jié) F T7噬菌體表達它自己的因子，而不是編碼它自己的RNA聚合酶5 名詞解釋：弱化子弱化子：原核生物操縱子中能顯著減弱甚至終止轉(zhuǎn)錄作用的一段核苷酸序列，該區(qū)域能形成不同的二級結(jié)構(gòu)，利用原核微生物轉(zhuǎn)錄與翻譯的偶聯(lián)機制對轉(zhuǎn)錄進行調(diào)節(jié)。在操縱基因和trpE基因編碼序列之間一段序列的缺失將導(dǎo)致基本轉(zhuǎn)錄水平和活化后的轉(zhuǎn)錄水平的上升，該位點稱為弱化子。6 色氨酸操縱子弱化作用的機理？色氨酸操縱子RNA的前導(dǎo)序列含有4個序列互補區(qū)，能形成不同的堿基配對的RNA結(jié)構(gòu)。它們被稱為1、2、3和4。弱化子發(fā)夾結(jié)構(gòu)是序列

39、3和序列4配對的產(chǎn)物（3 : 4結(jié)構(gòu)）。大腸桿菌中，弱化作用依賴于轉(zhuǎn)錄和翻譯的緊密偶聯(lián)，即翻譯可以在mRNA轉(zhuǎn)錄的同時進行。由于色氨酸（色氨酸操縱子編碼的酶的最終合成產(chǎn)物）是翻譯過程中所必需的，因此細胞對它的含量很敏感，它決定了在mRNA中終止子發(fā)夾結(jié)構(gòu)（3 : 4）是否形成。在色氨酸操縱子轉(zhuǎn)錄進行的過程中，RNA聚合酶在序列2的末端停滯直到核糖體開始翻譯前導(dǎo)肽。在色氨酸含量很高的情況下，核糖體迅速在兩個色氨酸密碼子(UGG)處插入色氨酸，這樣翻譯可直達前導(dǎo)肽末端。當RNA聚合酶到達其終止序列時，核糖體封閉了序列2，于是3 : 4發(fā)夾得以形成，轉(zhuǎn)錄可能終止。M 真核生物的轉(zhuǎn)錄1以下對于真核生物

40、RNA聚合酶I、和的陳述哪一個是錯誤的？（ F ） A RNA聚合酶對-鵝膏蕈堿非常敏感 B RNA聚合酶存在于核質(zhì)中 C RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄tRNA基因 D真核細胞含有除RNA聚合酶I、和之外的其他RNA聚合酶 E 每一種RNA聚合酶除含有與大腸桿菌RNA聚合酶同源的亞基歪，還有一種聚合酶所特有的其他亞基 F RNA聚合酶的羧基末端含有一段稱為羧基末端區(qū)（CTD）的只有7個氨基酸的短序列，它可能被磷酸化2以下對于RNA聚合酶I基因的陳述哪兩個是正確的？（ A F ） A RNA聚合酶I轉(zhuǎn)錄核糖體RNA基因 B人細胞含有40簇5個拷貝的tRNA基因 C 18S、5.8S和28SrRNA是分開轉(zhuǎn)錄

41、的 D RNA聚合酶I的轉(zhuǎn)錄發(fā)生在核質(zhì)中 E RNA聚合酶I的轉(zhuǎn)錄發(fā)生在胞質(zhì)中 F rRNA基因簇被稱為核仁組織區(qū)域3 以下對于RNA聚合酶I轉(zhuǎn)錄的陳述哪一個是錯誤的？（ A ） A在RNA聚合酶I啟動子中，核心元件是上游調(diào)控元件（UCE）下游的1000個堿基 B上游結(jié)合因子（UBF）與UCE和RNA聚合酶I啟動子狠心元件的上游部分結(jié)合 C 選擇性因子SL1是使UBF-DNA復(fù)合體穩(wěn)定 D SL1包含幾個亞基，包括TATA結(jié)合蛋白TBP4 以下對于RNA聚合酶基因的陳述哪兩個是正確的？（ B E ） A tRNA基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)位于轉(zhuǎn)錄起始位點上游 B tRNA基因編碼區(qū)中的高度保守序列也是啟

42、動子序列 C TBP是TFC的亞基之一 D TFB自身就是一個序列特異性轉(zhuǎn)錄因子 E人類基因組內(nèi)有2000個拷貝的單基因簇的5S rRNA基因5 以下哪個陳述是正確的？（ C ） A RNA聚合酶只轉(zhuǎn)錄編碼蛋白的基因 B TATA框?qū)D(zhuǎn)錄效率有影響，但對轉(zhuǎn)錄起始位點的定位沒有影響 C TBP與TATA框結(jié)合 D增強子通常位于轉(zhuǎn)錄起始位點的上游100-200堿基處6 以下對于一般轉(zhuǎn)錄因子的陳述哪一個是錯誤的（ D ） A TFD結(jié)合TATA框 B TFD是由TBP和TAF組成的多蛋白復(fù)合體 C TBP是RNA聚合酶I、和轉(zhuǎn)錄中的共同因子 D TFB使TFD-DNA復(fù)合體穩(wěn)定 E RNA聚合酶結(jié)合后，TFE、TFH和TFJ與轉(zhuǎn)錄復(fù)合體結(jié)合 F TFH導(dǎo)致CTD磷酸化7 名詞解釋：真核生物啟動子、增強子、TATA框啟動子：啟動子是基因的一個組成部分，控制基因表達（轉(zhuǎn)錄）的起始時間和表達的程度。啟動子本身并不控制基因活動