1、輸血實驗室血型血清學(xué) 室間與室內(nèi)質(zhì)控,陜西省安康市中心醫(yī)院輸血科 方曉蕾,輸血實驗室室內(nèi)質(zhì)控,血型室內(nèi)質(zhì)控的內(nèi)容,設(shè)備儀器；離心機、冰箱、孵育箱、加樣器 試劑：定型血清、細(xì)胞、其它試劑 實驗；實驗的選擇、對照、環(huán)境對結(jié)果的影響 實驗室相關(guān)文件；操作規(guī)范、登記、記錄、報告與復(fù)核體系 人員培訓(xùn)；,設(shè)備儀器,離心機： （1）并未規(guī)定必須用何種離心機， 但建議用血庫專用離心機 （2）離心力離心轉(zhuǎn)速 ； 標(biāo)準(zhǔn)的離心力9001000g （3）離心時間；定型、各類判讀結(jié)果的試驗15秒； 各類洗滌細(xì)胞的試驗60秒 （4）校正頻率；每六個月一次,離心對血型鑒定的重要性,離心力過高，易形成亞型判斷失誤或假陽性 離

2、心力過低，是形成亞型判斷失誤或假陰性,A1 Aint A2 A3 Am Ax Ay Amos Aw Abantu AFinn Ael,4+,3+,1+,0,血庫試劑,試劑抗血清 抗-A, 抗-B, 抗-AB, 抗-D 其他血型試劑 抗人球蛋白血清 試劑紅細(xì)胞 A 細(xì)胞, B 細(xì)胞 篩選細(xì)胞 (O1, O2) 抗體篩選譜細(xì)胞 Coombs 質(zhì)控細(xì)胞 ( IgG-致敏細(xì)胞) 增效劑 如. Liss ,LIM,選擇確認(rèn)有效的試劑,只有通過國家認(rèn)可的試劑才可使用. 仔細(xì)閱讀供應(yīng)商應(yīng)提供所有數(shù)據(jù)(產(chǎn)品說明書) 以證明它們的試劑在特異性和效價方面符合最低標(biāo)準(zhǔn) 購買前通過對樣本的測試來對試劑的質(zhì)量進行評估,

3、ABO和Rh(D)抗血清的最低標(biāo)準(zhǔn),抗血清 試驗細(xì)胞 效價* 親和力( sec ) Anti-A A1 12815 A2 6430 A2B 6445 Anti-BB 12815 Anti-D R1r 1660 * 無稀釋血清與3相應(yīng)紅細(xì)胞抗原在鹽水試管法3至4。,用于ABO反定型的試劑紅細(xì)胞,A 細(xì)胞- 與抗A，抗A1反應(yīng)4，與抗B無反應(yīng) B 細(xì)胞- 與抗B反應(yīng)4，但與抗A，抗A1無反應(yīng) A 細(xì)胞& B 細(xì)胞盡可能不表達M.Lewis，P1抗原,抗體篩選細(xì)胞,2-3 份O細(xì)胞 通常是 R1R1 & R2R2 細(xì)胞 兩份細(xì)胞應(yīng)明確表達的抗原 :D,C,c,E,e, K,k, Fya, Fyb,

4、Jka, Jkb, S,s, M,N, Mia, P1, Lea, Leb, Dia (盡可能是純合子),抗體鑒定細(xì)胞,大于8份O細(xì)胞 對常規(guī)抗體和混合抗體必須有明確的反應(yīng)格局 一組細(xì)胞應(yīng)包括 rr, rr, r” r(r”r) 細(xì)胞型 和至少 包括 R2 R2 表現(xiàn)型 至少1至2種細(xì)胞為 Le(a-b-), K(+), Fya (-), M(-) 和 Mia (+) 和 至少 2 種表現(xiàn)型純合子 Jka, Jkb,評估試劑、技術(shù),若該試劑或技術(shù)是首次使用，則需增加試驗 新的試驗應(yīng)在常規(guī)工作中試用一周，或至少做五十份標(biāo)本，包括嬰兒貧血，亞型，弱D抗原,舉例； ABO血型定型差錯,差錯的類型(技

5、術(shù)性錯誤的常見來源) 血液標(biāo)本或試管的鑒定不當(dāng)(無樣本送檢與驗收的SOP) 紅細(xì)胞懸浮液過濃或過淡(未按實驗操作S0P進行） 人為的書寫錯誤（無血型鑒定試驗復(fù)核體系） 忽略觀察溶血現(xiàn)象（員工未進行嚴(yán)格的崗位技能培訓(xùn)） 未加入試劑（體系缺乏校正與復(fù)核） 未按照制造者的說明書操作（未按實驗操作S0P進行） 離心機校準(zhǔn)不良.（儀器設(shè)置未過行核正與定期檢查） 試劑受到污染或過期（缺乏試劑的認(rèn)證與日常室內(nèi)質(zhì)控） 溫度在離心過程中增高（員工未進行嚴(yán)格的崗位技能培訓(xùn)）,舉例；員工需進一步培訓(xùn)避免ABO血型定型差錯,非技術(shù)性錯誤的常見來源 減弱或缺少的抗原反應(yīng) A或B亞型 疾病狀態(tài) 過量可溶性血型物質(zhì) 未知的

6、抗原 獲得性A或B抗原 改變的抗原；T、Tn活化及Cad多凝集 低頻率抗原抗體的反應(yīng),舉例；員工需進一步培訓(xùn)避免ABO血型定型差錯,非技術(shù)性錯誤的常見來源 減弱的或缺乏的抗體反應(yīng) 年齡 丙種球蛋白過低血癥 丙種球蛋白缺乏血癥 嵌合現(xiàn)象 未知的抗體反應(yīng) 緡錢狀形成 冷型自身抗體 未知同種抗體,環(huán)境對結(jié)果的影響,溫度：IgM 4C IgG 37 C 抗A、抗B在37 C條件下反應(yīng)的活性 是4 C時的1/3,輸血實驗室室間質(zhì)控,WHO-室間質(zhì)量評估項目(EQA),EQA目標(biāo):在所有的世界衛(wèi)生組織成員國中建立一個對輸血機構(gòu)的質(zhì)控體系進行監(jiān)控的機制 EQA的益處 對參加的實驗室本身 對所有的參加者 一般

7、信息 實驗室之間的比較 監(jiān)測技術(shù)發(fā)展水平 促進改善與提高,血型血清學(xué)WHO IEQAS,監(jiān)測實驗的： 技巧與技術(shù) 操作者的熟練程度 實驗的步驟 每年2 次,實驗項目包括 ABO 定型 RhD 定型 紅細(xì)胞抗體篩選 紅細(xì)胞抗體鑒定 交叉配血,對于參加的個體,對個體進行監(jiān)控 檢測出實驗室中實驗步驟中存在的問題 與其它實驗室進行比較,對于參加的實驗室,提出忠告與培訓(xùn) 對實驗室所用的方法，技術(shù)，試劑，試劑盒提出意建與建議 發(fā)現(xiàn)問題 提供可選擇的相關(guān)信息 信息的交流,EQA 計劃,目的在于通過以下途徑來改進相關(guān)標(biāo)準(zhǔn) 證實良好的技術(shù) 有益于提高質(zhì)量 證實信息與培訓(xùn) 對質(zhì)量是有影響,單個實驗室中發(fā)現(xiàn)的問題通

8、過大家一起來解決,通過網(wǎng)絡(luò) 交換信息，試劑，建議 信息整理,EQA,不要總是期望在記錄中保持“歷史清白”就是好的 參與 研究中突出的問題 赴之以行動 為防止重犯而進行的體系改進 監(jiān)測,評估的效果,改進性能 剔除落后的方法 選擇適合您的技術(shù)與試劑 使實驗操作技能得以改善與提高 推薦介紹更新的指導(dǎo)方針,錯誤率 - UK,參加單位總錯誤率 WHO IEQAS 2000 - 2001,錯誤率 - WHO REQAS 2002-2003,練習(xí) 輸血實驗室中出現(xiàn)的差錯,事件 實驗室收到血樣，保存 快速定型為 A 型 患者在傍晚將急診手術(shù) 配了4 單位 A型血， 按要求發(fā)血 給患者輸注1單位血 血壓下降，因

9、此又加速輸了3單位血 患者術(shù)后情況惡化 ICU 第二天發(fā)現(xiàn)患者為O型,調(diào)查,實驗室繁忙 高級員工不在 初級員工在記錄本上記錄結(jié)果時出現(xiàn)書寫錯誤，將O型錯記為A型 實驗室負(fù)責(zé)人 (組織病理學(xué)專業(yè)) 幾乎沒有輸血實驗室工作經(jīng)驗 過于自信! 兼職管理，對于輸血沒有興趣, 簽定一份每周80小時的合同，必需隨叫隨到參加輸血 A+ 交叉配血 在間接抗人球?qū)嶒炛?，洗?xì)胞后在XM試管中僅剩下極少細(xì)胞， 而每周的 對照抗D正常。細(xì)胞洗滌儀可能存在問題 酶試驗與室溫試驗常出現(xiàn)陽性，這可能是非特異性的 XM實驗沒有重復(fù) ABO 分型沒有復(fù)核, 雖然沒有要求這樣做,結(jié)果,患者存活 ， 但延長腎臟透析時間,分析1 人為錯誤,在報告中出現(xiàn)錯誤的ABO血型 交叉實驗結(jié)果判讀錯誤 對儀器設(shè)備功能的假想 對實驗結(jié)果的判定出現(xiàn)錯誤 對出現(xiàn)結(jié)果差異的實驗未進行復(fù)檢 發(fā)血前未進行間接抗人球交叉配血 臨床醫(yī)生未認(rèn)識到這是急性HTR,分析2 系統(tǒng)錯誤,員工 有這么多員工都不在場 沒有最少工作人員配置的政策 初級員工工作時缺乏高級技術(shù)人員的監(jiān)督 科室主管待命系統(tǒng) 缺乏訓(xùn)練和經(jīng)驗，缺乏動力, 過度