1、新藥的臨床前研究與評(píng)價(jià),Preclinical research and evaluation of new drugs,1,新藥（New Drugs） 指化學(xué)結(jié)構(gòu)、藥品組成或藥理作用不同于現(xiàn)有藥品的藥物。 我國(guó)藥品管理法規(guī)定：新藥指未曾在中國(guó)境內(nèi)上市銷(xiāo)售的藥品。已生產(chǎn)的藥品改變劑型、改變給藥途徑、增加新的適應(yīng)癥或制成新的復(fù)方制劑的。,2,新藥的分類(lèi)Classification of New Drugs,按國(guó)家新藥審批辦法規(guī)定分類(lèi): 中藥（傳統(tǒng)藥,天然藥物） （traditional Chinese medicine） 化學(xué)藥品（西藥、現(xiàn)代藥） （western drug、chemicals）

2、 生物制品（biologicals）,3,藥品注冊(cè)管理辦法（局令第28號(hào)）附錄1,新藥注冊(cè)分類(lèi)：9 類(lèi),1類(lèi)：未在國(guó)內(nèi)上市銷(xiāo)售的從植物、動(dòng)物、礦物等物質(zhì)中提取的有效成份及其制劑 2類(lèi)：新發(fā)現(xiàn)的藥材及其制劑 3類(lèi)：新的中藥材代用品 4類(lèi)：藥材新的藥用部位及其制劑 5類(lèi)：未在國(guó)內(nèi)上市銷(xiāo)售的從植物、動(dòng)物、礦物等物質(zhì)中提取的有效部位及其制劑 6類(lèi)：未在國(guó)內(nèi)上市銷(xiāo)售的中藥、天然藥物復(fù)方制劑 7類(lèi)：改變國(guó)內(nèi)已上市銷(xiāo)售中藥、天然藥物給藥途徑的制劑 8類(lèi)：改變國(guó)內(nèi)已上市銷(xiāo)售中藥、天然藥物劑型的制劑 9類(lèi)：仿制藥,4,1類(lèi)：未在國(guó)內(nèi)外上市銷(xiāo)售的藥品： （1）通過(guò)合成或者半合成的方法制得的原料藥及其制劑； （2）

3、天然物質(zhì)中提取或者通過(guò)發(fā)酵提取的新的有效單體及其制劑； （3）用拆分或者合成等方法制得的已知藥物中的光學(xué)異構(gòu)體及其制劑； （4）由已上市銷(xiāo)售的多組份藥物制備為較少組份的藥物； （5）新的復(fù)方制劑； （6）已在國(guó)內(nèi)上市銷(xiāo)售的制劑增加國(guó)內(nèi)外均未批準(zhǔn)的新適應(yīng)癥。 2類(lèi)：改變給藥途徑且尚未在國(guó)內(nèi)外上市銷(xiāo)售的制劑。 3類(lèi)：已在國(guó)外上市銷(xiāo)售但尚未在國(guó)內(nèi)上市銷(xiāo)售的藥品： （1）已在國(guó)外上市銷(xiāo)售的制劑及其原料藥，改變劑型，不改變給藥途徑制劑； （2）已在國(guó)外上市銷(xiāo)售的復(fù)方制劑，改變劑型，不改變給藥途徑的制劑； （3）改變給藥途徑并已在國(guó)外上市銷(xiāo)售的制劑； （4）國(guó)內(nèi)上市銷(xiāo)售的制劑增加已在國(guó)外批準(zhǔn)的新適應(yīng)癥。

4、4類(lèi)：改變已上市銷(xiāo)售鹽類(lèi)藥物的酸根、堿基，但不改變其藥理作用的原料藥及其制劑。 5類(lèi)：改變國(guó)內(nèi)已上市銷(xiāo)售藥品的劑型，但不改變給藥途徑的制劑。 6類(lèi)：已有國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)的原料藥或者制劑。,新藥注冊(cè)分類(lèi)：6 類(lèi),藥品注冊(cè)管理辦法（局令第28號(hào)）附錄2,5,藥品注冊(cè)管理辦法（局令第28號(hào)）附錄3,1類(lèi)：未在國(guó)內(nèi)外上市銷(xiāo)售的生物制品 2類(lèi)：?jiǎn)慰寺】贵w 3類(lèi)：基因治療、體細(xì)胞治療及其制品 4類(lèi)：變態(tài)反應(yīng)原制品 5類(lèi)：由人或動(dòng)物組織或體液提取、或通過(guò)發(fā)酵制備的具有生物活性的多組份制品 6類(lèi)：由已上市銷(xiāo)售生物制品組成新的復(fù)方制品 7類(lèi)：已在國(guó)外上市銷(xiāo)售但尚未在國(guó)內(nèi)上市銷(xiāo)售的生物制品 8類(lèi)：含未經(jīng)批準(zhǔn)菌種制備的

5、微生態(tài)制品 ,新藥注冊(cè)分類(lèi)：15 類(lèi),6,藥品注冊(cè)管理辦法（局令第28號(hào)）附錄3,1類(lèi)：未在國(guó)內(nèi)外上市銷(xiāo)售的疫苗 2類(lèi)：DNA疫苗 3類(lèi)：已上市銷(xiāo)售疫苗變更新的佐劑，偶合疫苗變更新的載體 4類(lèi)：由非純化或全細(xì)胞(細(xì)菌、病毒等)疫苗改為純化或者組份疫苗 5類(lèi)：采用未經(jīng)國(guó)內(nèi)批準(zhǔn)的菌毒種生產(chǎn)的疫苗 6類(lèi)：已在國(guó)外上市銷(xiāo)售但未在國(guó)內(nèi)上市銷(xiāo)售的疫苗 7類(lèi)：采用國(guó)內(nèi)已上市銷(xiāo)售的疫苗制備的結(jié)合疫苗或者聯(lián)合疫苗 8類(lèi)：與已上市銷(xiāo)售疫苗保護(hù)性抗原譜不同的重組疫苗 ,新藥注冊(cè)分類(lèi)：15 類(lèi),7,藥 物 研 制 過(guò) 程,天然化合物 合成化合物 生物產(chǎn)品,試驗(yàn)動(dòng)物 毒理學(xué) 藥效學(xué) 藥動(dòng)學(xué),劑型、 處方 研究,人體試驗(yàn)

6、 藥效學(xué) 藥動(dòng)學(xué) 臨床 、 期試驗(yàn),臨床期試驗(yàn) 藥物不良反應(yīng) 藥物再評(píng)價(jià),臨床試驗(yàn),臨床應(yīng)用,藥物 上市,臨床藥 理研究,藥物制 劑研究,藥理學(xué)研究,臨床前試驗(yàn),活性物質(zhì),臨床前試驗(yàn),8,II 期,I 期,III 期,治療使用,臨床前研究與發(fā)展,藥學(xué)與臨床前藥理,動(dòng)物藥效學(xué)與藥動(dòng)學(xué),動(dòng)物毒理,急毒,長(zhǎng)毒與特殊毒理,臨床前審評(píng),新藥申請(qǐng)?zhí)岢?新藥批準(zhǔn),IV期臨床,不良反應(yīng)、 藥品檢驗(yàn)、 抽樣檢查,臨床研究階段,新藥的申請(qǐng)審查,上市后監(jiān)督,臨床試驗(yàn)在新藥研發(fā)過(guò)程中占70%費(fèi)用和1/2時(shí)間，并且只有0.2%獲得上市,6.5年,7年,1.5年,新藥研究過(guò)程,9,年,花費(fèi)10億元美金,10,新藥研發(fā)特點(diǎn)

7、,投資高 周期長(zhǎng) 風(fēng)險(xiǎn)高 利潤(rùn)高 競(jìng)爭(zhēng)激烈,11,新藥的臨床前研究,藥學(xué)研究 主要藥效學(xué)研究 安全性研究 藥動(dòng)學(xué)研究,12,藥學(xué)研究-新藥發(fā)現(xiàn),Drug Discovery 經(jīng)驗(yàn)積累 偶然發(fā)現(xiàn) 藥物篩選,Drug Discovery 老藥新用 綜合改造 定向設(shè)計(jì),13,藥學(xué)研究-主要內(nèi)容,研究新藥的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、鑒別、檢查和含測(cè)方法等原料 研制出可控、穩(wěn)定和使用方便的新藥劑型 研制出適合于工業(yè)化生產(chǎn)的原料及制劑的技術(shù)工藝路線(xiàn) 研究原料和制劑的穩(wěn)定性 制訂原料藥及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 提供臨床前評(píng)價(jià)和臨床試驗(yàn)所需的藥品,14,藥學(xué)研究的意義,是新藥評(píng)價(jià)的基礎(chǔ) 與新藥的臨床療效和安全性密切相關(guān) 貫穿

8、新藥評(píng)價(jià)的全過(guò)程（臨床前、臨床、生產(chǎn)前）,藥學(xué)研究,15,藥學(xué)研究注意事項(xiàng),進(jìn)行下游工作以前應(yīng)做到,化學(xué)結(jié)構(gòu)或組份明確 制備工藝相對(duì)穩(wěn)定 制劑處方固定 質(zhì)控方法可行 具有一定的化學(xué)穩(wěn)定性,這樣才能為藥效毒理、藥代、臨床評(píng)價(jià)提供保證,16,我是高血壓老鼠，聽(tīng)說(shuō)吃辣椒能降血壓，我來(lái)試試.,動(dòng)物藥理試驗(yàn)（有沒(méi)有效?）,新藥主要藥效學(xué)研究,17,新藥主要藥效學(xué)研究 -新藥的有效性試驗(yàn),評(píng)價(jià)化學(xué)物質(zhì)的生物活性和確定藥物作用機(jī)理。 體外細(xì)胞培養(yǎng)和酶系統(tǒng) 離體動(dòng)物組織試驗(yàn) 整體動(dòng)物試驗(yàn)（嚙齒動(dòng)物和非嚙齒動(dòng)物）,18,1. 受試藥物：制備工藝穩(wěn)定，同一批號(hào)，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)相同，標(biāo)示含量和來(lái)源明確。 動(dòng)物等級(jí)：健康潔

9、凈，符合國(guó)家要求（潔凈級(jí)） （醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證書(shū)，實(shí)驗(yàn)設(shè)施合格證書(shū)） 常用成年動(dòng)物 2. 動(dòng)物 年齡 幼年動(dòng)物（發(fā)育、內(nèi)分泌） 衰老動(dòng)物，果蠅（抗衰老） 性別：雌雄不限，雌雄各半，單性別（熱板法） 體重：與年齡有關(guān)，體重相近 種屬：家兔和小鼠（不宜用于呼吸循環(huán)系統(tǒng)試驗(yàn)） 阿片類(lèi)（猴犬兔中樞抑制；貓小鼠中樞興奮） 品系：腫瘤試驗(yàn)（肝癌DBA/2；肺癌C57）,3.給藥途徑：宜與推薦臨床用藥途徑一致,19,4. 病理模型：成熟、規(guī)范 反映臨床病理生理過(guò)程，反映藥理作用本質(zhì)，盡可能用自發(fā)性遺傳性模型動(dòng)物，如自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）；自發(fā)性糖尿病大鼠（BB）和小鼠（KK），避免用尚未被公認(rèn)的技術(shù)或

10、模型。同一指標(biāo)用二種以上模型或方法驗(yàn)證。以整體動(dòng)物（包括正?；蚰Ｐ蛣?dòng)物）實(shí)驗(yàn)為主，輔以體外試驗(yàn)。,5觀(guān)察指標(biāo)：與疾病密切相關(guān)的客觀(guān)指標(biāo)，記錄準(zhǔn)確，指標(biāo)特異性和靈敏性高，重現(xiàn)性好，盡量用定量或半定量指標(biāo)。,20,劑量 范圍,6.劑量,文獻(xiàn)資料查詢(xún) 試驗(yàn)摸索 按體表面積劑量呼應(yīng)：成人劑量動(dòng)物劑量 離體試驗(yàn)濃度 參考藥動(dòng)學(xué)有效濃度 由分布容積估算最大濃度 最大濃度=成人劑量/最小分布容積（15L） =動(dòng)物劑量 /（體重4） 10-10、310-10、10-9、310-9、10-8、310-8、10-7、310-7、10-6,劑量間隔：體內(nèi)：一般3個(gè)劑量組，比值2.53.5（1/3/10） 體外： 5

11、個(gè)劑量 盡量反映量效和或時(shí)效關(guān)系，大動(dòng)物（猴、狗等）試驗(yàn)或在特殊情況下，可適當(dāng)減少劑量組。,21,包括： 正常動(dòng)物空白對(duì)照組 模型動(dòng)物對(duì)照組 陽(yáng)性藥物對(duì)照組 應(yīng)選用正式批準(zhǔn)生產(chǎn)的藥品，根據(jù)需要設(shè)一個(gè)或多個(gè)劑量組。 必要時(shí)增設(shè)溶媒或賦形劑對(duì)照組。,7.對(duì)照,22,新藥臨床前安全性評(píng)價(jià),23,新藥臨床前安全性評(píng)價(jià),聽(tīng)說(shuō)，辣椒吃多了也會(huì)死人，到底吃多少會(huì)死呢？我來(lái)試試吧，不過(guò)別忘了追認(rèn)我為烈士呦！,你們兩個(gè)小家伙怎么能代表我的主人,我先吃上6個(gè)月吧.,我不下地獄，誰(shuí)下地獄,24,新藥安全性評(píng)價(jià)的重要性,反應(yīng)停:1956年上市, 治療妊娠嘔吐，引起海豹畸形兒12000多人 藥物性耳聾：藥物致耳聾者占6

12、0% 我國(guó)約100萬(wàn)人，每年24萬(wàn)遞增,25,各省、自治區(qū)、直轄市食品藥品監(jiān)督管理局（藥品監(jiān)督管理局）、總后衛(wèi)生部藥品監(jiān)督管理局：為貫徹實(shí)施藥品管理法，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布了藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（簡(jiǎn)稱(chēng)GLP）、藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范檢查辦法（試行）等有關(guān)規(guī)定，并于2003年開(kāi)始對(duì)藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究機(jī)構(gòu)進(jìn)行GLP認(rèn)證。目前已有部分藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)的研究機(jī)構(gòu)通過(guò)GLP認(rèn)證。為進(jìn)一步推進(jìn)藥物非臨床研究實(shí)施GLP，從源頭上提高藥物研究水平，保證藥物研究質(zhì)量，經(jīng)研究決定，自2007年1月1日起，未在國(guó)內(nèi)上市銷(xiāo)售的化學(xué)原料藥及其制劑、生物制品；未在國(guó)內(nèi)上市銷(xiāo)售的從植物、動(dòng)物、礦物

13、等物質(zhì)中提取的有效成份、有效部位及其制劑和從中藥、天然藥物中提取的有效成份及其制劑；中藥注射劑的新藥非臨床安全性評(píng)價(jià)研究必須在經(jīng)過(guò)GLP認(rèn)證，符合GLP要求的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。否則，其藥品注冊(cè)申請(qǐng)將不予受理。2007年1月以前已開(kāi)展的上述藥物的非臨床安全性評(píng)價(jià)研究，其藥品注冊(cè)申請(qǐng)資料可予以受理。請(qǐng)各省、自治區(qū)、直轄市食品藥品監(jiān)督管理局（藥品監(jiān)督管理局）加強(qiáng)對(duì)轄區(qū)內(nèi)藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究的監(jiān)督管理，并通知本轄區(qū)內(nèi)藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究機(jī)構(gòu)和相應(yīng)藥品研發(fā)機(jī)構(gòu)按照以上要求，嚴(yán)格執(zhí)行GLP。國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局 二六年十一月二十日,26,藥品臨床前試驗(yàn)管理規(guī)范（good laboratory prac

14、tice，GLP）,GLP是對(duì)從事實(shí)驗(yàn)研究的規(guī)劃設(shè)計(jì)、執(zhí)行實(shí)施、管理監(jiān)督和記錄報(bào)告等實(shí)驗(yàn)室組織管理、工作方法和有關(guān)條件所提出的法規(guī)性文件。 它主要是針對(duì)有關(guān)藥品、食品添加劑、農(nóng)藥、化學(xué)試劑、化妝品及其他醫(yī)用物品的動(dòng)物試驗(yàn)。,也稱(chēng)藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范,27,藥品臨床前試驗(yàn)管理規(guī)范 （ GLP） 為毒性評(píng)價(jià)而制定的法規(guī)，目的在于嚴(yán)格控制藥品安全性評(píng)價(jià)的各個(gè)環(huán)節(jié)，包括嚴(yán)格控制可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的各種主、客觀(guān)因素，如保證實(shí)驗(yàn)研究人員具備一定素質(zhì)、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)慎密合理、各種實(shí)驗(yàn)條件合格、數(shù)據(jù)完整準(zhǔn)確以及總結(jié)資料科學(xué)真實(shí)等。,28,藥物劑量與毒性作用的相關(guān)性 毒性作用的性質(zhì)和選擇性 安全劑量范圍,新

15、藥非臨床安全性評(píng)價(jià),目的與意義,為預(yù)測(cè)藥物臨床應(yīng)用安全性評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù),29,全身性毒性試驗(yàn) 局部毒性試驗(yàn) 藥物特殊毒性試驗(yàn) 藥物依賴(lài)性試驗(yàn),一般藥理學(xué)試驗(yàn) 急性毒性試驗(yàn) 長(zhǎng)期毒性試驗(yàn),刺激試驗(yàn) 過(guò)敏試驗(yàn) 溶血試驗(yàn),致畸、致癌、致突變?cè)囼?yàn) 免疫毒性試驗(yàn) 生殖毒性試驗(yàn),精神藥理學(xué)試驗(yàn) 軀體依賴(lài)性試驗(yàn) 精神依賴(lài)性試驗(yàn),新藥臨床前安全性評(píng)價(jià),30,廣義上是指主要藥效學(xué)以外所進(jìn)行的廣泛的藥理學(xué)研究， 包括：安全藥理學(xué)（Safety Pharmacology）研究 次要藥效學(xué)（Secondary Pharmacodynamic）研究。,檢測(cè)藥物對(duì)正常清醒動(dòng)物以下三個(gè)系統(tǒng)的影響 中樞神經(jīng)系統(tǒng) 心血管系統(tǒng)

16、 呼吸系統(tǒng)的影響,新藥臨床前安全性評(píng)價(jià) - 一般藥理學(xué)研究,狹義上主要是安全藥理學(xué)（Safety Pharmacology）研究,31,單劑量和/或24小時(shí)內(nèi)多劑量給藥。給藥劑量向一定范圍增加，以確定試驗(yàn)化合物不產(chǎn)生毒性的最大劑量、發(fā)生嚴(yán)重毒性的劑量水平及中等毒性劑量水平。,新藥臨床前安全性評(píng)價(jià) -急性毒性試驗(yàn),單次或多次給藥 連續(xù)觀(guān)察14天 LD50， 最大耐受量(最大給藥量）,一般先于藥效學(xué)試驗(yàn)，為藥效學(xué)試驗(yàn)提供劑量依據(jù),32,最大耐受量（Maximal tolerance dose, MTD）：不引起受試對(duì)象死亡的最高劑量。 最小致死劑量（Minimal lethal dose, MLD

17、）：引起個(gè)別受試動(dòng)物出現(xiàn)死亡的劑量 。 半數(shù)致死量（Median lethal dose, LD50）：在一定試驗(yàn)條件下引起50%動(dòng)物死亡的劑量。該值是經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所得的結(jié)果。 未見(jiàn)反應(yīng)劑量（No observed effect level, NOEL）或未見(jiàn)不良反應(yīng)劑量（No observed adverse effect level, NOAEL） 近似致死量（Approximate lethal dose, ALD),33,基本原則: 執(zhí)行GLP 隨機(jī)、對(duì)照、重復(fù) 動(dòng)物: 獲得盡量多信息前提下，使用盡量少動(dòng)物 嚙齒類(lèi)-小鼠或大鼠 非嚙齒類(lèi)-犬或猴 二種動(dòng)物(嚙齒類(lèi)及非嚙齒類(lèi)) 小鼠18-

18、22g; 大鼠120-150g; 犬用成年犬 初始體重不應(yīng)超過(guò)或低于平均體重的20% 各半,34,受試物: 工藝穩(wěn)定、符合臨床用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 標(biāo)明名稱(chēng)、來(lái)源、批號(hào)、含量（或規(guī)格）、保存條件及配制方法等，附質(zhì)檢報(bào)告 輔料、溶劑、試劑等應(yīng)標(biāo)明批號(hào)、規(guī)格和生產(chǎn)廠(chǎng)家，符合試驗(yàn)要求 例如： 原料藥 臨床擬用劑型 復(fù)方制劑：復(fù)方 + 拆方 (增毒？新毒？) 易降解：含降解產(chǎn)物量最高的受試物進(jìn)行急毒試驗(yàn)，并與臨床樣品的急毒試驗(yàn)結(jié)果比較,35,給藥途徑： 臨床擬用途徑 + 原型藥物較完全進(jìn)入循環(huán)途徑（如靜脈注射） 嚙齒類(lèi)ig給藥前應(yīng)禁食12h，不禁水 劑量和分組 給藥劑量：未見(jiàn)毒性量嚴(yán)重毒性量 設(shè)空白和/或溶媒（

19、輔料）對(duì)照 小動(dòng)物4-6個(gè)劑量組, 組距0.65-0.85,求LD50 大動(dòng)物可用50%等量遞升法(近似致死劑量法), 求出ALD和MTD，不必達(dá)到致死量,36,給藥容積：不等濃度等容量給藥,靜脈注射(iv)；腹腔注射(ip)；口服(po)；皮下注射(sc)；灌胃(ig),37,觀(guān)察指標(biāo)及時(shí)間 藥后4h內(nèi)詳觀(guān), 后每天上下午各一,觀(guān)察14d 記錄毒性反應(yīng)、死亡情況, 中毒癥狀、發(fā)生時(shí)間、持續(xù)時(shí)間、嚴(yán)重程度、恢復(fù)期及動(dòng)物最短、最長(zhǎng)死亡時(shí)間 其它指標(biāo)：一般指標(biāo)、體重變化等,38,39,結(jié)果處理：實(shí)驗(yàn)資料計(jì)算LD50。必要時(shí)求不同性別LD50 劑量反應(yīng)、時(shí)間反應(yīng)關(guān)系 反應(yīng)可能涉及組織、器官或系統(tǒng) 肉

20、眼病變和組織病檢，初步判斷毒性靶器官 病檢報(bào)告應(yīng)附：病檢者簽名+單位蓋章+病理照片 確定NOAEL、 MTD、ALD etc，初步判斷受試物的安全范圍,40,41,新藥臨床前安全性評(píng)價(jià) -長(zhǎng)期毒性試驗(yàn),用于人體一周或以上的藥物，必須要有90180天的動(dòng)物試驗(yàn)表明其安全性；若是用于慢性疾病治療，必須進(jìn)行一年或更長(zhǎng)的動(dòng)物試驗(yàn)。,指反復(fù)多次給藥于動(dòng)物，觀(guān)察藥物對(duì)動(dòng)物的毒性反應(yīng)，一般是指連續(xù)給藥14天以上。,42,給藥期限：實(shí)驗(yàn)周期為臨床給藥周期的3-4倍 給藥期限為2周的長(zhǎng)期毒性研究通?？芍С峙R床療程1-3天的藥物進(jìn)行臨床試驗(yàn)和生產(chǎn)； 給藥期限為1個(gè)月的長(zhǎng)期毒性研究通?？芍С峙R床療程2周的藥物； 給

21、藥期限為3個(gè)月的長(zhǎng)期毒性研究通常可支持臨床療程4周的藥物； 給藥期限為6個(gè)月的長(zhǎng)期毒性研究通常可支持臨床療程1月以上的藥物。,43,44,給藥頻率： 原則上長(zhǎng)期毒性研究中動(dòng)物應(yīng)每天給藥；但給藥周期為3個(gè)月或3個(gè)月以上：可采取一周6天給藥。,45,基本原則 執(zhí)行GLP 整體性 研究結(jié)果與其它藥理毒理試驗(yàn)互為印證、說(shuō)明和補(bǔ)充 隨機(jī)、對(duì)照、重復(fù),46,動(dòng)物 理想動(dòng)物 對(duì)受試物生物轉(zhuǎn)化與人體相近 對(duì)受試物敏感 已有大量歷史對(duì)照數(shù)據(jù) 二種動(dòng)物，嚙齒類(lèi)首選大鼠，非嚙齒類(lèi)用Beagle犬, 必要時(shí)用猴、豬等 來(lái)源、品系、遺傳背景清楚，符合等級(jí)要求,有動(dòng)物質(zhì)量合格證 大鼠6-9 w， Beagle犬6-12

22、m,體重CV20 各半,大鼠為各10 - 30只，Beagle犬或猴為各3 - 6只。 必要時(shí)，可用疾病模型動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn) Duration 6m,natural death ( rat:1y-15%, 1.5y-50%, 2y-70-80%),47,給藥途徑 與臨床用藥途徑一致 臨床iv , 大鼠給藥1月，ip代替 im或sc應(yīng)變換注射部位 必要時(shí)改變給藥途徑但應(yīng)說(shuō)明原因,48,分組 三個(gè)給藥組, 單位：mg(ml,IU)/kg 或 /m2 不等濃度等容量給藥 低劑量組高于有效劑量，不出現(xiàn)毒性 中劑量組輕微或中等度毒性 高劑量組明顯/嚴(yán)重毒性，或個(gè)別動(dòng)物死亡 空白對(duì)照溶媒或賦形劑 溶媒或賦形劑

23、有毒性時(shí)則增加正常對(duì)照組 陽(yáng)性對(duì)照,49,測(cè)試次數(shù):能反映動(dòng)態(tài)變化 一般行為、食量每天觀(guān)察記錄 大鼠體重每周一次 大動(dòng)物生理指標(biāo)每半月一次 大動(dòng)物ECG 導(dǎo)聯(lián)，給藥前、給藥期間、停藥及恢復(fù)期均要檢測(cè) 發(fā)現(xiàn)有陽(yáng)性指標(biāo)應(yīng)加大觀(guān)察密度,50,綜合評(píng)價(jià)長(zhǎng)毒結(jié)果 結(jié)合藥學(xué)，藥理學(xué)、PK、 TK和其它毒理學(xué)研究(+臨床研究)，綜合評(píng)價(jià) 找到：不良反應(yīng)(T&D&R)、毒性靶器官 (O)、安全范圍(S)、臨床需重點(diǎn)檢測(cè)指標(biāo)()及臨床監(jiān)護(hù)或解救措施(A),51,檢測(cè)指標(biāo),常規(guī)指標(biāo)：一般癥狀、體重、攝食量 血液學(xué)指標(biāo) ：10項(xiàng)（紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)，凝血時(shí)間等） 血液生化學(xué)指標(biāo) ：12項(xiàng)（非嚙齒類(lèi)16項(xiàng)） AST、AL

24、T等 尿液分析指標(biāo)：9項(xiàng)（非嚙齒類(lèi)）pH 值，尿糖，尿蛋白等 體溫、血壓、呼吸、心電圖及眼科檢查（非嚙 齒類(lèi)） 組織病理學(xué)檢查 臟器系數(shù)：12項(xiàng)（心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、甲狀腺、胸腺、睪丸、子宮、腦和前列腺） 組織學(xué)檢查 ：一般要求提供重要臟器(心、肝、脾、肺、腎、腦)和靶器官及有病理?yè)p傷的照片。,長(zhǎng)期毒性試驗(yàn),52,恢復(fù)期觀(guān)察 方法： 最后一次給受試物后24 h每組活殺2/31/2動(dòng)物檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)，留下l/31/2動(dòng)物繼續(xù)觀(guān)察24周，再活殺檢查。在此時(shí)間，除不給受試物外，其他觀(guān)察內(nèi)容與給受試物期間相同。引起不可逆損傷者要慎重考慮臨床試驗(yàn)問(wèn)題。,53,恢復(fù)期觀(guān)察 意義： 了解毒性反應(yīng)的可逆

25、程度和可能出現(xiàn)的延遲性毒性反應(yīng)。應(yīng)根據(jù)受試物的代謝動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)、靶器官或靶組織的毒性反應(yīng)和恢復(fù)情況確定恢復(fù)期的長(zhǎng)短。,54,檢測(cè)指標(biāo)的時(shí)間 大鼠3個(gè)月以?xún)?nèi)，一般在最后一次給藥后24h和恢復(fù)期結(jié)束各進(jìn)行一次。必要時(shí)中間可插一次；大鼠3個(gè)月以上，可在試驗(yàn)中間活殺少量動(dòng)物(高劑量組和對(duì)照組)檢測(cè)指標(biāo)。 犬的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)則應(yīng)有正常值2次，即未給藥時(shí)，給藥后11.5月測(cè)一次，停藥一次，恢復(fù)期結(jié)束一次。,55,（一）刺激性試驗(yàn) 刺激性是指非口服給藥制劑給藥后對(duì)給藥部位產(chǎn)生的可逆性炎癥反應(yīng)，若給藥部位產(chǎn)生了不可逆性的組織損傷則稱(chēng)為腐蝕性。刺激性試驗(yàn)是觀(guān)察動(dòng)物的血管、肌肉、皮膚、粘膜等部位接觸受試物后是否引起紅

26、腫、充血、滲出、變性或壞死等局部反應(yīng)。,（二）過(guò)敏性試驗(yàn) 過(guò)敏性又稱(chēng)超敏反應(yīng)，指機(jī)體受同一抗原再刺激后產(chǎn)生的一種表現(xiàn)為組織損傷或生理功能紊亂的特異性免疫反應(yīng)，是異?；虿±硇悦庖叻磻?yīng)。,（三）溶血性試驗(yàn) 溶血性是指藥物制劑引起的溶血和紅細(xì)胞凝聚等反應(yīng)。溶血性反應(yīng)包括免疫性溶血與非免疫性溶血。,新藥臨床前安全性評(píng)價(jià) -局部毒性試驗(yàn),56,新藥臨床前安全性評(píng)價(jià) -特殊毒性試驗(yàn),致癌試驗(yàn)包括長(zhǎng)期動(dòng)物和體外細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。 致畸型試驗(yàn)指有害因素施于親體，觀(guān)察子代胎兒畸型或死亡。 致突變?cè)囼?yàn)指遺傳物質(zhì)的損傷和改變：,致畸、致癌、致突變?cè)囼?yàn),57,新藥臨床前安全性評(píng)價(jià) -藥物依賴(lài)性試驗(yàn),58,新藥臨床前安全性評(píng)價(jià)局限性,種屬差異：假陽(yáng)性或假陰性 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量有限：發(fā)生率低的毒性反應(yīng)很難發(fā)現(xiàn) 發(fā)生率為5