1、,縮宮素的技術進步 與生育健康,南京新百藥業(yè)有限公司,1,2020/8/25,報告內(nèi)容,縮宮素的基本信息 生物縮宮素與化學縮宮素的特性比較 生物縮宮素的臨床應用,2,2020/8/25,催產(chǎn)素 （球和棒）綁定到其載體蛋白neurophysin（色帶）的結(jié)合形狀,縮宮素（催產(chǎn)素）的子宮收縮性質(zhì)由英國藥理學家亨利哈利特戴爾于1906年發(fā)現(xiàn) 1。 縮宮素：英文Oxytocin來自希臘語，kytokn，意思是“快誕生”。 縮宮素催乳性能由奧特（Ott）和斯科特（Scott）于1910年2和謝弗（Schafer）和Mackenzie于1911年描述3。 1953年初，科學家維森特迪維尼奧的團隊和Tupp

2、y成功測定排列出縮宮素的九個氨基酸序列4。1953年，科學家文森特迪維尼奧的團隊實現(xiàn)了實驗室合成人工縮宮素。 1955年，維森特迪維尼奧獲得諾貝爾化學獎56。 縮宮素是第一個在實驗室實現(xiàn)測序和合成的神經(jīng)肽。 維森特迪維尼奧在其1954年的著作中指出：這個合成是第一個神經(jīng)肽的可被合成7。 縮宮素從OXT（催產(chǎn)素）基因的無效前體蛋白合成。 人類與大多數(shù)哺乳動物的縮宮素的化學結(jié)構(gòu)如下： 半胱氨酸-酪氨酸-異亮氨酸-谷氨酰胺-天冬酰胺-半胱氨酸-脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-NH2。 縮宮素的結(jié)構(gòu)和抗利尿激素（半胱氨酸-酪氨酸-苯丙氨酸-谷氨酰胺-天冬氨酸-半胱氨酸-脯氨酸-精氨酸-甘氨酸-NH2）非常相似

3、。 1、 Dale HH. On some physiological actions of ergot. J. Physiol. (Lond.). 1906-05, 34 (3): 163206. PMC 1465771. PMID 16992821. Cite uses deprecated parameters 2、 Ott I, Scott JC. The Action of Infundibulum upon Mammary Secretion. Proc Soc Exp Biol. (1910) p.8:4849. 3、 Schafer EA, Mackenzie K. The a

4、ction of animal extracts on milk secretion. Proceedings of the Royal Society of London Series B-Containing Papers of a Biological Character. (1911) p.84:1622. 4、 du Vigneaud V, Ressler C, Trippett S. The sequence of amino acids in oxytocin, with a proposal for the structure of oxytocin. J. Biol. Che

5、m. 1953-12, 205 (2): 94957. PMID 13129273. Cite uses deprecated parameters 5、 du Vigneaud V, Ressler C, Swan JM, Roberts CW, Katsoyannis PG, Gordon S. The synthesis of an octapeptide amide with the hormonal activity of oxytocin. J. Am. Chem. Soc. 1953, 75 (19): 487980. doi:10.1021/ja01115a553. 6、 du

6、 Vigneaud V, Ressler C, Swan JM, Roberts CW, Katsoyannis PG. The synthesis of oxytocin. J. Am. Chem. Soc. 1954-06, 76 (12): 31153121. doi:10.1021/ja01641a004. Cite uses deprecated parameters 7、 THE SYNTHESIS OF OXYTOCIN. Vincent du Vigneaud, Charlotte Ressler, John M. Swan, Carleton W. Roberts, Pana

7、yotis G. Katsoyannis 1954 J. Am. Chem. Soc., 1954, 76（12）,pp 31153121,催產(chǎn)素的分子結(jié)構(gòu),1.1、縮宮素的發(fā)現(xiàn)歷史,3,2020/8/25,外源性縮宮素,內(nèi)源性縮宮素,1.2、縮宮素的產(chǎn)生路徑,1906年 發(fā)現(xiàn) iv 垂體后葉提取物可引起妊娠貓子宮收縮 1909年 用垂體后葉素治療剖宮產(chǎn)婦女子宮收縮乏力 1911年 用垂體后葉素治療滯產(chǎn) 1915年 發(fā)現(xiàn)刺激乳房可反射性分泌垂體后葉素 1927年 用垂體后葉素引產(chǎn) 1928年 鑒定了垂體后葉素 1948年 首先報道 VD 垂體后葉素用于引產(chǎn) 1953年 明確了縮宮素氨基酸序列

8、1955年 維森特獲諾貝爾獎,下丘腦視上核、室旁核大細胞合成垂體后葉貯存釋放九個氨基酸殘基組成的活性多肽。,4,2020/8/25,1.3、腺垂體激素與神經(jīng)垂體激素的異生共存,神經(jīng)垂體激素：催產(chǎn)素與升壓素的化學結(jié)構(gòu),Vicent du Vigneaud 于1953年合成縮宮素,縮宮素是一種九肽激素： 谷門冬半胱脯亮甘 異亮酪半胱 1單位相當于2ug高純度縮宮素， 1ml=15-16滴,5,2020/8/25,1.4、縮宮素、催乳素與生物進化,1、縮宮素、加壓素的生物進化,原始的脊椎動物（如：七腮鰻）僅有加壓催產(chǎn)素，即加壓素與催產(chǎn)素的祖先分子，其結(jié)構(gòu)如下： 谷門冬半胱脯精甘 異亮酪半胱 加壓催產(chǎn)

9、素的前半部象催產(chǎn)素，后半部象加壓素；它兼有催產(chǎn)素與加壓素的生物活性，唯效價均減半。 經(jīng)億萬年的演變，從水生魚類，過渡到兩棲類，再逐步進化到陸生的哺乳類，由于調(diào)節(jié)體內(nèi)水鹽代謝、產(chǎn)卵、分娩、哺育等作用過程和參與調(diào)節(jié)的器官均愈形復雜，遂從加壓催產(chǎn)素分化為催產(chǎn)素與加壓素。 加壓素：又稱抗利尿激素（ADH），作用于腎臟，調(diào)節(jié)水與鹽份平衡和體液的滲透壓，具有抗利尿作用，在較高的濃度時還能引起血壓升高。當大量出血時，它的調(diào)節(jié)血壓作用較為重要。醫(yī)學上用以治療尿崩癥，在大量肺咯血時用作止血劑。 催產(chǎn)素：可間接刺激子宮平滑肌收縮，模擬正常分娩的子宮收縮作用，導致子宮頸擴張，子宮對縮宮素的反應在妊娠過程中逐漸增加，

10、足月時達高峰。 生物提取縮宮素含有微量加壓素，化學合成縮宮素不含加壓素。,2、催乳素、生長激素的生物進化,生長激素與催乳素在結(jié)構(gòu)上相似，功能上分化，但兼有重疊的生理效應，兩者從共同的前體降解而來。 催乳素（prolactin，PRL）為腺垂體分泌的一種蛋白質(zhì)，由199個氨基酸殘基所組成。其對乳腺與泌乳的作用主要為促進乳腺發(fā)育生長，引起并維持泌乳。 妊娠期，催乳素、人絨毛膜生長素、孕激素、雌激素使乳腺組織進一步發(fā)育，由于血液中雌激素、孕激素濃度過高，與催乳素競爭乳腺細胞受體，催乳素失去效力。 分娩后，血中孕激素、雌激素濃度降低，催乳素發(fā)揮啟動和維持泌乳作用。胎兒垂體能分泌、貯存與釋放催乳素。到分

11、娩前幾周，其在血中濃度達高峰。 催乳素的分泌受下丘腦的催乳素釋放因子及催乳素釋放抑制因子的雙重控制。 在生理情況下，催乳素釋放抑制因子起作用。吸吮乳頭的動作，引起神經(jīng)沖動經(jīng)脊髓傳入下丘腦，使催乳素釋放因子神經(jīng)元興奮，引起催乳素分泌。 催乳素生理性增加見于運動后，性交、妊娠、產(chǎn)后、吮乳、夜間睡眠，應激狀態(tài)及月經(jīng)周期中的分泌期。,6,2020/8/25,刺激子宮收縮的因素,造成宮縮靜止的因素,1.5、縮宮素與分娩動因,7,2020/8/25,2.1、雜蛋白問題-引發(fā)化學合成縮宮素的雜蛋白被關注,1、2008肝素鈉事件-雜蛋白,2008年2月中上旬，美國4位患者，在使用美國百特醫(yī)療公司(下稱“美國百

12、特”)所產(chǎn)抗凝血劑肝素鈉(Heparin)后死亡，另有350多人出現(xiàn)了過敏反應和其他副作用。 (FDA)2008年2月14日表示，計劃盡快對生產(chǎn)肝素鈉有效成分的中國常州凱普公司進行調(diào)查。 即日起國家藥監(jiān)局連續(xù)下達十余專項文件整治國內(nèi)肝素鈉上下游生產(chǎn)商，確保不出現(xiàn)類似問題。 肝素鈉事件的核心問題是在肝素鈉藥物成分硫酸氨基葡聚糖之中摻進了約40%的雜蛋白物質(zhì)：多硫酸軟骨素?！岸嗔蛩彳浌撬亍睘榱蛩彳浌撬氐幕腔a(chǎn)品，屬于硫酸化多糖，不具備肝素鈉藥理作用。,3、藥品管理法,2001年12月1日起施行的藥品管理法第四十八條規(guī)定：禁止生產(chǎn)（包括配制，下同）、銷售假藥。 有下列情形之一的，為假藥： 1、藥品所

13、含成份與國家藥品標準規(guī)定的成份不符的； 2、以非藥品冒充藥品或者以他種藥品冒充此種藥品的。,2、2008三聚氰胺事件-雜蛋白,2008年9月21日，因使用三鹿嬰幼兒奶粉而接受門診治療咨詢且已康復的嬰幼兒累計39,965人，正在住院的有12,892人，此前已治愈出院1,579人，死亡4人，到9月25日，香港有5個人、澳門有1人確診患病。 國內(nèi)109家嬰幼兒奶粉生產(chǎn)企業(yè)的491批次產(chǎn)品排查中，顯示有22家企業(yè)69批次產(chǎn)品檢出三聚氰胺。 三聚氰胺最高比例約40%，一種三嗪類含氮雜環(huán)有機化合物，檢測中呈現(xiàn)類蛋白質(zhì)反應。,4、2010年國家藥典標準,縮宮素注射液 suogongsuzhusheye，Ox

14、ytocin Injection 本品系自豬或牛的腦垂體后葉中提取或化學合成的縮宮素的滅菌水溶液，其效價應為標示量的91%-116%。 檢查：PH值，應為3.0-4.5（附錄 H）、升壓物質(zhì)、細菌內(nèi)毒素、異常毒性、過敏反應、其他：應符合注射劑項下有關的各項規(guī)定（附錄 B）。,5、新GMP認證，加速化學縮宮素斷貨,國家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布數(shù)據(jù)顯示，截至2013年12月31日，有四成無菌藥品生產(chǎn)企業(yè)未通過藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）的認證。未通過新版藥品GMP認證的無菌藥品生產(chǎn)企業(yè)，將從2014年1月1日起停產(chǎn)。,8,2020/8/25,2.2、起始原料-兩種縮宮素的生物性差別,生物

15、提取縮宮素注射液,化學合成縮宮素注射液,以八種不同的氨基酸為起始原料，合成為九肽酰胺，后附加二硫鍵，難免引入二聚體、非對映異構(gòu)體、斷裂肽、開環(huán)肽的干擾，結(jié)構(gòu)相對松散，與受體結(jié)合能力及親和力弱化。,起始原料為新鮮豬或牛的腦垂體后葉，所提取的縮宮素化學結(jié)構(gòu)更接近人體內(nèi)源性縮宮素，與子宮平滑肌縮宮素受體的結(jié)合能力和親和力更強。,9,2020/8/25,2.3、活性物質(zhì)-化學縮宮素與三個有個性氨基酸,脯氨酸（Pro） 是一個環(huán)狀的亞氨基酸, 它的氨基和其它氨基酸的羧基形成的肽鍵有明顯的特點, 較易變成順式肽鍵。,甘氨酸（Gly） 是在-碳原子上只有2個氫原子, 沒有側(cè)鏈的氨基酸. 為此它既不能和其它殘

16、基的側(cè)鏈相互作用，也不產(chǎn)生任何位阻現(xiàn)象, 進而在蛋白質(zhì)的立體結(jié)構(gòu)形成中有其特定的作用。,半胱氨酸(Cys) 其側(cè)鏈有一定的大小和具有高度的化學反應活性，兩個Cys能形成穩(wěn)定的帶有二硫（橋）鍵的胱氨酸。二硫鍵不僅可以在肽鏈內(nèi)，也可以在肽鏈間存在。同樣的一對二硫鍵能具有不同的空間取向。,10,2020/8/25,2.4、工藝技術-生物提取的膜分離和樹脂純化組合工藝,采用生物提取法提取縮宮素，全過程僅用到一種有機試劑，減少了環(huán)境污染 。 采用膜技術與樹脂純化相結(jié)合的工藝提取縮宮素，縮宮素的純度達到90%以上，提取率達85%以上 ，達到目前生物提取法的最高水平。 2014年，獲得國家20年專利保護證書

17、。,專利工藝技術,11,2020/8/25,2.4.1、二十年國家專利保護-生物提取縮宮素的專利生產(chǎn)工藝,12,2020/8/25,純度高，有關物質(zhì)（雜質(zhì)蛋白）少 貯存期內(nèi)理化生物活性穩(wěn)定 幾無溶劑殘留,生物提取縮宮素注射液,2.5、產(chǎn)品質(zhì)量-兩種縮宮素的產(chǎn)品純度、生物穩(wěn)定性對比,化學合成縮宮素注射液,純度低，各種雜質(zhì)總量在20%-30%，受工藝影響或更高 貯存肽鏈可斷裂，貯存期內(nèi)生物活性穩(wěn)定性受到影響 合成過程存在多種有機溶劑殘留,13,2020/8/25,2.6、產(chǎn)品價格-各省零售價格列舉,化學合成縮宮素注射液,1ml：10單位，國家發(fā)改委定價，最高零售價1.50元/支。,1ml：5單位，

18、政府定價，2010年各省執(zhí)行最高零售價： 廣東?。?8.0元/支 安徽?。?4.4元/支 江蘇省：12.6元/支 江蘇省物價文件：蘇價醫(yī)【2010】125號文。,零售價格的差別，是生物提取縮宮素注射液與化學合成縮宮素制劑，在起始原料、工藝技術、質(zhì)量和療效、安全性等綜合差距的體現(xiàn)。,生物提取縮宮素注射液,14,2020/8/25,2.7、生物提取與化學合成縮宮素的比較匯總,專利工藝 技術,當下的化學合成 縮宮素需要升級 產(chǎn)品,純天然 原料,15,2020/8/25,3.1、縮宮素的藥理作用,縮宮素的藥理作用： 1、選擇性激動子宮平滑肌和乳腺的縮宮素受體：通過與該受體偶聯(lián)的G-蛋白介導，激活磷脂酶C（PLC）,促進磷酸肌醇的生成，使肌細胞動作電位下降，細胞外Ca離子進入細胞內(nèi)，增加胞漿中的Ca2+濃度，使子宮平滑肌興奮收縮，引起生理或藥理效應。 子宮收縮作用與縮宮素濃度、劑量及用藥時子宮狀態(tài)有關。孕晚期子宮逐漸敏感，臨產(chǎn)時和分娩后子宮敏感性達到高峰。 2、促宮頸成熟：通過激動蛻膜縮宮素受體，誘發(fā)子宮收縮；促進花生四烯酸生成，產(chǎn)生與釋放前列腺素，增加縮宮素敏感性。,注射縮宮素的生理效應： 1、興奮子宮平滑肌：激動子宮平滑肌的縮宮素受體，使收縮加強，頻率加快。 縮