1、輔導(dǎo)教案導(dǎo)學(xué)誘思一、酶與固定化酶1酶：活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化作用的一類有機物，它是生物體內(nèi)各種化學(xué)反應(yīng)的催化劑。2固定化酶：將_的酶用_或_方法_，使之成為_而又有_。3將酶改造成固定化酶的原因是：由于酶_，且不利于_，所以要將酶改造成固定化酶。4酶固定化的方法有：_法、_法、_法和_法等。本實驗用的是_法。5固定化酶作用的機理：將固定化酶_，當(dāng)_時，在_的作用下_。答案：2.水溶性物理化學(xué)固定在某種介質(zhì)上不溶于水酶活性的制劑3在水溶液中很不穩(wěn)定工業(yè)化使用4吸附共價偶聯(lián)交聯(lián)包埋吸附5裝柱底物經(jīng)過該柱酶轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物二、淀粉水解的過程及其在淀粉指示劑下的顏色反應(yīng)：答案：糊精藍(lán)紅不顯三、淀粉酶的固定化及

2、淀粉水解作用檢測的實驗1實驗?zāi)康模?1)制備_。(2)進(jìn)行_的測試。2實驗原理：將_酶固定在_上，一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過_后，可使淀粉水解成_。用_測試，若流出物呈_色，表明有_生成。3本實驗使用的酶及特性：本實驗使用的酶是_酶，其作用的最適宜pH為_，最適宜溫度為_。4實驗設(shè)備及用品：5 mL塑料注射器、50 mL燒杯、滴管、自行車用氣門芯及夾子、注射器架、試管或微量離心管3支。5實驗材料及其制備：(1)材料：固定化的淀粉酶、可溶性淀粉酶、5 mol/L KII2溶液。(2)部分材料的制備：淀粉酶的固定化：在燒杯中將5 mg_溶于4 mL蒸餾水中(由于_，可能有些不溶物)再加入5g_，不時攪

3、拌30 min30 min后將上述溶液裝入1支注射器中(該注射器的下端接有_并用_封住)石英砂體積約4 mL用_倍體積的蒸餾水_此注射器以除去_，流速為1 mL/min可溶性淀粉溶液：取_mg可溶性淀粉溶于100 mL_中，攪拌均勻?？扇苄缘矸廴芤海悍Q取0.127 g_和0.83 g_。加蒸餾水100 mL，完全溶解后裝入滴瓶中。6實驗步驟：(1)淀粉溶液流經(jīng)固定化酶柱將灌注了_的注射器放在注射器架上，用滴管加_溶液，使該溶液以_mL/min的流速過柱。(2)接取流出物待從固定化酶柱中流出_mL的溶液后，接收_mL流出液。(3)流出物鑒定在流出物中加入_溶液，觀察顏色。用水稀釋_倍后再觀察顏色

4、。(4)洗滌、保存固定化酶柱。實驗后，用_倍柱體積的蒸餾水洗滌此柱。放置在_冰箱中保存。(5)幾天后取出冰箱中該固定化酶柱，重復(fù)實驗，觀察結(jié)果。7實驗結(jié)果的比較：答案：1.(1)固定化淀粉酶(2)淀粉水解2淀粉石英砂固定化酶柱糊精淀粉指示劑紅糊精3枯草桿菌的淀粉5.57.55075 5實驗材料及其制備：(2)淀粉酶酶不純石英砂氣門芯夾子10洗滌未吸附的游離淀粉酶50熱水碘碘化鉀6(1)固定化酶淀粉0.3(2) 50.5(3)KII21(4)1047藍(lán)紅紅核心解讀HEXINJIEDU1.酶與固定化酶一樣嗎？相對酶而言，固定化酶有什么優(yōu)點呢？不完全相同，固定化酶是酶的衍生物。酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催

5、化作用的一類有機物，它是生物體內(nèi)各種化學(xué)反應(yīng)的催化劑，而固定化酶是將水溶性的酶用物理或化學(xué)方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。固定化酶的優(yōu)點：使酶固定化后有一定的機械強度，催化反應(yīng)的過程可管道化、連續(xù)化和自動化。酶不溶解在催化反應(yīng)的溶液中，產(chǎn)物更易純化。固定化酶可反復(fù)使用，更經(jīng)濟(jì)，更利于工廠化生產(chǎn)。固定化酶提高了酶的穩(wěn)定性，可較長時間地貯存和使用。固相酶是在20世紀(jì)60年代發(fā)展起來的一項技術(shù)，很快就得到了廣泛的應(yīng)用。2如何證明洗滌固定化淀粉酶柱的流出液中沒有淀粉酶？可在試管中加入1 mL可溶性淀粉溶液，再加入幾滴淀粉酶柱的流出液，混合后用手握住試管增加溫度，幾分鐘后加12

6、滴KII2指示劑，如仍顯藍(lán)色，即流出液中沒有淀粉酶了。用固定在石英砂上的淀粉酶柱再作用于淀粉溶液，使其自柱中流出，作用的結(jié)果才能表明是淀粉酶的固相酶作用的結(jié)果。3固定化酶有哪些用途呢？(1)固相酶在工業(yè)上的應(yīng)用氨基酸酰化酶固相酶可使D型和L型氨基酸拆分，用于生產(chǎn)L型氨基酸。柚苷酶固相酶用于果汁脫苦。蛋白酶固相酶用于制造蛋白水解液。木瓜蛋白酶固相酶用于啤酒澄清。葡萄糖異構(gòu)酶固相酶用于制造果糖，果糖是最甜的糖，制備的糖溶液可大大提高糖液的甜度。(2)固相酶在化學(xué)分析和臨床診斷上的應(yīng)用用尿酶固相酶可測定血液或尿中的尿素含量。(3)固相酶在醫(yī)藥上的應(yīng)用苯丙酮尿癥患者是由于體內(nèi)缺少苯丙氨酸羥化酶，不能使

7、苯丙氨酸轉(zhuǎn)變成氨基酸，使苯丙氨酸變成苯丙酮酸和苯乳酸而隨尿排出。這種病人智力發(fā)育遲緩，又稱精神幼稚病。如將苯丙氨酸羥化酶及其輔酶制成不溶酶，注射到患者體內(nèi)，可有效治療苯丙酮尿病。亞洲有15%的人體內(nèi)缺少乳糖酶，不能水解牛乳中的乳糖，乳糖進(jìn)入腸道后異常發(fā)酵，引起腹瀉腹痛。這種現(xiàn)象大約在飲用后十幾小時發(fā)生。有的人進(jìn)入老年后缺少乳糖酶，也會發(fā)生上述現(xiàn)象。因此，可以用乳糖酶固相酶在體外或體內(nèi)水解乳糖。4耐高溫的淀粉酶有哪些可能的用途？在實際生產(chǎn)中，總希望反應(yīng)的時間愈短愈好，這就要提高反應(yīng)溫度。通常生產(chǎn)上淀粉酶是一次性使用的，加溫雖在短時間內(nèi)會使酶變性失活，但沒有關(guān)系，只要使淀粉在短時間內(nèi)水解即可。尋找

8、耐高溫的淀粉酶的目的是在高溫下使淀粉水解快，而且酶不會因高溫而在短時間內(nèi)變性。在發(fā)酵生產(chǎn)中使用的往往是植物淀粉，如青霉素發(fā)酵、丙酮丁醇發(fā)酵、乙醇發(fā)酵(生產(chǎn)啤酒)等都要水解淀粉。所以耐高溫淀粉酶用途廣泛。5實驗中為什么要待固定化酶柱中流出5 mL液體后再接收流出液用于鑒定？因為固定化酶柱中的酶與流經(jīng)柱子的淀粉反應(yīng)需要一定的時間，剛開始流出的液體中由于反應(yīng)時間過短，糊精未生成或生成的量太少，所以不利于后面的顏色鑒定。6本實驗中為什么選用石英砂來固定化酶？固定化酶有許多方法，本實驗中采用的是吸附法。吸附法有物理交換法和離子交換法兩種。其中本實驗采用的又是物理交換法。該方法是將酶蛋白的分子吸附在惰性載

9、體上，但要選擇不引起變性且能保持一定酶活力的載體，且對蛋白質(zhì)要有高度吸附能力。自然界中有機硅膠、活性炭和石英砂等都可以被用于做載體?，F(xiàn)已了解其中石英砂對固定化淀粉酶、胰蛋白酶作用較好。題例領(lǐng)悟TILILINGWU【例題1】 下面關(guān)于固定化酶的說法，正確的是 ()A固定化酶是一種能溶解在水中，但依然保持酶活性的制劑B固定化酶能溶解于水，且結(jié)構(gòu)很穩(wěn)定，有利于工業(yè)化生產(chǎn)C固定化酶是經(jīng)過物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，使之能溶解于水中，又有酶活性的制劑D固定化酶是經(jīng)過物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，使之不能溶解于水中，又有酶活性的制劑解析：本題考查固定化酶的概念。A、B、C選項都錯在固定化酶是不溶

10、于水中的。此外，固定化酶是經(jīng)過物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，使之不能溶解于水中，又有酶活性的制劑。所以，只有選項D是正確的。答案：D酶與固定化酶彼此有關(guān)聯(lián)，但又有不同。其中固定化酶是酶的衍生物。酶能溶于水，而固定化酶不溶于水。固定化酶就是將水溶性的酶用物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，使之不能溶解于水中，又有酶活性的制劑。【例題2】 下列方法中不屬于固定化酶的是()A吸附法B共價法C交聯(lián)法 D包埋法解析：本題考查固定化酶的方法。固定化酶的方法比較多，其中包括吸附法、共價偶聯(lián)法、交聯(lián)法、包埋法等。本題4個選項中B的方法是不對的，所以要求知識掌握，尤其是專用名詞一定要精確。答案：B固定化酶的方

11、法包括吸附法、共價偶聯(lián)法、交聯(lián)法、包埋法等?！纠}3】 淀粉在各種酶的作用下會依次水解，不同階段的水解產(chǎn)物遇到指示劑會出現(xiàn)不同的顯色反應(yīng)，下列選項中屬于本實驗中的反應(yīng)物質(zhì)和顯色現(xiàn)象的是 ()A淀粉遇碘顯藍(lán)色B糊精遇KII2溶液顯紅色C麥芽糖遇碘不顯色D葡萄糖遇斐林試劑顯磚紅色解析：本題考查本實驗步驟中物質(zhì)的鑒定過程。該過程所依據(jù)的原理是淀粉流經(jīng)淀粉酶固定化酶柱時，淀粉被酶水解成了糊精，而糊精遇到KII2溶液顯紅色。所以A、C、D選項中的物質(zhì)都是錯誤的，不是淀粉、麥芽糖、葡萄糖，而是糊精。只有選項B正確。答案：B淀粉在各種不同酶的催化作用下的水解過程要掌握，此外還要知道每種生成物在遇到指示劑后將

12、出現(xiàn)怎樣的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。隨堂訓(xùn)練SUITANGXUNLIAN1下列關(guān)于淀粉酶的固定化過程的敘述中錯誤的是()A首先要在燒杯中將淀粉酶溶于4 mL蒸餾水中B再將5 g石英砂加入上述燒杯中，不時攪拌30 minC隨后將燒杯中的物質(zhì)裝入1支下端接有氣門芯但并不封住的注射器中D最后用10倍體積的蒸餾水洗滌此注射器，除去那些未吸附的游離淀粉酶答案：C解析：本實驗所用的材料之一是淀粉酶的固定化酶，它是需要現(xiàn)場制備的。本題4個選項就是關(guān)于其制備的過程的4個步驟。但是C選項的制備錯了，應(yīng)該是將燒杯中的物質(zhì)裝入1支下端接有氣門芯并用夾子封住的注射器中 ，而不是不封住的注射器中。2下列選項中是本實驗固定化酶所采用的方法是()A吸附法 B共價偶聯(lián)法C