1、第33章 套式病毒目,該目病毒包括：冠狀病毒科和動脈炎病毒科。,一、本科病毒主要特性,冠狀病毒屬病毒顆粒具有多形性，略呈球形，直徑80-220nm 。 具有囊膜和12-24nm的棒狀纖突，纖突頂端膨大呈球狀，纖突間有較寬的間隙，由于囊膜纖突排列呈皇冠狀，故而得名。 核衣殼螺旋對稱。 基因組為單分子線狀正股單股RNA，大小27-32Kb，是已知的RNA病毒中基因組最大的，具有傳染性。,第一節(jié) 冠狀病毒科,胞漿內(nèi)復(fù)制，通過出芽進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，胞吐釋放。 冠狀病毒能在多種細胞上增殖。,一、本科病毒主要特性,二、分類,SARS冠狀病毒,1.分類地位： 屬于冠狀病毒科、冠狀病毒屬。,三、常見的冠狀病毒,豬傳

2、染性胃腸炎病毒,2.病毒特點 呈圓形、橢圓形或多邊形；單分子線狀、單股正鏈RNA;螺旋對稱核衣殼；有囊膜，有1824nm長的冠狀纖突。,豬傳染性胃腸炎病毒,3.抵抗力： 病毒對脂溶劑敏感， 在低溫下極為穩(wěn)定，豬腸組織中的病毒，在-20可保存半年以上，室溫下可以存活3天，56作用45min可滅活病毒，0.5mol的MgCl2可以增強其對熱的抵抗力， 對光敏感，糞便暴露于日光下6h，其內(nèi)所含病毒即被滅活。 0.05%福爾馬林在37下20min可滅活病毒，0.5%的石炭酸在37下30min可滅活病毒。,豬傳染性胃腸炎病毒,4.致病性 TGEV在世界各地均有發(fā)現(xiàn)，是引起仔豬腹瀉的一種病原，對其他動物無

3、傳染性。 臨床癥狀是仔豬腹瀉、嘔吐，不同年齡和品種的豬均易感，3周齡以下的仔豬具有較高的死亡率，5周齡以后，發(fā)病豬的死亡率小于3周齡以內(nèi)豬（很少死亡），即隨著日齡增長，死亡率下降。,豬傳染性胃腸炎病毒,5. 致病機理 TGEV的靶器官為小腸，病毒可存在于病豬的各個器官、體液、和排泄物中。但以空場、十二指腸、腸系膜淋巴結(jié)內(nèi)含毒量最高。滴度為每克組織含106個豬感染劑量。 可經(jīng)呼吸道感染，病毒先在鼻粘膜和肺中復(fù)制，而后經(jīng)血液進入小腸。亦可經(jīng)（口、眼、食管、胃）消化道進入小腸。 進入小腸的TGEV，感染小腸絨毛上皮細胞，導(dǎo)致絨毛縮短（影響消化吸收），絨毛受損后，絨毛上皮細胞分泌的乳糖酶及其他雙糖酶減

4、少，導(dǎo)致腸內(nèi)容物的滲透壓增高，水從組織進入腸腔，導(dǎo)致腹瀉。,豬傳染性胃腸炎病毒,6.免疫 一般認為給母豬作口、鼻同時接種或乳腺內(nèi)接種，能給哺乳仔豬提供較好的乳汁免疫。 乳汁抗體含有IgA、IgG、IgM，IgA主要為分泌型IgA，僅有通過粘膜免疫才能產(chǎn)生母源保護，非經(jīng)腸免疫不能產(chǎn)生母源保護。 仔豬可通過初乳及乳汁獲得母源IgA抗體，獲得被動免疫，但血清中的IgG抗體不能提供保護。,豬傳染性胃腸炎病毒,7.微生物學(xué)診斷 取疾病早期階段的仔豬腸粘膜作涂片或冰凍切片，通過熒光抗體或ELISA可快速檢出病毒。,豬傳染性胃腸炎病毒, RT-PCR檢測。,豬傳染性胃腸炎病毒,病毒的分離鑒定 豬甲狀腺原代細

5、胞，較為敏感。初代分離可見微弱的CPE，原代豬腎、豬睪丸細胞盲傳多代可見CPE，傳代細胞對新分離株不敏感。 血清學(xué)實驗 包熒光抗體、間接血凝、環(huán)狀沉淀試驗、瓊擴及中和試驗等，其中中和試驗應(yīng)用最多，檢出率最高，特異性最強。 電鏡及免疫電鏡觀察,豬傳染性胃腸炎病毒,8.預(yù)防與控制 用弱毒疫苗免疫并不太有效，用強毒株接種懷孕母豬可使仔豬通過母源抗體獲得最佳保護。此外，改善衛(wèi)生條件，加強管理，對預(yù)防疫病有一定作用。,豬傳染性胃腸炎病毒,冠狀病毒科冠狀病毒屬。 病毒粒子呈球形，大小為100-200nm，具有囊膜，核酸類型為正股單股RNA。,（一）、病毒特點,禽傳染性支氣管炎病毒IBV,（二）血凝性,本病

6、毒含有血凝素，但未經(jīng)胰酶處理的含毒尿囊液，不能凝集雞的紅細胞。 若經(jīng)1%胰酶在37下作用3h，或56加熱30min，則會出現(xiàn)血凝性。經(jīng)胰酶處理的病毒，在-65可保存3周而不失去活性。（已經(jīng)適應(yīng)雞胚的毒株缺乏血凝性）,IBV能在雞胚以及雞胚氣管以及來自雞胚的多種細胞上生長；初次分離最好尿囊腔接種911日齡雞胚；感染組織內(nèi)不形成包涵體。,（三）病毒的培養(yǎng),傳染性支氣管炎是雞的一種急性、高度接觸性傳染的呼吸道疾病。本病僅發(fā)生于雞，雞不分年齡、性別和品種，均易感。 但主要侵害1-4周齡的幼雞。患雞主要（特征）表現(xiàn)為：氣喘、咳嗽、噴嚏和氣管出現(xiàn)鑼音。 在雛雞還出現(xiàn)流鼻涕。 產(chǎn)蛋雞產(chǎn)蛋量和質(zhì)量下降，或停止

7、產(chǎn)蛋。 目前，還出現(xiàn)了以腎臟、腸道或腺胃病變?yōu)橹鞯闹虏⌒汀ＤI型傳支的病雞腎臟腫大、蒼白、有尿酸鹽沉積。,（四）病毒的致病性,病毒通過汽霧以及攝入污染糞便的食物，而在雞群中迅速傳播。在環(huán)境中，病毒可存活數(shù)天，在低溫下存活數(shù)周，因此，雞群中往往存在持續(xù)感染的帶毒者。 病毒首先在呼吸道纖毛上皮細胞或腸道復(fù)制，可達很高滴度。在感染1-2天后，出現(xiàn)病毒血癥，將病毒散布到許多器官，最終導(dǎo)致生殖系統(tǒng)及腎臟的嚴(yán)重損傷。 由于病毒感染后，可進入各個器官，某些毒株對未成熟輸卵管可產(chǎn)生永久性的結(jié)構(gòu)損傷。,（五）病毒的致病機理,本病可經(jīng)呼吸道、消化道傳播。 從分泌物排毒長達2周，糞便排毒達3周。 病毒也可存于感染雞的

8、精液和急性期病雞所產(chǎn)的蛋中，康復(fù)雞可帶毒49天，35天具有傳染性 。,（六）雞群的帶毒情況,從病雞呼吸道分泌物、肺、腎臟、腺胃、輸卵管等處取病料 。 病毒的分離培養(yǎng)：雞胚尿囊腔種。雞胚發(fā)育遲緩。出現(xiàn)侏儒胚。,（七）病毒的微生物學(xué)診斷, 病毒鑒定： 易感雛雞接種；病毒中和實驗；血清學(xué)實驗（如熒光抗體、瓊脂擴散、間接血凝等）、核酸探針、PCR 等。,（八）病毒的微生物學(xué)診斷,該科只有1個屬，即：動脈炎病毒屬。,一、動脈炎病毒科的成員,第二節(jié) 動脈炎病毒科,為單鏈RNA病毒、衣殼呈二十面體對稱，核衣殼直徑40-45nm，病毒粒子直徑為60-70nm，具有囊膜、5nm的突起，對乙醚、氯仿敏感。PRRS

9、V無血凝特性。,豬呼吸與繁殖綜合癥病毒PRRSV,（一）病毒特點,符合該科病毒的特性，該病毒無血凝性.,（一）病毒特點,豬呼吸與繁殖綜合癥病毒PRRSV,根據(jù)核苷酸序列可分為兩個基因型： 歐洲基因型（A群）：代表株LV； 美洲基因型（B群）：代表株ATCCVR-2332。 在中國尚未見有歐洲型的報道。,（二）病毒的基因型,病毒能在豬肺巨噬細胞(PAM)和傳代細胞MarC-145 或Vero及MA104培養(yǎng)復(fù)制。,（三）病毒的培養(yǎng),具有高度的傳播性，主要侵害母豬和仔豬。 通過空氣經(jīng)呼吸道感染，亦可經(jīng)精液由交配感染。 母豬流產(chǎn)、不育癥為特征，出生死胎，弱仔；仔豬呼吸困難（彌漫性間質(zhì)性肺炎），死亡率

10、高；育肥豬的癥狀類似豬流感流涕。部分病豬耳部和軀體末端皮膚發(fā)紺，故稱“藍耳病”。,（四）病毒的致病性,病理變化： 通常感染豬子宮、胎盤、胎兒乃至新生仔豬無肉眼可見的變化。 剖檢死產(chǎn)、弱仔和發(fā)病仔豬常能觀察到肺炎病變。 患病哺乳仔豬肺臟出現(xiàn)重度多灶性乃至彌漫性黃褐色或褐色的肝變；脾臟腫大，淋巴結(jié)腫脹；胸腺萎縮、心包積液等。,感染豬在若干星期內(nèi)抗體存在的同時出現(xiàn)病毒血癥，已經(jīng)證實抗體可以增強病毒感染。 病毒可以通過胎盤感染胎兒，導(dǎo)致臍帶出血性病變。 病毒感染單核細胞及巨噬細胞，造成免疫抑制。,（五）病毒的致病機理,病毒分離與鑒定： 應(yīng)用豬肺巨噬細胞（PAM）或傳代細胞（MarC-145、Vero

11、MA104）分離病毒。 用免疫金、銀染色或過氧化酶染色進行鑒定； 分子生物學(xué)方法（如RT-PCR）具有特異敏感快速等優(yōu)點。,（六）病毒的微生物學(xué)診斷,國內(nèi)外己經(jīng)推廣應(yīng)用滅活苗或弱毒苗。但因病毒的變異性以及致病與免疫機理的復(fù)雜性，滅活苗的免疫效果不確實，弱毒苗的安全性仍存在隱患。 對本病尚無有效的治療或預(yù)防藥物。,（七）防治,本章小結(jié),冠狀病毒科的基因組結(jié)構(gòu)和特點決定其易發(fā)生變異和進化，致使致病性和抗原性復(fù)雜多變，豬的冠狀病毒、禽傳染性支氣管炎病毒及貓傳染性腹膜炎病毒是典型。 SARS冠狀病毒是2003年發(fā)現(xiàn)的對人有高致病性的冠狀病毒。多種冠狀病毒均可引起腹瀉。 動脈炎病毒科的豬呼吸與繁殖障礙綜

12、合征病毒對豬具有致病性，其檢測和預(yù)防均具有重要意義。,本章復(fù)習(xí)題,1比較冠狀病毒科與動脈炎病毒科的異同并說明設(shè)立套式病毒目的依據(jù)。 2以禽傳染性支氣管炎病毒為例，試述冠狀病毒變異的復(fù)雜性。 3闡述豬呼吸與繁殖綜合征病毒的致病特點。,第34章 其他正鏈RNA病毒,該科的病毒在人醫(yī)和獸醫(yī)中均具有重要性。 其中口蹄疫病毒是人類發(fā)現(xiàn)的第一個動物病毒；而且是目前研究最為廣泛、深入的病毒之一。 人類的脊髓灰質(zhì)炎病毒也是該科的成員。,第一節(jié) 微RNA病毒科,微RNA病毒科分6個屬：口蹄疫病毒屬、腸病毒屬、心病毒屬、鼻病毒屬、肝病毒屬 及 副腸孤病毒屬。 這6個屬的重要區(qū)別是： 口蹄疫ph7以下不穩(wěn)定 1.

13、在低溫下穩(wěn)定 鼻病毒屬ph5以下失活 其他幾個屬在pH3均穩(wěn)定 2. 5端非編碼區(qū)： 心病毒屬及口蹄疫有一個長的聚C尾，其他幾個屬則無。 3. 心病毒屬與口蹄疫病毒屬編碼衣殼蛋白的先導(dǎo)蛋白又有區(qū)別。,一、分類,病毒顆粒無囊膜，直徑20-30nm，20面體對稱，外表光滑呈球形。每個衣殼單體都由4蛋白組成：VP1、VP2、VP3、VP4。 基因組為單分子線狀正股單股RNA，基因組RNA具有傳染性。,二、本科病毒主要特征,屬于微RNA病毒科、口蹄疫病毒屬。 病毒粒子20-25nm，呈圓形或六角形，二十面體對稱，無囊膜。在負染標(biāo)本中，可見由32個殼粒組成的衣殼,口蹄疫病毒FMDV,一、病毒形態(tài)特征,實

14、驗動物中，豚鼠、小鼠、乳鼠均易感。 FMDV可在多種細胞中增值，且增值速度快。,二、病毒培養(yǎng),4較為穩(wěn)定，-20-70可保存數(shù)年之久，畜舍、墻壁、或地板上的干燥分泌物中的病毒，夏天可存活1個月，冬天2個月。 pH7.4-7.6最適。對酸堿敏感，酸堿條件下迅速滅活（pH3或1%NaOH下1min即可滅活）； 乳品中的口蹄疫病毒于70 10min即可滅活，肉品(或尸體) 中的FMDV，由于尸僵后迅速產(chǎn)生乳酸，故肌肉中的病毒可迅速滅活，腺體、淋巴結(jié)和骨髓中的病毒由于不易產(chǎn)酸，病毒可活數(shù)月。 常用消毒劑如：酚類、乙醚、氯仿及一些去污劑對病毒作用不大。但3-5%的福爾馬林、0.2-0.5%的過氧乙酸、5

15、%的氨水、5%的次氯酸鈉均為口蹄疫病毒的良好消毒劑。 由于1%NaOH可在1min內(nèi)滅活病毒，故畜舍、運輸車和飼槽等常用其消毒。,三、抵抗力,口蹄疫病毒具有7個血清型：A、O、C、SAT1、SAT2、SAT3及亞洲1型。 每一個血清型又可進一步劃分為若干亞型，共有亞型65個。 各型之間臨床表現(xiàn)沒有什么區(qū)別，但各型之間交叉免疫微弱，幾乎無交叉免疫。且本病毒具有較大的變異性，病毒在保存或流行過程中常發(fā)生抗原漂移，這給本病的預(yù)防帶來一定的困難。,四、血清型,五、致病性,口蹄疫病毒是全球性最重要的動物健康問題之一，世界大部分地區(qū)時有發(fā)生。僅1973年，就有73個國家和地區(qū)爆發(fā)。 口蹄疫病毒主要侵害偶蹄

16、獸，偶爾見于人和其他動物。人特別是兒童，可得心肌炎引起死亡。 家畜中以牛最易感，其次是豬，再次是綿羊、山羊和駱駝。馬不感染。本病常在豬群和牛群中大范圍流行。國際獸醫(yī)局（OIE）一直將本病列為發(fā)病后必須報告的A類疫病名單之首。,本病的主要癥狀：口、鼻、蹄及乳房等部位發(fā)生水泡和潰爛為特征。（在咽喉、氣管、支氣管有時有爛斑和潰瘍，心包膜有彌散狀及點狀出血），并有可能出現(xiàn)跛行。 不同動物癥狀稍有不同。懷孕母?？赡芰鳟a(chǎn)，而后導(dǎo)致繁殖能力下降；犢牛常不表現(xiàn)臨床癥狀即死亡，主要是心肌炎；豬則以跛蹄為最主要的癥狀。該病死亡率不高，但感染率很高。,五、致病性,五、致病性,病毒在水泡及淋巴結(jié)中含毒量最高。在水泡發(fā)

17、展的過程中，病毒進入血流，則可分布于全身各部分組織和體液。 實驗動物中，豚鼠、小鼠、乳鼠均易感。FMDV可在多種細胞中增值，且增值速度快。,五、致病性,反芻動物感染的主要途徑是通過吸入感染，但亦可通過采食或接觸污染物而感染。 病毒經(jīng)呼吸道而感染時，最初在咽部復(fù)制，而后傳播到其他組織，在臨床癥狀出現(xiàn)前的24h，患畜排出病毒，奶中也帶有大量的病毒，并持續(xù)數(shù)天，感染豬噴出的飛沫中含有大量的病毒。,六、致病機理,上皮細胞是FMDV的易感靶細胞，病毒侵入機體后，首先在侵入部位的上皮細胞內(nèi)增值，引起漿液性滲出物而形成原發(fā)性水泡。1-3天后，病毒進入血流，引起動物體溫升高和全身癥狀，病毒隨著血流到達所嗜好的

18、部位（如：口腔粘膜、蹄部、以及乳房皮膚的表層組織）繼續(xù)增值，形成繼發(fā)性水泡，隨著水皰的發(fā)展，融合而破裂時，體溫即下降至正常，病毒從血流中逐漸減少直至消失，此時病畜即進入恢復(fù)期，多數(shù)病例逐漸好轉(zhuǎn)。 病毒可在某些康復(fù)動物的咽部長時間存在，牛在感染后可長達2年，綿羊可達6個月，豬未發(fā)現(xiàn)病毒的持續(xù)感染。 康復(fù)牛對同型病毒感染的免疫力可維持1年或稍長。,六、致病機理,七、微生物學(xué)診斷,口蹄疫幾乎是世界各國都被列為必須上報的疫病，診斷只能在指定的實驗室進行，一般是檢測抗體。 送檢的樣品包括：水泡液、剝落的水泡、抗凝血或血清等，死亡動物則可采淋巴結(jié)、扁桃體及心等。 樣品應(yīng)冷凍保存，或置于pH7.6的甘油緩沖液中。 檢測有多種方法