1、分子細(xì)胞遺傳學(xué)新進展,傳統(tǒng)的細(xì)胞遺傳學(xué),細(xì)胞遺傳學(xué)主要研究染色體的 亞顯微結(jié)構(gòu)和基因活動的關(guān)系,細(xì)胞周期的階段,簡 介,60年代早期 局限于計算染色體的數(shù)目 粗略的將染色體按照大小和著絲粒位置進行區(qū)分( groups A to G) 1970年 顯帶技術(shù)的建立 清楚的分辨出46條染色體,細(xì)胞遺傳學(xué)的一般步驟,細(xì)胞培養(yǎng) 使細(xì)胞停留在分裂中期 低滲的方法使細(xì)胞膨大 固定染色體，保留核酸 將細(xì)胞滴到玻片上 用顯帶染色技術(shù)進行染色 在熒光顯微鏡下分析染色體 數(shù)20個中期分裂相進行分析 常規(guī)研究方法可區(qū)分400-600條帶 高分辨率研究方法可區(qū)分650條帶,細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)的步驟,細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)的步驟,細(xì)

2、胞遺傳技術(shù)的步驟,有絲分裂中期的核型分析,染色體組核型分析,G-帶 (Giemsa) 富含AT的區(qū)域顏色較深 優(yōu)點 能看到整個基因組 顯示每一單個染色體 缺點 分辨率(5-10Mb) 進行細(xì)胞培養(yǎng) 其他會用到的核型分析技術(shù) R, Q, C, 和 NOR 帶,染色體異常數(shù)目改變,三倍體 和 四倍體 非整倍體 +21, +18, +13, XO, XXY, 等,染色體異常結(jié)構(gòu)異常,平衡改變 易位和 倒位 不平衡改變 缺失, 擴增, 環(huán)狀染色體, 和等臂染色體,倒位,擴增和環(huán)形染色體,染色體缺失,缺失 看得見的 識別起來相對容易 微缺失 看不見 識別起來不是很容易,意 義,為什么開展細(xì)胞遺傳學(xué)分析

3、?,(A)產(chǎn)前及產(chǎn)后遺傳病,染色體異常的發(fā)生機率,出生嬰兒 0.6% 先天性智力障礙（MR）患者 23% 先天性心臟病 13% SAB 夫婦 5% 死胎和 圍產(chǎn)期死亡胎兒 6.0% 自然流產(chǎn) (前三個月) 60%,染色體異常在自發(fā)性流產(chǎn)中的發(fā)生率,唐式綜合癥在活產(chǎn)中的發(fā)生率及與孕婦年齡的關(guān)系,新生兒染色體異常發(fā)生率,唐氏綜合癥,21號染色體三體, 95-97% 多余的染色體來自母親, 唐氏綜合癥與母親的年齡有關(guān)系, 確切的病因不是很了解. 活產(chǎn)新生兒發(fā)病率為1 /800 to 1 /1,100 , 唐氏綜合癥與文化、種族、社會階層以及地理區(qū)域都沒有必然的聯(lián)系。 智能較正常兒童低，認(rèn)知困難，發(fā)育

4、遲緩。他們也有很特殊的面貌，通常雙眼距離較遠(yuǎn)、眼睛向上斜、鼻梁骨平坦，嘴、牙齒及耳朵均細(xì)小。肌張力低。,Turner 綜合癥,1個x染色體的全部或者部分丟失 ，只發(fā)生在女性。 是最常見的染色體異常導(dǎo)致的疾病 ( 活產(chǎn)女性新生兒發(fā)病率大約為 1 / 2500 ) 身材矮小、卵巢不發(fā)育、性幼稚、 蹼頸、 腎臟和甲狀腺有問題, 骨骼畸形等 生長激素治療, 雌激素替代治療等,(B)白血病及實體瘤,腫瘤的分子生物學(xué)基礎(chǔ) 1、癌基因 2、抑癌基因,基因功能與腫瘤,腫瘤中常見的癌基因種類,腫瘤中常見的癌基因擴增,常見的抑癌基因,白血病及淋巴瘤中常見的基因改變,基因組大小和分辨率,分子細(xì)胞遺傳學(xué) 熒光原位雜交

5、技術(shù) (FISH)多色 FISH (SKY 和 MFISH）比較基因組雜交 (CGH）基因微陣列 (aCGH),熒光原位雜交技術(shù)(FISH),熒光原位雜交（Fluorescence in situ Hybridization，F(xiàn)ISH）,基本原理：應(yīng)用熒光染料標(biāo)記探針DNA，變性成單鏈后與變性后的染色體或細(xì)胞核靶DNA雜交，在熒光顯微鏡下觀察并記錄結(jié)果。,生命科學(xué)中的“釣魚” 技術(shù),centromere,telomere subtelomere,locus specific,whole chromosome paint,FISH技術(shù)的特點,操作簡便，探針標(biāo)記后穩(wěn)定，可與多種技術(shù)結(jié)合， 可成功地

6、幫助細(xì)胞遺傳學(xué)家做出回顧性分析,方法敏感，能迅速得到結(jié)果，24小時就可以完成檢測,人員培訓(xùn)較快,標(biāo)本來源豐富，間期細(xì)胞，分裂中期細(xì)胞、分化或未分 化細(xì)胞及死亡或存活的細(xì)胞皆可以被檢測,FISH在白血病及實體瘤中的應(yīng)用,（1）診斷,宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居第二位，僅次于乳腺癌。據(jù)世界范圍統(tǒng)計，每年估計有46.6 萬左右的宮頸癌新發(fā)病例，其中80%的病例發(fā)生在發(fā)展中國家。近幾年來，據(jù)一些國家和地區(qū)報道，宮頸癌的發(fā)病和死亡大致穩(wěn)定，但局部有增長的趨勢，特別是宮頸癌的年輕病例增加，宮頸腺癌的發(fā)病也趨于年輕化。在我國部分地區(qū)近年也出現(xiàn)了宮頸癌病人年紀(jì)年輕化趨勢的報道,行為

7、危險因素 性生活過早、多個性伴侶、多孕多產(chǎn)、社會經(jīng)濟地位低下、營養(yǎng)不良及性混亂等 生物學(xué)因素 細(xì)菌、病毒和衣原體等各種微生物的感染,子宮頸癌,細(xì)胞學(xué)分級,鱗狀細(xì)胞癌為主，約占95；腺癌僅為5左右；腺鱗癌少見，但惡性度最高，預(yù)后最差。,傳統(tǒng)的宮頸癌檢查及診斷程序,Cervical Pap screening,Normal,ASC-US,ASC-H,LSIL,HSIL,Repeat Pap 4 to 6 months,or,HPV Testing,HPV negative (high-risk type),HPV positive (high-risk type),Repeat Pap 12 mo

8、nths,Colposcopy,No lesion seen,Cervical pre-cancer or cancer,Repeat Pap at 6, 12 months, or HPV testing at 12 months,Treat,傳統(tǒng)巴氏細(xì)胞學(xué)涂片14)(p16;q32); t(14;16)(q32;q23), 17p13- ( 24.7 個月) 預(yù)后中等: 13q14- (42.3 個月) 預(yù)后好: 其他 (50.5 個月),成人急性淋巴細(xì)胞性白血病的預(yù)后分類 Favorable risk ( median DFS 3 years) Normal or isolated 9p

9、/p15-p16 deletions Intermediate risk ( median DFS 19 months) 6q deletions, hyperdiploidy, and miscellaneous aberrations Unfavorable risk (median DFS 7 months) t(9;22)/BCR-ABL, t(4;11)/MLL-AF4, and t(1;19)/E2A-PBX1,Favorable risk +4,+10, and +17 or t(12;21)(TEL/AML1) Unfavorable risk 11q23(MLL) rearrangements Very unfavorable risk Hypodiploidy( 45 chrom