1、“番茄馬鈴薯”理想圖,通過(guò)長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)，科學(xué)家們采用體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了“番茄馬鈴薯”植株。,雜種植株,融合的原生質(zhì)體AB,再生出細(xì)胞壁,脫分化,愈傷組織,再分化,植物細(xì)胞的融合,植物組織培養(yǎng),植物細(xì)胞A,原生質(zhì)體B,原生質(zhì)體A,雜種細(xì)胞AB,去 壁,去 壁,人 工 誘 導(dǎo),方法？,促進(jìn)融合的方法？,融合完成的 標(biāo)志,植物細(xì)胞B,植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過(guò)程,成果和未解決的問(wèn)題,成果：克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙，出 現(xiàn)自然界沒(méi)有的新品種。,未解決的問(wèn)題：未能讓雜種植物按照人們 的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。,如果將牛的細(xì)胞與植物細(xì)胞雜交，得到綠色的小奶牛，那豈不是只要曬曬太陽(yáng)就可以擠出牛奶啦！,動(dòng)物細(xì)胞也能

2、融合嗎？,一、動(dòng)物細(xì)胞融合,細(xì)胞A,細(xì)胞B,雜交細(xì)胞,滅活的病毒,物理法 化學(xué)法,仙臺(tái)病毒 皰疹病毒 新城雞瘟病毒,不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞,滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合,融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,1、動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程,思考題,1、植物體細(xì)胞雜交前做何處理？怎么處理？,去壁 酶解法，如纖維素酶或果膠酶,2、動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需要進(jìn)行去壁處理嗎？為什么？,無(wú)需，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁,3、植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？,離心、振動(dòng)、電激等物理方法；PEG等化學(xué)方法,4、動(dòng)物細(xì)胞融合能利用上述兩類(lèi)方法嗎？還有其他方法？,能 還可以利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo),5、植物體細(xì)胞雜交過(guò)程應(yīng)先進(jìn)行原生質(zhì)體融合再

3、進(jìn)行組織培養(yǎng)形成完整的個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎？,不能,6、你能歸納出什么叫做動(dòng)物細(xì)胞融合嗎？,思考題,2、動(dòng)物細(xì)胞融合的概念,動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。,7、你推測(cè)一下動(dòng)物細(xì)胞融合有哪些方面的應(yīng)用嗎？,思考題,利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)誘導(dǎo)形成雜交瘤細(xì)胞,8、在生產(chǎn)實(shí)際中雜交瘤細(xì)胞有怎樣的應(yīng)用？,生產(chǎn)單克隆抗體,細(xì)胞融合與融合誘導(dǎo)細(xì)胞融合物質(zhì)：,誘導(dǎo)劑：仙臺(tái)病毒、聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合的仙臺(tái)病毒必須滅活。 思考討論：為什么細(xì)胞融合過(guò)程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎？,因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂 質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)

4、胞發(fā)生融合，不滅 活的話會(huì)感染細(xì)胞，而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。,細(xì)胞融合技術(shù)應(yīng)用于哪些方面？,細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)及制備單克隆抗體。,1.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？ 2. 如何得到抗體？,二、單克隆抗體,抗體,1、抗原 動(dòng)物體內(nèi),抗原不純,抗體不純,2、特異性差、純度低；,產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏,二、單克隆抗體,設(shè)計(jì)方案： 一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖,如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？,雜種細(xì)胞,二、單克隆抗體,？,？,誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？,抗原,漿細(xì)胞,2.制備過(guò)程：,二、單克隆抗體,B BB B瘤 瘤瘤 瘤,細(xì)胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞？,雜種細(xì)胞,整個(gè)制

5、備過(guò)程要經(jīng)過(guò)幾次篩選?,（第一次篩選得到雜交瘤細(xì)胞（多種）， 第二次需先在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開(kāi)始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。 由于該細(xì)胞群是單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆得來(lái)的，所以產(chǎn)生的抗體必然是化學(xué)性質(zhì)單一的，特異性強(qiáng)的單克隆抗體。這里的單克隆確有單個(gè)細(xì)胞克隆的含義，只不過(guò)克隆的不是B淋巴細(xì)胞，而是雜交瘤細(xì)胞。）,3.單克隆抗體的應(yīng)用：,作為診斷試劑,用于治療疾病和運(yùn)載藥物,生物導(dǎo)彈,特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。,主要用于制備 單克隆抗體,獲得雜種植株,用途,物理、化學(xué)方法 （同左）,滅活的病毒,物理（離心、振動(dòng)、電刺激） 化學(xué)（聚乙二醇）,誘導(dǎo)方法,使細(xì)胞

6、分散后誘 導(dǎo)細(xì)胞融合,去除細(xì)胞壁后誘 導(dǎo)原生質(zhì)體融合,細(xì)胞融合的方法,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,細(xì)胞膜的流動(dòng)性、 植物細(xì)胞全能性,原理,動(dòng)物細(xì)胞融合,植物體細(xì)胞雜交,比較項(xiàng)目,植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較,下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案,制備單克隆抗體,B細(xì)胞,抗體,細(xì)胞融合,滅活病毒,雙親細(xì)胞,分泌抗體,無(wú)限增殖,原代,傳代,下列屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的是 A.培養(yǎng)基成分不同 B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行 C.動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能 D.動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株,下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中，不正確的是 A培

7、養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清 B原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右便會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)停滯 C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般能夠傳到4050代，但其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變 D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細(xì)胞,A,C,生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，以下較易成功“復(fù)生”野驢的方法是 A將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個(gè)體 B將野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體 C取出野驢的體細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體 D將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個(gè)體,C,一

8、只羊的卵細(xì)胞核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后，這個(gè)卵細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次分裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用途，但是不能 A有選擇地繁殖某一性別的家畜 B繁殖家畜中的優(yōu)秀個(gè)體 C用于保存物種 D改變動(dòng)物的基因型,D,下列哪項(xiàng)屬于克隆 A將雞的某個(gè)DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B將抗藥菌的某基因引入草履蟲(chóng)的細(xì)胞內(nèi) C將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過(guò)免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞 D將某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個(gè)細(xì)胞系,試管嬰兒、試管苗和克隆羊三者均屬于生物工程技術(shù)的杰出成果，下面敘述正確的是 A.都屬于無(wú)性生殖能保持母本性狀 B.都是細(xì)胞工程的技術(shù)范圍 C.都充分體現(xiàn)了體細(xì)胞

9、的全能性 D.都不會(huì)發(fā)生基因重組和變異,D,B,下圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖。請(qǐng)據(jù)此回答：,（1）A中放置的是動(dòng)物器官或組織。它一般取自 。 （2）容器A中的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是 ， 然 后用 酶處理，使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)，這樣做的目的是 。 （3）培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行，瓶中的培養(yǎng)基成分有_等。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間后，有許多細(xì)胞衰老死亡，這是培養(yǎng)到第 代，到這時(shí)的培養(yǎng)稱(chēng)為 。 （4）為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中，用 處理，然后配置成 ，再分裝。 （5）在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡，原因是 。,CCTV一2于2005年4月7日?qǐng)?bào)道，衛(wèi)生部4月6日發(fā)布了蘇丹紅危險(xiǎn)性

10、報(bào)告評(píng)估，報(bào)道中提到蘇丹紅一號(hào)是一種人工色素(工業(yè)染料)，它在人體內(nèi)代謝生成相應(yīng)的胺類(lèi)。科研人員欲采用一定的技術(shù)手段探究蘇丹紅是否對(duì)人體有危害。請(qǐng)回答： （1）根據(jù)所學(xué)的動(dòng)物細(xì)胞工程知識(shí)，你認(rèn)為采取下列哪種技術(shù)手段最合適： A動(dòng)物細(xì)胞融合 B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) C胚胎移植 D核移植,（2）根據(jù)上述選擇，請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)來(lái)探究“蘇丹紅一號(hào)”是否對(duì)人體有危害。 1該實(shí)驗(yàn)的原理是： 。 2實(shí)驗(yàn)方法步驟： 材料準(zhǔn)備：從醫(yī)院婦產(chǎn)科獲取所需要的原材料組織，濃度為0.09“蘇丹紅一號(hào)”試劑，高倍顯微鏡，培養(yǎng)瓶若干，配制好的培養(yǎng)液，剪刀，培養(yǎng)箱，所需要的酶。 制備檢測(cè)細(xì)胞： a配制細(xì)胞懸浮液： 。 b將懸浮液分裝到

11、兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間。 檢測(cè)過(guò)程： 。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察、分析得出結(jié)論。(略),動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較，在動(dòng)物細(xì)胞融合中有特殊性的是 A融合的原理 B融合的過(guò)程 C融合的誘導(dǎo)手段 D融合的結(jié)果,C,下表為動(dòng)、植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容比較，你認(rèn)為錯(cuò)誤的有,A0處 B1處 C2處 D3處,（1）若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用 處理，除去了 ；由A、B到細(xì)胞C的過(guò)程中，常用的物理方法是 。融合完成的標(biāo)志是 。 （2）若A、B是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用 技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。,（3）若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自 ，然后用 使其分散開(kāi)來(lái)；由A、B到C的過(guò)程中，

12、常用的不同于植物細(xì)胞融合的手段是 ，所形成的D稱(chēng)為 ，A、B融合為C的過(guò)程說(shuō)明了細(xì)胞膜具有 。,（1）纖維素酶和果膠酶 細(xì)胞壁 電刺激、振動(dòng)、離心 產(chǎn)生新的細(xì)胞壁 （2）植物組織培養(yǎng),(3)動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織 胰蛋白酶 滅活的病毒誘導(dǎo) 雜種細(xì)胞 一定的流動(dòng)性,（4）若該過(guò)程是制備單克隆抗體，A為小鼠效應(yīng)B細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已經(jīng)被注射了 。注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)，生成了_，圖中B為 。 （5）若該過(guò)程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過(guò)程中，所形成的C有 種，用來(lái)培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是 。從中選擇出它的方法是 培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中

13、培養(yǎng)和 。,(4)抗原 效應(yīng)B細(xì)胞 抗體和記憶細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 (5)3 雜交瘤細(xì)胞 用特定的選擇培養(yǎng)基 小鼠腹腔內(nèi)增殖,若人基因的作用不受鼠基因影響，則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的 號(hào)染色體上。,將分離出的雜種細(xì)胞在不同條件下繼續(xù)培養(yǎng)，獲得A、B、C三細(xì)胞株。各細(xì)胞株內(nèi)含有的人染色體如有表（“+”有，“”無(wú)）測(cè)定各細(xì)胞株中人體所具有的五種酶的活性。 結(jié)果是：B株有a酶活性；A、B、C株均有 b酶活性：A、B株有c酶活性；C株有d酶活性；A、B、C株均無(wú)e酶活性。,比特爾等在1941年提出了“一個(gè)基因一種酶假說(shuō)”。在生物體內(nèi)，各類(lèi)物質(zhì)或分子是經(jīng)過(guò)一系列代謝步驟合成的，每一步都受特定的酶所催化。現(xiàn)