1、人苗條素受體 () 酶聯(lián)免疫分析（）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中人苗條素受體 () 含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人苗條素受體() 水平。用純化的人苗條素受體()抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入苗條素受體()，再與標記的苗條素受體 () 抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物顯色。 在酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的苗條素受體 () 呈正相關。用酶標儀在波長下測定吸光度（值），通過標準曲線計算樣品中人苗條素受體 () 濃度。試劑盒組成

2、：試劑盒組成孔配置孔配置保存說明書份份封板膜片 ()片 ()密封袋個個酶標包被板 保存標準品瓶瓶 保存標準品稀釋液瓶瓶 保存酶標試劑瓶瓶 保存樣品稀釋液瓶瓶 保存顯色劑液瓶瓶 保存顯色劑液瓶瓶 保存終止液瓶瓶 保存濃縮洗滌液( 倍 ) 瓶( 倍 ) 瓶 保存樣本處理及要求：.血清：室溫血液自然凝固分鐘，離心分鐘左右（轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。.血漿：應根據(jù)標本的要求選擇、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合分鐘后，離心 分鐘左右（ 轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。.尿液：用無菌管收集，離心分鐘左右（轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形

3、成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心分鐘左右（ 轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用（）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到萬 左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心分鐘左右（轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的，。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保持的溫度。加入一定量的（），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心分鐘左右（ 轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。1 / 3操作步驟：. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔孔，在第

4、一、第二孔中分別加標準品，然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液，混勻；然后從第一孔、第二孔中各取 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取 棄掉，再各取 分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液，混勻后從第七、第八孔中分別取 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液，混勻后從第九第十孔中各取 棄掉。. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品

5、稀釋液，然后再加待測樣品 （樣品最終稀釋度為 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。. 溫育：用封板膜封板后置溫育分鐘。. 配液：將（ 的 倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水（的 倍）倍稀釋后備用。. 洗滌：小心揭掉封板膜， 棄去液體， 甩干，每孔加滿洗滌液， 靜置 秒后棄去， 如此重復次，拍干。. 加酶：每孔加入酶標試劑，空白孔除外。. 溫育：操作同。. 洗滌：操作同。. 顯色：每孔先加入顯色劑，再加入顯色劑 ，輕輕震蕩混勻，避光顯色分鐘. 終止：每孔加終止液 ，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。. 測定：以空白空調(diào)零，波長依序測量各孔的吸光度（值）。 測定應在加終止液后分鐘以內(nèi)

6、進行。注意事項： 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。 請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 值大于標準品孔第一孔的值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（）。 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 底物請避光保存。 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 本試劑不同批號組分不得混用。. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀