1、北京 有限公司文件編號：CHS/SJ/D/SOP016-60版本/修改狀態(tài)：B/00文件名稱：同型半胱氨酸測定試劑盒（酶法）設(shè)計(jì)方案受控狀態(tài)： 受 控編制人： 日期：審核人： 日期：批準(zhǔn)人： 日期：生效日期：分發(fā)部門：生產(chǎn)研發(fā)部、質(zhì)量管理部1 產(chǎn)品概述、處方及規(guī)格1.1產(chǎn)品概述本試劑通過測定人體液中同型半胱氨酸（Hcy）的濃度，主要是用于診斷心肌功能疾病。產(chǎn)品測定原理：同型半胱氨酸被轉(zhuǎn)化為游離型后，通過與共價(jià)底物反應(yīng)，循環(huán)放大，同時(shí)產(chǎn)生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黃嘌呤，氨在谷氨酸脫氫酶的作用下，使-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸還原性（NADH）轉(zhuǎn)化為NAD+，樣本中的同型半胱氨酸的濃度與NADH的變化

2、成正比。1.2 產(chǎn)品處方1.2.1 試劑為液體雙試劑。校準(zhǔn)品可使用朗道、羅氏等復(fù)合定標(biāo)液。1.2.2 產(chǎn)品所用主要原材料為S-腺苷甲硫氨酸（SAM）、-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸還原性（NADH）、 三（2羧乙基）磷氯化氫（TCEP）、- 酮戊二酸、 Hcy甲基轉(zhuǎn)移酶（HMTase）、谷氨酸脫氫酶（GLDH）S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）水解酶及腺苷脫氨酶（ADA）等。根據(jù)文獻(xiàn)資料選用適當(dāng)?shù)木彌_液和穩(wěn)定劑。1.3 產(chǎn)品規(guī)格產(chǎn)品包裝規(guī)格制定要考慮不同適用機(jī)型和不同客戶需求，根據(jù)以往經(jīng)驗(yàn)，擬制定規(guī)格：R1-8 ml、R2-2 ml；R1-16 ml、R2-4ml；R1-20 ml、R2-5ml；R1-3

3、2 ml、R2-8ml；R1-40 ml、R2-10 ml；R1-240 ml、R2-210 ml；R1-440 ml、R2-410 ml；R1-240 ml、R2-20 ml；R1-440 ml、R2-220 ml；R1-840 ml、R2-810 ml；R1-80 ml、R2-20 ml；R1-280 ml、R2-220 ml；R1-480 ml、R2-420 ml；R1-880 ml、R2-820 ml ；R1-60 ml、R2-15 ml；R1-260 ml、R2-215 ml；R1-360 ml、R2-315ml；R1-850 ml、R2-250ml；R1-670 ml、R2-335

4、ml；R1-540 ml、R2-50ml；R1-450 ml、R2-50ml； R1-360 ml、R2-45ml；R1-820 ml、R2-85 ml。2 產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）通用技術(shù)要求，應(yīng)對試劑外觀、凈含量、試劑空白、靈敏度、準(zhǔn)確度、批內(nèi)精密性、批間精密性、線性范圍和穩(wěn)定性等做出要求和規(guī)定。應(yīng)參考已上市產(chǎn)品并滿足臨床使用要求。2.1外觀R1、R2均為無色至淺黃色透明液體。2.2凈含量不少于標(biāo)示值。2.3試劑空白2.3.1試劑空白吸光度變化率以蒸餾水為檢測樣本時(shí)，每分鐘吸光度變化值(A/min)的絕對值應(yīng)不大于0.100A。2.3.2試劑空白吸光度以蒸餾水為檢測樣本時(shí)

5、，吸光度應(yīng)不小于0.800A。2.4準(zhǔn)確度以質(zhì)控血清（如Roche公司生產(chǎn)的質(zhì)控血清）為檢測樣本時(shí)，測定值在質(zhì)控血清規(guī)定的可接受范圍內(nèi)?；蛴帽葘υ囼?yàn)，相關(guān)系數(shù)r0.975,每個(gè)濃度點(diǎn)的相對偏差R20%。2.5線性范圍Hcy試劑在線性范圍0-50umol/L內(nèi)，a)回歸系數(shù)r應(yīng)不小于0.990;b)線性偏差應(yīng)不大于15%。2.6 分析靈敏度Hcy含量為10umol/L時(shí)，測定吸光度變化率(減掉試劑空白吸光度變化率) A 0.002Abs/min。2.7 重復(fù)性2.7.1測量精密度同一個(gè)試劑盒分別測定高低兩個(gè)樣本值所得的結(jié)果，變異系數(shù)CV8.0%。2.7.2批間差連續(xù)三批生產(chǎn)的不同批號的試劑測定同

6、一樣本，相對偏差R20%。2.8 穩(wěn)定性Hcy試劑貯存于28、避光環(huán)境中，有效期為12個(gè)月。3研制要求3.1對試劑所用原料進(jìn)行選擇，試劑配方進(jìn)行優(yōu)化，確定所用原料的濃度，在保證產(chǎn)品質(zhì)量的前提下盡量降低成本。3.2 對反應(yīng)體系進(jìn)行研究，選擇最佳加樣方案，兼顧反應(yīng)的靈敏度和線性范圍，并適合在全自動(dòng)生化分析儀上應(yīng)用。3.3 對生產(chǎn)工藝進(jìn)行研究，以使研制的產(chǎn)品能夠順利進(jìn)入生產(chǎn)程序。3.4 對試劑的分析性能進(jìn)行評估，對產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的各項(xiàng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)評價(jià)并確定最終要求，據(jù)此擬定注冊產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)。3.5 實(shí)驗(yàn)確定該項(xiàng)目的正常參考值。3.6 穩(wěn)定性研究：試制至少三批樣品，在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后，檢測各項(xiàng)

7、性能指標(biāo)是否仍能達(dá)到產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求。3.7 進(jìn)行臨床研究，確定臨床適用性和符合性。4 生產(chǎn)工藝流程（見附頁）5 生產(chǎn)過程及工藝條件5.1.1 稱量5.1.1.1根據(jù)產(chǎn)品處方計(jì)算待配溶液所需各試劑成分量，用適當(dāng)?shù)姆Q、量工具按順序依次準(zhǔn)確稱量或量取各試劑成分。5.1.1.2稱量過程要求控制稱量試劑成分的正確性和精確性，需根據(jù)所要稱、量試劑的量選用適當(dāng)?shù)姆Q、量工具。稱量過程應(yīng)有復(fù)核人復(fù)核。5.1.2 配制在配液桶中加入預(yù)定體積90%左右的純化水，然后依次加入準(zhǔn)確稱量的各試劑成分，注意在加入下一成分前，之前加入的試劑成分要已攪拌溶解。所有試劑成分加完并溶解后，用純化水定容至預(yù)定體積。5.1.3 過

8、濾5.1.3.1試劑配制完成后，用10um孔徑的濾膜過濾。根據(jù)液量多少，可采用蠕動(dòng)泵過濾，液量過少時(shí)采用針頭過濾器過濾。5.1.3.2為減少酶或其他較大分子生物成分損失，可在加入這些成分之前進(jìn)行過濾。5.1.3.3過濾過程要避免溶液受污染，與溶液接觸的器具應(yīng)盡量專用，不能專用應(yīng)保證洗滌徹底，以免造成試劑間的交叉污染。5.1.4 配液檢驗(yàn)配制完成的液體靜置2小時(shí)以上，即可通知質(zhì)檢部取樣進(jìn)行性能檢測，檢測合格的試劑方可進(jìn)入分裝程序。如配液量很少，配制后即分裝，此步檢驗(yàn)可省卻。5.2 分裝可用蠕動(dòng)泵調(diào)整液量后分裝，也可采用稱重法、量取體積法分裝。5.2.1 裝量控制分裝程序要求對裝量進(jìn)行控制，不得低

9、于標(biāo)示裝量。分裝過程中對裝量進(jìn)行抽檢，為避免損失溶液和增加污染機(jī)會(huì)，建議采用稱重法進(jìn)行裝量檢驗(yàn)。5.2.2 分裝后檢驗(yàn)分裝完成后，通知質(zhì)檢部取樣檢驗(yàn)。檢驗(yàn)合格的試劑方可進(jìn)入下一生產(chǎn)程序。如分裝和包裝程序連續(xù)進(jìn)行，在溶液配制后已進(jìn)行檢驗(yàn)的前提下，此步檢驗(yàn)可省卻。5.3 組裝5.3.1 組裝程序5.3.1.1領(lǐng)取半成品、包裝盒、瓶簽、盒簽、說明書。5.3.1.2標(biāo)簽打印在通用瓶簽和盒簽上打印相應(yīng)內(nèi)容：瓶簽在綠色區(qū)域內(nèi)打印產(chǎn)品名稱和半成品規(guī)格；盒簽在綠色區(qū)域內(nèi)打印產(chǎn)品名稱和試劑盒包裝規(guī)格，并將注冊號和產(chǎn)品注冊標(biāo)準(zhǔn)部分打印完整。5.3.1.3貼簽 瓶簽貼到半成品瓶身指定位置，端正、居中； 盒簽貼于包裝

10、盒正面，端正，居中。5.3.1.4 疊說明書 將說明書橫向?qū)φ蹆纱魏笤倏v向?qū)φ垡淮危酆煤蟮恼f明書邊緣應(yīng)整齊。5.3.1.5裝盒將包裝盒折好，依次放入半成品組分和說明書，各組分位置應(yīng)整齊有序。5.3.2 成品檢驗(yàn)試劑組裝好后，通知質(zhì)檢部抽樣檢驗(yàn)。質(zhì)檢部檢驗(yàn)合格后按批生產(chǎn)量發(fā)合格證給生產(chǎn)部，生產(chǎn)部將合格證貼于包裝盒指定位置，即可進(jìn)行成品入庫。6 主要設(shè)備一覽表序號設(shè)備名稱設(shè)備型號生產(chǎn)廠家生產(chǎn)能力1電子分析天平AL104梅特勒-托利多稱量范圍：0.01g-110g；精度等級0.01g2AR114電子天平DT-1000奧豪斯中國地區(qū)稱量范圍：0g-100g；精度等級0.0001g3蠕動(dòng)泵BT300-1F保定蘭格恒流泵有限公司最大分配次數(shù)999次；分配液量0.1ml-99.9L4標(biāo)簽打印機(jī)Cl 408e/412eSATO America Inc300m走行5半自動(dòng)生化分析儀Microlab300荷蘭