1、生物安全管理與防護(hù),生物安全管理與防護(hù),生物安全管理與防護(hù),主要內(nèi)容,實(shí)驗(yàn)室感染史 生物安全管理現(xiàn)狀與意義 這幾個(gè)概念你了解嗎 生物安全柜的分類和正確使用 幾個(gè)誤區(qū)要關(guān)注 生物安全防護(hù)的要點(diǎn),生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室相關(guān) 性感染 Laboratory associated infections,實(shí)驗(yàn)室感染,實(shí)驗(yàn)室獲得 性感染 Laboratory acquired infections,又稱,實(shí)驗(yàn)室感染簡(jiǎn)史,生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室感染簡(jiǎn)史,1886年 Koch報(bào)告第一例霍亂病的實(shí)驗(yàn)室感染：德國(guó)柏林的一名學(xué)生在處理霍亂弧菌培養(yǎng)物時(shí)被感染并發(fā)病 1893年 Reincke報(bào)告第一例實(shí)驗(yàn)室傷寒

2、感染 1899年 Birt和Lamb報(bào)告第一例布氏桿菌引起的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染 1905年 Johnston報(bào)告第二例布氏菌實(shí)驗(yàn)室感染并作了評(píng)價(jià),生物安全管理與防護(hù),1931年 Findlay報(bào)告第一例實(shí)驗(yàn)室感染肝炎的 病例 1932年 有報(bào)告實(shí)驗(yàn)室工作人員被恒河猴咬傷 后患猿猴皰疹病毒性腦炎，這是該病毒感染 人類的第一例 1943年 在巴西的黃熱病實(shí)驗(yàn)室，兩周內(nèi)8名 實(shí)驗(yàn)室人員發(fā)生了委內(nèi)瑞拉馬腦炎 1967年 在德國(guó)有26名實(shí)驗(yàn)室人員因接觸黑尾 長(zhǎng)猴的血液和組織而感染一種病毒 (馬堡病 毒)，最終有9人死亡,實(shí)驗(yàn)室感染簡(jiǎn)史,生物安全管理與防護(hù),1969年 尼日利亞北部一家醫(yī)院3名護(hù)士感染砂粒

3、病毒，其中2人死亡。這是該病毒感染人的首次報(bào) 告 （1951、1965、1976）美國(guó)實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染調(diào)查 5000個(gè)實(shí)驗(yàn)室 累計(jì)感染總數(shù)：3921例 與已知事故相關(guān)的80%（氣溶膠？） 最常報(bào)告的感染：乙型肝炎、肺結(jié)核、傷寒、委內(nèi)瑞拉馬腦炎、布魯氏菌病,實(shí)驗(yàn)室感染簡(jiǎn)史,生物安全管理與防護(hù),1999年 Walker等報(bào)告實(shí)驗(yàn)室人員感染率 19941995年為16.2人/10萬年 19881989年為82.7人/10萬年 2003年后 新加坡、臺(tái)灣和北京先后發(fā)生了實(shí)驗(yàn) 室人員感染SARS-CoV的報(bào)告 2004年 中國(guó)CDC病毒所形態(tài)室SARS-CoV感染 事件導(dǎo)致9人感染，其中1人死亡，747人

4、被隔離,實(shí)驗(yàn)室感染簡(jiǎn)史,生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室感染的證據(jù)分析,宋、楊均在同一實(shí)驗(yàn)室工作，該室一直從事SARS-CoV工作 封鎖病毒所后，未再出現(xiàn)任何SARS病人 第二代病例魏某胸水中分離到SARS-CoV，其全基因序列與實(shí)驗(yàn) SARS-CoV高度同源 宋、楊從未接觸過野生動(dòng)物 宋、楊潛伏期內(nèi)北京沒有任何其他SARS病例 主要原因：病毒滅活不徹底，滅活方法沒有進(jìn)行有效的評(píng) 評(píng)價(jià)，沒有規(guī)定對(duì)每一批病毒的滅活效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)和質(zhì)控 責(zé)任追究： 13名處級(jí)以上領(lǐng)導(dǎo)被免職名處級(jí)以上領(lǐng)導(dǎo)被免職,生物安全管理與防護(hù),生物安全目標(biāo),促進(jìn)致病微生物/化學(xué)毒物/放射線/ 基因的安全操作并教育人們?cè)谙率霏h(huán) 境安全操

5、作： 實(shí)驗(yàn)室 調(diào)查現(xiàn)場(chǎng) 生產(chǎn)設(shè)施 醫(yī)療衛(wèi)生設(shè)施 最終目標(biāo)：實(shí)驗(yàn)室安全事件零發(fā)生！,生物安全管理與防護(hù),生物安全管理與防護(hù),生物安全管理與防護(hù),生物安全管理與防護(hù),我國(guó)的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理現(xiàn)狀,以上立法工作對(duì)促進(jìn)和加強(qiáng)我國(guó)生物 安全起到了重要的指導(dǎo)作用，使得實(shí)驗(yàn)室的 生物安全相關(guān)工作有法可依!,生物安全管理與防護(hù),我國(guó)的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理現(xiàn)狀,2008年9月8日，評(píng)審“十一五”國(guó)家科技支撐計(jì) 劃重點(diǎn)項(xiàng)目“實(shí)驗(yàn)室生物安全關(guān)鍵技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)的 研究”課題，內(nèi)容涉及實(shí)驗(yàn)室空氣污染防護(hù)、實(shí) 驗(yàn)室感染性污水安全輸送、實(shí)驗(yàn)室污染空氣實(shí)時(shí) 監(jiān)測(cè)、實(shí)驗(yàn)室實(shí)時(shí)監(jiān)控網(wǎng)絡(luò)、實(shí)驗(yàn)室污染物泄漏 以及實(shí)驗(yàn)室外環(huán)境樣本采集等六個(gè)

6、研究方向,生物安全管理與防護(hù),建立生物安全實(shí)驗(yàn)室、加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的生物安全 管理，對(duì)于我國(guó)的實(shí)驗(yàn)室生物安全、生物防護(hù) （國(guó)防）、傳染病預(yù)防與控制、動(dòng)物防疫、出 入境檢驗(yàn)檢疫、醫(yī)院感染控制和實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)建 設(shè)等，均具有十分重要的意義：1、為建立和管理病原微生物和其他研究生物安 全平臺(tái)提供保障 2、為醫(yī)院感染控制提供科學(xué)、安全的平臺(tái) 3、為加強(qiáng)各實(shí)驗(yàn)室對(duì)突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)對(duì)能 力提供科學(xué)、安全的實(shí)驗(yàn)平臺(tái),生物安全實(shí)驗(yàn)室的重要意義,生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù) biosafety protection for laboratories 實(shí)驗(yàn)室工作職員所處理的實(shí)驗(yàn)對(duì)象含有致病的微生物及其毒素時(shí)，通

7、過在實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、使用個(gè)體防護(hù)設(shè)置、嚴(yán)格遵從標(biāo)準(zhǔn)化的工作及操縱程序和規(guī)程等方面采取綜合措施，確保實(shí)驗(yàn)室工作職員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象侵染，確保四周環(huán)境不受其污染。 微生物危害評(píng)估 hazard assessment for microbes 對(duì)實(shí)驗(yàn)微生物和毒素可能給人或環(huán)境帶來的危害所 進(jìn)行的評(píng)估。,生物安全管理與防護(hù),由人為操作或人類活動(dòng)而導(dǎo)致生物體或其產(chǎn)物對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境 的現(xiàn)實(shí)損害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。這里的危害包括對(duì)操作者、其他相關(guān)人員、 環(huán)境和其他生物的危害,生物因子將要或可能形成的危害，是傷害概率和嚴(yán)重性的綜合。又稱生物風(fēng)險(xiǎn),生物安全管理與防護(hù),F 由動(dòng)物、植物、微生物等生物給人 類健康和自然環(huán)

8、境可能造成不安全 的防范;包括由現(xiàn)代生物技術(shù)的開 發(fā)和應(yīng)用可能產(chǎn)生的負(fù)面影響所采 取的有效預(yù)防和控制措施,避免危險(xiǎn)生物因子造成實(shí)驗(yàn)室人員暴露、向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施,生物安全管理與防護(hù),生物安全實(shí)驗(yàn)室（biosafety laboratory ) 是指通過防護(hù)屏障和管理措施，從事傳染性物質(zhì)操作的實(shí)驗(yàn)室， 包括:研究用實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室、臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室、公共衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室、傳染病監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室等,生物安全管理與防護(hù),什么是生物安全柜？,生物安全柜 (BiologicalSafety Cabinet, BSC) 指防止操作者和 環(huán)境暴露于實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的生 物氣溶膠的負(fù)壓過濾排風(fēng)柜。 它是實(shí)驗(yàn)

9、室最基本也是最重要的 安全設(shè)備。,生物安全管理與防護(hù),I級(jí)生物安全柜 class biosafety cabinet 至少裝置一個(gè)高效空氣過濾器對(duì)排氣進(jìn)行凈化，工作時(shí)柜正面玻 璃推拉窗打開一半，上部為觀察窗，下部為操縱窗口，外部空氣 由操縱窗口吸進(jìn)，而不可能由操縱窗口逸出。工作狀態(tài)時(shí)保證工 作職員不受侵害，但不保證實(shí)驗(yàn)對(duì)象不受污染。 II級(jí)生物安全柜 class biosafety cabinet 至少裝置一個(gè)高效空氣過濾器對(duì)排氣進(jìn)行凈化，工作空間為經(jīng)高 效過濾器凈化的無渦流的單向流空氣。工作時(shí)正面玻璃推拉窗打 開一半，上部為觀察窗，下部操縱窗口。外部空氣由操縱窗口吸 進(jìn)，而不可能由操縱窗口逸

10、出。工作狀態(tài)下遵守操縱規(guī)程時(shí)既保 證工作職員不受侵害，也保證實(shí)驗(yàn)對(duì)象不受污染。 III級(jí)生物安全柜class III biosafety cabinet 至少裝置一個(gè)高效空氣過濾器對(duì)排氣進(jìn)行凈化，工作空間為經(jīng)高 效過濾器凈化的無渦流的單向流空氣，正面上部為觀察窗，下部 為手套箱式操縱口。箱內(nèi)對(duì)外界保持負(fù)壓可確保人體與柜內(nèi)物品 完全隔盡。,生物安全管理與防護(hù),物理抑制設(shè)備 physicalcontainmentdevice 用物理或機(jī)械方法防止致病微生物逸出的設(shè)備。 高效空氣過濾器HEPA(high efficiency particulate air)filter 在額定風(fēng)量下，對(duì)粒徑大于即是

11、0.3m的粒子 捕集效率在99.97%以上及氣流阻力在245Pa以下 的空氣過濾器。,生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室感染又稱實(shí)驗(yàn)室相關(guān)性感染(laboratory associated infections)，或?qū)嶒?yàn)室獲得性感染(laboratoryacquired infections) 其中由于微生物氣溶膠所致的實(shí)驗(yàn)室感染占有重 要地位。有研究表明已知原因的實(shí)驗(yàn)室感染只占全部感染的18， 不明原因的實(shí)驗(yàn)室感染卻高達(dá)82。對(duì)不明原因的實(shí)驗(yàn)室感染的 研究表明，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的許多操作可以產(chǎn)生氣溶膠，由于其氣溶 膠分子小，易漂浮在空氣中，大多數(shù)可能是病原微生物形成的感 染性氣溶膠在空氣擴(kuò)散而污染實(shí)驗(yàn)室的

12、空氣，當(dāng)工作人員吸人了 污染的空氣，便可以引起實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染。在病原微生物實(shí)驗(yàn)室 中，產(chǎn)生的微生物氣溶膠可分為兩大類：一類是飛沫核氣溶膠， 另一類是粉塵氣溶膠。 微生物氣溶膠的定義 是指液體或固體微粒均勻地分散在氣體中形成的相對(duì)穩(wěn)定的懸浮 體系。微生物氣溶膠是一群形體微小，構(gòu)造簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或接近單細(xì)胞的生物懸浮于空氣中所成的膠體體系。粒子大小在0.01100m，一般為0.130m。,生物安全管理與防護(hù),2、微生物氣溶膠的特點(diǎn) ）生物氣溶膠無色無味、無孔不入，不易發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)人員在自然呼吸中不知不覺吸入而造成感染。若治療控制不及時(shí)會(huì)造成嚴(yán)重后果。 ）與其自然感染的疾病相比，有些微生物氣溶膠感染的癥

13、狀不典型， 病程復(fù)雜，難以及時(shí)診治，影響預(yù)后。 ）有些氣溶膠感染只有呼吸道粘膜免疫才有預(yù)防作用，非呼吸道免 疫途徑預(yù)防作用效果欠佳?，F(xiàn)有常規(guī)疫苗的預(yù)防效果不理想，如肺 炭疽。 ）呼吸道傳播的傳染病的微生物特別是高致病性病毒常常發(fā)生變異， 尤其是其抗原性、致病性都可能發(fā)生改變，在空氣中存活力增強(qiáng)。 ）氣溶膠傳播容易發(fā)生病原體在人與人、人與動(dòng)物、動(dòng)物與動(dòng)物之 間的傳播。 ）可以遠(yuǎn)距離或較遠(yuǎn)距離傳播，這是其與其他傳播途徑的顯著區(qū)別， 也是氣溶膠傳播難以預(yù)防的另一重要原因。,生物安全管理與防護(hù),氣溶膠的產(chǎn)生,任何形成液體薄膜和引起明顯 壓力差的操作均可產(chǎn)生 細(xì)菌接種環(huán)接種、注射器、移 液管、離心機(jī)、標(biāo)

14、本混勻、勻 漿、振蕩、開啟培養(yǎng)皿、標(biāo)本 涂片、傾倒和潑灑 86.6%實(shí)驗(yàn)室操作可產(chǎn)生氣溶膠,生物安全管理與防護(hù),如何減少或杜絕氣溶膠對(duì)人體危害呢,標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防 規(guī)范操作 科學(xué)使用離心機(jī) 根據(jù)實(shí)驗(yàn)室級(jí)別配置相應(yīng)級(jí)別的生物安全柜 合理的建筑布局和流程 使用警示標(biāo)識(shí),生物安全管理與防護(hù),生物安全標(biāo)識(shí) 凡是盛裝生物危害物質(zhì)的容器、運(yùn)輸工具、進(jìn)行生物危險(xiǎn)物質(zhì)操作的儀器和專用設(shè)備等都必須粘貼標(biāo)示有相應(yīng)危害級(jí)別的生物安全標(biāo)識(shí)。 生物安全標(biāo)識(shí)的使用 在生物安全實(shí)驗(yàn)室入口的明顯位置必須張貼生物危害標(biāo)志。標(biāo)志上應(yīng)明確標(biāo)示實(shí)驗(yàn)室生物安全水平等級(jí)，實(shí)驗(yàn)室生物安全責(zé)任人、緊急聯(lián)系方式等。,生物安全管理與防護(hù),生物安全柜（B

15、SCs） 英文全稱： Biosafety cabinets。 用途：保護(hù)操作人員、環(huán)境和實(shí)驗(yàn)物品 提醒：應(yīng)與“超凈工作臺(tái)”區(qū)分開 種類：共分級(jí)、級(jí)和級(jí)三種。 級(jí)分類：分為A1、A2、B1和B2四型。,生物安全管理與防護(hù),BSC排氣循環(huán)排處連接,所有生物學(xué)污染的管道均為負(fù)壓狀態(tài)。,生物安全管理與防護(hù),HEPA過濾器(high-efficiencyparticulate air filters)：高效空氣濾過器。 潔凈空氣是通過HEPA過濾器從生物安全柜排出 HEPA 過濾器可濾掉99.97%的直徑為0.3微米的顆粒；但化學(xué)氣體或煙霧可通過HEPA過濾器,生物安全管理與防護(hù),生物安全柜的定期檢測(cè),

16、由專業(yè)人員定期檢測(cè)（建議年檢），主要以三 方面為例： 進(jìn)氣流流速檢測(cè)（除A1型外，應(yīng)不低于0.5m/s） 氣流模式檢測(cè) 過濾器防漏檢測(cè),生物安全管理與防護(hù),生物安全柜的定期檢測(cè),氣流模式檢測(cè)合格標(biāo)準(zhǔn)： 工作區(qū)的下沉氣流沒有死點(diǎn)或回流 整個(gè)工作開口區(qū)煙霧都是向內(nèi)流動(dòng) 從外部進(jìn)入的煙霧不會(huì)直接進(jìn)入操作區(qū)域 操作區(qū)的煙霧不會(huì)自前窗上沿或邊緣逃逸,生物安全管理與防護(hù),生物安全柜的定期檢測(cè),HEPA過濾器摘除后需要在至少1000的溫度下焚 燒。在焚燒之前推薦進(jìn)行下述處理： 在摘除前用噴漆噴頭給過濾器的裸露表面噴霧。 在摘除過程中將過濾器“裝袋”。,生物安全管理與防護(hù),亞太地區(qū)三分之一實(shí)驗(yàn)室 的生物安全柜

17、處于不安全狀態(tài)！,生物安全管理與防護(hù),誤區(qū)一 追求高大上，生物安全柜 選型不當(dāng),生物安全管理與防護(hù),生物安全柜的分類,所有,生物安全柜級(jí),別一定是經(jīng)NSF認(rèn)證的。,生物安全管理與防護(hù),生物安全柜的分類,一級(jí)二級(jí)三級(jí) 所有的生物安全柜級(jí)別一定是經(jīng)NSF認(rèn)證的。,生物安全管理與防護(hù),級(jí)生物安全柜的細(xì)分及特征,級(jí)生物安全柜有4種類型：,生物安全管理與防護(hù),級(jí)生物安全柜的細(xì)分及特征,由,強(qiáng)化的安全,性能， 級(jí)A2型是研究實(shí)驗(yàn)室最常用的生物安,柜,于易于使用,生物安全管理與防護(hù),2020/9/16,誤區(qū)二 專業(yè)知識(shí)欠缺， 生物安全柜安裝問題多,生物安全管理與防護(hù),合適的安裝地點(diǎn),遠(yuǎn)離門、可打開的窗、空調(diào)

18、通風(fēng)口、風(fēng)扇、 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)人員走動(dòng)頻繁處。 排氣區(qū)尤其容易造成氣流干擾。 安全柜頂部和天花板間至少保持40cm。,生物安全管理與防護(hù),誤區(qū)三 有了生物安全柜，一切就 “OK”？,生物安全管理與防護(hù),BC的“靈魂”氣流平衡（氣流 穩(wěn)定性）,下降氣流流速測(cè)試,流入氣流流速測(cè)試,生物安全管理與防護(hù),生物安全柜的操作技術(shù),物品平行擺放原則 & 不同樣品柜內(nèi)移動(dòng)原則,潔凈物,污染物,避免震動(dòng)原則,緩慢移動(dòng)原則,明火使用原則,生物安全管理與防護(hù),正確使用生物安全柜,個(gè)人防護(hù) 安全柜內(nèi)物品擺放原則 紫外燈的使用 盡量避免使用明火 操作宜緩慢 柜內(nèi)移動(dòng)物品時(shí)應(yīng)盡量避免交叉污 染 避免震動(dòng) 操作結(jié)束后選用合適的消

19、毒劑清潔 安全柜內(nèi)表面 安全柜只有在工作正常時(shí)才能使用,生物安全管理與防護(hù),本生燈 ,不能在生物安全柜內(nèi)使用明火；,使用明火將造成氣流動(dòng)蕩，破壞HEPA過濾 氣源吹向臺(tái)面的模式。,紅外高溫滅菌器 ,生物安全管理與防護(hù),誤區(qū)四 生物安全柜監(jiān)控成“空白”,生物安全管理與防護(hù),生物安全柜臨床應(yīng)用、維護(hù)與保養(yǎng),下列情況時(shí)，應(yīng)對(duì)生物安全柜進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)： 生物安全實(shí)驗(yàn)室竣工后，投入使用前，生物安全柜已安裝完畢 生物安全柜被移動(dòng)位置 對(duì)生物安全柜進(jìn)行檢修 生物安全柜更換HEPA過濾器后 生物安全柜一年一度的常規(guī)檢測(cè),生物安全管理與防護(hù),生物安全柜的監(jiān)測(cè),設(shè)備,人員,環(huán)境,人員、試驗(yàn)品和環(huán)境保護(hù)的微 生物挑戰(zhàn)

20、測(cè)試； 下降氣流流速測(cè)試；,流入氣流流速測(cè)試； 工作舒適度有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)； 高效過濾器完整性測(cè)試； 柜體泄漏的測(cè)試。,生物安全管理與防護(hù),生物安全柜臨床應(yīng)用、維護(hù)與保養(yǎng),維護(hù)與保養(yǎng)： 每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)對(duì)工作室進(jìn)行清洗和 消毒。 過濾器一旦受損，應(yīng)及時(shí)更換。 高效空氣過濾器有一定的使用壽命，隨 著使用期的延長(zhǎng)，細(xì)菌和塵埃積聚在過 濾器上，會(huì)導(dǎo)致高效空氣過濾器壓力損 失的增大。高效空氣過濾器的使用壽命 到期后，應(yīng)立即更換。由于過濾器可能 帶有污染物，操作時(shí)應(yīng)注意安全防護(hù)， 最好請(qǐng)專業(yè)人員來更換。,生物安全管理與防護(hù),1.可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作均應(yīng)在生物安 全柜(級(jí)生物安全柜為宜)或其他

21、物理抑制設(shè)備中進(jìn)行，并 使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。 2.處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜(級(jí)生 物安全柜為宜)或其他物理抑制設(shè)備中進(jìn)行，并使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。 上述材料的離心操作如果使用密封的離心機(jī)轉(zhuǎn)子或安全離心 杯，且它們只在生物安全柜中開閉和裝載感染性材料，則可 在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。 3.當(dāng)微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行而必須采取外部 操作時(shí)，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部 保護(hù)裝置(護(hù)目鏡、面罩、個(gè)體呼吸保護(hù)用品或其他防濺出保 護(hù)設(shè)備)。,二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室 安全設(shè)備和個(gè)體防護(hù),生物安全管理與防護(hù),4 . 在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護(hù)服。離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)， 防護(hù)

22、服必須脫下并留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。不得穿著外出，更不能攜 帶回家。用過的工作服應(yīng)先在實(shí)驗(yàn)室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌 或丟棄。 5. 當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的表面或設(shè)備時(shí)應(yīng)戴手套。如 可能發(fā)生感染性材料的溢出或?yàn)R出，宜戴兩副手套。不得戴 著手套離開實(shí)驗(yàn)室。工作完全結(jié)束后方可除去手套。一次性 手套不得清洗和再次使用。,生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)和建造的特殊要求,1.每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近出口處。 2.實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)內(nèi)表面應(yīng)易于清潔。地面應(yīng)防滑、無縫隙。 3.實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面應(yīng)不透水，耐腐蝕、耐熱。 4.實(shí)驗(yàn)室中的家具應(yīng)牢固。為易于清潔，各種家具和設(shè)備之間應(yīng)保持一定間隙。應(yīng)有專門放置生物廢棄物容器

23、的臺(tái)(架)。 5.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有可開啟的窗戶，應(yīng)設(shè)置紗窗。 6.在實(shí)驗(yàn)室所在的建筑內(nèi)應(yīng)高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗(yàn)證，以保證符合要求。 7.應(yīng)設(shè)置洗眼設(shè)施，必要時(shí)應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。 8.實(shí)驗(yàn)室門宜帶鎖、可自動(dòng)關(guān)閉，門有可視窗。 9.實(shí)驗(yàn)室出口應(yīng)有在黑暗中可明確辨識(shí)的標(biāo)識(shí)。 10. 應(yīng)通風(fēng)，如使用窗戶自然通風(fēng)，應(yīng)有防蟲紗窗。,生物安全管理與防護(hù),二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室操作要點(diǎn),1.實(shí)驗(yàn)室人口須貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志，注明危險(xiǎn)因子、生物安全級(jí)別 、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室的特殊要求及離開實(shí)驗(yàn)室的程 序； 2.禁止非工作人員進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室。參觀實(shí)驗(yàn)室等特殊情況須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室 負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進(jìn)入； 3.禁止在工

24、作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲(chǔ)存食物； 4.接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實(shí)驗(yàn)室前 要洗手； 5.以移液器吸取液體，禁止口吸； 6.制定尖銳器具的安全操作規(guī)程； 7.按照實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生； 8.每天至少消毒一次工作臺(tái)面，活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)消毒；,生物安全管理與防護(hù),9. 所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前必須進(jìn)行滅活，如高壓 滅活。需運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室滅活的物品必須放在專用密閉防漏的容器內(nèi)儲(chǔ)存、運(yùn)輸及消毒滅菌； 10.如有條件工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種 (如卡介苗等)； 11.必要時(shí)收集從事危險(xiǎn)性工作人員的基本血清留底，并根據(jù)需要 定期收集血清樣

25、本，應(yīng)有檢測(cè)報(bào)告，如有問題及時(shí)處理； 12.將生物安全程序納入標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范或生物安全手冊(cè)，由實(shí)驗(yàn)室 負(fù)責(zé)人專門保管，工作人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前要閱讀規(guī)范并按 照規(guī)范要求操作； 13.工作人員要接受有關(guān)的潛在危險(xiǎn)知識(shí)的培訓(xùn)，掌握預(yù)防暴露以 及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓(xùn)； 14.實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒； 15.人員暴露于病毒時(shí)，及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人匯報(bào)并記錄。,生物安全管理與防護(hù),為何需使用生物安全柜?,考慮對(duì)操作人員，操作樣品，操作環(huán)境的保護(hù)。 美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生研究院NIH標(biāo)準(zhǔn)與美國(guó)國(guó)家疾病控制中心CDC 實(shí)驗(yàn)室生物安全級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)中要求： 應(yīng)用于臨床、診斷、教學(xué)、研究、或者

26、生產(chǎn)設(shè)施，開展有 關(guān)內(nèi)源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入該病源, 會(huì)引發(fā)嚴(yán)重的、可能致死的疾病。,1.需使用ClassII級(jí)生物安全柜 2.實(shí)驗(yàn)人員受過專業(yè)訓(xùn)練 3.應(yīng)有管道化的排氣系統(tǒng)，排出的空氣不再循環(huán)至建筑 物內(nèi)的任何其他區(qū)域。 4.建議生物安全柜每年經(jīng)過測(cè)試和確證,生物安全管理與防護(hù),生物安全設(shè)備分類,1.超凈臺(tái) 2.抽風(fēng)櫥 3. CLASS I 一級(jí)生物安全柜 4.CLASS II 二級(jí)生物安全柜 5. CALSS III三級(jí)生物安全柜（又稱手套柜）,生物安全管理與防護(hù),1、超凈臺(tái),正壓柜 氣 流 從 頂 部 或 底 部 經(jīng) 過 過 濾 器 后 從 操 作 區(qū) 正 面 流 向 工

27、 作 臺(tái) 面 ， 被 樣 品 污 染 的 氣 流 排 出 柜 外 ， 沒 有 循 環(huán) 氣流。 超凈臺(tái)保護(hù)樣品不受污染， 適用于普通實(shí)驗(yàn)室或1級(jí)生 物安全水平中對(duì)人員和環(huán) 境無保護(hù)要求的實(shí)驗(yàn)。,1、超凈臺(tái),生物安全管理與防護(hù),2、CLASSI一級(jí)生物安全柜,全柜, 負(fù)壓柜 氣流經(jīng)操作人員向內(nèi)進(jìn)入工作 臺(tái)面，被污染的氣流通過HEPA過 濾器外排出柜外，沒有循環(huán)氣流。 CLASS I級(jí)BSC保護(hù)操作人員和 環(huán)境不受污染，適用于生物安全 水平中對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品無保護(hù)要求的 實(shí)驗(yàn)。,生物安全管理與防護(hù),3、CLASSII 二級(jí)生物安全柜,層流負(fù)壓柜 它們可以安全的保護(hù)樣品、人員和環(huán)境。 II 級(jí)生物安全柜分為

28、A型（30%排在室內(nèi)）和 B型； B型中又分為B1 （70%接管道外排） B2（100%接管道外排）B3（30%接管道外排）,生物安全管理與防護(hù),CLASSIIA生物安全柜,進(jìn)入氣流最低流速平均為0.38米/秒)； 30%氣流經(jīng)HEPA過濾后外排在室內(nèi)； 被污染的管道和氣流通道為正壓狀態(tài),生物安全管理與防護(hù),生物安全柜空氣流向,生物安全管理與防護(hù),CLASSII B1生物安全柜,進(jìn)入的氣流最低流速平均為0.5米/ 秒； 70%氣流通過專用的管道經(jīng)HEPA過濾 后接管道外排至室外； 所有受生物污染的管道和氣流通道 均在負(fù)壓狀態(tài)下或被負(fù)壓的管道或氣 流通道包圍。,生物安全管理與防護(hù),CLASSII

29、B2生物安全柜,進(jìn)入氣流最低流速平均為0.5米/秒； 所有向內(nèi)進(jìn)入的氣流和向下的氣流均 通過HEPA過濾后排到室外而不在柜內(nèi) 循環(huán)，也不能排入實(shí)驗(yàn)室；100%接管 道外排。 所有的被污染的管道和氣流通道都在 負(fù)壓狀態(tài)下或被直接外排的負(fù) 壓管道 或氣流管道所包圍。,生物安全管理與防護(hù),CLASS II B3生物安全柜,進(jìn)入的氣流最低流速為0.5米/秒； 外排到室外的氣流（30%）經(jīng)過HEPA高 效過濾； 所有經(jīng)生物污染的管道和氣流通道均 為負(fù)壓狀態(tài)； 與CLASS II A型氣流方向相同，但與 CLASS A型不同的是，它30%外排氣是接管道排到室外的。,生物安全管理與防護(hù),II級(jí)生物安全柜 A

30、irflow,生物安全管理與防護(hù),4. CLASSIII生物安全柜（手套柜）,全封閉的、氣密結(jié)構(gòu)的通風(fēng)柜； 通過橡膠手套進(jìn)行操作； 柜內(nèi)保持至少120Pa的負(fù)壓； 供氣通過HEPA抽入內(nèi)； 外排的氣流經(jīng)過雙層HEPA過濾或經(jīng)HEPA后 再經(jīng)燃燒處理。 CLASS III 型BSC適用于BSL3、BSL4的生 物實(shí)驗(yàn)。,生物安全管理與防護(hù),生物安全裝置異同,生物安全管理與防護(hù),級(jí)、級(jí)和級(jí)生物安全柜的區(qū)別,生物安全管理與防護(hù),根據(jù)保護(hù)類型的需要選擇適宜的生物安全柜,生物安全管理與防護(hù),對(duì)各級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室的要求,生物安全管理與防護(hù),潔凈臺(tái),生物安全管理與防護(hù),潔凈工作臺(tái),1、環(huán)境空氣工作臺(tái)過濾

31、樣本直接吹向操 作者排入室內(nèi) 2、保護(hù)產(chǎn)品，不保護(hù)操作人員及操作環(huán)境 3、通過樣本的空氣過濾對(duì)直徑大于0.3微米的顆 粒，過濾效率99.9%無醫(yī)院藥房或無菌設(shè)備的組裝。,生物安全管理與防護(hù),生物安全柜,1、環(huán)境空氣進(jìn)入工作臺(tái)過濾樣本高效 過濾排入室內(nèi)或室外 2、經(jīng)過樣本的空氣及排放出的空氣均經(jīng)過濾， 對(duì)直徑大于0.3微米的顆粒，超高效過濾器的過 濾效率為99.999%。 3、采用負(fù)壓裝置，形成氣幕防護(hù)屏障，保護(hù)操 作人員安全應(yīng)用于有一定生物危險(xiǎn)的操作。,生物安全管理與防護(hù),潔凈工作臺(tái)生物安全柜,1、環(huán)境空氣（流動(dòng)/排出方式） 2、使用目的（產(chǎn)品、操作人、環(huán)境） 3、空氣濾過能力 4、氣幕屏障

32、5、應(yīng)用,生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室生物安全的個(gè)人防護(hù),生物安全管理與防護(hù),微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù),1、臨床微生物實(shí)驗(yàn)室中引起實(shí)驗(yàn)室獲得性感染的 微生物種類： 細(xì)菌：布魯菌、銅綠、結(jié)核、腸道致病菌等 病毒：經(jīng)血、呼吸道傳播的病毒，其他病毒 真菌：二相真菌、孢子菌等 其他：衣原體、鉤端螺旋體等 寄生蟲：弓形體、瘧原蟲、血吸蟲等,生物安全管理與防護(hù),2、引起微生物實(shí)驗(yàn)室中工作人員發(fā)生實(shí)驗(yàn)室獲得 性感染的途徑： 經(jīng)空氣傳播：吸入（氣溶膠、實(shí)驗(yàn)物） 經(jīng)口傳播：“手口”，食入 直接接種：針刺、劃傷或咬傷 黏膜接觸：（眼結(jié)膜） 節(jié)肢動(dòng)物媒介：蚊、蜱、跳蚤等,生物安全管理與防護(hù),3、臨床微生物實(shí)驗(yàn)室中引起

33、微生物感染機(jī)體 的方式： 接觸損傷皮膚和黏膜： 吸入： 食入： 接觸感染動(dòng)物：,生物安全管理與防護(hù),4、微生物實(shí)驗(yàn)室中病原微生物危險(xiǎn)度評(píng)價(jià)依據(jù)： 對(duì)人或動(dòng)物毒性的強(qiáng)弱： 特定病原體是否存在國(guó)內(nèi)： 引發(fā)臨床癥狀輕重、病程長(zhǎng)短、預(yù)后情況 潛伏、慢性、不典型難診斷，無法預(yù)防,生物安全管理與防護(hù),5、微生物實(shí)驗(yàn)室中病原微生物危險(xiǎn)度分 類標(biāo)準(zhǔn)： 級(jí)危險(xiǎn)：個(gè)體/群體極大危害 級(jí)危險(xiǎn)：個(gè)體極大危害/群體極小 級(jí)危險(xiǎn)：個(gè)體中度危害/群體較小 級(jí)危險(xiǎn)：個(gè)體/群體沒有或極小,生物安全管理與防護(hù),國(guó)家根據(jù)實(shí)驗(yàn)室防護(hù)水平，將實(shí)驗(yàn)室分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)。 臨床診斷、檢測(cè)檢驗(yàn)工作可以在二級(jí)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。 但是，發(fā)現(xiàn)

34、高致病性病原微生物的其病原學(xué)的分離鑒定工作應(yīng)當(dāng)轉(zhuǎn)移到三級(jí)以上的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。,生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)分級(jí),一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡(jiǎn)稱BSL1或P1 二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡(jiǎn)稱BSL2或P2 三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡(jiǎn)稱BSL3或P3 四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡(jiǎn)稱BSL4或P4,生物安全管理與防護(hù),一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,安全設(shè)施和個(gè)體防護(hù)： 一般無須使用生物安全柜等專用安全設(shè)備 工作人員在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿工作服，帶防護(hù)眼鏡 工作人員手上有皮膚破損或皮疹時(shí)應(yīng)戴手套,生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)人或環(huán)境 具有中等潛在危害的微生物 包含微生物舉例

35、,麻疹病毒 乙型肝炎病毒 衣原體,沙門氏菌 HIV血清學(xué)檢測(cè) 志賀氏菌,二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,生物安全管理與防護(hù),BSL-2 實(shí)驗(yàn)室,生物安全管理與防護(hù),二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,設(shè)計(jì)和建造的特殊要求： 消毒設(shè)施（高壓滅菌鍋、化學(xué)消毒裝置等） 洗眼裝置 可自動(dòng)關(guān)閉的門鎖 門口有發(fā)光指示裝置 換氣裝置（3-4次/小時(shí)）,生物安全管理與防護(hù),滿足一級(jí)實(shí)驗(yàn)室 (標(biāo)準(zhǔn)微生物操作規(guī)程) 各 款要求，在此基礎(chǔ)上特別注意： 1. 制定出入制度 2. 實(shí)驗(yàn)室人口貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志 3. 制定實(shí)驗(yàn)室特定的生物安全操作規(guī)則 4. 每年一次最新培訓(xùn)制度,二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室 特殊微生物操作規(guī)程,生物安全管理與防護(hù),

36、5. 使用塑料器材代替玻璃器材 6. 禁止用手處理破碎的玻璃器具 7. 培養(yǎng)基、組織、體液及其它具有潛在危險(xiǎn)性的廢棄物須放在防漏的容器中儲(chǔ)存、運(yùn)輸及消毒、滅菌,生物安全管理與防護(hù),8. 用過的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽， 禁止用手直接從注射器取下。 9. 用過的針頭必須直接放入防穿透的容器中。 10.非一次性利器必須放入厚壁容器中并運(yùn)送到特 定區(qū)域消毒，最好進(jìn)行高壓消毒,生物安全管理與防護(hù),11.工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種和檢測(cè) (如乙型 肝炎疫苗，卡介苗等) 12.必要時(shí)收集從事危險(xiǎn)性工作人員的本底血清 13.嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室工作人員年度采血檢測(cè) HIV 抗體 和備案制度。每半年進(jìn)行

37、一次 HIV 抗體檢測(cè)，并 保留樣品 14.對(duì)從事艾滋病實(shí)驗(yàn)室工作的人員，因工作中意外 事故造成HIV 職業(yè)暴露者，所在單位應(yīng)負(fù)責(zé)解決 抗病毒及其它相應(yīng)治療的醫(yī)療費(fèi)用,生物安全管理與防護(hù),15.實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒 16.人員暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人匯 報(bào)，并記錄事故經(jīng)過和處理方案 17.禁止將無關(guān)動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室,生物安全管理與防護(hù),二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,安全設(shè)施和個(gè)體防護(hù)： 處理以下致病微生物時(shí)應(yīng)在生物安全柜 (級(jí)) 中進(jìn) 行 ，包括:高濃度容量有噴濺可能性 上述材料的離心操作如使用密封的離心機(jī)轉(zhuǎn)子或安全離 心杯，且只在生物安全柜中開閉，可在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行 級(jí)

38、生物安全柜必須每年進(jìn)行一次年度現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè),生物安全管理與防護(hù),當(dāng)微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行時(shí)，須使 用面部保護(hù)裝置 應(yīng)有相應(yīng)的SOP 在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護(hù)服，不得穿著 外出。用過的工作服應(yīng)先在實(shí)驗(yàn)室中消毒，然后統(tǒng)一 洗滌或丟棄 當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的設(shè)備時(shí)應(yīng)戴手套。如 可能發(fā)生感染性材料的溢出或?yàn)R出，宜戴兩副手套。 不得戴著手套離開實(shí)驗(yàn)室，工作完全結(jié)束后方可除去 手套。一次性手套不得清洗和再次使用,生物安全管理與防護(hù),下列操作必須在P2實(shí)驗(yàn)室或全排式生物安全柜中進(jìn)行： 1、含漱液、血清和血液等樣品的診斷檢測(cè) 2、溶解、固定或用其他方法處理滅活的病毒和(或) 有傳染性

39、的病毒基因片段 3、常規(guī)的細(xì)菌和毒素檢查 4、可能產(chǎn)生氣溶膠的樣品處理 5、臨床樣品的包裝、分裝 6、離心管和離心機(jī)轉(zhuǎn)頭的封閉和開啟,生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于 主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病 的致病微生物及其毒素。通常已有預(yù)防的疫苗 包含微生物舉例,結(jié)核分枝桿菌 鼠疫桿菌 Q熱病原體 澳大利亞立克次氏體,牛分枝桿菌 炭疽桿菌 HIV(血清學(xué)檢測(cè)除外) 加拿大立克次氏體,三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,生物安全管理與防護(hù),BSL-3 實(shí)驗(yàn) 室,生物安全管理與防護(hù),三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,必須安裝級(jí)或以上生物安全柜，感染性材料的 操作應(yīng)在生物安全柜

40、中進(jìn)行。 當(dāng)操作不得不在柜外進(jìn)行時(shí)，必須個(gè)體防護(hù)與使 用物理抑制設(shè)備綜合防護(hù)措施 在進(jìn)行感染性組織培養(yǎng)、有可能產(chǎn)生感染性氣溶 膠的操作時(shí)，必須使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備（如呼吸保 護(hù)裝置等）。 入室工作前/后有專用更衣室，室內(nèi)有必備品（消 毒劑、沖洗液、藥品等）。 排除的空氣不循環(huán)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)負(fù)壓,生物安全管理與防護(hù),下列操作必須在P3實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行： 1、 用細(xì)胞培養(yǎng)的方法分離病毒 2、收集或濃縮病毒或其培養(yǎng)產(chǎn)物 3、用活病毒或病毒的全基因接種動(dòng)物 4、咽拭子樣品的診斷檢測(cè),生物安全管理與防護(hù),P3實(shí)驗(yàn)室示意圖,生物安全管理與防護(hù),實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)人體 具有高度的危險(xiǎn)性，通

41、過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明， 目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素 與上述情況類似的不明微生物，也必須在四級(jí)生物安全防護(hù) 實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，帶有充分?jǐn)?shù)據(jù)后再?zèng)Q定此種微生物或毒素應(yīng) 在四級(jí)還是在較低級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室中處理 包含微生物舉例 黃病毒埃博拉病毒(主要為接觸傳播) 中歐蜱傳腦炎病毒,四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,生物安全管理與防護(hù),四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,在級(jí)生物安全柜中進(jìn)行操作。 入室必須換上全套實(shí)驗(yàn)室服裝。 實(shí)驗(yàn)室必備的配套裝置與裝備。,生物安全管理與防護(hù),BSL 4,被戲稱 為 “魔鬼 實(shí)驗(yàn)室” 分為 五個(gè)區(qū) 共有 10道門,生物安全管理與防護(hù),粘膜污染：用大量流水或生理鹽水徹底沖洗污染 部位 衣物污染：盡快脫掉污染的衣物，進(jìn)行消毒處理 污染物潑濺： 發(fā)生小范圍污染物潑濺事故時(shí)，應(yīng)立即進(jìn)行消